新生兒敗血癥病原菌耐藥性分析及C-反應蛋白與降鈣素測定對預后的評估意義

高新穎　黃立新　胡建山

102488　北京市，首都醫(yī)科大學良鄉(xiāng)教學醫(yī)院

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·藥物研究·

新生兒敗血癥病原菌耐藥性分析及C-反應蛋白與降鈣素測定對預后的評估意義

高新穎黃立新胡建山

102488北京市，首都醫(yī)科大學良鄉(xiāng)教學醫(yī)院

【摘要】目的評價C-反應蛋白及降鈣素對新生兒敗血癥預后的評估預測作用，同時研究新生兒敗血癥病原菌耐藥性情況，指導臨床上抗生素的合理選擇，盡可能減少病菌耐藥性的出現(xiàn)。方法選取2014年4月至2015年4月就診的54例新生兒敗血癥患者為主要研究對象。試驗前，根據(jù)患者的患病程度，將所有受試者分成，一般組(n=30)和重癥組(n=24)；同時選出26例正常人為空白組。在患兒進行抗生素治療前，取患兒血液進行血培養(yǎng)及藥敏試驗；治療過程中，采用散射比濁法和化學發(fā)光免疫法分別測定受試者血漿降鈣素水平和血清C-反應蛋白濃度。結(jié)果使用抗生素治療一段時間后，患兒體內(nèi)仍留有一部分病原菌，說明這一部分病原菌對該抗生素產(chǎn)生了耐藥性。其中，革蘭氏陽性球菌對青霉素、苯唑西林等藥物的耐藥性較強，但對萬古霉素及利福平無耐藥性；革蘭氏陰性菌對頭孢唑啉、氨芐西林等具有較高的耐藥性，但對碳青霉烯類及頭孢哌酮舒巴坦的耐藥性很低。在新生兒敗血癥病患兒中，C-反應蛋白和降鈣素原在血清中含量分別為(24.5±158) mg/L和 (11.5±12.1) ng/ml，檢測結(jié)果明顯高于正常組水平，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；經(jīng)過抗生素的有效治療后，C-反應蛋白和降鈣素原濃度降低，表明敗血癥患兒病情開始好轉(zhuǎn)。結(jié)論臨床上應當合理使用抗生素，減少病原菌耐藥性的發(fā)生。另外，血清C-反應蛋白和降鈣素水平是兩個在臨床敗血癥疾病檢測中應用較廣的指標，可用于新生兒敗血癥的預后評估。

【關(guān)鍵詞】新生兒敗血癥；病原菌耐藥性分析；C-反應蛋白；降鈣素

新生兒敗血癥是指在病原菌侵入到新生兒血液循環(huán)，并在其中生長繁殖、產(chǎn)生大量有害毒素而引起的全身炎性反應，常見的病原體主要是細菌，也可為霉菌、病毒等。研究表明，在我國，引起新生兒敗血癥的病原菌主要是葡萄球菌，其次是大腸桿菌等G-桿菌；而發(fā)達國家主要病原菌是B族溶血性鏈球菌[1]。機體為了抵抗病原菌的入侵，通過細胞因子介導使機體免疫與炎癥之間的動態(tài)平衡被打破，對新生兒的生命造成重大威脅。同時，新生兒敗血癥具有危害大、難治療、難發(fā)現(xiàn)的特點，臨床死亡率較高[2]。研究調(diào)查發(fā)現(xiàn)，新生兒敗血癥是危害新生兒生命健康，導致新生兒死亡的最直接原因，已經(jīng)引起了醫(yī)療界的高度重視。另外，新生兒敗血癥發(fā)病早期具有隱秘性，大部分患兒發(fā)病緊急，病情蔓延速度極快，容易引發(fā)多種并發(fā)癥[3,4]。因此，對于新生兒敗血癥的早期診斷及預后檢測顯得尤其重要。

因新生兒敗血癥早期無特征性的臨床表現(xiàn)，且相關(guān)實驗室檢查結(jié)果的特異度及靈敏度不高，給早期診斷新生兒敗血癥增加了一定的難度?，F(xiàn)階段，隨著醫(yī)學技術(shù)的不斷發(fā)展，眾多實驗室檢查結(jié)果已被廣泛應用于早期診斷新生兒敗血癥，目前的指標主要有：CRP、降鈣素(PCT)、白細胞計數(shù)、白介素-6、白介素-10、TNF、ICAM、中性粒細胞表面抗原等[5]。這些實驗室檢查結(jié)果主要是對早期識別新生兒敗血癥進行探討，較少對新生兒敗血癥患兒的預后進行評估。相關(guān)研究表明，血清CRP和PCT對早期炎癥的特異度和靈敏度較高，能早期識別炎癥的變化，對疾病的預后起著重要的作用[6,7]。為了及時有效的對新生兒敗血癥癥狀做出正確診斷，對患者進行監(jiān)視治療，本次研究通過監(jiān)測患兒體內(nèi)血清CRP和PCT水平對抗生素治療效果及預后進行評價。同時，通過調(diào)查分析新生兒敗血癥病原菌耐藥性情況，借以指導臨床抗生素藥物的合理使用，盡可能減少病菌耐藥性的發(fā)生。

1資料與方法

1.1一般資料選取2014年4月至2015年4月我院就診的新生兒敗血癥患者為主要研究對象，選出54例患者進行試驗。所有新生敗血癥患兒均符合新生兒敗血癥診斷標準及早發(fā)型敗血癥(NEOS)與晚發(fā)型敗血癥(NLOS)診斷標準。試驗前，根據(jù)患兒的患病程度將所有受試者分為一般組(n=30)和重癥組(n=24)；同時，在醫(yī)院中選出同時期正常兒童26例為空白組對照。

1.2方法(1) 新生兒敗血癥病原菌耐藥性分析[8]:在患兒住院后，分別對一般組和重癥組患兒進行血液培養(yǎng)和藥敏實驗，采用K-B藥敏紙片法進行抗菌藥物敏感性試驗。(2)CRP與降鈣素的測定[9-11]:對剛出生的健康嬰兒觀察10 d后進行采血試驗，敗血癥患兒在住院之后分別在未使用抗生素之前、恢復期、使用抗生素之后進行采血實驗，然后離心5 min，將血清放置在-70℃下保存。分別對2組患兒的血樣進行CRP和PCT聯(lián)合檢測，檢測方法分別為散射比濁法和化學發(fā)光免疫法。

1.3評價指標CRP>10 mg/L時表現(xiàn)為陽性；PCT>0.05 ng/ml時表現(xiàn)為陽性[12]。

2結(jié)果

2.1新生兒敗血癥病原菌耐藥性分析研究主要針對在新生兒敗血癥中起到重要作用的菌群進行，最終發(fā)現(xiàn)革蘭氏陽性菌對青霉素、苯唑西林、紅霉素、頭孢曲松、頭孢唑啉等抗生素的耐藥性較強，但對萬古霉素及利福平并沒有耐藥性；然而革蘭氏陰性菌對頭孢唑啉、氨芐西林、第一、二代頭孢及不加酶的第三代頭孢具有較高的耐藥性，但對碳青霉烯類及頭孢哌酮舒巴坦、阿米卡星等呈現(xiàn)出較低的耐藥性。見表1、2。

表1　革蘭氏陽性菌對抗菌藥物的耐藥性　株(%)

表2　革蘭氏陰性菌對抗菌藥物的耐藥性　株(%)

2.2CRP和PCT檢測在新生兒敗血癥預后中的評估意義敗血癥組患者血清中CRP和PCT水平均明顯高于空白組(P<0.01)，經(jīng)過一段時間的抗生素治療后，血清中CRP和PCT水平降低。計算PCT和CRP檢測在血液檢測中的重要性，發(fā)現(xiàn)PCT檢測在敏感性、陽性預測值方面均高于CRP檢測(P<0.05)；在陰性預測值、特異性方面，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；而聯(lián)合使用這兩種指標可以有效提高結(jié)果的準確性。見表3、4。

3討論

新生兒敗血癥死亡率高達13%～50%，已經(jīng)成為新生兒病死率最高的疾病之一。新生兒敗血癥的高危因素主要有：(1)早產(chǎn)兒；(2)極低體重兒；(3)對新生兒進行侵入性檢查或操作；(4)經(jīng)驗性聯(lián)合應用多種抗生素；(5)不合理的使用糖皮質(zhì)激素等。在致病菌方面，我國主要是葡萄球菌、大腸桿菌、G-桿菌及條件致病菌，國外主要是B族鏈球菌、大腸桿菌。因新生兒的屏障功能差、補體激活能力差、白介素低、細胞因子少及IgG、A、M功能低下[13]，且新生敗血癥患兒的病情具有差異性和復雜性，目前還沒有靈敏的臨床診斷能夠?qū)颊叩牟∏樽兓龀鰷蚀_判斷[14]?，F(xiàn)階段，敗血癥患兒的診斷仍然是通過細菌學培養(yǎng)完成的，不僅存在極大的弊端，而且耗時耗力，成本極高。有時因診斷時間過長而延誤最佳治療時間，導致患兒死亡。CRP在1930年由Tillet和Francis發(fā)現(xiàn)，是一種在肝臟內(nèi)部合成的急性識相蛋白，可以作為發(fā)生炎性反應后的一個十分敏感的重要指示標準[15]。研究表明，CRP屬于機體非特異性免疫機制的一部分，與C-多糖相結(jié)合，在Ca2+存在的條件下，與細胞膜上磷酸膽堿相結(jié)合，激活補體的經(jīng)典途徑，增強白細胞的吞噬作用，調(diào)節(jié)淋巴細胞或單核/巨噬系統(tǒng)功能，促進巨噬細胞組織因子的生成[16]。正常情況下，CRP在人體內(nèi)的含量相當少，當機體受到刺激后6～8 h合成，一個晝夜的時間即可達到最高峰。對于患有敗血癥的新生兒來說，受到病原菌感染時，極有可能導致CRP的快速升高。降鈣素原是一種能夠鑒別人體發(fā)熱反應的糖蛋白，也是國際醫(yī)療界公認的炎性反應生物標志分子，具有分子穩(wěn)定性好，易于臨床檢測的優(yōu)點[17]。研究表明，當人體內(nèi)存在嚴重細菌、真菌感染、膿毒癥及多臟器功能衰竭時，降鈣素原在血漿中的含量將會大大提高，而對于自身免疫性反應、過敏及病毒感染，PCT含量無明顯改變，血漿PCT含量能間接的表明體內(nèi)炎癥的活躍程度[18]。因此，本文通過CRP和降鈣素原水平進行分析，希望能夠用于新生兒敗血癥的預后進行相應的評估。

表3　新生兒血清CRP和PCT水平檢測結(jié)果比較　±s

表4　PCT、CRP及二者聯(lián)合檢測對新生兒敗血癥診斷的

經(jīng)過血清PCT、CRP的濃度檢測和各組間評估對比發(fā)現(xiàn)，血清PCT、CRP濃度檢測可用于患有敗血癥的新生兒的診斷和監(jiān)測，在新生敗血癥患兒臨床檢測過程具有極其重要的評估價值。研究中發(fā)現(xiàn)，重癥組患者CRP和PCT水平高于一般感染組，各組間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。對于患有敗血癥的新生兒來講，CRP和PCT水平越高，則表明患者炎性反應更加敏感；隨著抗生素的治療，CRP和PCT濃度迅速下降；當患兒的身體機能有了明顯改觀以后，CRP和PCT濃度降至正常健康水平，與新生兒敗血癥病情變化基本一致。證明了CRP和PCT水平作為一項敏感的指標，能夠確定新生兒敗血癥的發(fā)病階段。計算PCT和CRP檢測在血液檢測中的重要性，發(fā)現(xiàn)PCT檢測在敏感性、 陽性預測值方面均高于CRP檢測；在陰性預測值 、特異性方面，二者幾乎無差異；而聯(lián)合使用這兩種指標可以有效地提高結(jié)果的準確性。

抗生素的使用，使得人類對于眾多感染性疾病的發(fā)病率得到控制，而且使手術(shù)和某些腫瘤患者的感染得以根本的預防和治療，延長了人類的壽命，促進人類疾病譜發(fā)生了質(zhì)的改變[19]。雖然抗生素的使用一方面可以抑制病菌的生長，但是長期濫用還可能導致病菌產(chǎn)生耐藥性[5]。因此，分析敗血癥患兒主要病原菌分布以及耐藥性的相關(guān)情況，指導臨床醫(yī)務人員正確合理的選擇抗生素，適時對病原菌的耐藥性進行分析，能夠從最大程度上減少耐藥性的發(fā)生。為此，我們專門對敗血癥患兒病原菌群的耐藥性進行了研究。研究報道，不同發(fā)病階段患兒的主要感染菌群具有很大差異。早發(fā)型敗血癥患兒主要表現(xiàn)為革蘭氏陽性菌感染為主，晚發(fā)型敗血癥患兒以革蘭氏陰性菌感染為主。針對這些菌群的耐藥性分析，發(fā)現(xiàn)革蘭氏陽性菌對青霉素、苯唑西林、紅霉素、頭孢曲松、頭孢唑啉等抗生素的耐藥性較強，但對萬古霉素及利福平并沒有耐藥性；然而革蘭氏陰性菌對頭孢唑啉、氨芐西林、第一、二代頭孢及不加酶的第三代頭孢具有較高的耐藥性，但對碳青霉烯類及頭孢哌酮舒巴坦、阿米卡星等呈現(xiàn)出較低的耐藥性。因此，臨床上使用抗生素進行新生兒敗血癥的治療過程，可以根據(jù)患兒的發(fā)病階段及主要菌群進行對癥下藥，合理設計治療方案，防止對抗生素耐藥性的發(fā)生。

綜上所述，PCT、CRP用于患有敗血癥的新生兒臨床癥狀的表征具有評估意義，在新生兒敗血癥的診斷中，血清 PCT 和 CRP 一起檢測可作為病情診斷和預后的重要指標[11-13]。同時，臨床上抗生素的使用要根據(jù)患兒的發(fā)病情況及感染菌群進行，有效避免抗生素耐藥性的發(fā)生，為醫(yī)療研究減輕壓力，降低成本。

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doi:10.3969/j.issn.1002-7386.2016.11.039

【中圖分類號】R 722.131

【文獻標識碼】A

【文章編號】1002-7386(2016)11-1723-03

(收稿日期：2015-09-10)