Notch1、VEGF在子宮內膜癌組織中的表達及臨床意義

馬東華，時志民，鄭彥強

(1. 河北省大名縣婦幼保健院，河北 大名 056900；2. 河北工程大學，河北 邯鄲 056000，3. 河北省邯鄲市婦幼保健院，河北 邯鄲 056002)

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Notch1、VEGF在子宮內膜癌組織中的表達及臨床意義

馬東華1，時志民2，鄭彥強3

(1. 河北省大名縣婦幼保健院，河北 大名 056900；2. 河北工程大學，河北 邯鄲 056000，3. 河北省邯鄲市婦幼保健院，河北 邯鄲 056002)

[摘要]目的探討轉染轉移相關基因1 (Notch1)和血管內皮生長因子(VEGF)在子宮內膜癌組織中的表達情況及臨床意義。方法收集子宮內膜癌組織標本68例為實驗組，并選取正常子宮內膜組織標本32例為對照組，采用EliVisionTM免疫組織化學法檢測各組Notch1和VEGF的表達情況。結果實驗組中Notch1和VEGF蛋白陽性表達率均明顯高于對照組(P<0.05)。Notch1和VEGF的表達與腫瘤淋巴結轉移、cTNM、分化程度有關(P<0.05)；Notch1和VEGF表達呈負相關(P<0.05)。結論Notch1和VEGF在子宮內膜癌組織的表達情況與子宮內膜癌的發(fā)生、發(fā)展、轉移及預后密切相關，臨床檢測二者表達情況可為評估子宮內膜癌嚴重程度提供參考。

[關鍵詞]子宮內膜癌組織；Notch1蛋白；VEGF蛋白；EliVisionTM免疫組化；生存率

子宮內膜癌為女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率居女性惡性腫瘤的第2位，且近年來有上升趨勢，早期診斷該病成為目前亟待解決的問題。多種細胞信號系統(tǒng)參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程，在通路中某一環(huán)節(jié)的異常可致細胞生長失控,最終導致腫瘤形成。Notch1在細胞發(fā)育、增殖、分化和凋亡的過程中發(fā)揮著重要作用，而VEGF在組織血管生成過程中起到重要作用，本研究采用免疫組織化學SP法檢測了Notch1和VEGF在子宮內膜癌組織中的表達情況，旨在探討二者表達情況與子宮內膜癌的關系。

1研究資料

1.1一般資料選取2010年1月—2014年12月大名縣婦幼保健院收治并存檔的68例子宮內膜癌患者癌組織蠟塊為實驗組，患者年齡56～71歲，中位年齡62.9歲，按照WHO標準[1]對全部病例的切片進行復查。另選取正常子宮內膜組織標本32例作為對照組，患者年齡55～70歲，中位年齡62.5歲。

1.2研究方法S-P試劑盒、二硝基聯苯胺(DAB)顯色液及兔抗人Notch1單克隆抗體和兔抗人VEGF多克隆抗體均購自武漢博士德生物技術有限公司。采用EliVisionTM法,先進行抗原修復，抗體為兔抗人Notch1和兔抗人VEGF(1∶100)，取已知切片作為陽性對照，以PBS緩沖液代替一抗作為陰性對照，DAB顯色，蘇木素復染，鏡下觀察。Notch1陽性表達定位于細胞核，VEGF陽性表達主要定位于細胞漿和細胞膜，以在細胞核或胞漿內出現棕黃色顆粒為陽性信號。每張切片均隨機觀察5個高倍視野(×400)，陽性細胞數<5%為(-)，5%～25%為(+)，26%～50%為()，>50%為()。+～為陽性表達。

1.3統(tǒng)計學方法采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析，計數資料采用2檢驗,相關性分析用 Spearman 等級相關分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1Notch1和VEGF在子宮內膜癌組織中的表達情況Notch1陽性表達定位于細胞核，VEGF陽性表達主要定位于細胞漿和細胞膜，見圖1和圖2。

圖1　Notch1在子宮內膜癌中的表達情況(SP,×100)

圖2　VEGF在子宮內膜癌中的表達情況(SP,×100)

2.22組Notch1和VEGF蛋白陽性表達情況對照組中Notch1蛋白陽性表達29例(88%)，VEGF蛋白陽性表達10例(31)；實驗組中Notch1陽性表達30例(44%)，VEGF蛋白陽性表達57例(75%)。2組中Notch1和VEGF陽性表達率比較差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)。

2.3Notch1和VEGF在子宮內膜癌組織中的表達與病理指標的關系Notch1和VEGF在子宮內膜癌組織中的表達與分化程度、淋巴結轉移、病理分期有關 (P均<0.05)；且Notch1與肌層浸潤程度有關(P<0.05)。見表1。

表1　Notch1和VEGF在子宮內膜癌組織中的

2.4子宮內膜癌組織中Notch1與VEGF表達的相關性Notch1、VEGF在子宮內膜癌中的表達呈明顯正相關(r=-0.513，P<0.05)。見表2。

表2　子宮內膜癌組織中Notch1與VEGF

3討論

目前子宮內膜癌發(fā)病機制仍不清楚，可能與雌激素、子宮內膜增生過長、體質、絕經后延、遺傳等有關，早期癥狀不典型，難以早期診斷。研究發(fā)現Notch信號通路參與腫瘤的發(fā)生，該通路家族成員眾多，在哺乳動物中包括Notch1、Notch1、Notch3和Notch4 4個受體[2-3]，其中Notch1是Notch信號通路中研究最為廣泛的受體[4]，其參與腫瘤的發(fā)生，并且在不同的惡性腫瘤組織中表達水平不同，表現為致癌或抑癌作用，如在乳腺癌、結腸癌和血液系統(tǒng)腫瘤[5-7]等組織中呈現高表達，為致癌作用；但是在皮膚鱗狀細胞癌、胃癌[8-9]中呈現低表達，起到抑癌、拮抗作用。本研究對Notch1在子宮內膜癌中表達情況進行分析發(fā)現，Notch1在子宮內膜癌組織中陽性表達率明顯低于正常子宮內膜組織，在子宮內膜癌組織中表現為抑癌作用，應該是Notch1抑制組織內的細胞通路，重點是抑制PI3K/Akt通路和Wnt通路從而抑制癌細胞的增生；并且Notch1在子宮內膜癌組織中的表達情況與病理分期、有無淋巴結轉移有關，說明在病理分期較晚、發(fā)生淋巴結轉移的組織中Notch1呈現低表達，其水平的下降抑制相關通路(Wnt通路等)的作用呈現能力不足，起不到抑制腫瘤發(fā)展的作用，水平高低側面反映出子宮內膜癌的預后和惡性程度情況；但 Notch1表達情況與組織類型沒有相關性，考慮到也許是標本量的不足，需要在以后工作中多收集病例資料和隨訪工作，科學地反映其真實水平。

VEGF在臨床上已經被廣泛關注，其可促進組織血管生成，尤其在腫瘤的血管生成過程中，新生血管為腫瘤生長提供必要的營養(yǎng)物質維持其代謝[10]，另外血管也是腫瘤生長、發(fā)生浸潤、轉移的基礎，是重要的轉移途徑。有大量證據證明VEGF在腫瘤組織中高表達[11-12]，作用機制公認是降解血管內皮細胞基質、破壞血管屏障作用，增加滲透作用，促進大量的癌細胞轉移進入血液循環(huán)而轉移到遠處。本研究結果顯示，在子宮內膜癌組織中VEGF的陽性表達率明顯高于正常子宮內膜組織，并且與腫瘤分化程度、浸潤深度、有無淋巴結轉移、病理分期有關，提示VEGF可促進子宮內膜癌發(fā)生、轉移，其高表達直接證明預后差，值得臨床醫(yī)生關注。

Spearman相關性分析顯示，Notch1和VEGF在子宮內膜癌組織中呈現負相關，提示Notch1表達的增高可能負反饋作用于VEGF，抑制并且阻斷VEGF促血管生長作用，使腫瘤血管形成受阻，從而起到抑癌作用。VEGF在臨床上檢測較多，故檢測Notch1目前只是在實驗室層面上檢測，Notch1在有條件的醫(yī)院可以推廣，為進一步研究子宮內膜癌提供幫助。

總之，Notch1和VEGF在子宮內膜癌組織的表達情況與子宮內膜癌的發(fā)生、發(fā)展、轉移及預后密切相關，臨床檢測二者表達情況可為評估子宮內膜癌嚴重程度提供參考。

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[收稿日期]2015-11-14

[通信作者]時志民,E-mail:shizhimin1980@163.com

[中圖分類號]R737.33

[文獻標識碼]B

[文章編號]1008-8849(2016)14-1568-02

doi:10.3969/j.issn.1008-8849.2016.14.032