視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡對(duì)延遲整流鉀電流的影響*

趙 瑛， 徐亞吉， 路雪婧， 段俊國(guó)△

(1成都中醫(yī)藥大學(xué)視覺(jué)生理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610075； 2成都大學(xué)生理教研室，四川 成都 610106)

視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡對(duì)延遲整流鉀電流的影響*

趙 瑛1， 徐亞吉2， 路雪婧1， 段俊國(guó)1△

(1成都中醫(yī)藥大學(xué)視覺(jué)生理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610075；2成都大學(xué)生理教研室，四川 成都 610106)

目的： 觀察視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinal ganglion cells，RGCs)凋亡對(duì)延遲整流鉀電流(delayed recti-fier K+currents，IK)的影響。方法: 將原代培養(yǎng)2～3 d的SD乳大鼠RGCs分為對(duì)照組、加壓0.5 h組、加壓1 h組、加壓1.5 h組和加壓2 h組，對(duì)照組為常規(guī)培養(yǎng)6 d；其它各組常規(guī)培養(yǎng)6 d后用自行設(shè)計(jì)的加壓裝置加壓80 mmHg，時(shí)間分別為0.5 h、1 h、1.5 h和2 h，通過(guò)連續(xù)波長(zhǎng)多功能微孔板檢測(cè)儀檢測(cè)各組RGCs線粒體的熒光強(qiáng)度；通過(guò)全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)觀察各組細(xì)胞膜電容(membrane capacitance，Cm)的變化，觀察對(duì)照組與加壓1 h組IK、V1/2、k和Gmax的變化。結(jié)果: 對(duì)照組RGCs線粒體的熒光強(qiáng)度與加壓0.5 h組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，而加壓1 h、1.5 h和2 h各組RGCs線粒體的熒光強(qiáng)度顯著低于對(duì)照組(P<0.05)；對(duì)照組RGCs的細(xì)胞Cm與加壓0.5 h組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，其余各組RGCs的細(xì)胞Cm顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。與對(duì)照組比較，加壓1 h能使電流幅度顯著增加，在刺激電位為-10 mV～60 mV時(shí)，加壓1 h組的電流密度明顯大于對(duì)照組(P<0.05)。加壓1 h組的Gmax值明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，V1/2顯著小于對(duì)照組(P<0.01)，兩組間比較k值的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。結(jié)論: 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡伴有IK通道電導(dǎo)增加，IK增大。

延遲整流鉀電流； 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞； 加壓； 細(xì)胞凋亡

青光眼是不可逆致盲性眼病，病理基礎(chǔ)是視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinal ganglion cells，RGCs)凋亡，視野缺損，因此探索RGCs凋亡機(jī)理對(duì)預(yù)防和治療青光眼有重要意義。越來(lái)越多的研究表明，細(xì)胞內(nèi)鉀離子濃度降低是多種細(xì)胞凋亡途徑的重要因素，胞內(nèi)鉀外流是引起老年癡呆患者海馬神經(jīng)元凋亡的關(guān)鍵[1]，隨著凋亡細(xì)胞內(nèi)K+的丟失，細(xì)胞內(nèi)促凋亡因子Bax表達(dá)增加使細(xì)胞凋亡[2]。我們前期的研究發(fā)現(xiàn)，青光眼大鼠的RGCs促凋亡因子Bax增加，凋亡抑制因子Bcl-2的表達(dá)減少，RGCs的凋亡增多[3]。然而尚不清楚在凋亡過(guò)程中RGCs的K+電流是如何變化的。為此，本研究探討壓力誘導(dǎo)RGCs凋亡時(shí)延遲整流鉀電流(delayed rectifier K+currents,IK)的變化，探索RGCs凋亡的機(jī)理，為防止青光眼視神經(jīng)疾病奠定基礎(chǔ)。

材 料 和 方 法

1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

SD乳鼠(出生2～3 d)，雌雄不拘，由成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。將分離培養(yǎng)的乳鼠RGCs分為對(duì)照組、加壓0.5 h組、加壓1 h組、加壓1.5 h組和加壓2 h組。對(duì)照組為常規(guī)培養(yǎng)6 d；其余各組為常規(guī)培養(yǎng)6 d后用自行設(shè)計(jì)的加壓裝置加壓80 mmHg，時(shí)間分別為0.5 h、1 h、1.5 h和2 h。

2 主要試劑與儀器

多聚鳥(niǎo)氨酸、多聚賴氨酸、胰蛋白酶、ATP-Mg、 GTP、phosphocreatin、EGTA和Asp(Sigma)；層黏連蛋白(Roche)；胎牛血清、HEPES、 DMEM/F12、B-27、Thy1.1單克隆抗體、rhodamine 123和二甲基亞砜(Invitrogen)；羊抗鼠IgG(北京中杉金橋生物科技有限公司)；寧夏枸杞多糖(由香港大學(xué)腦與認(rèn)知科學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室饋贈(zèng))。Multiclamp 700B膜片鉗系統(tǒng)(Axon)；P-97電極拉制儀(Sutter)；Ti倒置顯微鏡(Nikon)；DMi1倒置顯微成像系統(tǒng)(Leica)；SMZ445體視顯微鏡(Nikon)

3 方法

3.1 RGCs的培養(yǎng) 用文獻(xiàn)報(bào)道的方法[4]分離培養(yǎng)RGCs。取出生2～3 d內(nèi)的SD乳鼠，75%乙醇消毒，斷頸處死，無(wú)菌條件下取眼球，置入含青霉素的PBS液中。在體視顯微鏡下沿角膜剪開(kāi)，去除晶狀體和玻璃體，鈍性分離視網(wǎng)膜。將視網(wǎng)膜放入終濃度0.125%的胰蛋白酶中，吸管輕輕吹打，消化10 min，加入胎牛血清終止消化，用200目無(wú)菌鋼篩網(wǎng)過(guò)濾，濾液離心2次，1 000 r/min，每次10 min，棄上清液。向沉淀中加入DMEM/F12培養(yǎng)液(含90% DMEM/F12、10%胎牛血清、1×105U/L青霉素、100 mg/L鏈霉素)，吸管吹打使之分散均勻制成單細(xì)胞懸液。將視網(wǎng)膜細(xì)胞懸液加入經(jīng)羊抗鼠IgG和小鼠抗大鼠Thy-1.1單克隆抗體包被的培養(yǎng)皿中，在37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中孵育30 min，使視網(wǎng)膜RGCs與Thy-1.1單克隆抗體充分結(jié)合。去除懸液，用無(wú)血清DMEM/F12培養(yǎng)液反復(fù)漂洗，清除培養(yǎng)皿表面未黏附細(xì)胞。用0.125%胰蛋白酶消化黏附的細(xì)胞5 min，小牛血清終止消化。收集細(xì)胞，1 000 r/min離心5 min，去上清，加入含胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)液，用吸管反復(fù)吹打，使細(xì)胞分散均勻，制成細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)，將細(xì)胞懸液按每孔1×106個(gè)接種于經(jīng)多聚鳥(niǎo)氨酸、層黏連蛋白包被的24孔板中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3.2 線粒體膜電位的檢測(cè) 用0.125%胰蛋白酶消化黏附的細(xì)胞5 min，小牛血清終止消化，收集細(xì)胞，1 000 r/min離心5 min，加入PBS液使細(xì)胞懸浮，將懸液加入酶標(biāo)板中，靜置30 min貼壁，加入已配置好的1 μmol/L rhodamine 123，每孔20 μL，使終濃度至0.5 μmol/L，37 ℃孵育20 min，用PBS洗滌2次，用連續(xù)波長(zhǎng)多功能微孔板檢測(cè)各組RGCs線粒體膜熒光強(qiáng)度，激發(fā)光波長(zhǎng)為488 nm，發(fā)射光波長(zhǎng)為532 nm，重復(fù)3次實(shí)驗(yàn)。

3.3 全細(xì)胞膜片鉗記錄 在室溫條件(20～25 ℃)下記錄各組RGCs的膜電容(membrane capacitance,Cm)以及對(duì)照組與加壓1 h組的IK。采樣頻率為10 kHz，低通濾波頻率2 kHz，保持電位鉗制在-50 mV，以10 mV的階躍，從-50 mV去極化至+60 mv，鉗制時(shí)間為200 ms。電極液(mmol/L)：KOH 110、KCl 20、Asp 110、MgCl21、HEPES 10、EGTA 5、ATP-Mg 5、GTP 0.1、phosphocreatin 5，用KOH調(diào)節(jié)pH值至7.2；細(xì)胞浴液(mmol/L)：NaCl 136、KCl 5.4、CaCl21.0、MgCl21.0、NaH2PO40.33、HEPES 5、glucose 10、CoCl23，用NaOH調(diào)節(jié)pH值至7.35。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用Clampfit 10.0和Origin 7.5軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理并作圖，采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間進(jìn)行比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA)，各組均數(shù)間兩兩比較采用LSD法，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 加壓對(duì)RGCs線粒體膜電位的影響

線粒體膜電位與rhodamine 123熒光強(qiáng)度成正比，因此可通過(guò)rhodamine 123熒光強(qiáng)度間接觀察線粒體膜電位的變化。對(duì)照組與加壓0.5 h組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，加壓1 h組、加壓1.5 h組和加壓2 h組顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)圖1。

Figure 1.Time courses of pressure-induced decreses in rhodamine 123 fluorescence in the mitochondria of RGCs. Mean±SD.n=6.*P<0.05,**P<0.01vscontrol group.

圖1 加壓時(shí)間延長(zhǎng)引起RGCs線粒體膜電位減小

2 加壓對(duì)細(xì)胞Cm的影響

為了觀察加壓誘導(dǎo)凋亡細(xì)胞體積的變化，我們?cè)陔娚韺?shí)驗(yàn)中觀察了加壓不同時(shí)間的細(xì)胞Cm，對(duì)照組和加壓0.5 h組細(xì)胞的Cm差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，加壓1 h、1.5 h和2 h組細(xì)胞的Cm均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，而加壓1.5 h和2 h組細(xì)胞的Cm差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，見(jiàn)圖2。

3 凋亡的RGCsIK的改變

加壓80 mmHg 1 h能使RGCs發(fā)生凋亡，因此，本研究采用全細(xì)胞電壓鉗制脈沖刺激模式記錄對(duì)照組和加壓1 h組RGCs 的IK。選擇胞體光澤好、細(xì)胞膜光滑、立體感強(qiáng)的細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。與對(duì)照組比較，加壓1 h能使電流幅度顯著增加。各階躍電壓下的電流大小以電流密度(電流/膜電容)表示，做電流-電壓(I-V)曲線，與對(duì)照組比較，在刺激電位為-10 mV～60 mV時(shí)，加壓組的電流密度明顯大于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(P<0.05)，見(jiàn)圖3。

Figure 2.Time courses of pressure-induced decreses in the membrane capacitance. Mean±SD.n=8.**P<0.01vscontrol group.

圖2 加壓時(shí)間延長(zhǎng)引起細(xì)胞膜電容減小

4 凋亡的RGCsIK的動(dòng)力學(xué)改變

從IK電流-電壓曲線中獲得數(shù)據(jù)并轉(zhuǎn)化為電導(dǎo)值，以標(biāo)準(zhǔn)化電導(dǎo)值對(duì)膜電位作圖，用Boltzmann方程G=Gmax/{1+exp[(V1/2-Vm)/k]}擬合，得到最大電導(dǎo)值(Gmax)、IK電流激活曲線、IK半數(shù)激活電壓(V1/2)和斜率k值。加壓1 h組的Gmax與對(duì)照組的Gmax比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(P<0.05)，加壓1 h組的V1/2與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(P<0.01)；兩組比較k值間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，見(jiàn)圖4、表1。

討 論

青光眼是全世界第二位致盲性眼病，據(jù)流行病學(xué)調(diào)查顯示，目前，我國(guó)40歲以上人群中，青光眼患者達(dá)到2 210萬(wàn)人，且青光眼患者數(shù)量呈逐年上升的趨勢(shì)[5]，青光眼的主要病理變化是視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡及視神經(jīng)的永久性損害，視野缺損，因此，探索青光眼視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡的機(jī)制尤為重要。

細(xì)胞凋亡是細(xì)胞死亡的主要形式之一，誘導(dǎo)凋亡的方法根據(jù)研究者們研究的對(duì)象和目的而采取不同的方法，國(guó)內(nèi)外研究己證實(shí)外來(lái)機(jī)械壓力可導(dǎo)致淋巴細(xì)胞凋亡[6]，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的損傷或凋亡[7-8]。本實(shí)驗(yàn)室早已建立了成熟的加壓誘導(dǎo)RGCs細(xì)胞凋亡的方法，發(fā)現(xiàn)加壓80 mmHg 1 h能誘發(fā)RGCs凋亡[9]，采用加壓的方法誘導(dǎo)RGCs凋亡模擬了眼球在高壓狀態(tài)下引起RGCs凋亡及損傷的情況。

線粒體在細(xì)胞凋亡過(guò)程中發(fā)揮積極主動(dòng)的調(diào)控作用，而且處于多種凋亡調(diào)控通路和信號(hào)的中心地位[10]。正常的線粒體膜電位是生存所必須的，當(dāng)細(xì)胞受到凋亡誘導(dǎo)因素作用后，線粒體膜受到破壞使其膜電位降低，導(dǎo)致線粒體內(nèi)促凋亡蛋白分子釋放，使細(xì)胞凋亡。Rhodamine 123是一種可透過(guò)細(xì)胞膜的陽(yáng)離子熒光染料，是一種線粒體跨膜電位的指示劑，rhodamine 123熒光與線粒體膜電位呈線性關(guān)系。我們的研究顯示隨著加壓時(shí)間大于1 h，rhodamine 123熒光強(qiáng)度降低，該研究結(jié)果與凋亡的大腦紋狀體神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)rhodamine 123顆粒熒光強(qiáng)度降低[11]，缺氧誘導(dǎo)的大鼠皮層神經(jīng)細(xì)胞線粒體膜電位降低一致[12]。熒光強(qiáng)度的降低可能與加壓引起RGCs線粒體膜完整性破壞有關(guān)，從線粒體中釋放出活性氧(reactive oxygen species,ROS)、caspase-3、caspase-9等促凋亡蛋白[13-14]可能引起壓力誘導(dǎo)的RGCs凋亡。我們的研究還發(fā)現(xiàn)，加壓80 mmHg 1 h、1.5 h、2 h會(huì)引起RGCs的Cm變小，而加壓1.5 h 與加壓2 h無(wú)明顯的差異，細(xì)胞Cm間接反映了細(xì)胞體積的大小，這與細(xì)胞凋亡時(shí)細(xì)胞體積變小的基本形態(tài)學(xué)特性一致。我們的這些研究結(jié)果也再次證明了加壓 80 mmHg 1 h可引起RGCs凋亡。

Figure 3.The delayed rectifier K+currents in control group and pressure 1 h group. A: voltage clamp protocol, voltage step from -50 to 60 mV; B: current traces ofIKin control group and pressure 1 h group; C: current (I)-voltage (V) relationship of the 2 groups. Mean±SD.n=9.*P<0.05,**P<0.01vscontrol group.

圖3 加壓1 h組與對(duì)照組IK的變化

Figure 4.The conductance-voltage curves for control and pressure 1 h groups. Mean±SD.n=9.

圖4 加壓1 h組和對(duì)照組的電導(dǎo)-電壓曲線

表1 兩組IK的動(dòng)力學(xué)特征

*P<0.01,**P<0.05vscontrol group.

大量的研究發(fā)現(xiàn)，多種細(xì)胞凋亡伴有細(xì)胞內(nèi)鉀離子的外流增加，本研究發(fā)現(xiàn)加壓引起細(xì)胞IK增大，V1/2左移變小，Gmax增加，這一研究結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道的神經(jīng)細(xì)胞凋亡時(shí)外向鉀電流增加[15]一致，說(shuō)明RGCs凋亡也伴有外向鉀電流增加，增加的原因可能是細(xì)胞膜上的K+通道數(shù)開(kāi)放增多，電導(dǎo)增大，但并不能說(shuō)明通道開(kāi)放的速度增快。此外，外向鉀電流的增加，細(xì)胞內(nèi)容物減少，促進(jìn)了細(xì)胞體積變小，這也可能是細(xì)胞凋亡時(shí)體積變小的原因。然而，RGCs凋亡時(shí)外向鉀電流增加是否是RGCs凋亡的必要條件，鉀通道在RGCs凋亡過(guò)程中的作用是什么?哪種類型的鉀通道參與RGCs凋亡我們還要做進(jìn)一步的研究。

致謝: 感謝蘇國(guó)輝院士為本研究提供寧夏枸杞多糖。

[1] 金宏偉. 電壓依賴性鉀通道在老年癡呆相關(guān)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡中的作用研究 [D].北京：中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)，1999．

[2] 楊巧云．鉀離子調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子活性參與神經(jīng)元凋亡機(jī)制的探討[D]．上海：中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院神經(jīng)科學(xué)研究所，2006．

[3] 趙 瑛，劉立夏，黃 燕，等．枸杞多糖對(duì)高眼壓大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的影響[J]. 中醫(yī)眼耳鼻喉雜志, 2012, 2(1):24-26．

[4] 張 虹，鐘 杰，李貴剛，等．壓力對(duì)大鼠純化視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞存活及軸突生長(zhǎng)的影響[J]. 中華眼科雜志, 2009, 44(2):164-167.

[5] Jonas JB, George R, Asokan R, et al. Prevalence and causes of vision loss in Central and South Asia: 1990-2010 [J]. Br J Ophthalmol, 2014, 98(5):592-598.

[6] Takano KJ, Takano T, Yamanouchi Y, et al. Pressure-induced apoptosis in human lymphoblasts[J]. Exp Cell Res, 1997, 235(1):155-160.

[7] Chen C, Wang L, Rong X, et al. Effects of fluoxetine on protein expression of potassium ion channels in the brain of chronic mild stress rats[J]. Acta Pharm Sin B, 2015, 5(1):55-61.

[8] Pannaccione A, Boscia F, Scorziello A, et al. Up-regulation and increased activity of KV3.4 channels and their accessory subunit MinK-related peptide 2 induced by amyloid peptide are involved in apoptotic neuronal death[J]. Mol Pharmacol, 2007, 72(3):665-673.

[9] 曾潔萍. DSX及其成分對(duì)體外培養(yǎng)鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 成都：成都中醫(yī)藥大學(xué)，2003．

[10]Susin SA, Zamzami N, Kroemer G.Mitochondria as regulators of apoptosis: doubt no more[J]. Biochim Biophys Acta, 1998, 1366(1-2):151-165.

[11]Tang K, Zhang JT. Clausenamide improves long-term potentiation impairment and attenuates apoptosis after tran-sient middle cerebral artery occlusion in rats[J]. Neurol Res, 2003, 25(7):713-717.

[12] 魏楚蓉，劉路寬，田立兵，等．硫化氫對(duì)缺氧誘導(dǎo)的大鼠皮層神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用[J].中國(guó)病理生理雜志，2014,30(2):203-207.

[13]應(yīng) 俊，潘若望，王茂峰，等.藻藍(lán)蛋白誘導(dǎo)喉癌HEP-2細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)病理生理雜志，2015,31(7):1189-1196.

[14]劉 俊，張雪林，任永生，等．BARF1表達(dá)下調(diào)通過(guò)活化caspase依賴的線粒體通路誘導(dǎo)EBV陽(yáng)性胃癌細(xì)胞凋亡[J].中國(guó)病理生理雜志，2015,31 (11):1970-1978.

[15]Norris CA, He K, Springer MG, et al. Regulation of neuronal proapoptotic potassium currents by the hepatitis C virus nonstructural protein 5A[J]. J Neurosci, 2012, 32(26):8865-8870.

(責(zé)任編輯： 盧 萍， 羅 森)

Effects of retinal ganglion cell apoptosis on delayed rectifier K+currents

ZHAO Ying1, XU Ya-ji2, LU Xue-jing1, DUAN Jun-guo1

(1KeyLaboratoryforVisionPhysiology,ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine,Chengdu610075,China;2DepartmentofPhysiology,ChengduUniversity,Chengdu610106,China.E-mail:duanjgs@126.com)

AIM: To investigate the effects of rat retinal ganglion cell (RGC) apoptosis on delayed rectifier K+currents (IK). METHODS: The retinas of 2～3 d newborn Sprague-Dawley rats were dissociated into cell suspension by trypsin digestion. The RGCs were cultured and divided into control group, pressure 0.5 h group, pressure 1 h group, pressure 1.5 h group and pressure 2 h group. The cells were cultured regularly for 6 d in control group, and the cells in other groups were cultured regularly for 6 d and gave pressure of 80 mmHg for 0.5 h, 1 h, 1.5 h and 2 h, respectively. The rhodamine 123 fluorescence from labeled RGC mitochondrion was detected by continuous wavelength multifunctional microplate detection instrument. The membrane capacitance (Cm) in different groups andIKin the pressure 1 h group were recorded from the RGCs by whole-cell patch-clamp technique. RESULTS: No difference of rhodamine 123 fluorescence in the RGC mitochondria between control group and pressure 0.5 h group was observed. Rhodamine 123 fluorescence in the other 3 groups was significantly lower than that in control group (P<0.05). No difference of theCmbetween control group and pressure 0.5 h group was found, and theCmin the other 3 groups was significantly lower than that in control group (P<0.05). The amplitudes ofIKwere higher than that in control group. At the test potential from -10 mV to 60 mV, the current density in pressure 1 h group was significantly higher than that in control group (P<0.05). The maximal conduction (Gmax) in pressure 1 h group was significantly higher than that in control group. The voltage forIKchannel half-activation (V1/2) in pressure 1 h group declined comparison with control group (P<0.01), and thekvalue had no significant difference between the 2 groups. CONCLUSION: Retinal ganglion cell apoptosis accompanies with delayed rectifier K+current enhancement.

Delayed rectifier K+currents; Retinal ganglion cells; Pressure; Apoptosis

1000- 4718(2016)08- 1403- 05

2016- 02- 26

2016- 06- 15

國(guó)家科技部重大新藥創(chuàng)制資助項(xiàng)目(No. 2009ZX09103-369)；四川省教育廳重點(diǎn)項(xiàng)目(No. 200ZD013)

R774.6；R339.14

A

10.3969/j.issn.1000- 4718.2016.08.010

雜志網(wǎng)址： http://www.cjpp.net

△通訊作者 Tel: 028-87715032; E-mail： duanjgs@126.com