植物精油對(duì)肉仔雞血液生化指標(biāo)及淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響

張文靜，雷連成*，魏靜元

（1.吉林大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，長(zhǎng)春　130062；2.遼寧省分析研究院，沈陽　110015）

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植物精油對(duì)肉仔雞血液生化指標(biāo)及淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響

張文靜1，雷連成1*，魏靜元2

（1.吉林大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，長(zhǎng)春130062；2.遼寧省分析研究院，沈陽110015）

摘要：試驗(yàn)旨在研究植物精油對(duì)肉仔雞血液生理和免疫功能的影響，選擇1日齡AA肉仔雞480只作為試驗(yàn)動(dòng)物，隨機(jī)分成4組：對(duì)照組和試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，分別添加精油0、80、160、240 mg·kg-1飼料，檢測(cè)血清總蛋白、白蛋白、尿素氮、甘油三酯、總膽固醇、T、B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，植物精油對(duì)血清總蛋白、白蛋白、尿素氮的影響各組之間差異均不顯著（P＞0.05），對(duì)甘油三酯和總膽固醇的影響在各組之間差異均不顯著（P＞0.05），T、B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率增加顯著（P＜0.05）。研究表明，精油可增加肉仔雞的免疫功能，且無不良影響。

關(guān)鍵詞：植物精油；肉仔雞；血液生化指標(biāo)；免疫功能

植物精油是植物體內(nèi)的次生代謝產(chǎn)物，具有揮發(fā)性和芳香氣味，化學(xué)成分復(fù)雜，主要包括萜烯類衍生物、芳香族、脂肪族、氮硫類等成分，具有很強(qiáng)的抑菌和殺菌能力，尤其含羥基的苯環(huán)類化合物抑菌作用極強(qiáng)［1］。因藥理活性強(qiáng)且源于天然，也吸引了畜牧業(yè)學(xué)者對(duì)其進(jìn)行研究。植物精油在家禽中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在提高生產(chǎn)性能方面。有研究表明，在肉仔雞日糧中添加牛至油可提高日增重和出欄體重，且使料肉比降低，其中牛至油添加量為100 mg·kg-1時(shí)生長(zhǎng)性能與對(duì)照組相比較差異極顯著（P＜0.01）［2］。但在其免疫功能上的研究比較少。試驗(yàn)通過對(duì)肉仔雞血液生化指標(biāo)和淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的測(cè)定，研究植物精油對(duì)肉仔雞生理和免疫功能的影響，為其進(jìn)一步應(yīng)用提供參考。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

試驗(yàn)動(dòng)物選用健康的、體重相近的1日齡AA肉仔雞480只，公母各半。稱取適量丁香酚、百里香酚和香芹酚50%乙醇水溶液中搖勻后混合制成復(fù)合植物精油備用。

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，隨機(jī)分成4組，即對(duì)照組和試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，分別添加精油0、80、160、240 mg·kg-1，設(shè)6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只雞。試驗(yàn)期42 d，分為1～21日齡和22～42日齡兩個(gè)階段?；A(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（以飼喂?fàn)顟B(tài)為基礎(chǔ)）見表1。

1.3飼養(yǎng)管理

按飼養(yǎng)手冊(cè)操作，7日齡、21日齡接種新城疫疫苗。保證雞群健康生長(zhǎng)。如發(fā)現(xiàn)病死，及時(shí)記錄并淘汰，同時(shí)重新統(tǒng)計(jì)飼料消耗。

1.4測(cè)定指標(biāo)和方法

總蛋白（TP）、尿素氨（UREA）、白蛋白（ALB）、總膽固醇（TG）、甘油三酯（TC）采用試劑盒測(cè)定。淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率采用MTT法。T細(xì)胞有絲分裂原為伴刀豆蛋白A（ConA），B細(xì)胞有絲分裂原為脂多糖（LPS）。

表1　基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

2　試驗(yàn)結(jié)果

2.1植物精油對(duì)肉仔雞血液生化指標(biāo)的影響

2.1.1植物精油對(duì)肉仔雞血清總蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮的影響

復(fù)合植物精油對(duì)肉仔雞血清總蛋白、白蛋白和尿素氮的影響見表2。

表2　復(fù)合植物精油對(duì)肉仔雞血清總蛋白、白蛋白和尿素氮的影響

由表2可知，肉仔雞血清總蛋白含量在21 d時(shí)隨著精油的劑量呈上下波動(dòng)變化，但各組之間均差異不顯著（P＞0.05）；42 d時(shí)隨著精油劑量的增加血清中總蛋白含量呈升高再降低的趨勢(shì)，但各組之間差異均不顯著（P＞0.05）。總體看來，白蛋白的含量處于波動(dòng)態(tài)勢(shì)，說明精油的添加未對(duì)其產(chǎn)生明顯的影響。肉仔雞血清中白蛋白的含量在21和42 d各組之間的差異均不顯著（P＞0.05），隨著精油劑量的增加呈上下波動(dòng)的趨勢(shì)，說明精油對(duì)白蛋白的影響無規(guī)律可循，作用效果不確定。

由表2可知，42 d時(shí)血清中尿素氮的含量有降低的趨勢(shì)，但結(jié)果表明，對(duì)照組和各試驗(yàn)組之間差異均不顯著（P＞0.05），21 d的數(shù)據(jù)表明，各組之間差異均不顯著（P＞0.05），說明植物精油的添加在1～21 d階段對(duì)肉仔雞血清總尿素氮的含量影響不明顯，而42 d尿素氮含量雖然由于精油的添加有降低的趨勢(shì)，但隨著劑量的增加，表現(xiàn)為升高后又降低的變化。從全程來看，試驗(yàn)組Ⅰ肉仔雞血清中的尿素氮含量相對(duì)較低，表明其蛋白沉積效率相對(duì)而言有較好的表現(xiàn)，有利于生長(zhǎng)性能發(fā)揮。

2.1.2植物精油對(duì)肉仔雞血清甘油三酯、總膽固醇的影響

復(fù)合植物精油對(duì)肉仔雞血清甘油三酯、總膽固醇的影響見表3。

表3　復(fù)合植物精油對(duì)肉仔雞血清甘油三酯、總膽固醇的影響mmol L-1

由表3可知，肉仔雞血清中甘油三酯的含量由于精油的添加，表現(xiàn)為有降低的趨勢(shì)，但21和42 d時(shí)各組之間差異均不顯著（P＞0.05），隨著精油劑量的增加有先增加再降低的微弱趨勢(shì)，這種趨勢(shì)在42 d表現(xiàn)比21 d相對(duì)明顯，該結(jié)果分析表明，復(fù)合植物精油對(duì)肉仔雞血清甘油三酯含量的降低有一定影響，但不是很大。

由表3可知，21和42 d時(shí)，肉仔雞血清中總膽固醇的含量各組之間差異不顯著（P＞0.05），整體呈現(xiàn)精油的添加導(dǎo)致血清膽固醇含量有所降低的趨勢(shì)。

2.2植物精油對(duì)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響

復(fù)合植物精油對(duì)肉仔雞外周血T、B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響見表4。

表4　復(fù)合植物精油對(duì)肉仔雞外周血T、B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響OD值

由表4可知，試驗(yàn)組和對(duì)照組比較，21 d肉仔雞外周血T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率均達(dá)極顯著水平（P＜0.01），但各試驗(yàn)組之間差異不顯著（P＞0.05）。42 d肉仔雞外周血T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，均差異顯著（P＜0.05），且試驗(yàn)組Ⅰ和Ⅱ之間差異顯著（P＜0.05）?？傮w看來，植物精油可使T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率增強(qiáng)且跟劑量有一定的關(guān)系。

由表4可知，肉仔雞試驗(yàn)組外周血B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率均高于對(duì)照組，且試驗(yàn)組Ⅲ在21 d時(shí)與對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.05），但其他各組差異均不顯著（P＞0.05）。說明植物精油可以增加肉仔雞B細(xì)胞淋巴轉(zhuǎn)化率，隨劑量增加有明顯上下波動(dòng)。

3　討論

3.1植物精油對(duì)肉仔雞血液生化指標(biāo)的影響

3.1.1對(duì)血清總蛋白、白蛋白、球蛋白和尿素氮的影響

血清總蛋白包括血清白蛋白（清蛋白）和血清球蛋白，生理功能是維持血漿正常膠體滲透壓、運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)、維持血漿酸堿度恒定、推動(dòng)機(jī)體代謝等作用［3］。動(dòng)物的血液生化指標(biāo)與其生長(zhǎng)性能相關(guān)，蛋白質(zhì)代謝是否旺盛可以從血清總蛋白濃度高低來加以體現(xiàn)［4］。血清總蛋白、白蛋白、球蛋白可以反應(yīng)機(jī)體的生理狀態(tài)，如果機(jī)體營(yíng)養(yǎng)狀況差，血清中的總蛋白、白蛋白含量會(huì)降低［5］。尿素氮是蛋白質(zhì)代謝的產(chǎn)物，也是反應(yīng)機(jī)體健康程度的一個(gè)指標(biāo)，如果體內(nèi)的尿素氮含量升高，表示機(jī)體內(nèi)的蛋白質(zhì)分解代謝作用加強(qiáng)，氮沉積減少或者腎功能發(fā)生障礙［6］。血清尿素氮濃度在一定的范圍可以反映蛋白質(zhì)的代謝情況。濃度降低時(shí)，氨基酸分解減少，氮存留增加，相應(yīng)蛋白質(zhì)沉積增加；但如果超出范圍，則說明機(jī)體出現(xiàn)了腎臟功能異常。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)組和對(duì)照組血清白蛋白、血清總蛋白含量差異不顯著，且無明顯的變化規(guī)律，說明機(jī)體代謝機(jī)能正常，蛋白質(zhì)分解和合成均處于平衡狀態(tài)，精油的添加沒有對(duì)其產(chǎn)生明顯的影響作用；血清中尿素氮的含量在各試驗(yàn)組和對(duì)照組之間差異不顯著，說明各組腎功能沒有異常，植物精油對(duì)尿素氮的影響不大，但試驗(yàn)表明，精油的添加有使肉仔雞血清中尿素氮含量降低的趨勢(shì)，尤其試驗(yàn)組Ⅰ和Ⅱ在日糧營(yíng)養(yǎng)濃度一致的情況下，采食量高于對(duì)照組，說明機(jī)體采食的蛋白質(zhì)和氨基酸更多，但血清中尿素氮的濃度雖然相差不大但有所降低，說明精油組分解代謝蛋白質(zhì)的能力還是強(qiáng)于對(duì)照組，有利于沉積體蛋白，對(duì)肉仔雞的生長(zhǎng)性能提高和胸肌、腿雞等產(chǎn)率提高有一定的促進(jìn)效果。

3.1.2對(duì)血清甘油三酯和總膽固醇的影響

甘油三酯是機(jī)體恒定的供能來源，主要存在于β-脂蛋白和乳糜顆粒中，直接參與膽固醇和膽固醇酯的合成。機(jī)體的肝臟負(fù)責(zé)合成內(nèi)源性甘油三酯，輸送入血液則是以脂蛋白的形式，合成和分解的速度過快或者過慢，就會(huì)引起異常。血中甘油三酯高易導(dǎo)致心血管疾病，含量低則說明肝臟功能差、營(yíng)養(yǎng)狀況不佳。動(dòng)物年齡、性別和飲食均能影響血清中甘油三酯含量［7］。血清膽固醇與甘油三脂是血酯的主要形式，是反映機(jī)體內(nèi)脂類代謝情況的生化指標(biāo)，在臨床上，甘油三酯、總膽固醇和低密度脂蛋白的含量等可以用來診斷脂肪肝、動(dòng)脈硬化等，甘油三酯和心血管疾病有相關(guān)性，且呈正相關(guān)［8］。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加植物精油的試驗(yàn)組和對(duì)照組肉仔雞血清中甘油三酯含量無顯著變化，說明動(dòng)物脂類代謝未受到明顯影響，即肝臟的功能均處于正常狀態(tài)，添加精油可使肉仔雞肝臟保持良好功能，維持正常脂類代謝和其他生理活動(dòng)。但試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析表明，整體甘油三酯和總膽固醇的血清含量精油組與對(duì)照組相比有降低趨勢(shì)，說明精油組肉仔雞脂類代謝的能力有所增強(qiáng)，肝臟的代謝功能有所增強(qiáng)，有助于機(jī)體發(fā)揮更高的生長(zhǎng)潛能。

3.1.3對(duì)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響

T細(xì)胞主要參與細(xì)胞免疫反應(yīng)，活化的T細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子，輔助T、B淋巴細(xì)胞和其他免疫細(xì)胞的增殖分化，協(xié)調(diào)免疫細(xì)胞間的相互作用，殺傷性T細(xì)胞能夠直接殺死靶細(xì)胞；B細(xì)胞主要參與體液免疫反應(yīng)，受到刺激后T細(xì)胞在巨噬細(xì)胞的輔助作用下，增殖分化形成漿細(xì)胞，產(chǎn)生抗體。

T淋巴細(xì)胞在非特異性物質(zhì)刺激下，可被激活向淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化，在轉(zhuǎn)化過程中DNA、RNA及蛋白質(zhì)合成增加，使細(xì)胞分裂增殖，活化的淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子IL-2，IL-2又可促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)化。淋巴細(xì)胞的分裂增殖程度是其發(fā)揮作用的衡量標(biāo)準(zhǔn)，所以淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率是反應(yīng)細(xì)胞免疫水平的重要指標(biāo)。T淋巴細(xì)胞對(duì)植物血凝素（PHA）、刀豆蛋白A（ConA）等比較敏感，B淋巴細(xì)胞對(duì)大腸桿菌脂多糖（LPS）和葡萄菌體（SAC）比較敏感，CoA和LPS常作為相應(yīng)的有絲分裂原在淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)中使用［9］。體外淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率試驗(yàn)用來研究藥物對(duì)T、B淋巴細(xì)胞功能的影響，是初步篩選免疫增強(qiáng)藥物的成熟方法，具備試驗(yàn)時(shí)間短、易于控制試驗(yàn)條件的優(yōu)點(diǎn)［10］。天然產(chǎn)物人參在對(duì)淋巴細(xì)胞增殖具有雙向調(diào)節(jié)作用，其量效曲線呈“鐘罩”型［11］。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，精油對(duì)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率呈劑量依賴性，隨著添加量增加到一定數(shù)值后呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，這表明精油對(duì)肉仔雞淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率具有雙向調(diào)節(jié)的功能。

4　結(jié)論

植物精油對(duì)肉仔雞血液生化指標(biāo)影響不大，說明機(jī)體的生理代謝活動(dòng)都處于正常狀態(tài)，無不良影響。但血清尿素氮、甘油三酯和總膽固醇含量呈現(xiàn)隨著精油的添加而降低的趨勢(shì)，說明精油組肉仔雞對(duì)蛋白質(zhì)和脂類的代謝能力有所增強(qiáng)，有助于生長(zhǎng)。同時(shí)植物精油能使肉仔雞T、B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率提高，增強(qiáng)肉仔雞的免疫功能。植物精油安全、無污染，可在肉雞養(yǎng)殖中應(yīng)用［12-13］。

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Effects of Essential Oil on Blood Biochemical Index and Lympocytes Transformation Rate of Broiler

ZANG Wengjing1，LEI Liancheng1*，WEI Jingyuan2
（1.College of Veterinary Medicine，Jilin University，Changchun 130062，China；2.Liaoning Province Academy of Analytic Science，Shenyang 110015，China）

Abstract：To study the effects of essential oil on blood biochemical index and lympocytes proliferation of broiler，a total of four hundreds and eighty of healthy one day old AA broilers，with similar initial body weight，half males and half females，were randomly divided into four treatments which include a control group and three experimental groups.Every treatment had six replicates of 20 broilers per replicate.Control group was fed basic diet，experimental groupⅠ，Ⅱ，Ⅲwere fed basal diet+80 mg，diet+160 mg，diet+240 mg essential oil respectively.The experiment lasted 42 days.The results showed that TP，ALB，UREA，TG and TC of each experimental group were not significant（P＞0.05）comparing with the control group.The lympocytes proliferation of each experimental group was higher than the control group，and some of them were the significant（P＜0.05）.Essential oil had no bad effect to broilers，could promote immune function of broilers.

Key words：essential oil；broilers；blood biochemical index；immune performance

中圖分類號(hào)：Q946；S831

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1001-0084（2016）04-0001-04

收稿日期：2016-02-22

作者簡(jiǎn)介：張文靜（1972-），女，遼寧昌圖人，博士研究生，研究方向?yàn)槲⑸锱c免疫。

*通訊作者：博士生導(dǎo)師，E-mail:leiliancheng@163.com。