藏荊芥與荊芥的揮發(fā)性成分比較

胡丹丹， 黃　山， 李　斌， 金　巖， 王躍飛， 王聚樂

（1.青島科技大學(xué)，山東青島266042；2.天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津300193；3.西藏大學(xué)醫(yī)學(xué)院，西藏拉薩850012）

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藏荊芥與荊芥的揮發(fā)性成分比較

胡丹丹1， 黃山1， 李斌1， 金巖1， 王躍飛2， 王聚樂3*

（1.青島科技大學(xué)，山東青島266042；2.天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津300193；3.西藏大學(xué)醫(yī)學(xué)院，西藏拉薩850012）

摘要：目的 分析藏荊芥NePeta angustifolia C.Y.Wu不同藥用部位及荊芥SchizonePeta tenuifalia Briq中的揮發(fā)性成分，并比較其差異。方法 取藏荊芥全草、花穗、葉、莖和荊芥，分別密封于頂空進(jìn)樣瓶中，頂空氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（HS-GC/MS）法測定揮發(fā)性成分，并檢索NIST標(biāo)準(zhǔn)譜庫，面積歸一化法計(jì)算其相對含有量。結(jié)果 藏荊芥的揮發(fā)性成分種類以葉中最多（21個(gè)），而全草中最少（17個(gè)）。莖中主要為荊芥內(nèi)酯，相對含有量達(dá)73.24％。荊芥中鑒定出18個(gè)揮發(fā)性成分，主要為異薄荷酮、胡薄荷酮和檸檬烯。結(jié)論 藏荊芥與荊芥中的揮發(fā)性成分存在較大差異。

關(guān)鍵詞：藏荊芥；荊芥；藥用部位；揮發(fā)性成分；HS-GC/MS

藏荊芥（藏語又名沙丟那博）為唇形科荊芥屬植物藏荊芥NePeta angustifolia C.Y.Wu的全草［1］，是西藏地區(qū)常用的傳統(tǒng)藏藥材，生長在海拔3 600～4 600 m的山坡路邊、草地、林緣，分布于西藏中部、南部地區(qū)。《中華本草·藏藥卷》記載［2］，藏荊芥具有“開竅醒神”的功效，臨床主治神昏痙厥、中風(fēng)、癲癇、腦溢血、瘡傷及疼痛等病癥。荊芥SchizonePeta tenuifalia Briq.與藏荊芥均為唇形科荊芥屬植物，其藥用部位干燥莖葉為常用發(fā)解表藥，主治感冒頭痛、風(fēng)疹、瘡瘍初起等病癥，在功能主治上與藏荊芥有較大差別，說明這兩種植物在化學(xué)成分上可能有所不同。由于唇形科植物中大多含揮發(fā)油類成分，故本實(shí)驗(yàn)主要對其揮發(fā)性成分進(jìn)行考察。目前，對于藏荊芥的研究僅局限于其主要化學(xué)成分及抗炎、鎮(zhèn)痛方面［3-4］，但該植物不同藥用部位中的揮發(fā)性成分是否存在差異，以及與荊芥中揮發(fā)性成分有何不同，均鮮有報(bào)道。

頂空氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（HS-GC/MS）法是對液體或固體中的揮發(fā)性成分進(jìn)行分析的方法，具有樣品用量少、前處理簡單等優(yōu)點(diǎn)［5］。因此，本實(shí)驗(yàn)采用該方法對藏荊芥不同藥用部位及荊芥中的揮發(fā)性成分進(jìn)行分析，并比較其差異，為今后對藏荊芥的化學(xué)、藥理研究及合理開發(fā)利用提供依據(jù)。

1 儀器與材料

450GC-320MS HS-GC/MS聯(lián)用儀（美國布魯克-道爾頓公司）；高速萬能粉碎機(jī)（天津泰斯特儀器有限公司）；AL-204電子天平（萬分之一，瑞士Mettler-Toledo公司）。藏荊芥（2014年8月采自西藏大學(xué)）、荊芥（江蘇同仁堂藥店，產(chǎn)地江蘇省太倉市）經(jīng)西藏大學(xué)王聚樂教授鑒定，分別為唇形科荊芥屬植物藏荊芥NePeta angustifolia C.Y. Wu的全草與荊芥SchizonePeta tenuifalia Briq的干燥莖葉。

藏荊芥全草按花穗、莖、葉不同部位進(jìn)行分揀，然后分別將其和荊芥粉碎，過60目篩，精密稱取0.5 g，置于頂空進(jìn)樣玻璃瓶內(nèi)，擰緊瓶蓋，密封備用。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 頂空進(jìn)樣條件 頂空振蕩室加熱溫度80℃；頂空平衡時(shí)間30 min；震蕩加熱；進(jìn)樣量1.0 mL；頂空進(jìn)樣針溫度90℃。

2.2 色譜條件 VF-5MS色譜柱（30 m×0.25 mm× 0.25 μm）；載氣為高純氦氣（>99.999％）；分流比50∶1；體積流量1 mL/min；進(jìn)樣量1 mL；氣化溫度250℃。色譜柱程序升溫條件為初始溫度40℃，恒溫5 min，以30℃/min速率升至120℃，再以5℃/min速率升至150℃，恒溫5 min，再以20℃/min速率升至220℃，恒溫3 min。

2.3 質(zhì)譜條件 EI離子源，離子源溫度250℃；電子能量70 eV；接口溫度280℃；全掃描模式，掃描范圍m/z30～500。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 藏荊芥不同藥用部位和荊芥HS-GC/MS總離子流圖差異分析 由圖1A～1E可知，在12.5 min時(shí)，藏荊芥不同藥用部位都出現(xiàn)一高一矮兩個(gè)較明顯的色譜峰，而且全草、花穗、葉、莖處的峰高有明顯區(qū)別；在7.5～12.5 min之間，荊芥總離子流圖有零落的較小色譜峰，而且峰高明顯低于藏荊芥，保留時(shí)間也有較大變化。由圖A1～E1可知，藏荊芥不同藥用部位的總離子流主要分布在7.5、12.5 min，而荊芥較分散。由此說明，藏荊芥不同藥用部位色譜峰的保留時(shí)間相當(dāng)，但峰高有一定的差異，并且兩種植物中揮發(fā)性成分的出峰時(shí)間也存在較大差別，即該類成分有明顯差異。

3.2 藏荊芥不同藥用部位及荊芥揮發(fā)性成分分析在“2.1.2”項(xiàng)色譜條件下，對藏荊芥不同藥用部位及荊芥中的揮發(fā)性成分進(jìn)行分析，NIST-08標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫檢索，根據(jù)文獻(xiàn)［6-10］進(jìn)行鑒定。然后，峰面積歸一化法測定樣品中各成分的相對含有量，結(jié)果見表1，總離子流圖見圖2。

由表可知，從藏荊芥不同藥用部位中鑒定出21個(gè)揮發(fā)性成分，主要為酯類、萜類、烯類、酮類及烷烴類等，而相對含有量最高的為莖中的荊芥內(nèi)酯，高達(dá)73.24％，與澤仁拉姆等［4］報(bào)道相符。另外，在荊芥中檢測出18個(gè)揮發(fā)性成分，主要為異薄荷酮、胡薄荷酮、檸檬烯等，與杜成智等［6］等報(bào)道一致，顯示兩者的揮發(fā)性成分測定結(jié)果差別較大。

本實(shí)驗(yàn)從藏荊芥不同部位中鑒定出多種揮發(fā)性成分，其數(shù)量依次為葉（21個(gè)）>花穗（20個(gè)）>莖（18個(gè)）>全草（17個(gè)），與文獻(xiàn)［7］報(bào)道相符，雖然藏荊芥葉中揮發(fā)性成分的種類最多，但其含有量是否也為最高還有待確定。另外還發(fā)現(xiàn)，藏荊芥全草中的揮發(fā)性成分少于其它部位，推測可能是由于該植物在采收、貯存和運(yùn)輸過程中，葉和花穗干燥后萎縮嚴(yán)重，容易脫落，導(dǎo)致兩者所占全草的比例降低，而莖占大多數(shù)，因此產(chǎn)生如上現(xiàn)象。

注：A1、B1、C1、D1、E1分別是A、B、C、D、E的放大圖A、A1.全草 B、B1.花穗 C、C1.葉 D、D1.莖 E、E1.荊芥A and A1.whole grass B and B1.spikes C and C1.leaves D and D1.stems E and E1.S.tenuifalia圖1　藏荊芥不同藥用部位及荊芥的HS-GC/MS總離子流圖Fig.1 HS-GC/M S total ion current chrom atogram s of differentm edicinal parts of N.a ngustifolia and S.tenuifalia.

表1　藏荊芥不同藥用部位及荊芥中的揮發(fā)性成分分析結(jié)果Tab.1 Analysis results of the volatile constituents in differentmedicinal parts of N.angustifolia and S.tenuifalia

續(xù)表1　

圖2　藏荊芥葉和荊芥的HS-GC/MS總離子流圖Fig.2 HS-GC/MS total ion current chromatograms of N.angustifolia leaves and S.Tenuifalia

同時(shí)，在藏荊芥中首次鑒定出了布他西丁、3-甲基環(huán)戊酮、氧化芳樟醇、4-甲基-1-異丙烯-環(huán)己烯、β-石竹烯、葎草烯、順-γ-紅沒藥烯等化合物，并發(fā)現(xiàn)了3-甲基環(huán)戊酮、苯并環(huán)丁烷、桉葉油素、5-甲基-5-己烯-2-酮、氧化芳樟醇、順式-芳樟醇氧化物、4-乙?；?1-甲基-環(huán)己烯、異戊酸葉醇酯、氫化肉桂酸甲酯、氧化石竹烯、紅沒藥醇等荊芥中沒有的成分。

有報(bào)道稱，荊芥貯藏期越長，其中的揮發(fā)性成分損失越多，當(dāng)貯藏3年時(shí)，該成分損失過半［11］，而本實(shí)驗(yàn)所用的荊芥藥材采收于2014年7月份，已存放了近一年時(shí)間，故揮發(fā)性成分損失較大。在荊芥中，揮發(fā)性成分相對含有量最高的為異薄荷酮（53.02％），其次是胡薄荷酮（16.67％）、檸檬烯（7.58％）等成分，而且還鑒定出了β-檸檬醇（1.56％）、辣薄荷酮（1.30％）、乙酸香芹酯（1.07％）、雪松烯醇（0.71％）、百秋李醇（0.55％）等藏荊芥中沒有的揮發(fā)性成分。由此可知，作為西藏特有的傳統(tǒng)藥材，藏荊芥與荊芥在揮發(fā)性成分上有很大差別，故為兩者在主治功效和臨床應(yīng)用上的不同提供了理論依據(jù)。

藏荊芥葉揮發(fā)性成分的出峰時(shí)間在12.5 min左右，而荊芥在7.5～12.5 min之間，表明各色譜峰分離度良好，見圖2。

3.3 代表性成分質(zhì)譜裂解規(guī)律解析 由表1可知，藏荊芥不同藥用部位中的揮發(fā)性成分主要為荊芥內(nèi)酯，而荊芥主要為異薄荷酮、胡薄荷酮及檸檬烯等。本實(shí)驗(yàn)分別選取荊芥內(nèi)酯和胡薄荷酮來解析其質(zhì)譜裂解規(guī)律，其NIST譜庫檢索結(jié)果和質(zhì)譜裂解規(guī)律見圖3、圖4。

4 討論

荊芥內(nèi)酯最早是在1941年，從一種貓薄荷植物中分離所得，對某些昆蟲具有驅(qū)逐作用［12］，而且在鎮(zhèn)痛和抑菌方面也顯示了獨(dú)特的優(yōu)勢［13-14］，可用于制備抗痙攣藥、弱安眠藥、退熱藥與抗菌藥等藥物。另外，其抗痙攣?zhàn)饔每赡芘c藏荊芥治療神昏痙厥、中風(fēng)、癲癇等病癥有很大的關(guān)系。

本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，藏荊芥和荊芥藥材中的揮發(fā)性成分，特別是主要成分及其含有量都存在較大差異。由此表明，藏荊芥在臨床上可能具有更廣泛的應(yīng)用前景，可為該植物的進(jìn)一步開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

圖3　荊芥內(nèi)酯NIST譜庫檢索結(jié)果及其質(zhì)譜裂解規(guī)律Fig.3 Retrieved results of NIST library and MS fragm entation pattern of nepetalactone

圖4　胡薄荷酮NIST譜庫檢索結(jié)果及其質(zhì)譜裂解規(guī)律Fig.4 Retrieved results of NIST library and MS fragmentation pattern of pulegone

參考文獻(xiàn)：

［1］ 羅達(dá)尚.新修晶珠本草［M］.成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，2004：546.

［2］ 西藏自治區(qū)藏醫(yī)院藥物研究所.中華本草：藏藥卷［M］.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2002：359-360.

［3］ 黃 山，江春艷，龍 飛.藏荊芥揮發(fā)油抗炎與鎮(zhèn)痛作用研究［J］.醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2011，30（10）：1262-1265.

［4］ 澤仁拉姆，童志平，張 垠，等.藏荊芥揮發(fā)油化學(xué)成分的研究［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2011，22（6）：1520-1521.

［5］ 張 軍，車海先.淺議頂空氣相色譜［J］.食品安全導(dǎo)刊，2012（5）：48.

［6］ 杜成智，覃潔萍，陳玉萍，等.不同產(chǎn)地荊芥揮發(fā)油化學(xué)成分的GC-MS分析［J］.湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，53（1）：188-190.

［7］ 蔣以號，羅朝暉，洪玲玲，等.GC-MS分析不同提取方法對荊芥各部位揮發(fā)油的影響［J］.中藥材，2014，37（1）：77-79.

［8］ 任彥蓉，米 琴，劉寶林，等.超臨界CO2萃取法提取康藏荊芥中有效成分的研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36 （33）：14578-14581.

［9］ 方明月，康文藝，姬志強(qiáng)，等.荊芥揮發(fā)油化學(xué)成分研究［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2007，18（7）：1551-1522.

［10］ 陳 赟，江周虹，田景奎.荊芥穗揮發(fā)性成分的GC-MS分析［J］.中藥材，2006，29（2）：140-142.

［11］ 胡壽康，張厚寶.不同收獲期對荊芥揮發(fā)油含量的影響［J］.中國中藥雜志，1993，18（7）：414.

［12］ Birkett M A，Hassanali A，Hoglund S，etal.Repellentactivity of catmint，NePeta cataria，and iridoid nepetalactone isomers against Afro-tropical mosquitoes，ixodid ticks and red poultry mites［J］.phytochemistry，2011，72（1）：109-114.

［13］ Aydin S，Beis R，Oztürk Y，etal.Nepetalactone：a new opioid analgesic from NePeta caesarea Boiss［J］.J pharm pharmacol，1998，50（7）：813-817.

［14］ Nestorovic J，Misic D，Siler B，et al.Nepetalactone content in shoot cultures of three endemic NePeta species and the evaluation of their antimicrobial activity［J］.FitoteraPia，2010，81 （6）：621-626.

網(wǎng)絡(luò)出版日期：2015-11-05

網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/31.1368.R.20151105.1407.002.htm l

Com parison of volatile constituents in NePeta angustifolia and SchizonePeta tenuifalia

HU Dan-dan1， HUANG Shan1， LIBin1， JIN Yan1， WANG Yue-fei2， WANG Ju-le3 *
（1.Qingdao University of Science and Technology，Qingdao 266042，China；2.Tianjin University of Traditional Chinese Medicine，Tianjin 300193，China；3.College of Medicine，Tibet University，Lhasa 850012，China）

ABSTRACT：AIM To analyze the volatile constituents in differentmedicinal parts of NePeta angustifolia C.Y. Wu and SchizonePeta tenuifalia Briq and to compare their differences.M ETHODS The whole grass，spikes，leaves and stems of N.angustifolia and S.tenuifalia were sealed in the headspace bottle and analyzed by headspace gas chromatography-mass spectrometry（HS-GC/MS）.The NIST library was searched.Then the relative contents of them were calculated by area normalization method.RESULTS The kinds of volatile constituents in N.angustifolia were themost in leaves（twenty-one）and the least in whole grass（seventeen）.Stemsmainly contained nepetalactone with the relative content of 73.24％.There were eighteen volatile constituents in S.tenuifalia，mainly ofwhich werementhone，pulegone and cinene.CONCLUSION There are significant differences in the volatile constituents in N.angustifolia and S.tenuifalia.

KEY WORDS：NePeta angustifolia C.Y.Wu；SchizonePeta tenuifalia Briq；medicinal parts；volatile constituents；HS-GC/MS

*通信作者：王聚樂（1963—），男，博士，教授，研究方向?yàn)椴厮幩幮W(xué)和毒理學(xué)。Tel：（0891）6991746，E-mail：Jule_ wang@ 163.com

作者簡介：胡丹丹（1990—），女，碩士，研究方向?yàn)樗幬镄聞┬团c新技術(shù)。E-mail：dandanhu1989@126.com

基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81360686）；國家科技基礎(chǔ)性工作專項(xiàng)項(xiàng)目（2014FY111100）

收稿日期：2015-06-06

doi：10.3969/j.issn.1001-1528.2016.05.024

中圖分類號：R284.1

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：1001-1528（2016）05-1078-05