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    4種藥物對齊口裂腹魚魚苗的急性毒性試驗

    2016-06-13 02:12:30于振海王玉新陳有光鄭玉珍盧紅
    長江大學學報(自科版) 2016年9期
    關鍵詞:腹魚海因敵百蟲

    于振海,王玉新,陳有光,鄭玉珍,盧紅

    (山東省淡水漁業(yè)研究院,山東省淡水水產(chǎn)遺傳育種重點試驗室,山東濟南250013)

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    4種藥物對齊口裂腹魚魚苗的急性毒性試驗

    于振海,王玉新,陳有光,鄭玉珍,盧紅

    (山東省淡水漁業(yè)研究院,山東省淡水水產(chǎn)遺傳育種重點試驗室,山東濟南250013)

    [摘要]采用半靜水式試驗方法探討了在水溫(20.1±1.5)℃、pH(8.01±0.12)、溶氧(5.1±0.9)mg/L條件下,敵百蟲、車輪特寧、二溴海因、甲醛等4種魚藥對齊口裂腹魚(Schizothorax prenanti)魚苗的急性毒性。結果顯示:4種藥物中敵百蟲的96h半致死濃度最低,為0.473mg/L;甲醛的96h半致死濃度最高,為37.565mg/L。4種藥物毒性大小順序依次為敵百蟲>二溴海因>車輪特寧>甲醛。4種藥物的安全濃度分別為敵百蟲0.128mg/L,車輪特寧0.886mg/L,二溴海因1.011mg/L,甲醛7.531mg/L。該結果表明:4種藥物中,敵百蟲和甲醛安全濃度低于常規(guī)用量,在生產(chǎn)中慎用;二溴海因與車輪特寧安全濃度高于常規(guī)用量,可在生產(chǎn)中安全使用。

    [關鍵詞]齊口裂腹魚(Schizothorax prenanti);急性毒性;半致死濃度;安全濃度

    齊口裂腹魚(Schizothoraxprenanti)是鯉形目(Cypriniformes)鯉科(Cyprinidae)裂腹魚亞科(Schizothoracinae)裂腹魚屬(Schizothorax)魚類,自然分布于我國長江上游、金沙江、岷江、大渡河、青衣江、酋水、任河及烏江下游等水域,其肉味鮮美,是產(chǎn)區(qū)的名貴魚類,也是我國特有的重要“冷水性經(jīng)濟魚類”[1,2]。

    由于齊口裂腹魚具有較高的經(jīng)濟價值,近年來養(yǎng)殖面積逐漸增加。在養(yǎng)殖階段,魚苗容易因細菌、霉菌、寄生蟲等病害侵襲而大批死亡[3]。采用藥物進行病害防治是最直接、最有效和最經(jīng)濟的辦法[4]。有關水產(chǎn)藥物對魚類急性毒性研究表明,魚的種類不同、規(guī)格不同對藥物的安全濃度都存在一定的差異[5],用藥過程中因對藥物的毒性不明、濃度使用不當而造成魚中毒的情況時有發(fā)生[6]。因此,通過急性毒性試驗確定藥物的安全濃度和毒性等級,以確定合適的藥物及用藥濃度是必要的。本試驗選用常規(guī)的病害防治藥物,通過急性毒性試驗探討試驗藥物對齊口裂腹魚的安全濃度,以期為齊口裂腹魚的病害防治時合理安全用藥提供參考。

    1材料與方法

    1.1材料:

    試驗用魚體長(7.5±1.0)cm,體重(2.0±0.3)g。健康活潑,無病、無傷、無畸形。試驗前在試驗條件下暫養(yǎng)3d,每天投食1次,試驗開始前24h停止投食。

    受試藥物有甲醛、車輪特寧、二溴海因和敵百蟲,藥品規(guī)格及生產(chǎn)廠家等詳見表1。

    1.2試驗方法

    試驗在規(guī)格60cm×40 cm×40 cm的白色塑料箱內(nèi)進行。試驗時間為2015年4月1日至4月27日,每個周期4 d,試驗用水為養(yǎng)殖場用深井水,水質符合漁業(yè)水質標準( GB11607-89),水溫(20.1±1.5)℃、pH(8.01±0.12)、溶氧(5.1±0.9)mg/L。每箱盛水30L,苗10尾,每日測1次水溫、pH、溶解氧。

    表1 4種試驗藥物的規(guī)格與成分

    采用半靜態(tài)試驗法,參照盧玲等[7]的方法在室內(nèi)進行。試驗期間不投餌,甲醛具有揮發(fā)性,為保證試驗藥液質量濃度,每隔24h 更換1次試驗藥液。試驗開始和結束時,測定試驗容器中受試物濃度。

    根據(jù)預試驗結果,在包括使魚全部死亡的最低濃度和96h魚類全部存活的最高濃度之間至少設置5個濃度組,以幾何級數(shù)排布,濃度間隔系數(shù)小于等于2.2[8]。每個試驗濃度組設2個平行,每一系列設1個空白對照。試驗溶液調(diào)節(jié)至相應溫度后,從馴養(yǎng)魚群中隨機取出魚并隨機迅速放入各箱中,每箱放魚苗10尾。同一試驗,試驗用魚在30min內(nèi)分組完畢。

    在24、48、72、96h后檢查受試魚狀況,以試驗對象失去活力、對外界刺激無反應為死亡標準[9]。在試驗開始后3h或6h觀察各處理組魚的狀況,并記錄異常行為。

    1.3數(shù)據(jù)處理

    半致死濃度(LC50)、安全濃度(SC)[10]采用下述公式計算:

    (1)

    (2)

    式中:xm為死亡組最大劑量的對數(shù);LC50為半致死濃度,mg/L;d為相鄰濃度的對數(shù)差;p為各組的死亡率,%;∑p為各組死亡率之和,%;SC為安全濃度,mg/L;B為48h LC50,mg/L;C為24hLC50,mg/L。

    2結果與分析

    整個試驗過程中空白對照組沒有出現(xiàn)死魚現(xiàn)象,即死亡率為0。敵百蟲、車輪特寧、二溴海因、甲醛等4種藥物對齊口裂腹魚的毒性試驗結果如表2所示。

    2.1敵百蟲對齊口裂腹魚的毒性

    敵百蟲中毒后的魚苗對外界刺激反應能力降低,在水中翻滾,游泳時尾部擺動頻率高,魚體有明顯彎曲現(xiàn)象,死前魚體失去平衡,最后死于水底。濃度為0.2mg/L時,96h魚死亡率為0;濃度為0.8mg/L時,24h內(nèi)的死亡率為100%(表2)。經(jīng)計算,敵百蟲對齊口裂腹魚的24、48h的半致死濃度分別為0.583、0.525mg/L,安全濃度為0.128mg/L(表3)。

    2.2車輪特寧對齊口裂腹魚的毒性

    由表2可知,齊口裂腹魚在藥物濃度為1.000~1.496mg/L時96h內(nèi)未出現(xiàn)死亡,當濃度為5mg/L時,魚苗開始無明顯不適,后逐漸反應遲鈍,偶有突然竄動,身體失去平衡,約5h出現(xiàn)死亡,24h箱內(nèi)魚苗全部死亡(表2)。經(jīng)計算,車輪特寧對齊口裂腹魚的24、48h的半致死濃度為3.772、3.477mg/L,安全濃度為0.886mg/L(表3)。

    2.3二溴海因對齊口裂腹魚的毒性

    齊口裂腹魚放入二溴海因的水箱中后,藥物濃度為10mg/L時,大約10min就出現(xiàn)失去平衡的現(xiàn)象,30min開始出現(xiàn)死亡,死亡前出現(xiàn)浮頭,側翻失去平衡的現(xiàn)象,死亡后魚口張開,腹部略漲。藥物濃度分別為10.0mg/L 、5.6mg/L的2個試驗組的24h死亡率均為100%;濃度分別為1.0mg/L 和1.8ml/L的2個試驗組96h死亡率均為0(表2)。經(jīng)計算,二溴海因對齊口裂腹魚的24、48h的半致死濃度均為3.369mg/L,安全濃度為1.011mg/L(表3)。

    表2 4種藥物對昆明裂腹魚魚苗的致死率

    表3 4種藥物的半致死濃度和安全濃度

    2.4甲醛對齊口裂腹魚的毒性

    甲醛急性中毒的齊口裂腹魚表現(xiàn)為不安亂竄,浮頭,后身體側翻失去平衡,最后死亡。藥物濃度為10mg/L時,96h魚死亡率為0;濃度為100mg/L時,24h內(nèi)的死亡率為100%(表2)。經(jīng)計算,甲醛對齊口裂腹魚的24、48h的半致死濃度為70.771、50.097mg/L,安全濃度為7.531mg/L(表3)。

    3討論

    3.14種藥物對齊口裂腹魚的毒性評價

    半致死濃度(LC50)用來衡量藥物對試驗魚毒性的大小,其值越小,藥物毒性越大;其值越大,毒性越低[11,12]。以96h LC50為魚類急性毒性分級標準,分為極高毒(<1mg/L)、高毒(1~10mg/L)、中毒(10~100mg/L)和低毒(>100mg/L)4個等級[8]。本試驗中4種藥物對齊口裂腹魚的96h LC50順序依次為甲醛>車輪特寧>二溴海因>敵百蟲,按照藥物對齊口裂腹魚的毒性大小順序依次為敵百蟲>二溴海因>車輪特寧>甲醛。從本試驗結果看:4種藥物中敵百蟲對齊口裂腹魚是極高毒藥物,二溴海因和車輪特寧是高毒藥物,甲醛是中毒藥物。由表3可知,4種藥物對齊口裂腹魚的半致死濃度基本表現(xiàn)為24h LC50>48h LC50>96h LC50,說明隨時間的延長,4種藥物對試驗魚的毒性效應相應提高。

    3.24種藥物對齊口裂腹魚苗的用藥安全

    敵百蟲為膽堿酯酶抑制劑,能將膽堿酯酶的活性點磷酸化而抑制其活性,因其在魚體內(nèi)殘留量少、殘留時間短而被廣泛用于防治體外寄生甲殼類、單殖吸蟲及腸內(nèi)寄生的部分蠕蟲,常用劑量為0.2~0.5mg/L[13]。試驗中敵百蟲對齊口裂腹魚的安全濃度為0.128mg/L,低于常用劑量,并且其在毒性分級標準中屬極高毒,因此在齊口裂腹魚魚苗的病害防治過程中不宜使用敵百蟲。甲醛具有廣譜性殺滅細菌、寄生蟲、真菌、芽孢和病毒的作用,甲醛已被廣泛應用于水生動物疾病防治,且使用劑量較大,常規(guī)用量為10~30mg/L[14]。試驗中,甲醛的安全濃度為7.531mg/L,低于常規(guī)用量,但其毒性分級屬中毒,因此在齊口裂腹魚魚苗的病害防治過程中甲醛要慎用。

    二溴海因在水產(chǎn)養(yǎng)殖中作為殺菌型消毒劑,常用劑量為0.3~0.4mg/L ,多種水產(chǎn)動物安全濃度均高于常規(guī)用量,其安全系數(shù)較高,是很好的消毒劑[15]。試驗中二溴海因的安全濃度為1.011mg/L,高于常規(guī)用量,說明二溴海因能夠用于齊口裂腹魚魚苗的病害防治。車輪特寧為阿維菌素水乳劑生產(chǎn)制品,其有效成分為阿維菌素。阿維菌素對水產(chǎn)養(yǎng)殖動物對錨頭鳋、中華鳋、纖毛蟲、指環(huán)蟲和線蟲等寄生蟲均有著極強的驅殺作用,現(xiàn)已廣泛應用于水產(chǎn)動物體內(nèi)外寄生蟲病的防治[16]。車輪特寧的規(guī)定劑量為0.037~0.045mg/L。本試驗中車輪特寧的安全濃度為0.886mg/L,高于常用劑量,說明車輪特寧能夠用于齊口裂腹魚魚苗疾病的防治。由于阿維菌素對魚類和蝦蟹類毒性較強[17,18],在病害防止過程中注意合理用藥。

    在生產(chǎn)上選用藥物除了考慮藥物的半致死濃度和安全濃度以外,還需對藥物的常用濃度及用藥時間進行綜合考慮。

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    [收稿日期]2015-11-03

    [作者簡介]于振海(1983-),男,碩士,助理研究員,主要從事養(yǎng)殖工程研究,zhenhaiyu-007@163.com。

    [中圖分類號]S948

    [文獻標識碼]A

    [文章編號]1673-1409(2016)09-0038-04

    [引著格式]于振海,王玉新,陳有光,等.4種藥物對齊口裂腹魚魚苗的急性毒性試驗[J].長江大學學報(自科版) ,2016,13(9):38~41.

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