秀麗高原鰍生物學性狀與肌肉氨基酸組成分析

李光華，武祥偉，于虹漫，冷　云，孔令富，張　宇，姜志武

(1.云南省漁業(yè)科學研究院，昆明　650111；2.云南農(nóng)業(yè)大學動物科學技術學院，昆明　650201；3.云南農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學與生物技術學院，昆明　650201；4.云南華電魯?shù)乩娪邢薰?，昆明?50228)

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秀麗高原鰍生物學性狀與肌肉氨基酸組成分析

李光華1，武祥偉2，于虹漫3，冷云1，孔令富2，張宇4，姜志武4

(1.云南省漁業(yè)科學研究院，昆明650111；2.云南農(nóng)業(yè)大學動物科學技術學院，昆明650201；3.云南農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學與生物技術學院，昆明650201；4.云南華電魯?shù)乩娪邢薰?，昆?50228)

摘要：2013-2014年分析了金沙江流域160尾秀麗高原鰍(Triplophysa venusta)的生長性狀、繁殖力和肌肉氨基酸組成。結(jié)果顯示，秀麗高原鰍由1～8齡個體組成，以2～5齡個體為主，占比為78.1%；雌雄個體比例為1∶1.29。雌雄個體的平均體長分別為67.8 mm與72.7 mm，平均體重分別為4.13 g與4.30 g，雌雄個體間的體長和體重均無顯著差異。秀麗高原鰍的體長與體重呈顯著的冪函數(shù)相關：W♀ + ♂=0.014 9L2.811，(R2=0.89，r=0.864 7)。雌雄個體的Fulton和Clark肥滿度分別為1.13與1.02，1.15與0.84，但差異不顯著。雌性個體的絕對繁殖力位于825～4 500粒/尾之間，平均1 815粒/尾。肌肉中共檢測到18種氨基酸，包括8種必需氨基酸與10種非必需氨基酸，總氨基酸含量(占鮮重)為13.63%，鮮味氨基酸含量為4.22%；必需氨基酸的構(gòu)成比例符合FAO/WHO標準。氨基酸評分中，色氨酸分值最小，為第一限制性氨基酸。

關鍵詞：秀麗高原鰍(Triplophysa venusta)；生物學；氨基酸；肌肉

秀麗高原鰍(Triplophysavenusta)屬鯉形目爬鰍科條鰍亞科高原鰍屬，為底棲冷水性小型魚類，主要分布于云南省鶴慶縣的金沙江水系漾弓江流域，是當?shù)氐闹饕⌒汪~類[1-2]；并且秀麗高原鰍所在的條鰍亞科魚類是青藏高原魚類區(qū)系的主體之一，對研究青藏高原魚類區(qū)系的劃分與進化具有重要意義[3]。但由于金沙江上建設水電站，加之始于2009年的云南連續(xù)干旱，使秀麗高原鰍群體數(shù)量銳減，嚴重破壞了其種群資源量。目前，尚無秀麗高原鰍生物學方面的研究報道，本文在調(diào)查采樣的基礎上，對秀麗高原鰍的年齡、生長、繁殖和肌肉氨基酸組成進行了研究，為其種群資源保護管理、人工繁育及資源開發(fā)利用提供參考依據(jù)。

1材料與方法

1.1樣本收集

2013年3月—2014年2月，對分布于云南省鶴慶縣漾弓江流域清水河的秀麗高原鰍進行調(diào)查采樣，采用網(wǎng)捕等方法獲得標本568尾，暫養(yǎng)于充氣水泥池中。

1.2性狀測量與年齡鑒定

隨機選取160尾個體按照《內(nèi)陸水域漁業(yè)自然資源調(diào)查手冊》的方法測量體重、性腺重、去內(nèi)臟重、全長、體長、頭長、尾柄高、體高、眼間距等[4]，并解剖辨認性別，記錄懷卵量和性腺發(fā)育程度。參考已報道的高原鰍屬魚類年齡鑒定方法[5]，采用耳石鑒定年齡。

1.3肌肉氨基酸成分分析

隨機選取9尾秀麗高原鰍樣本，取等量背部肌肉，每3尾混合搗碎，用于測定氨基酸組成。采用酸水解法(GB/T 5009.124-2003)使用安捷倫氨基酸自動分析儀測定除色氨酸外的17種氨基酸含量；采用堿水解法(GB/T15400-1994)用熒光分光光度法測定色氨酸含量。

1.4數(shù)據(jù)分析

根據(jù)BacHeⅡOB公式計算秀麗高原鰍各年齡段的生長指數(shù)[6]；采用冪函數(shù)W=aLb(W為去內(nèi)臟重，L為體長，a與b為常數(shù))進行體長與體重關系的擬合，并使用Paulyt-檢驗法檢驗體長與體重回歸方程的冪指數(shù)b與3之間的差異[7]，以判斷體長與體重的生長速度差異；采用Fulton和Clark兩種方法[6]分析秀麗高原鰍肥滿度K=(W/L3)×100(L為體長；Fulton方法時，W為體重；Clark方法時，W為去內(nèi)臟重)。

2結(jié)果

2.1體長與體重分布及年齡組成

秀麗高原鰍體長范圍為32～110 mm，平均體長70.5 mm，體長組成主要集中于60～80 mm，占總數(shù)的52.5%。體重為0.52～15.41 g，平均體重4.23 g，體重組成主要集中于1.00～6.00 g，占總數(shù)的65.5%。由1～8齡個體組成，以2～5齡個體為主，占總數(shù)的78.1%(表1)。雌雄個體平均體長分別為67.8 mm與72.7 mm，平均體重分別為4.13 g與4.30 g。雙尾t-檢驗表明雌雄個體間的體長、體重差異均不顯著(P>0.05)。

2.2生長指數(shù)

1～8齡個體中體長與體重的相對生長率、瞬時生長率與生長比率的變化趨勢均為先升高，2齡時達最大值，之后逐漸降低，但在4齡與5齡時又達到較高水平?？傮w上，1～8齡個體的生長常數(shù)與生長指標逐漸增大(表2)。由于7齡與8齡個體樣本較少，導致生長常數(shù)與生長指標在此階段處于較低水平。

表1　秀麗高原鰍各年齡組體長與體重的分布

表2　秀麗高原鰍體長與體重生長指數(shù)

2.3體長與體重的關系

160尾樣本中，全部個體、雌性個體、雄性個體的體長與體重的冪函數(shù)擬合回歸方程式分別為：W♀+♂=0.014 9L2.811(n=160，R2=0.891 3，r=0.864 7)，W♀=0.015 5L2.793 1(n=70；R2=0.911 1，r=0.871 8)，W♂=0.013L2.876 1(n=90，R2=0.839 8，r=0.871 8) (圖1)。Paulyt-檢驗結(jié)果表明全部個體、雌性個體、雄性個體的t值分別為1.59、1.19與0.76，均分別小于t0.05(159)=1.96、t0.05(69)=1.99、t0.05(89)=1.98，表明上述體長與體重回歸方程的冪指數(shù)b與3之間無顯著性差異，秀麗高原鰍體重與體長立方成正比，屬于均勻型生長類型。

2.4肥滿度

雄魚(雌魚)的Fulton與Clark肥滿度范圍分別為1.03～1.42(1.03～1.28)與0.76～0.93(0.81～1.21)，平均值分別為1.15(1.13)與0.84(1.02)，最大與最小Fulton肥滿度個體的體長范圍分別為3～4 cm(3～4 cm)與5～6 cm(7～8 cm)，最大與最小Clark肥滿度個體的體長分別為5～6 cm (3～4 cm)與3～4 cm(9～11 cm)(表3)?？傮w上，雄魚Fulton肥滿度平均值大于雌魚，而雄魚Clark肥滿度小于雌魚，但雙尾t-檢驗表明雌雄魚的肥滿度差異均未達到顯著水平(P>0.05)。

圖1　秀麗高原鰍體長與體重關系的擬合曲線

2.5繁殖力

160尾標本中雌雄個體分別為70與90尾，雌雄比例為1∶1.29。雄魚具兩葉精巢，白色細長，最小性成熟個體的體長與體重分別為64 mm和2.78 g，性成熟系數(shù)為0.76%。雌魚腹腔后側(cè)兩側(cè)各具一個卵巢，卵巢前部相連，其正腹面具一凹槽，中后部分開，最小性成熟個體的體長與體重分別為62 mm和2.15 g，絕對懷卵量為769粒，性成熟系數(shù)為2.56%。

性腺發(fā)育至Ⅳ期的30尾個體的絕對繁殖力位于825～4 500粒/尾之間，平均1 815粒/尾，并且體長越大絕對繁殖力越大；相對繁殖力位于317～466粒/g之間，平均316粒/g，并且隨體長規(guī)律性的增加，繁殖貢獻以101～110 mm體長的個體最高，平均值達355粒/g(表4)。Ⅳ期卵巢呈棕黃色，卵為淡黃色。秀麗高原鰍在金沙江漾弓江流域的產(chǎn)卵期為6～8月。

表3　秀麗高原鰍肥滿度變化

表4　秀麗高原鰍繁殖力

2.6氨基酸組成及營養(yǎng)價值評價

從秀麗高原鰍肌肉中檢測到18種氨基酸，包括8種必需氨基酸(EAA)和10種非必需氨基酸(NEAA)，含量分別為5.97%與7.66%(表5)；鮮樣中總氨基酸(TAA)含量為13.63%，谷氨酸含量最高(1.67%)，其次為亮氨酸(1.43%)、天冬氨酸(1.15%)與賴氨酸(1.09%)。EAA與TAA和NEAA的比值分別為0.44與0.78。鮮味氨基酸(DAA)含量為4.22%，DAA/TAA值為0.31。

表5　秀麗高原鰍肌肉中氨基酸的組成與其他鰍屬魚類的比較

續(xù)表5

注：“*”：必需氨基酸；“#” ：鮮味氨基酸；TAA：總氨基酸 ；EAA：必需氨基酸；NEAA：非必需氨基酸；BCAA：支鏈氨基酸；

氨基酸評分中，除色氨酸外其他必需氨基酸的AAS值均大于0.6，賴氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸+酪氨酸的AAS值均大于或等于0.9，最小值為色氨酸(0.21)，其次為蘇氨酸(0.67)。化學評分中，除色氨酸與蛋氨酸+胱氨酸外，其他必需氨基酸CS值均大于0.5，賴氨酸的CS值最高，色氨酸CS值最小(0.12)，其次為蛋氨酸+胱氨酸(CS=0.44)?？傮w上，秀麗高原鰍肌肉氨基酸組成中第一限制性氨基酸為色氨酸。

表6　秀麗高原鰍肌肉中必需氨基酸組成模式與評分

3討論

高原鰍屬大多為小型魚類，秀麗高原鰍是本屬中生長比較緩慢的種類之一。個體體長生長至100 mm時，西溪高原鰍和黑體高原鰍分別需要4年與5年[13-14]，而秀麗高原鰍則需要約8年，與細尾高原鰍相似，后者需要8～9年[15]。除因生活史與遺傳特征不同外，還與其所生活的水環(huán)境相關。秀麗高原鰍生活在高海拔地區(qū)，生存條件隨海拔的增高趨向惡化，生長較慢，個體較小。水環(huán)境因子的不同也是引起生長速度差異化的原因[16]。秀麗高原鰍的年齡結(jié)構(gòu)較為復雜，低齡個體所占漁獲物的比重較小(表1)，表明補充群體數(shù)量較少，資源量受外部因素影響較大，除人為捕撈等影響因素外，始于2009年的云南連年干旱以及秀麗高原鰍棲息地建設水電站是主要原因。干旱嚴重破壞魚類生境，迅速降低種群數(shù)量[17]，而電站大壩可顯著改變河流水文特征，阻礙魚類洄游通道，破壞產(chǎn)卵繁殖場[18]。總之，外部的不利因素已使秀麗高原鰍種群向脆弱化方向發(fā)展。

Clark肥滿度計算公式K=(W/L3)×100中，體長L為定值時，體重W越大，K值越大，表明該種魚的胴體生長越快，用于胴體生長的能量越多，用于性腺生長的能量較少。秀麗高原鰍雌性成魚的Clark肥滿度小于幼魚，表明幼魚獲得的能量多用于胴體生長，而成魚中部分能量用于性腺發(fā)育；同理，同一體長組中，雄性幼魚的Clark肥滿度較小(表3)，表明其性腺發(fā)育要早于雌性。秀麗高原鰍的絕對繁殖力與相對繁殖力分別為1 815粒/尾和316粒/g，均低于已報道的新疆高原鰍(27 597粒/尾，550粒/g)[19]、葉爾羌高原鰍(11 543粒/尾，1 037粒/g)[20]、黑體高原鰍(3 653粒/尾，373粒/g)[14]以及長身高原鰍(2 451粒/尾，473粒/g)[21]；較小的相對繁殖力可能表明秀麗高原鰍對惡劣生存環(huán)境的應對。

氨基酸的組成與含量是評價蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值的重要指標。秀麗高原鰍肌肉中18種氨基酸含量占鮮重的13.63%，低于已報到的葉爾羌高原鰍(22.65%)、似鲇高原鰍(15.95%)、花斑副沙鰍(22.58%)和中華沙鰍(16.3%)肌肉中氨基酸含量(表5)。秀麗高原鰍肌肉EAA與TAA和NEAA的比值分別為0.44與0.78。根據(jù)FAO/WHO的理想模式，質(zhì)量較好的蛋白質(zhì)中氨基酸的EAA/TAA為0.4左右，EAA/NEAA大于0.6[8]，因此，秀麗高原鰍肌肉蛋白質(zhì)質(zhì)量較好。氨基酸評分中，除色氨酸外，秀麗高原鰍各必需氨基酸的AAS值均大于0.6，CS值均大于0.4，表明秀麗高原鰍肌肉中必需氨基酸含量較豐富，組成相對平衡。但秀麗高原鰍EAAI值為48.11，小于已報道的高原鰍屬魚類中的葉爾羌高原鰍(86.84)[22]與似鲇高原鰍(85.17)[10]的EAAI值，可能是因為生活環(huán)境的差異性。動物肉質(zhì)鮮味一定程度上由鮮味氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸)的組成與含量決定。秀麗高原鰍肌肉鮮樣中鮮味氨基酸總量為4.22%，大于葉爾羌高原鰍肌肉中鮮味氨基酸的含量(3.66%)[9]；但低于似鲇高原鰍(6.31%)[10]、泥鰍(5.88%)[23]、刺鰍(8.76%)和大刺鰍(7.14%)[24]中鮮味氨基酸含量。

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(責任編輯：張紅林)

Study on the biology traits and the amino acid component in the muscle of Triplophysa venusta

LI Guang-hua1,WU Xiang-wei2,YU Hong-man3,LENG Yun1,KONG Ling-fu2,ZHANG Yu4,JIANG Zhi-wu4

(1.YunnanAcademyofFisheriesScience,Kunming650111,China;2.CollegeofAnimalScienceandTechnology,YunnanAgriculturalUniversity,Kunming650201,China;3.CollegeofAgronomyandBiotechnology,YunnanAgriculturalUniversity,Kunming650201,China;4.YunnanHuadianLudilahydropowerCo.,Ltd，Kunming650228,China)

Abstract：The growth,fecundity and the component of amino acids in muscle were characterized using 160 individuals of Triplophysa venusta collected from their inherent habitats in Jinsha River from 2013 to 2014.Our study showed that the age of the fish ranged from 1 to 8 years,with the majority of 2 to 5 years accounting for 78.1%.The means of body length in females and males were 67.8 mm and 72.7 mm,respectively.The average body weight was 4.13 g and 4.30 g in female and male individuals,respectively.There was no significant difference in both body weight and body length between males and females.The relationship between body weight and body length was W♀ + ♂=0.0149L2.811，(R2=0.89，r=0.8647).In the females and males,the Fulton ponderal indexes were 1.13 and 1.15,respectively.While the Clark ponderal indexes were 1.02 and 0.84.However,there was no significant difference in ponderal index between females and males.The absolute fecundity ranged from 825 to 4500 eggs per individual,with the average of 1815 eggs per individual.Eighteen amino acids were detected from the muscle of T.venusta,including 8 essential amino acids (EAA) and 10 nonessential amino acids,accounting for 13.63% of wet body weight.Moreover,the proportion and component of EAA in the muscle of T.venusta were accord with the standard of FAO/WHO concerning amino acids.The delicious amino acids accounted for 4.22% of wet body weight.The evaluation of amino acids suggested that Trp was the first limited amino acid.

Key words：Triplophysa venusta;biology;amino acid;muscle

收稿日期：2015-07-01；

修訂日期：2015-12-03

第一作者簡介：李光華(1965-)，男，副研究員，主要從事淡水漁業(yè)科學研究及其管理工作。E-mail：yn118877@126.com通訊作者：冷云。E-mail：wxw9559@126.com

中圖分類號：S931

文獻標識碼：A

文章編號：1000-6907-(2016)03-0023-06

資助項目：云南華電魯?shù)乩娪邢薰?LDL2011/023(P)；云南省科學技術廳(2013HB125)；云南省教育廳科研基金 (2013C125)；云南省科技廳應用基礎研究項目(2014FD019)