阿苯達唑混懸劑的研制及其品質(zhì)控制

黨麗梅，崔耀明，冶冬陽，張　潔，李會芳，王炫博，李引乾

(1 西北農(nóng)林科技大學 動物醫(yī)學院，陜西 楊凌 712100；2 河南牧業(yè)經(jīng)濟學院，河南 鄭州 450046)

阿苯達唑混懸劑的研制及其品質(zhì)控制

黨麗梅1，崔耀明2，冶冬陽1，張潔1，李會芳1，王炫博1，李引乾1

(1 西北農(nóng)林科技大學 動物醫(yī)學院，陜西 楊凌 712100；2 河南牧業(yè)經(jīng)濟學院，河南 鄭州 450046)

[摘要]【目的】 對研制的阿苯達唑混懸劑的品質(zhì)進行評價，為擴大其臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)?！痉椒ā?采用分散法制備阿苯達唑混懸劑，以沉降體積比、再分散性和藥物含量等混懸劑藥劑學特性為指標，在單因素試驗的基礎(chǔ)上采用正交試驗優(yōu)選并確定最佳配方，對制備的阿苯達唑混懸劑進行品質(zhì)評價?！窘Y(jié)果】 阿苯達唑混懸劑的最佳配方為：每25 mL混懸劑中含有1.75 g阿苯達唑，0.3 g羧甲基纖維素鈉，0.012 5 mL聚山梨酯-80，0.3 g檸檬酸，0.075 g苯甲酸鈉。制備的阿苯達唑混懸劑沉降體積比為0.94，再分散性良好，平均回收率(99.60±1.47)%，變異系數(shù)1.48%?！窘Y(jié)論】 確定的阿苯達唑混懸劑配方的藥劑學特性穩(wěn)定，制備的混懸劑物理穩(wěn)定性良好，符合混懸劑的品質(zhì)要求。

[關(guān)鍵詞]阿苯達唑；混懸劑；藥物研制；質(zhì)量控制

阿苯達唑(Albendazole，ABZ)為苯并咪唑類廣譜抗寄生蟲藥，是該類藥物中驅(qū)蟲譜較廣、作用較強的藥物之一，對線蟲、吸蟲、絳蟲均有驅(qū)除作用，對包蟲、泡球蚴病和細粒棘球蚴病也有較好的療效，被廣泛用于預防和治療人及動物蛔蟲病、鉤蟲病、鞭蟲病、旋毛蟲病以及糞類圓線蟲病和棘球蚴病[1-4]。

阿苯達唑由于溶解度低，目前常用劑型以片劑和膠囊劑為主，這極大地限制了該藥在臨床上的應(yīng)用?；鞈覄┦菍㈦y溶性固體藥物以微粒狀態(tài)分散于分散介質(zhì)中形成的非均勻的液體劑型，藥物以微粒狀態(tài)分散，分散度較大，有利于延長藥物作用時間及提高生物利用度[5-7]。本研究采用正交設(shè)計試驗篩選配方，用分散法制備阿苯達唑懸液，考察其藥劑學特征及穩(wěn)定性，旨在為阿苯達唑獸用新劑型的研制奠定基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1藥品與試劑

阿苯達唑原料藥，購自武漢祥華順生物工程有限公司，批號：20130327；阿苯達唑?qū)φ掌?，購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，批號：20140415；阿拉伯膠，天津市天力化學制劑有限公司，批號：20120708；檸檬酸，天津博迪化工股份有限公司，批號：20121226；檸檬酸鈉，天津市天力化學制劑有限公司，批號：20121108；聚山梨酯-80，天津市天力化學制劑有限公司，批號：20120907；冰乙酸，天津市百世化工有限公司，批號：20131026；無水乙醇，成都市科龍化工試劑廠，批號：20130619。

1.2儀器

SPECORD50紫外-可見分光光度計，德國耶那分析儀器有限公司；78-1型磁力加熱攪拌器，江蘇金壇保慶分析設(shè)備廠；PH-S3B型pH計，上海精密科學儀器有限公司；T25高速分散機，德國IKA公司；85-72型超速離心機，日本日立公司；BS-210S型電子分析天平，德國賽多利斯股份公司；QL-901型漩渦振蕩器，其林貝爾儀器制造公司。

1.3阿苯達唑混懸劑的制備

1.3.1配方篩選以阿苯達唑為主藥，按照混懸劑制備要求[8]，通過單因素試驗確定羧甲基纖維素鈉為助懸劑、吐溫-80為潤濕劑、檸檬酸為絮凝劑、苯甲酸鈉作為抗氧化劑。在單因素試驗的基礎(chǔ)上，選擇L16(45)正交法進行設(shè)計，對羧甲基纖維素鈉、吐溫-80、檸檬酸、苯甲酸鈉的用量進行篩選，以混懸劑的物理性狀、沉降體積比、再分散性、藥物含量等藥劑學特性為評價指標，比較各配方的穩(wěn)定性，以確定最佳配方[9]。正交試驗各因素水平見表1。

表 1　阿苯達唑混懸劑配方正交試驗的因素與水平

1.3.2制備方法采用分散法，用高速均質(zhì)分散機制備混懸劑。按篩選確定的阿苯達唑混懸劑配方，先將助懸劑、潤濕劑、絮凝劑、抗氧化劑溶于適量的蒸餾水中，待溶脹或溶解后備用。取潤濕劑溶于少量的蒸餾水中，然后加入阿苯達唑潤濕后，用高速均質(zhì)分散機混勻，轉(zhuǎn)移至25 mL量筒中，用蒸餾水沖洗均質(zhì)機數(shù)次，將沖洗液轉(zhuǎn)移至量筒，加蒸餾水至25 mL，密封筒口，混勻后在室溫下靜置保存?zhèn)溆肹10-11]。

1.4混懸劑的質(zhì)量評價

1.4.1顏色和pH變化觀察記錄混懸劑的外觀、色澤、澄清度并測定其pH。

1.4.2沉降體積比的測定取阿苯達唑混懸劑25 mL置于量筒內(nèi)，密塞后用力振蕩1 min，記錄混懸劑的總體積V0，靜置1，2，3，4 h和2，3，4，7 d后，分別記錄沉降物的體積V，然后計算混懸劑的沉降體積比F：F=V/V0[12-13]。

1.4.3再分散試驗在室溫環(huán)境下，將阿苯達唑混懸劑靜置7 d后，以20 r/min的速度翻轉(zhuǎn)量筒，觀察混懸液的再分散性、物理性狀以及絮凝性。

1.5阿苯達唑質(zhì)量濃度測定方法的建立

1.5.1測定波長的選擇精密稱取105 ℃下干燥至恒質(zhì)量的阿苯達唑標準品10.80 mg，置于100 mL容量瓶中，先加入2.0 mL冰醋酸溶解，再用無水乙醇稀釋至刻度，振蕩搖勻，作為標準品儲備液。精密量取標準品儲備液0.10 mL，置于50 mL容量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，制成2.16 μg/mL的溶液備用。以無水乙醇作為空白對照，用分光光度計在190～450 nm波長處對阿苯達唑標準品進行掃描[14-15]。

1.5.2標準工作曲線的繪制用移液管分別精密吸取上述標準品儲備液0.10，0.30，0.50，0.80和1.0 mL，置于10 mL容量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，配制成1.08，3.24，5.40，8.64，10.80 μg/mL的阿苯達唑系列對照品溶液備用。以無水乙醇作為空白對照，在1.5.1選擇的波長處測定上述標準品的吸光度。以阿苯達唑標準品質(zhì)量濃度(C)為橫坐標(x)，吸光度為縱坐標(y)，繪制吸光度-質(zhì)量濃度標準曲線，求其回歸方程。

1.5.3樣品處理將阿苯達唑混懸劑充分搖勻后準確移取0.5 mL于10 mL容量瓶中，用冰乙酸定容至刻度，充分搖勻。移取上述溶液0.5 mL于10 mL容量瓶，用冰乙酸定容至刻度，充分搖勻。重復上述操作2次后得測定樣品。取該樣品液用紫外分光光度計進行測定。

1.5.4回收率與精密度試驗精密稱取適量阿苯達唑和其他輔料，按1.3.2的方法制備成阿苯達唑理論質(zhì)量濃度為10.0，30.0和70.0 mg/mL的混懸劑樣品，轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶定容，充分混勻。按上述樣品處理方法處理后，在208 nm處測定吸光值，采用標準曲線計算阿苯達唑質(zhì)量濃度，計算其回收率。

取標準品，按照1.3.2的方法配制成質(zhì)量濃度為10.0，30.0和70.0 mg/mL的阿苯達唑混懸劑標樣，分別在同一天測定3次；一周內(nèi)隔天測定，共測定3次，分別計算日內(nèi)精密度和日間精密度。

2結(jié)果與分析

2.1阿苯達唑混懸劑顏色和pH值的變化

試驗制備的阿苯達唑混懸劑外觀為乳白色，靜置分層后，上清為無色透明液體，沉淀物為乳白色。放置時間較長時，上清液略呈淡黃色。放置過程中，上清液的pH無明顯改變，介于5.5～6.2。

2.2阿苯達唑混懸劑沉降體積比的測定

阿苯達唑混懸劑在制備后7 d內(nèi)的沉降體積比測定結(jié)果見表2。由表2可知，第9,10,15和16組藥劑穩(wěn)定性較好，不易沉降，符合藥典規(guī)定的混懸劑品質(zhì)控制標準。

表 2　阿苯達唑混懸劑的沉降體積比和再分散性(V0=25 mL)

2.3阿苯達唑混懸劑的再分散性

在室溫環(huán)境下，制備的阿苯達唑混懸劑靜置7 d后可以重新分散，且瓶底無沉淀，混懸劑中無凝塊，再分散性結(jié)果見表2。由表2可知，第2,3，4，5，6，11和16組藥劑的再分散性較好。

2.4阿苯達唑混懸劑最佳配方的確定

通過對樣品藥劑學特性的考察，確定阿苯達唑混懸劑的最佳配方組成為第16組，即每25 mL混懸劑含1.75 g阿苯達唑、0.3 g羧甲基纖維素鈉、0.012 5 mL吐溫-80、0.3 g檸檬酸和0.075 g苯甲酸鈉，利用該配方制備的阿苯達唑混懸劑穩(wěn)定性、再分散性均良好。

2.5阿苯達唑含量的測定

2.5.1測定波長的選擇圖1結(jié)果表明，阿苯達唑標準品在208 nm波長處有最大吸收峰，故選擇208 nm波長為阿苯達唑質(zhì)量濃度的測定波長。

2.5.2標準工作曲線的繪制阿苯達唑標準曲線如圖2所示。以吸光度(y)對阿苯達唑標準品質(zhì)量濃度(x)進行線性回歸，標準曲線方程為：y=0.040 9x+0.017 8(R2=0.998，n=5)。由此可見，阿苯達唑在質(zhì)量濃度為1.08～10.80 μg/mL時線性關(guān)系良好。

圖 1　阿苯達唑的紫外吸收光譜

2.5.3回收率試驗結(jié)果由表3可知，阿苯達唑混懸劑中阿苯達唑的平均回收率為(99.60±1.47)%，變異系數(shù)為1.48%。說明混懸劑中阿苯達唑的回收率高，測定方法的專屬性好。

表 3　混懸劑中阿苯達唑的回收率

2.5.4精密度試驗結(jié)果由表4可知，混懸劑中阿苯達唑的日內(nèi)和日間平均精密度分別為0.45%和0.58%，日內(nèi)和日間精密度(RSD)均小于5%，說明測定方法穩(wěn)定性較好，測定結(jié)果真實可靠。

表 4　混懸劑中阿苯達唑的日內(nèi)和日間精密度

3討論

分析阿苯達唑混懸劑樣品的各項藥劑學特性可知，正交試驗所涉及的幾個因素中，影響混懸劑F值、再分散性等藥劑學特征的主要因素是其自身的含量以及助懸劑、潤濕劑的種類和含量。通過對配方組成進行單因素試驗及正交試驗，優(yōu)選了制備阿苯達唑混懸劑的配方。在樣品藥劑學特性的考察中，沉降體積比試驗結(jié)果顯示，第9，10，15和16組穩(wěn)定性較好，不易沉降，符合藥典規(guī)定的混懸劑品質(zhì)控制標準；再分散試驗結(jié)果顯示，第2，3，4，5，6，11和16組再分散性較好；故確定阿苯達唑混懸劑的最佳配方組成為第16組，即每25 mL混懸劑含1.75 g阿苯達唑，0.3 g羧甲基纖維素鈉，0.012 5 mL聚山梨酯-80，0.3 g檸檬酸，0.075 g苯甲酸鈉。

混懸劑的沉降體積比主要與助懸劑的特性有關(guān)，與藥物含量的關(guān)系并不大。試驗制備了阿苯達唑質(zhì)量濃度為10.0，30.0，50.0和70.0 mg/mL的16組混懸劑，當助懸劑含量相同時，其沉降體積比基本一致，但在應(yīng)用同一分散介質(zhì)制備的不同質(zhì)量濃度的混懸劑中，質(zhì)量濃度為70 mg/mL的阿苯達唑混懸劑易出現(xiàn)藥物凝集結(jié)塊現(xiàn)象。為了增強混懸劑的穩(wěn)定性，可適當增加助懸劑的質(zhì)量濃度，以防藥物凝集結(jié)塊。本試驗采用羧甲基纖維素鈉為助懸劑，可有效增加藥物再分散性并減緩混懸劑中的顆粒沉降速度，有效提高了該混懸劑的穩(wěn)定性[16]。

本試驗還嘗試使用研缽法和均質(zhì)法2種不同工藝來制備阿苯達唑混懸劑。結(jié)果表明，2種制備工藝所得樣品在藥劑學特征方面差異不大，但均質(zhì)法所得樣品的F值稍大，且操作簡便，適當改進工藝和設(shè)備即可進行小規(guī)模生產(chǎn)。

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Preparation and quality control of Albendazole suspension

DANG Li-mei1,CUI Yao-ming2,YE Dong-yang1,ZHANG Jie1,

LI Hui-fang1, WANG Xuan-bo1, LI Yin-qian1

(1CollegeofVeterinaryMedicine,NorthwestA&FUniversity,Yangling,Shaanxi712100,China；2HenanUniversityofAnimalHusbandryandEconomy,Zhengzhou,Henan450046,China)

Abstract：【Objective】 The quality of prepared Albendazole suspension for veterinary use was evaluated to provide foundation for its application in clinical expansion.【Method】 Albendazole suspension was prepared using dispersion method.The optimal dispersion characteristics such as sedimentation volume,re-dispersibility and drug content were determined based on single factor experiments.Then the quality of prepared Albendazole suspension was evaluated.【Result】 The optimal preparation conditions for Albendazole suspension were Albendazole 1.75 g,sodium carboxymethyl cellulose 0.3 g,poly yamanashi ester-80 0.012 5 mL,citrate 0.3 g and sodium benzoate 0.075 g in a volume of 25 mL.The prepared suspension had the subsidence volume ratio of 0.94,fine re-dispersibility,the average recovery rate of (99.60±1.47)% and the variation coefficient of 1.48%.【Conclusion】 The prepared Albendazole suspension had good pharmaceutical and physical stability and meet the quality requirement of suspension.

Key words：Albendazole;suspension;drug development;quality control

DOI：網(wǎng)絡(luò)出版時間:2016-05-03 14:0510.13207/j.cnki.jnwafu.2016.06.007

[收稿日期]2014-10-14

[基金項目]西北農(nóng)林科技大學大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃校級重點項目(2201210712053)

[作者簡介]黨麗梅(1988-)，女，陜西鳳翔人，在讀碩士，主要從事新獸藥研發(fā)。E-mail:hjxniu7816@163.com [通信作者]李引乾(1962-)，男，陜西岐山人，教授，博士，主要從事獸醫(yī)藥理學與毒理學研究。E-mail:liyinqian628@163.com

[中圖分類號]S859.5+3

[文獻標志碼]A

[文章編號]1671-9387(2016)06-0040-06

網(wǎng)絡(luò)出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/61.1390.S.20160503.1405.014.html