• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    水飛薊中木脂素的發(fā)現(xiàn)及其生物活性研究

    2016-07-09 07:25張艷彭玉勃陳效忠宋麗艷
    中國(guó)中藥雜志 2016年9期
    關(guān)鍵詞:木脂素

    張艷 彭玉勃 陳效忠 宋麗艷

    [摘要]以蒸餾水為溶劑回流提取水飛薊種子,提取物依次過(guò)D101大孔樹(shù)脂、MCI樹(shù)脂、MPLC色譜、HPLC色譜等色譜分離純化得到7個(gè)化合物。經(jīng)NMR解析確定化合物1~7分別為tricin 4′O[threoβguaiacyl(7″Omethyl)glyceryl] ether(1), tricin 4′O[erythroβguaiacyl(7″Omethyl)glyceryl] ether(2), 5′methoxyhydnocarpinD(3), palstatin(4),(8R,7′S,8′R)5,5′dimethoxy7oxolariciresinol 9′ODxylopyranoside(5), 9ODglucopyranoside(6),(-)haplomyrtoside(7)?;衔?,3~5具有較強(qiáng)的抗流感病毒(H5N1)活性, IC50分別為065, 021, 032和056 μmol·L-1,SI(SI=TC50/IC50)分別為125, 35, 106, 78?;衔?,2,6,7具有較好的抗人肝癌細(xì)胞(HepG2)活性,IC50分別為035, 025, 053, 066 μmol·L-1?;衔?~7為從該植物中首次分離得到。

    [關(guān)鍵詞]水飛薊;木脂素; 抗流感病毒活性; 細(xì)胞毒活性

    [Abstract]The seeds of Silybum marianum were extracted by hot water, and the extract was isolated by D101 macroporous resin, MCI resin, MPLC, HPLC, et al As a result, 7 compounds including tricin 4′O[threoβguaiacyl(7″Omethyl)glyceryl] ether(1), tricin 4′O[erythroβguaiacyl(7″Omethyl)glyceryl] ether(2), 5′methoxyhydnocarpinD(3),palstatin(4),(8R,7′S,8′R)5,5′dimethoxy7oxolariciresinol 9′ODxylopyranoside(5), 9ODglucopyranoside(6), and(-)haplomyrtoside(7) were isolated and identified for the first time Compounds 1, 3, 4, and 5 exhibited activity against influenza A(H5N1)with IC50 value of 065, 021, 032, and 056 μmol·L-1, respectively Compounds 1, 2, 6, and 7 exhibited cytotoxity against HepG2 with IC50 value of 035, 025, 053, 066 μmol·L-1, respectively

    [Key words]Silybum marianum; lignan; antiinfluenza virus activity; cytotoxity

    doi:10.4268/cjcmm20160915

    水飛薊Silybum marianum (L)Gaertn是菊科水飛薊屬植物,性涼、味苦、歸肝、膽經(jīng)。具有清熱解毒,舒肝利膽之功效。用于治療肝膽濕熱、脅痛、黃疽等證。水飛薊特有成分為黃酮型木脂素類化合物,統(tǒng)稱為水飛薊素(silymarin),主要包括水飛薊賓(silybin)、異水飛薊賓(isosilybin)、水飛薊寧(silydianin)、水飛薊亭(silychristin)、脫氫水飛薊賓(dehydrosisilybin)、聚水飛薊賓(silybinomer)等[1]。除以上成分外,日本學(xué)者竹本常松等還獲得2種新的黃酮型木脂素:2,3脫氫水飛薊賓(2,3dehydrosilmarin)和2,3脫氫水飛薊亭(2,3dehydrosilychristin)。本課題組前期研究中分離得到了水飛薊中5個(gè)黃酮類化合物[2],然而沒(méi)有得到黃酮型木脂素類化合物。為了繼續(xù)尋找具有生物活性的黃酮型木脂素類化合物,課題組繼續(xù)對(duì)水飛薊進(jìn)行成分與活性的研究。

    1材料

    核磁共振譜:INOVA500核磁共振儀, 溶劑峰為內(nèi)標(biāo); 分析型HPLC:Agilent 1100 Series 型高效液相色譜儀, DADUV 檢測(cè)器, YMC C18(46 mm×150 mm,5 μm)色譜柱, 以及Diamonsil C18(46 mm×250 mm,5 μm)色譜柱; 制備型HPLC:Shimadazu LC6AD, SPD6A, SPD10A 紫外檢測(cè)器, SPD紫外檢測(cè)器, YMCPack ODSA(20 mm×250 mm,10 μm)色譜柱; 制備型MPLC:Biotage 公司FLASH,ODS(50 mm×60 mm, 10 μm)色譜柱。

    水飛薊藥材于2014年10月采集于黑龍江省佳木斯地區(qū),經(jīng)黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)佳木斯學(xué)院陳效忠副教授鑒定為水飛薊S marianum種子。

    2提取與分離

    干燥的水飛薊種子10 kg,粉碎后用蒸餾水回流提取3次,每次1 h。提取液減壓濃縮成浸膏(10 kg)。將浸膏混懸于水中,過(guò)D101型大孔吸附樹(shù)脂柱色譜,乙醇水(0%,30%,50%,95%)洗脫,其中水洗脫部分得浸膏200 g,30%乙醇洗脫部分得浸膏300 g,50%乙醇洗脫部分得浸膏400 g,95%乙醇洗脫部分得浸膏90g。50%乙醇洗脫部分進(jìn)行MCI柱色譜分離,乙醇水(0%,30%,50%,95%)洗脫,其中水洗脫物50 g,30%乙醇洗脫部分得浸膏150 g,50%乙醇洗脫部分得浸膏150 g,95%乙醇洗脫部分得浸膏40 g 。30%乙醇洗脫部分進(jìn)行MPLC柱色譜分離,甲醇水(0%~95%)梯度洗脫,薄層色譜檢識(shí),合并相似洗脫流分,得到8個(gè)組分(A1~A8)。A3組分經(jīng)HPLC制備型色譜儀分離(色譜條件為甲醇水 2∶8,流速5 mL·min-1),得到化合物1(10 mg,tR=25 min),2(8 mg,tR=30 min),3(5 mg,tR=33 min);A5組分經(jīng)HPLC制備型色譜儀分離(色譜條件為甲醇水 1∶3,流速5 mL·min-1),得到化合物4(10 mg,tR=32 min),5(8 mg tR=33 min),6(5 mg,tR=35 min);A7組分經(jīng)HPLC制備型色譜儀分離(色譜條件為甲醇水3∶7,流速5 mL·min-1),得到化合物7(10 mg,tR=37 min)。

    3結(jié)構(gòu)鑒定

    化合物1白色粉末,鹽酸鎂粉呈陽(yáng)性反應(yīng)。1HNMR(CDCl3,500 MHz)δ:660(1H,s,H3),615(1H,s,H6),640(1H,s,H8),708(1H,s,H2′),708(1H,s,H6′),385(2H,s,H3′,5′),692(1H,br s,H2″),677(1H,br s,H5″),681(1H,m,H6″),447(1H,d,J=60,H7″),445(1H,m,H8″),392(1H,dd,J=120,44 Hz,H9″a),375(1H,dd,J=120,33 Hz,H9″b),385(3H,s,3″OCH3),386(3H,s,7″OCH3); 13CNMR(CDCl3,125 MHz)δ:1660(C2),1055(C3),1835(C4),1535(C5),1005(C6),1671(C7),953(C8),1595(C9),1057(C10),1278(C1′),1048(C2′),1547(C3′),1405(C4′),1545(C5′),1048(C6′),555(C3″和H5″OCH3 ),1313(C1″),1123(C2″),1489(C3″),1481(C4″),1157(C5″),1223(C6″),839(C7″),869(C8″),618(C9″),559(3″OCH3),558(7″OCH3)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[3]報(bào)道的化合物一致,故鑒定該化合物為tricin 4′O[threoβguaiacyl(7″Omethyl)glyceryl] ether。

    化合物2白色粉末,鹽酸鎂粉呈陽(yáng)性反應(yīng)。1HNMR(CDCl3,500 MHz)δ:661(1H,s,H3),616(1H,s,H6),642(1H,s,H8),709(1H,s,H2′),709(1H,s,H6′),385(2H,s,H3′,5′),695(1H,br s,H2″),678(1H,br s,H5″),682(1H,m,H6″),490(1H,d, J=45 Hz,H7″),446(1H,m,H8″),395(1H,dd, J=120,44 Hz,H9″a),376(1H,dd, J=120,33 Hz,H9″b),387(3H,s,3″OCH3),388(3H,s,7″OCH3); 13CNMR(CDCl3,125 MHz)δ:1663(C2),1056(C3),1837(C4),1539(C5),1006(C6),1671(C7),955(C8),1597(C9),1059(C10),1272(C1′),1049(C2′),1549(C3′),1407(C4′),1546(C5′),1049(C6′),556(C3″和H5″OCH3 ),1315(C1″),1125(C2″),1491(C3″),1482(C4″),1158(C5″),1206(C6″),748(C7″),869(C8″),619(C9″),556(3″OCH3),557(7″OCH3)。以上以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[3]報(bào)道的化合物一致,故鑒定該化合物為tricin 4′O[erythroβguaiacyl(7″Omethyl)glyceryl] ether。

    化合物3白色粉末,鹽酸鎂粉呈陽(yáng)性反應(yīng)。1HNMR(CDCl3,500 MHz)δ:705(1H,d,J=20 Hz,H2″),685(1H,d,J=81 Hz,H5″),689(1H,dd,J=91,20 Hz,H6″),379(3H,s,C3″OMe),395(3H,s,C5″OMe),678(1H,s,H3),620(1H,d,J=21 Hz,H6),655(1H,d,J=23 Hz,H8),363(1H,m,H11a),339(1H,m,H11b),426(1H,m,H12),499(1H,d,J=91 Hz,H13),729(1H,d,J=21 Hz,H2′),735(1H,d,J=21 Hz,H6′); 13CNMR(CDCl3,125 MHz)δ:1643(C2),1039(C3),1818(C4),1234(C5),1258(C6),1629(C7),942(C8),1573(C9),1036(C10),618(C11),786(C12),759(C13),568(COMe),1227(C1′),1082(C2′),442(C3′),1366(C4′),1482(C5′),1029(C6′),1278(C1″),1175(C2″),479(C3″),1476(C4″),1154(C5″),1206(C6″)。以上以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn) [4]報(bào)道的化合物一致,故鑒定該化合物為5′methoxyhydnocarpin D。

    化合物4白色粉末,鹽酸鎂粉呈陽(yáng)性反應(yīng)。1HNMR(CDCl3,500 MHz)δ:698(1H,s,H3),617(1H,d,J=25 Hz,H6),650(1H,d,J=25 Hz,H8),336(1H,dd,J=110 ,40 Hz,H11a),360(1H,J=d,110 Hz,H11b),425(1H,ddd,J=110,80,10 Hz,H12),493(1H,d,J=80 Hz,H13),730(1H,d,J=35 Hz,H2′),390(3H,s,5′OCH3),675(2H,s,H2″,6″),375(2H,s,H3″,5″); 13CNMR(CDCl3,125 MHz)δ:1630(C2),1045(C3),1819(C4),1616(C5),995(C6),1648(C7),945(C8),1578(C9),1039(C10),600(C11),785(C12),766(C13),1222(C1′),1083(C2′),1445(C3′),1368(C4′),1490(C5′),1029(C6′),556(5′OCH3 ),1263(C1″),1053(C2″,6″),1478(C3″,5″),1361(C4″),560(C3″,5″)。以上以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn) [4] 報(bào)道的化合物一致,故鑒定該化合物為palstatin。

    化合物5白色粉末。1HNMR(CDCl3,500 MHz)δ:773(1H,br s,H2),775(1H,br s,H6),485(1H,m,H8),468(1H,dd,J=110,80 Hz,H9a),440(1H,t,J=80 Hz,H9b),385(3H,s,OCH3),728(1H,br s,H2′),728(1H,br s,H6′),539(1H,d,J=85 Hz,H7′),316(1H,m,H8′),448(1H,dd,J=115,30 Hz,H9′a),395(1H,dd,J=115 ,45 Hz,H9′b),382(3H,s,OCH3),478(1H,d,J=82 Hz,H1″),406(1H,t,J=85 Hz,H2″),413(1H,t,J=85 Hz,H3″),406(1H,m,H4″),430(1H,dd,J=110 ,50 Hz,H5″a),368(1H,t,J=110 Hz,H5″b); 13C NMR(CDCl3,125 MHz)δ:1279(C1),1079(C2),1486(C3),1437(C4),1489(C5),1084(C6),1985(C7),492(C8),706(C9),565(OCH3),1312(C1′),1052(C2′),1495(C3′),1378(C4′),1495(C5′),1053(C6′),845(C7′),535(C8′),765(C9′),566(OCH3),1057(C1″),747(C2″),788(C3″),711(C4″),673(C5″)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5] 報(bào)道的化合物一致,故鑒定該化合物為(8R,7′S,8′R)5,5′dimethoxy7oxolariciresinol 9′ODxylopyranoside。

    化合物6白色粉末。1HNMR(CDCl3,500 MHz)δ:695(1H,d,J=20 Hz,H2),670(1H,d,J=80 Hz,H5),780(1H,dd,J=80 ,20 Hz,H6),555(1H,d,J=65 Hz,H7),356(1H,m,H8),401(1H,m,H9a),382(1H,m,H9b),377(3H,s,OCH3),675(1H,br s,H2′),668(1H,br s,H6′),257(1H,br t,J=80 Hz,H7′),177(1H,m,H8′),352(2H,t,J=65 Hz,H9′),380(3H,s,OCH3),430(1H,d,J=76 Hz,H1″),328(1H,m,H2″),327(1H,m,H3″),323(1H,m,H4″),332(1H,m,H5″),368(1H,t,J=110 Hz,H6″a),358(1H,m,H6″b); 13CNMR(CDCl3,125 MHz)δ:1346(C1),1109(C2),1495(C3),1477(C4),1169(C5),1195(C6),892(C7),533(C8),727(C9),567(OCH3),1368(C1′),1182(C2′),1457(C3′),1478(C4′),1295(C5′),1143(C6′),330(C7′),358(C8′),623(C9′),566(OCH3),1046(C1″),756(C2″),786(C3″),717(C4″),689(C5″),629(C5″)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5] 報(bào)道的化合物一致,故鑒定該化合物為9ODglucopyranoside。

    化合物7白色粉末。1HNMR(CDCl3,500 MHz)δ:552(1H,d,J=35 Hz,Hl″),455(1H,d,J=35 Hz,H2″),395(1H,d,J=100 Hz,H4″α),445(1H,d,J=100 Hz,H4″β),372(1H,d,J=115 Hz,H5″α),375(1H,d,J=115 Hz,H5″β),405(3H,s,OCH3),770(1H,s,H5),705(1H,s,H8),556(1H,d,J=140 Hz,H10),677(1H,d,J=18 Hz,H2′),603(2H,s,3′,4′OCH2O),694(1H,d,J=78 Hz,H5′),674(1H,dd,J=78,18 Hz,H6′); 13CNMR(CDCl3,125 MHz)δ:1365(C1),1300(C2),1195(C3),1464(C4),1276(C4a),1016(C5),1527(C6),1497(C7),1105(C8),1323(C8a),1726(C9),687(C10),1025(OCH2O),1302(C1′),1115(C2′),1488(C3′,C4′),1089(C5′),1246(C6′),563(OCH3),1126(Cl″),788(C2″),803(C3″),759(C4″),643(C5″)。以上以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6] 報(bào)道的化合物基本一致,故鑒定該化合物為(-)haplomyrtoside。

    4活性測(cè)試

    抗流感病毒(A/Hanfang/1/47,H5N1)試驗(yàn)方法:在5% CO2,37 ℃條件下,將MDCK 細(xì)胞接種于96 孔培養(yǎng)板內(nèi)。24 h后使MDCK細(xì)胞感染流感病毒1×10-5,吸附2 h后棄掉病毒液,再加入含有不同稀釋度樣品及陽(yáng)性對(duì)照藥(奧司米韋)的維持液。在5% CO2,37 ℃條件下繼續(xù)培養(yǎng),待病毒對(duì)照組病變(CPE)達(dá)4+時(shí)觀察各組細(xì)胞病變(CPE)(約35 h),計(jì)算各樣品抗流感病毒半數(shù)抑制濃度(IC50)。結(jié)果表明化合物1,3,4,5具有較強(qiáng)的抗流感病毒(H5N1)活性,IC50分別為065,021,032,056 μmol·L-1,SI分別為125,35,106,78; 陽(yáng)性對(duì)照藥(奧司米韋)IC50為28 μmol·L-1 ,SI為1 1501。

    細(xì)胞毒活性試驗(yàn)方法:用含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基配制成1萬(wàn)個(gè)/mL細(xì)胞懸液,將腫瘤細(xì)胞置于培養(yǎng)液中。96孔培養(yǎng)板內(nèi)接種細(xì)胞,在37 ℃,5% CO2溫箱內(nèi)培養(yǎng)24 h。受試樣品設(shè)3個(gè)濃度(01,1,10 μmol·L-1),每個(gè)濃度設(shè)置3個(gè)平行孔,在37 ℃,5% CO2溫箱內(nèi)培養(yǎng)4 d。棄去培養(yǎng)液后,每孔加入MTT 溶液(04 g·L-1,RPMI1640 配制)100 μL,37 ℃ 孵育4 h。棄上清液,每孔加入DMSO 150 μL,用550型酶標(biāo)儀在檢測(cè)波長(zhǎng)540 nm,參考波長(zhǎng)405 nm下測(cè)定A。結(jié)果表明化合物1,2,6,7具有較好的抗人肝癌細(xì)胞(HepG2)活性,IC50分別為035,025,053,066 μmol·L-1,陽(yáng)性對(duì)照藥紫杉醇IC50為0012 μmol·L-1。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1]柯銘清. 中草藥有效成分理化與藥理特性[M]. 長(zhǎng)沙:湖南科學(xué)技術(shù)出版社,1982:266.

    [2]陳效忠,常鑫,張艷,等. 水飛薊莖葉中具有抗氧化活性的黃酮類化學(xué)成分研究[J]. 黑龍江醫(yī)藥科學(xué), 2015, 38(4):35.

    [3]Bai N, He K, Roller M, et al. Flavonolignans and other constituents from Lepidium meyenii with activities in antiinflammatory and human cancer cell lines [J]. J Agric Food Chem, 2015, 63(9):2458.

    [4]Stermitz F R, TawaraMatsuda J, Lorenz P, et al. 5′MethoxyhydnocarpainD and pheophorbide A:berberis species components that potentiate berberine growth inhibition of resistant staphylococcus aureus [J]. J Nat Prod, 2000, 63(8):1146.

    [5]Su D M, Tang W Z, Hu Y C, et al. Lignan glycosides from Neoalsomitra integrifoliola [J]. J Nat Prod, 2008, 71(5):784.

    [6]Gzler B, Gzler T, Hesse M, et al. Minor lignans from Haplophyllum cappadocicum [J]. Phytochemistry, 1996, 42(3):689.

    [責(zé)任編輯丁廣治]

    猜你喜歡
    木脂素
    木莢紅豆葉中1個(gè)新的木脂素
    星點(diǎn)設(shè)計(jì)—響應(yīng)面法優(yōu)選五味子的二次提取工藝
    五味子木脂素對(duì)記憶障礙模型小鼠自由基及膽堿能、單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響
    微波提取法提取北五味子木脂素條件研究
    野八角化學(xué)成分的研究
    石巖楓中兩個(gè)新的木脂素類化合物
    南五味子木脂素提取物清潔驗(yàn)證分析方法研究
    芝麻木脂素超聲提取工藝優(yōu)化及其抗氧化性能
    成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 成人手机av| 国产野战对白在线观看| 天天一区二区日本电影三级 | 日本在线视频免费播放| 国产麻豆成人av免费视频| bbb黄色大片| 老司机午夜十八禁免费视频| 日本 欧美在线| 两个人免费观看高清视频| 少妇粗大呻吟视频| 中文亚洲av片在线观看爽| 激情视频va一区二区三区| 色哟哟哟哟哟哟| 国产一区在线观看成人免费| 极品教师在线免费播放| 69av精品久久久久久| 久久人妻熟女aⅴ| 久久欧美精品欧美久久欧美| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产精品久久久久久精品电影 | 一本综合久久免费| 国产激情久久老熟女| 女人精品久久久久毛片| 黑人欧美特级aaaaaa片| 色综合婷婷激情| 精品国产国语对白av| 精品高清国产在线一区| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 一本久久中文字幕| 亚洲精品久久国产高清桃花| 日韩av在线大香蕉| 国产成人精品无人区| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 亚洲在线自拍视频| 老司机靠b影院| 久久人人精品亚洲av| 午夜福利一区二区在线看| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 国产高清激情床上av| 婷婷精品国产亚洲av在线| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | tocl精华| 99精品在免费线老司机午夜| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 欧美最黄视频在线播放免费| 亚洲一区高清亚洲精品| 中出人妻视频一区二区| 精品欧美一区二区三区在线| 久久人妻av系列| 国产乱人伦免费视频| 国产xxxxx性猛交| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 18禁观看日本| √禁漫天堂资源中文www| 中出人妻视频一区二区| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 国产亚洲精品av在线| 国产午夜福利久久久久久| 午夜a级毛片| 99在线人妻在线中文字幕| 叶爱在线成人免费视频播放| 精品国产乱码久久久久久男人| 日韩欧美免费精品| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 嫩草影院精品99| 久久亚洲精品不卡| 免费观看人在逋| 很黄的视频免费| 国产成人免费无遮挡视频| 国产成人欧美| 91成年电影在线观看| 精品国产一区二区久久| av电影中文网址| 91成人精品电影| 大陆偷拍与自拍| 国产97色在线日韩免费| 又黄又粗又硬又大视频| 日韩精品免费视频一区二区三区| 18美女黄网站色大片免费观看| 91麻豆av在线| 久久青草综合色| 精品久久久久久久人妻蜜臀av | 一边摸一边做爽爽视频免费| 亚洲专区中文字幕在线| 国产私拍福利视频在线观看| 久久中文字幕一级| 精品久久蜜臀av无| 麻豆成人av在线观看| 国产精品久久久久久精品电影 | 国产aⅴ精品一区二区三区波| 国产免费男女视频| 在线观看www视频免费| 国产主播在线观看一区二区| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲在线自拍视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 色综合站精品国产| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 精品第一国产精品| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 首页视频小说图片口味搜索| 国产精品99久久99久久久不卡| av视频免费观看在线观看| www.www免费av| 色综合亚洲欧美另类图片| av超薄肉色丝袜交足视频| 正在播放国产对白刺激| 身体一侧抽搐| av在线天堂中文字幕| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 不卡av一区二区三区| 国产三级在线视频| a级毛片在线看网站| av天堂久久9| 一区二区三区激情视频| www.999成人在线观看| 一级作爱视频免费观看| 精品久久久久久久人妻蜜臀av | 麻豆国产av国片精品| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 日本五十路高清| 免费观看人在逋| 美女扒开内裤让男人捅视频| 成人av一区二区三区在线看| 精品国产乱码久久久久久男人| 午夜福利成人在线免费观看| 亚洲中文字幕日韩| 日韩视频一区二区在线观看| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 一二三四在线观看免费中文在| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 久久九九热精品免费| 国产1区2区3区精品| 色在线成人网| 一边摸一边抽搐一进一小说| 久久 成人 亚洲| 乱人伦中国视频| 亚洲九九香蕉| 亚洲国产中文字幕在线视频| 悠悠久久av| 90打野战视频偷拍视频| √禁漫天堂资源中文www| 动漫黄色视频在线观看| 在线天堂中文资源库| 成年人黄色毛片网站| 天堂影院成人在线观看| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 久久人人97超碰香蕉20202| 国产精品久久久人人做人人爽| 嫩草影院精品99| 亚洲五月婷婷丁香| 精品日产1卡2卡| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 一本大道久久a久久精品| 欧美在线黄色| 给我免费播放毛片高清在线观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 欧美在线黄色| 欧美日韩一级在线毛片| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 日韩欧美三级三区| 女人精品久久久久毛片| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产精品日韩av在线免费观看 | 国产精品香港三级国产av潘金莲| 两性夫妻黄色片| 成人精品一区二区免费| 一区二区日韩欧美中文字幕| 性少妇av在线| 一二三四在线观看免费中文在| 亚洲精品美女久久av网站| x7x7x7水蜜桃| 亚洲熟女毛片儿| 在线天堂中文资源库| 国产成人欧美在线观看| av免费在线观看网站| 国产一区二区三区综合在线观看| 精品熟女少妇八av免费久了| 成人三级做爰电影| 国产精品二区激情视频| 久久久久久久久久久久大奶| 精品无人区乱码1区二区| 99久久精品国产亚洲精品| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产免费男女视频| 大型黄色视频在线免费观看| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产午夜精品久久久久久| 日本 欧美在线| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 两个人看的免费小视频| 一本大道久久a久久精品| 好男人电影高清在线观看| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 丝袜人妻中文字幕| 国产精品亚洲美女久久久| 成人国产一区最新在线观看| 久久精品影院6| 给我免费播放毛片高清在线观看| 在线观看免费午夜福利视频| 国产成人av教育| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 看片在线看免费视频| 91九色精品人成在线观看| 免费在线观看影片大全网站| 在线永久观看黄色视频| 国产高清有码在线观看视频 | 老汉色av国产亚洲站长工具| 性少妇av在线| 亚洲一区二区三区色噜噜| 大陆偷拍与自拍| www国产在线视频色| 亚洲专区字幕在线| 男人舔女人的私密视频| 在线视频色国产色| 两个人免费观看高清视频| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 欧美成人午夜精品| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 午夜久久久久精精品| 美女国产高潮福利片在线看| ponron亚洲| 啦啦啦免费观看视频1| 啦啦啦 在线观看视频| 免费人成视频x8x8入口观看| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 欧美精品亚洲一区二区| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 中亚洲国语对白在线视频| 嫁个100分男人电影在线观看| 夜夜爽天天搞| 免费在线观看亚洲国产| 精品第一国产精品| 9热在线视频观看99| 国产av在哪里看| 视频区欧美日本亚洲| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 老司机在亚洲福利影院| 午夜福利欧美成人| 国产精品 国内视频| 桃色一区二区三区在线观看| 国产片内射在线| 国产成+人综合+亚洲专区| 久热爱精品视频在线9| 久久人人精品亚洲av| 国产精品av久久久久免费| 女警被强在线播放| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 亚洲精品在线观看二区| 两性夫妻黄色片| 又黄又粗又硬又大视频| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲精品国产一区二区精华液| 久久久久久免费高清国产稀缺| 亚洲精品美女久久av网站| 国产国语露脸激情在线看| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 18禁观看日本| 日韩精品免费视频一区二区三区| 国产精品av久久久久免费| 久久这里只有精品19| 亚洲中文日韩欧美视频| 欧美日本亚洲视频在线播放| 麻豆国产av国片精品| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 他把我摸到了高潮在线观看| 一区二区三区精品91| 久久影院123| 韩国av一区二区三区四区| www日本在线高清视频| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 国产av一区二区精品久久| 亚洲精华国产精华精| xxx96com| 欧美在线黄色| 狂野欧美激情性xxxx| 自线自在国产av| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 日日夜夜操网爽| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 一级a爱片免费观看的视频| 成人免费观看视频高清| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 久99久视频精品免费| 精品熟女少妇八av免费久了| 手机成人av网站| 亚洲自拍偷在线| 免费观看人在逋| 最新在线观看一区二区三区| 精品国产乱子伦一区二区三区| 色综合婷婷激情| 成人欧美大片| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 国产野战对白在线观看| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 久久久久久大精品| 老鸭窝网址在线观看| av片东京热男人的天堂| 精品国内亚洲2022精品成人| 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲国产精品999在线| 日韩高清综合在线| 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲性夜色夜夜综合| xxx96com| 亚洲电影在线观看av| 一进一出好大好爽视频| 黄色视频,在线免费观看| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 日韩有码中文字幕| 亚洲成国产人片在线观看| 国产精品一区二区免费欧美| 一边摸一边做爽爽视频免费| 久久人人精品亚洲av| 免费在线观看完整版高清| 免费观看人在逋| 9色porny在线观看| 国产真人三级小视频在线观看| 最近最新免费中文字幕在线| 国产成人av激情在线播放| 亚洲精品中文字幕在线视频| 波多野结衣av一区二区av| 亚洲,欧美精品.| 亚洲七黄色美女视频| tocl精华| 亚洲国产精品久久男人天堂| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 亚洲精品在线美女| 久久中文看片网| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 9热在线视频观看99| 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 精品一区二区三区四区五区乱码| 美女扒开内裤让男人捅视频| 黄色a级毛片大全视频| 国产熟女xx| 久热爱精品视频在线9| 97碰自拍视频| 久久久久久久久免费视频了| 脱女人内裤的视频| 一级a爱视频在线免费观看| 亚洲激情在线av| 精品国产一区二区久久| 中文亚洲av片在线观看爽| 欧美成人一区二区免费高清观看 | av中文乱码字幕在线| 国产不卡一卡二| 亚洲中文av在线| 国产精品 国内视频| 国产精华一区二区三区| 成人特级黄色片久久久久久久| 老司机靠b影院| 无限看片的www在线观看| 亚洲中文字幕日韩| 精品国产国语对白av| 久久久久久人人人人人| 91av网站免费观看| 天堂影院成人在线观看| 国产乱人伦免费视频| avwww免费| 成人手机av| 不卡av一区二区三区| 亚洲熟妇熟女久久| 亚洲精品国产一区二区精华液| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 成人免费观看视频高清| 久久精品91无色码中文字幕| 亚洲一码二码三码区别大吗| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 亚洲情色 制服丝袜| 搡老熟女国产l中国老女人| 999久久久精品免费观看国产| 久久欧美精品欧美久久欧美| 欧美黑人欧美精品刺激| 国产成人精品在线电影| 男女下面插进去视频免费观看| 99久久精品国产亚洲精品| 韩国av一区二区三区四区| av中文乱码字幕在线| 亚洲自拍偷在线| 91精品三级在线观看| 免费搜索国产男女视频| 国产精品永久免费网站| 中文字幕高清在线视频| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国产精品二区激情视频| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 搡老熟女国产l中国老女人| 村上凉子中文字幕在线| 久久性视频一级片| 亚洲精品在线美女| 亚洲精华国产精华精| 97人妻天天添夜夜摸| 久热这里只有精品99| 两性夫妻黄色片| 久久久久精品国产欧美久久久| 9色porny在线观看| 久久久久久久久中文| 黄色 视频免费看| 国产精品,欧美在线| 亚洲中文av在线| av福利片在线| 99国产精品99久久久久| 涩涩av久久男人的天堂| 午夜精品久久久久久毛片777| 日韩免费av在线播放| 禁无遮挡网站| 午夜精品国产一区二区电影| 久9热在线精品视频| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国产成人系列免费观看| 欧美日本中文国产一区发布| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 免费在线观看日本一区| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 一a级毛片在线观看| 黄频高清免费视频| 亚洲成a人片在线一区二区| 91精品国产国语对白视频| 日本 av在线| 国产色视频综合| 真人做人爱边吃奶动态| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产成人精品无人区| 一级毛片女人18水好多| 久久人人精品亚洲av| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 大型av网站在线播放| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产高清有码在线观看视频 | 满18在线观看网站| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 日韩精品青青久久久久久| 女人精品久久久久毛片| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产成人啪精品午夜网站| 免费少妇av软件| 国产av一区在线观看免费| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 男人舔女人的私密视频| 免费在线观看完整版高清| 婷婷丁香在线五月| 久久青草综合色| 午夜福利欧美成人| 操出白浆在线播放| 欧美不卡视频在线免费观看 | 一a级毛片在线观看| 成人国语在线视频| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 村上凉子中文字幕在线| x7x7x7水蜜桃| 美女大奶头视频| 给我免费播放毛片高清在线观看| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 亚洲免费av在线视频| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 色在线成人网| 亚洲avbb在线观看| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 看黄色毛片网站| 久久香蕉国产精品| 成熟少妇高潮喷水视频| 精品人妻1区二区| 一边摸一边抽搐一进一小说| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 美女高潮到喷水免费观看| 欧美一级毛片孕妇| 悠悠久久av| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 免费看美女性在线毛片视频| 亚洲国产欧美网| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 不卡av一区二区三区| 日本免费a在线| 久久青草综合色| 亚洲视频免费观看视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 欧美黑人欧美精品刺激| 多毛熟女@视频| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 免费高清在线观看日韩| 精品国产国语对白av| 极品教师在线免费播放| 中文字幕av电影在线播放| 日韩三级视频一区二区三区| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 午夜福利高清视频| 99久久国产精品久久久| 亚洲精品在线美女| av视频在线观看入口| 亚洲一区二区三区不卡视频| 99热只有精品国产| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 手机成人av网站| 日韩精品中文字幕看吧| 亚洲av成人av| 亚洲欧美激情综合另类| 在线观看66精品国产| 国产精品日韩av在线免费观看 | 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲九九香蕉| 香蕉久久夜色| 亚洲男人天堂网一区| 十分钟在线观看高清视频www| 亚洲 国产 在线| 久久久久久久精品吃奶| 亚洲一区二区三区不卡视频| 性色av乱码一区二区三区2| 可以在线观看毛片的网站| av视频免费观看在线观看| 老司机午夜福利在线观看视频| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲欧美激情综合另类| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 亚洲国产精品成人综合色| netflix在线观看网站| 欧美激情高清一区二区三区| 人人澡人人妻人| 国产高清激情床上av| 黄色丝袜av网址大全| 久久国产乱子伦精品免费另类| 亚洲精品久久国产高清桃花| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 69av精品久久久久久| av免费在线观看网站| 丝袜美腿诱惑在线| 黑人欧美特级aaaaaa片| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 9色porny在线观看| 黄频高清免费视频| 亚洲国产精品合色在线| 国产av又大| 午夜福利高清视频| 国产精品 欧美亚洲| 久久天堂一区二区三区四区| 亚洲中文日韩欧美视频| 18美女黄网站色大片免费观看| 精品国产亚洲在线| 精品欧美一区二区三区在线| 欧美午夜高清在线| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 亚洲 欧美一区二区三区| 国产精品亚洲一级av第二区| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 黄色丝袜av网址大全| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 可以免费在线观看a视频的电影网站| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 男男h啪啪无遮挡| 欧美激情 高清一区二区三区| 美女 人体艺术 gogo| 日韩免费av在线播放| 制服诱惑二区| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 母亲3免费完整高清在线观看| 黄片播放在线免费| 18禁国产床啪视频网站| 精品日产1卡2卡| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产成人免费无遮挡视频| 国产精品二区激情视频| 99久久99久久久精品蜜桃| 99riav亚洲国产免费| 成人av一区二区三区在线看| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲av成人av| 97人妻天天添夜夜摸| 午夜老司机福利片| 搡老岳熟女国产| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 男女之事视频高清在线观看| 午夜激情av网站| 国产成人精品久久二区二区91| 国产精品1区2区在线观看.| 日本免费a在线| 欧美大码av| 18禁国产床啪视频网站| 成年女人毛片免费观看观看9| 亚洲电影在线观看av| 免费人成视频x8x8入口观看| 国产熟女xx| 男女床上黄色一级片免费看| 最近最新中文字幕大全电影3 | 国产色视频综合| 亚洲国产高清在线一区二区三 | av视频在线观看入口| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 在线观看免费午夜福利视频| 在线视频色国产色| 亚洲天堂国产精品一区在线| АⅤ资源中文在线天堂| 真人做人爱边吃奶动态| 99国产综合亚洲精品| 国产精品1区2区在线观看.| 久久九九热精品免费| 国产亚洲精品久久久久久毛片| av网站免费在线观看视频| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| av有码第一页| 国内精品久久久久精免费| 国产三级黄色录像| 伦理电影免费视频| 啦啦啦免费观看视频1| 日韩欧美国产在线观看| 一区二区三区高清视频在线|