單葉細(xì)辛對寒飲射肺證模型大鼠LN及HA含量的影響

陳悅　喬春鳳

【摘要】 目的 探討分析單葉細(xì)辛對寒飲射肺證模型大鼠層粘連蛋白（LN）及透明質(zhì)酸（HA）含量的影響。方法 50只無特定病原體（SPF）級Wistar大鼠， 依照寒飲射肺證模型進(jìn)行造模， 隨機(jī)分成對照組和觀察組， 各25只。對照組采用生理鹽水灌胃， 觀察組采用單葉細(xì)辛灌胃。比較兩組大鼠肺泡灌洗液與血清中的HA、LN水平。結(jié)果 4周后， 觀察組大鼠肺泡灌洗液與血清中的HA、LN水平低于對照組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 單葉細(xì)辛在寒飲射肺證模型大鼠的治療中發(fā)揮出較好的治療作用， 可顯著降低大鼠體內(nèi)LN及HA含量。

【關(guān)鍵詞】 寒飲射肺證模型大鼠；單葉細(xì)辛；層粘連蛋白；透明質(zhì)酸；影響

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.13.218

單葉細(xì)辛性溫， 可歸心、肺、腎經(jīng)， 具有溫肺化飲、通竅止痛以及祛風(fēng)散寒的功效。《本經(jīng)疏證》中記載到單葉細(xì)辛入肺、溫肺散寒， 說明單葉細(xì)辛可溫肺化痰飲、止咳逆。臨床上有關(guān)于單葉細(xì)辛改善寒飲射肺證模型大鼠磷脂、血栓素以及內(nèi)皮素水平的報(bào)道[1]， 但是關(guān)于單葉細(xì)辛對寒飲射肺證模型大鼠LN及HA含量的影響并不多見。故本研究主要探討分析了單葉細(xì)辛對寒飲射肺證模型大鼠LN及HA含量的影響?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料 50只SPF級Wistar大鼠由當(dāng)?shù)蒯t(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供， 周齡6～8周， 平均周齡（7.1±0.7）周， 體重178～223 g， 平均體重（202±19）g。將大鼠隨機(jī)分成對照組和觀察組， 各25只。HA、LN放免試劑盒由上海信裕生物科技有限公司提供， 烏拉坦由上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司提供， 單葉細(xì)辛由當(dāng)?shù)刂胁菟幏刻峁?制成濃度為1g/ml的溶液待用。超速離心機(jī)由上海喬躍電子有限公司提供， 放射免疫自動(dòng)記數(shù)器由北京科普順科技有限公司提供， 數(shù)顯恒溫水浴鍋由匡貝實(shí)業(yè)（上海）有限公司提供， Bio-RAD680酶標(biāo)儀電腦分析系統(tǒng)由美國進(jìn)口。

1. 2 方法

1. 2. 1 建模 腹腔注射適量的烏拉坦進(jìn)行麻醉， 大鼠仰臥并固定， 消毒后于頸部正中切開皮膚， 充分顯露正中氣管與頸總動(dòng)脈， 在環(huán)狀軟骨下方0.5 cm部位切開氣管前壁， 并作一個(gè)縱向切口， 插入“Y”型氣管并固定， 將血液吸凈；將左側(cè)的頸總動(dòng)脈分離備用， 套管針穿刺置管， 然后結(jié)扎固定；大鼠呼吸恢復(fù)平穩(wěn)后， 左側(cè)管插入軟塑料內(nèi)套管， 將6℃的生理鹽水按2.5 ml/kg的劑量灌注進(jìn)大鼠肺內(nèi)， 0.5 min后抽出， 間隔5 min后重復(fù)灌洗， 共操作5次。

1. 2. 2 用藥與檢測 對照組采用濃度為0.9%生理鹽水灌胃， 劑量為1 ml/kg。觀察組采用單葉細(xì)辛灌胃， 單葉細(xì)辛中藥水提取液按1 ml/kg的劑量灌胃， 兩組大鼠均灌胃4周。采集大鼠的頸總動(dòng)脈血液進(jìn)行檢測， 應(yīng)用放射免疫分析法檢測大鼠肺泡灌洗液與血清中的HA、LN水平， 嚴(yán)格按照說明書步驟執(zhí)行。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

4周后， 觀察組大鼠肺泡灌洗液與血清中的HA、LN水平低于對照組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1， 表2。

3 討論

寒飲射肺證是呼吸系統(tǒng)多發(fā)病證， 西醫(yī)認(rèn)為該病的發(fā)生與受寒引起的炎性細(xì)胞因子釋放有關(guān)， 中醫(yī)則認(rèn)為該病的發(fā)生與宿罹痰飲、復(fù)感寒邪有關(guān)[2]。寒飲射肺的病情進(jìn)展緩慢， 通常會(huì)并發(fā)阻塞性肺氣腫、支氣管炎以及哮喘， 甚至可能出現(xiàn)肺源性心臟病、肺動(dòng)脈高壓而誘發(fā)死亡， 具有十分大的臨床危害性[3]。

HA主要由間質(zhì)細(xì)胞合成， 屬于一種糖胺多糖， 是基質(zhì)的重要組成成分， 其能夠介導(dǎo)成纖維細(xì)胞、炎性因子的遷移、黏附， 是機(jī)體炎癥反應(yīng)的重要標(biāo)志物[4]。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)HA會(huì)積聚于損傷的肺間質(zhì)中， 影響血液與氣體間的交換， 同時(shí)肺間質(zhì)細(xì)胞受到損傷后會(huì)促進(jìn)HA的產(chǎn)生。LN由上皮、內(nèi)皮、平滑肌等細(xì)胞合成， 主要分布在細(xì)胞基底膜基質(zhì)中， 其水平上升會(huì)引起肺細(xì)胞炎性反應(yīng)， 對肺組織產(chǎn)生損傷作用。

中醫(yī)藥理學(xué)研究顯示單葉細(xì)辛具有解熱、抗炎、降溫、鎮(zhèn)痛以及抗驚厥的功效， 并且具有抑制LN和HA分泌的功效， 能夠顯著減輕機(jī)體的炎癥反應(yīng)， 從而緩解病情[5]。本次研究結(jié)果顯示， 4周后觀察組大鼠肺泡灌洗液與血清中的HA、LN水平低于對照組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。表明單葉細(xì)辛在寒飲射肺證模型大鼠的治療中發(fā)揮出較好的治療作用， 可顯著減輕肺組織損傷， 促進(jìn)預(yù)后。

綜上所述， 單葉細(xì)辛在寒飲射肺證模型大鼠的治療中發(fā)揮出較好的治療作用， 可顯著降低大鼠體內(nèi)LN及HA含量。

參考文獻(xiàn)

[1] 李楊， 明海霞.單葉細(xì)辛對寒飲射肺證模型大鼠HYP、IL-17及IL-6動(dòng)態(tài)表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.中醫(yī)研究， 2015， 28（6）：58-60.

[2] 李楊， 明海霞， 耿廣琴.單葉細(xì)辛對寒飲射肺證模型大鼠 LN、HA影響的實(shí)驗(yàn)研究.中醫(yī)藥學(xué)報(bào)， 2015， 43（2）：52-54.

[3] 王平， 邱繼云， 陶功定.肺氣虛加寒濕外邪大鼠復(fù)合模型建立的實(shí)驗(yàn)研究.世界中西醫(yī)結(jié)合雜志， 2012， 7（11）：938-940.

[4] 李楊， 明海霞.單葉細(xì)辛對寒飲射肺證模型大鼠TGF-β1、PC-Ⅲ影響的實(shí)驗(yàn)研究.中醫(yī)研究， 2015， 28（10）：63-64.

[5] 李楊， 明海霞.單葉細(xì)辛對寒飲射肺證模型大鼠氧自由基代謝及肺組織病理變化的實(shí)驗(yàn)研究.中醫(yī)藥學(xué)報(bào)， 2015， 43（5）：35-37.

[收稿日期：2015-12-21]