多樂氟氟保護(hù)漆對乳牙釉質(zhì)脫礦和再礦化效果的實驗研究

劉 奕，尚 蘭，周夕湲，費 偉

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院 a.口腔科，b.放射科，c.皮膚科，四川 成都 610072)

多樂氟氟保護(hù)漆對乳牙釉質(zhì)脫礦和再礦化效果的實驗研究

劉 奕a，尚 蘭b，周夕湲c，費 偉a

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院 a.口腔科，b.放射科，c.皮膚科，四川 成都 610072)

目的 體外評價多樂氟氟保護(hù)漆對乳牙早期齲的脫礦和再礦化效果。 方法 離體乳牙標(biāo)本80例，分為多樂氟組、5%氟化鈉溶液組及人工唾液對照組，利用pH-循環(huán)模型在乳牙標(biāo)本上形成人工齲，然后進(jìn)行脫礦-再礦化循環(huán)處理，比較三組釉質(zhì)表面鈣釋出率、乳牙牙釉質(zhì)顯微硬度及牙釉質(zhì)表面氟含量的變化。 結(jié)果 多樂氟組乳牙釉質(zhì)表面鈣釋出率明顯低于5%氟化鈉溶液組及人工唾液組，再礦化后的顯微硬度、表面氟含量明顯高于5%氟化鈉溶液組及人工唾液對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P< 0.05)。結(jié)論 多樂氟可明顯抑制乳牙早期齲脫礦，促進(jìn)其再礦化。

多樂氟；氟保護(hù)漆；乳牙；再礦化

氟是世界一致公認(rèn)的防齲劑，能夠抑制脫礦和促進(jìn)再礦化的發(fā)生，通過再礦化過程改變牙齒礦物質(zhì)的含量，可抑制或扭轉(zhuǎn)早期牙齒的齲壞過程[1]。目前的氟制劑普遍存在:與牙釉質(zhì)表面的結(jié)合能力差，在口腔內(nèi)存在時間短以及使用時操作不便等問題[2]。高露潔棕櫚有限公司研制并生產(chǎn)的多樂氟(氟化鈉護(hù)齒劑)被引進(jìn)中國市場所應(yīng)用，多樂氟是涂布于牙面的一種高濃度氟的保護(hù)漆，能夠在有唾液的情況下附著于牙表面，具有使用方便、安全高效的優(yōu)點[2]。但是，目前國內(nèi)在臨床應(yīng)用該制劑的時間較短，也缺乏相關(guān)的研究資料。為了觀察多樂氟對乳牙齲齒的防護(hù)效果，本文通過對多樂氟氟保護(hù)漆對乳牙釉質(zhì)早期齲脫礦及再礦化作用進(jìn)行實驗研究，對多樂氟對乳牙早期齲的再礦化效果進(jìn)行體外評價，探索多樂氟護(hù)齒劑促進(jìn)乳牙早期齲再礦化的能力。

1 材料與方法

1.1 一般資料 離體乳牙標(biāo)本取自四川省人民醫(yī)院兒童口腔科就診的5～7歲兒童，均為因滯留而同時拔除的下頜乳中切牙，均簽署知情同意書。提供乳牙標(biāo)本的兒童無系統(tǒng)性疾病、遺傳病及發(fā)育異常。乳牙牙根吸收不超過根長的1/2。采集的牙標(biāo)本均用生理鹽水洗凈，去除附著的色素、菌斑、軟組織，在體視顯微鏡下挑選釉質(zhì)顏色正常、表面光滑、無裂紋、缺損及脫礦的乳牙80顆，置于去離子水(pH值調(diào)至中性)中，放入4 ℃的冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 主要儀器和試劑 慢速切片機(Iosmet型，美國)，研磨拋光機(Ecomet型，美國)，顯微硬度儀(Buehler，英國)，X射線光電子能譜儀(Axis Ultra DLD型，英國)，5%氟化鈉溶液，多樂氟護(hù)齒劑(美國高露潔公司生產(chǎn)，含5%氟化鈉，即22600 ppm的氟)，人工唾液配方:20 mmol/L NaHCO3，3 mmol/L NaH2PO4，1 mmol/L CaCl2，pH值為7.0。

1.2 方法

1.2.1 樣本處理 從80顆乳牙標(biāo)本中隨機挑選40顆用慢速切片機將其沿牙體長軸以唇舌方向?qū)Π肭虚_，每顆牙的一半作為對照組(人工唾液組)，另一半作為多樂氟組。剩下的40顆乳牙也按同樣方法對切，一半作為對照組(人工唾液組)，一半作為5%氟化鈉溶液組，均以自凝塑膠包埋，凝固后在流水下將包埋好的釉質(zhì)塊打磨平整光滑，僅在牙冠唇面中1/3處開窗，形成1.5 mm×1.5 mm正方形釉質(zhì)暴露區(qū)域，此區(qū)用于涂布實驗制劑，其余部分用無色指甲油涂布抗酸。開窗區(qū)的牙釉質(zhì)表面首先用75%乙醇消毒，自然干燥。

1.2.2 人工齲的形成 將上述處理好的三組的離體乳牙標(biāo)本固定在pH-循環(huán)模型(pH-cycling model)上，進(jìn)行如下循環(huán):三組標(biāo)本分別處理對應(yīng)實驗用液5 min(2 ml/每樣本)，酸性緩沖液(50 mmol/L醋酸，1.5 mmol/L KH2PO4，pH5.0)，中性緩沖液(20 mmol/L羥乙基哌嗪乙磺酸，1.5 mmol/LKH2PO4，pH7.0)處理1 min，循環(huán)重復(fù)12次，酸性緩沖液保留待測。采用原子吸收光譜法測定酸性緩沖液中的鈣濃度，計算機輔助圖象分析系統(tǒng)測定釉質(zhì)塊脫礦面積，用鈣釋出率[calcium depletion rate，CDR，μg/(mm2·h)]表示，觀察結(jié)果。

1.2.3 再礦化處理 將已脫礦的乳牙釉質(zhì)塊，進(jìn)行脫礦-再礦化循環(huán)，37 ℃水浴中振蕩進(jìn)行: 一周后將以上脫礦釉質(zhì)塊用去離子水沖洗干凈。實驗組釉質(zhì)塊分別涂布多樂氟和5%氟化鈉溶液，對照組浸泡于人工唾液中，37 ℃孵育兩周，實驗液5天更換一次。

1.2.4 顯微硬度測定 利用顯微硬度儀測定包埋好的乳牙釉質(zhì)塊的表面洛氏硬度值，加載0.01 HK(98.07 mN)的負(fù)荷，加載時間15 s，每個樣本在處理面不同位置測定5次取平均值，作為該標(biāo)本的硬度值。測定脫礦前、后及再礦化后實驗組和對照組乳牙釉質(zhì)塊的表面洛氏顯微硬度值。用統(tǒng)計學(xué)方法分析比較脫礦前、后，及再礦化后釉質(zhì)塊的表面顯微硬度值的變化情況。

1.2.5 X射線光電子能譜儀檢測 將乳牙釉質(zhì)塊按相應(yīng)分組分別涂布實驗用藥5 min后，將牙齒放入24 孔板(每孔1個牙齒、1 ml去離子水)，并置于37 ℃恒溫水浴振蕩箱中。分別于涂布后靜置48 h，從每組各隨機取出3 個釉質(zhì)塊，并在體視顯微鏡下用丙酮仔細(xì)擦除表面指甲油、用乙醇擦除氟化物涂膜；將三組標(biāo)本置于干燥箱內(nèi)干燥24 h后，常規(guī)真空鍍膜，掃描電鏡下用X 射線能譜儀測定各牙釉質(zhì)表面氟含量(每個牙每個區(qū)域各隨機測量3個點，取平均值)，單位為氟元素占所測元素(C、O、F、Na、Mg、Si、P、Ca)中的百分含量。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 17.0 版本的統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩兩比較采用t檢驗。P< 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組鈣釋出率的比較 經(jīng)人工齲液浸泡后，肉眼觀察牙釉質(zhì)面開窗區(qū)對照組均呈現(xiàn)白堊色，表面無光澤，有的還出現(xiàn)明顯的凹陷。多樂氟組、5%氟化鈉溶液組及人工唾液組的單位面積鈣析出率均值分別為(3.235±0.14)、(3.852±0.15)及(8.960±0.15)μg/ml，多樂氟組低于5%氟化鈉溶液組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=8.8827，P< 0.05)。

2.2 三組表面顯微硬度的比較 多樂氟組和5%氟化鈉溶液組脫礦后及再礦化后表面顯微硬度值均高于人工唾液對照組，脫礦后顯微硬度值多樂氟組高于5%氟化鈉溶液組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=6.6781，P< 0.05)，再礦化后表面顯微硬度值多樂氟組高于5%氟化鈉溶液組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=9.3321，P< 0.05)，見表1。

表1 各組牙釉質(zhì)表面顯微硬度分析 (HV)

2.3 三組能譜法測定比較 多樂氟組、5%氟化鈉溶液組及人工唾液組氟元素含量分別為(0.36±0.15)wt%及(0.33±0.21)wt%及(0.18±0.08)wt%，多樂氟組高于5%氟化鈉溶液組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=5.3296，P< 0.05)。

3 討論

通常情況下，牙體表面的脫礦與再礦化保持著動態(tài)平衡[3]，齲損的形成是交替進(jìn)行的釉質(zhì)脫礦與再礦化的動態(tài)平衡被破壞的結(jié)果；而使口腔中形成一個有助于促進(jìn)早期釉質(zhì)齲再礦化的環(huán)境是控制齲病的重要方法[4]。氟對抑制脫礦和促進(jìn)再礦化具有重要作用，氟離子可以競爭性地結(jié)合鈣橋，阻礙菌斑形成，降低釉質(zhì)溶解度和促進(jìn)釉質(zhì)再礦化[5]。其常用的方法主要是局部應(yīng)用，包括含氟牙膏、含氟漱口水、氟化粘接材料、氟凝膠、氟泡沫和含氟涂料等[3]。

多樂氟是涂布于牙面的一種高濃度氟的保護(hù)漆，能夠在有唾液的情況下附著于牙表面。目前，我國及歐美國家普遍使用的是高露潔公司生產(chǎn)的含5%氟化鈉的多樂氟氟保護(hù)漆，用于牙脫敏及防齲效果顯著[6]。多樂氟保護(hù)漆通過延長氟與牙釉質(zhì)的接觸時間，改善了含氟漱口液的不足。研究發(fā)現(xiàn)，乳牙釉質(zhì)表面局部涂布多樂氟保護(hù)漆后，釉質(zhì)中的氟濃度明顯升高?？s短該制劑的涂布周期，能有效增加釉質(zhì)表層內(nèi)的氟含量，但釉質(zhì)內(nèi)氟含量并不隨多樂氟涂布劑量增加而升高[5]。Lee等[7]也認(rèn)為，應(yīng)用多樂氟能夠使釉質(zhì)內(nèi)氟含量大幅度提高。多樂氟的物理性狀決定了它比傳統(tǒng)的氟化鈉溶液能更好地附著于釉質(zhì)層。多樂氟在歐洲國家已廣泛應(yīng)用，近兩年開始逐步進(jìn)入我國。Weinstein等[8]在對62例12～24月齡的患齲高危兒童中使用多樂氟保護(hù)漆發(fā)現(xiàn)，患齲率下降8%。大量臨床研究也發(fā)現(xiàn)，多樂氟對于緩解牙頸部牙本質(zhì)過敏癥狀效果顯著[9，10]。

多樂氟由于其含有天然樹脂成分，可迅速粘結(jié)到牙齒表面并停留一段時間，多樂氟中的濃縮氟離子可在牙齒表面形成一層類似氟化鈣的小球狀物質(zhì)大量沉積于牙釉質(zhì)內(nèi)，該小球狀物質(zhì)通過口腔內(nèi)蛋白磷酸酶得以穩(wěn)定，成為不可溶的氟化物保護(hù)層，可促進(jìn)再礦化作用[1]。但該小球狀物質(zhì)并不能與釉質(zhì)晶體持久結(jié)合，釉質(zhì)內(nèi)氟離子會不斷析出，隨著時間的推移，氟含量逐漸下降。因此，為了維持牙釉質(zhì)內(nèi)的氟含量，需要重復(fù)使用氟保護(hù)漆。多樂氟的臨床作用有:①有助于抵御酸的侵蝕，改變牙齒表面的物理化學(xué)性質(zhì)；②可進(jìn)入到殘留的菌斑中，抑制菌斑的細(xì)菌代謝，抑制脫礦，促進(jìn)再礦化；③在菌斑和脫礦后的釉質(zhì)中形成氟化鈣，改善釉質(zhì)的結(jié)晶性[11]。但由于國內(nèi)在臨床應(yīng)用多樂氟護(hù)齒劑的時間較短，相關(guān)的研究資料也比較缺乏。本實驗通過對多樂氟氟保護(hù)漆對乳牙釉質(zhì)進(jìn)行早期齲脫礦及再礦化的研究，初步證實多樂氟有較好地降低釉質(zhì)脫礦和促進(jìn)再礦化的效果。

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The effect of Duraphat varnish on demineralization and remineralization of deciduous teeth in an experimental study

LIU Yia，SHANG Lanb，ZHOU Xi-yuanc，F(xiàn)EI Weia

(a.Department of Oral Medicine，b.Department of Radiology，c.Department of Dermatology，Sichuan Academy of Medical Sciences & Sichuan Provincial People’s Hospital，Chengdu 610072，China)

FEIWei

Objective To evaluate the effect of Duraphat varnish on demineralization and remineralization of deciduous teeth.Methods Eighty isolated deciduous teeth were collected from clinic and randomly divided into three groups: Duraphat varnish group，5% sodium fluoride group and artificial saliva control group.The artificial caries were created in these specimens by using a pH cycling model and then，continually treated with demineralization-remineralization cycle.The calcium release rate，microhardness and fluoride distribution on the enamel were compared among the three groups.Results The results showed that the mean values of calcium release rate on enamel surface in the Duraphat group was significantly lower than that in the 5% sodium fluoride group and control group (P< 0.05).The mean values of microhardness after remineralization，and fluoride concentration in the Duraphat group was significantly higher than that in the 5% sodium fluoride group and control group (P< 0.05).Conclusion Duraphat varnish can obviously inhibit the demineralization and promote the remineralization of early caries of deciduous teeth.

Duraphat，Varnish，Deciduous teeth，Remineralization

四川省人民醫(yī)院博士基金項目(編號：30305030568)

費 偉

R788

A

1672-6170(2016)02-0099-03

2015-09-28；

2015-11-16)