杜仲續(xù)斷藥對(duì)不同配比對(duì)SAMP6小鼠脂代謝的影響

段衛(wèi)華 于佳慧 高秀梅

【摘要】目的：觀察中藥杜仲、續(xù)斷藥對(duì)配伍前后對(duì)于SAMP6小鼠脂代謝的影響。方法：采用快速老化SAMP6小鼠及其同源正常對(duì)照SAMR1為研究對(duì)象，應(yīng)用杜仲續(xù)斷1∶[KG-*3/5]1配伍及單味藥進(jìn)行治療12周，觀察血清和肝臟的總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白等指標(biāo)變化，并進(jìn)行組間比較。結(jié)果：與模型組相比，杜仲續(xù)斷1∶[KG-*3/5]1配伍低劑量組能顯著降低血清低密度脂蛋白，升高血清高密度脂蛋白，顯著降低血清和肝組織的LDL-C水平，升高血清HDL-C水平，降低肝組織中HDL-C水平。結(jié)論：杜仲續(xù)斷藥對(duì)具有調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的作用。

【關(guān)鍵詞】杜仲；續(xù)斷；配伍；衰老；SAMP6小鼠；脂代謝

【中圖分類號(hào)】R285.5【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2016）09-0014-02

根據(jù)《中國(guó)人口老齡化發(fā)展趨勢(shì)預(yù)測(cè)研究報(bào)告》預(yù)測(cè)，到2020年我國(guó)老年人口將達(dá)到2.48億。隨著社會(huì)人口的老齡化，老年性骨質(zhì)疏松癥、老年性學(xué)習(xí)記憶受損及AD等與衰老相關(guān)疾病發(fā)病率明顯增高，嚴(yán)重影響老年人的生活質(zhì)量和健康水平。隨著增齡，血脂異?；疾÷试龈遊1]，除氧化脂質(zhì)除誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化外，較高的血清總膽固醇水平是老年人AD患病率增加的危險(xiǎn)因子[2-3]。與此同時(shí)，伴高脂血癥的骨質(zhì)疏松患者存在由氧化脂質(zhì)誘導(dǎo)的骨PTH抵抗[4]，骨形成減少。杜仲與續(xù)斷配伍是中醫(yī)臨床常用藥對(duì)，雖然對(duì)于單味藥研究較多，但對(duì)于二者配伍的研究報(bào)道較少。研究以快速老化SAMP6及其同源正常對(duì)照SAMR1小鼠為研究對(duì)象，觀察杜仲和續(xù)斷配伍前后對(duì)動(dòng)物模型的血液和肝臟中脂代謝主要生化指標(biāo)的影響，為中藥配伍理論和中醫(yī)臨床提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1儀器與材料

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物6月齡清潔級(jí)雄性快速老化骨質(zhì)疏松模型小鼠SAMP650只，正常同源對(duì)照小鼠SAMR110只，均購(gòu)自天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心SAM鼠繁育屏障系統(tǒng)，合格證號(hào)為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（飼）字0003499。

1.2藥品及其制備杜仲、續(xù)斷生藥購(gòu)自安國(guó)市順全隆中藥材有限公司，由天津中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室馬琳教授鑒定。杜仲生藥、續(xù)斷生藥分別用70%乙醇10倍量回流提取2次，每次2h，合并提取液濃縮，真空干燥得杜仲、續(xù)斷提取物。按照上述提取方法，杜仲續(xù)斷按照生藥量1：1比例配伍，制備杜仲續(xù)斷配伍提取物。

1.3儀器VITALAB MTCRO半自動(dòng)生化儀（荷蘭威圖公司）。

1.4試劑總膽固醇測(cè)定試劑盒（TC，批號(hào)：111271）、甘油三酯測(cè)定試劑盒（TG，批號(hào)：114951）、低密度脂蛋白-膽固醇測(cè)定試劑盒（LDL-C，批號(hào)：110421）、高密度脂蛋白-膽固醇測(cè)定試劑盒（HDL-C，批號(hào)：110431），以上試劑盒均由北京中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)。

2方法

2.1分組及給藥正常老化對(duì)照SAMR1組10只，SAMP6小鼠按照體重隨機(jī)分為SAMP6組、配伍高劑量組、配伍低劑量組、杜仲組、續(xù)斷組5組，每組10只。SAMR1組和SAMP6組分別灌服蒸餾水；配伍高劑量組：灌服配伍提取物（每日杜仲、續(xù)斷各用3g生藥/kg）；配伍低劑量組：灌服配伍提取物（每日杜仲、續(xù)斷各用1.5g生藥/kg）；杜仲組和續(xù)斷組：分別灌胃杜仲、續(xù)斷提取物（每日用藥劑量均為3g生藥/kg）。各組每日灌胃1次，連續(xù)給藥12周。實(shí)驗(yàn)期間自由飲水?dāng)z食。每周稱量1次體重，根據(jù)體重變化調(diào)整給藥量。

2.2標(biāo)本采集與處理

2.2.1血清脂質(zhì)檢測(cè)用藥治療第12周末，所有小鼠禁食不禁水8h，末次灌胃給藥lh后，乙醚吸入麻醉，摘眼球取血，分離血清，按照試劑盒要求檢測(cè)TC、TG、LDL-C、HDL-C。

2.2.2肝臟脂質(zhì)檢測(cè)取血后迅速取出肝臟，勻漿，離心取上清液，按照試劑盒要求檢測(cè)TC、TG、LDL-C、HDL-C。

2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用單因素方差分析（One-WayANOVA），方差齊采用LSD法，方差不齊采用Dunnett′s T3法比較，進(jìn)行組間兩兩比較，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3結(jié)果

3.1杜仲續(xù)斷藥對(duì)不同配比對(duì)SAMP6小鼠血清脂質(zhì)的影響SAMP6組小鼠血清LDL-C水平顯著高于SAMR1組（P<0.05）。灌胃給藥12周，配伍低劑量組和杜仲組小鼠血清LDL-C水平顯著低于SAMP6組（P<0.05），配伍低劑量組小鼠血清HDL-C水平顯著高于SAMP6組，配伍低劑量組的HDL-C/TC有升高趨勢(shì)。見表1。

3.2杜仲續(xù)斷藥對(duì)不同配比對(duì)SAMP6小鼠肝組織脂質(zhì)的影響SAMP6組肝組織LDL-C，HDL-C，HDL-C/TC均顯著高于SAMR1組（P<0.01，P<0.05）。經(jīng)治療12周后，配伍低劑量組肝組織TG顯著低于SAMP6組（P<0.01），配伍低劑量組和杜仲組肝組織LDL-C顯著低于SAMP6組（P<0.05，P<0.01），配伍高、低劑量組和杜仲組肝組織HDL-C顯著低于SAMP6組（P<0.01，P<0.05），配伍高劑量組和配伍低劑量組肝組織HDL-C/TC顯著低于SAMP6組（P<0.01，P<0.05）。見表2。

4討論

中醫(yī)并無(wú)高脂血癥的病名，認(rèn)為其病因病機(jī)與痰濁、瘀血等有關(guān)，肝脾腎虛衰，致痰瘀內(nèi)生，以臟虛為本，特別是腎虛，痰濁瘀血內(nèi)阻為標(biāo)，屬本虛標(biāo)實(shí)之證[5]?！毒霸廊珪吩疲骸澳I主水，水泛亦為痰。故痰之化無(wú)不在脾，痰之本無(wú)不在腎”。臨床治療高脂血癥杜仲、續(xù)斷為常用補(bǔ)腎中藥，均具有補(bǔ)肝腎，強(qiáng)筋骨，安胎等功效。藥理研究表明，杜仲和續(xù)斷均具有抗骨質(zhì)疏松、神經(jīng)保護(hù)、調(diào)節(jié)血脂、抗衰老等多種藥理作用[6-8]。SAMP6小鼠為快速自發(fā)老年性骨質(zhì)疏松模型，且血糖、甘油三酯、胰島素水平、瘦素水平、肝脂質(zhì)水平均高于同齡SAMR1和AKR/J小鼠，并具肥胖癥和高脂血癥[9]。

研究發(fā)現(xiàn)，與SAMR1組相比，SAMP6小鼠血清LDL-C顯著升高，肝組織LDL-C、HDL-C、HDL-C/TC顯著升高。經(jīng)給藥治療后，配伍低劑量組和杜仲組小鼠血清LDL-C水平顯著低于SAMP6組。配伍低劑量組小鼠血清HDL-C水平顯著高于SAMP6組，HDL-C/TC有升高趨勢(shì)。配伍低劑量組肝組織TG和LDL-C、杜仲組肝組織LDL-C均顯著低于SAMP6組，配伍高、低劑量組和杜仲組肝組織中HDL-C水平顯著低于SAMP6組。研究結(jié)果表明，杜仲續(xù)斷配伍后能顯著降低血清和肝組織的LDL-C水平，升高血清HDL-C水平，降低肝組織中HDL-C水平，提示杜仲續(xù)斷配伍使用可調(diào)節(jié)血脂水平，具有提高機(jī)體轉(zhuǎn)運(yùn)和清除膽固醇的能力，調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的作用。

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（收稿日期：2016.03.17）