超表達OsPIN1a與野生型水稻旗葉水通道蛋白基因家族表達比較

李培綱 張付康 楊國 潘偉槐 金晨鐘 莫億偉

摘 要 為了探討超表達OsPIN1a對水稻旗葉水通道蛋白基因家族表達影響，以轉(zhuǎn)基因株系3和7-5及野生型水稻盛花期旗葉為材料，通過半定量PCR檢測各基因表達水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：（1）轉(zhuǎn)基因和野生型都呈現(xiàn)OsTIPs家族表達量最大，OsPIPs家族次之，再次是OsNIPs和OsSIPs家族。（2）轉(zhuǎn)基因和野生型都呈現(xiàn)OsPIP1-1、OsPIP2-7和OsPIP2-6的表達最高，OsPIP2-4，OsPIP2-2表達較低，而OsPIP1-2、OsPIP1-3、OsPIP2-1、OsPIP2-3和OsPIP2-8在旗葉內(nèi)均不表達；轉(zhuǎn)基因的OsPIP1-1，OsPIP2-4、OsPIP2-6和OsPIP2-7表達明顯高于野生型。（3）轉(zhuǎn)基因和野生型都呈現(xiàn)OsTIP1-1、OsTIP1-2、OsTIP2-2、OsTIP3-1、OsTIP4-2與OsTIP4-3表達較高，而OsTIP3-2、OsTIP5-1的表達相對較低；轉(zhuǎn)基因株系3的OsTIP3-2和OsTIP5-1表達均高于野生型，但OsTIP3-1、OsTIP4-1和OsTIP4-3明顯低于野生型；轉(zhuǎn)基因7-5株系中，除OsTIP4-3基因表達低于野生型外，其余基因的表達量均高于野生型。（4）OsNIP1-1、OsNIP2-1與OsNIP2-2在轉(zhuǎn)基因和野生型均能表達，但OsNIP1-2、OsNIP1-4、OsNIP3-2、OsNIP3-3和OsNIP4-1均不表達，但野生型的OsNIP2-1與OsNIP2-2表達量均高于轉(zhuǎn)基因。（5）轉(zhuǎn)基因和野生型的OsSIP1-1均不表達，但野生型OsSIP1-2與OsSIP2-1表達量均高于轉(zhuǎn)基因。試驗結(jié)果表明，盛花期當(dāng)天旗葉中OsTIPs基因家族表達量最大，超表達OsPIN1a影響了多個水通道蛋白基因表達。

關(guān)鍵詞 水稻；旗葉；水通道蛋白；水分脅迫； 開花期

中圖分類號 S511 文獻標(biāo)識碼 A

Abstract To clarified the effect of over-expression OsPIN1a on aquaporin genesexpression in rice， the flag leaves of two OsPIN1a transgenic lines（3， 7-5）and a wild-type line at flowering stage were used as material. Semi-quantitative RT-PCR was applied to detect the aquaporin genesexpression level. The results showed that： （1） The expression level of OsTIPs was highest in both transgenic lines and wild-type， followed by OsPIPs， and then is OsNIPs and OsSIPs. （2） OsPIP1-1、OsPIP2-7 and OsPIP2-6 showed the higher expression than OsPIP2-4，OsPIP2-2，while OsPIP1-2、OsPIP1-3、OsPIP2-1、OsPIP2-3 and OsPIP2-8 could not be detected in the flag leaves of two transgenic lines and wild-type. And the expression of OsPIP1-1， OsPIP2-4， OsPIP2-6 and OsPIP2-7 in transgenic lines were significantly higher than in wild-type. （3） All the strains had a high expression of OsTIP1-1、OsTIP1-2、OsTIP2-2、OsTIP3-1、OsTIP4-2 and OsTIP4-3 and a low expression of OsTIP3-2、OsTIP5-1. Comparing to the wild-type， the transgenic lines 3 had a higher expression in OsTIP3-2， OsTIP5-1 and a lower expression in OsTIP3-1， OsTIP4-1 and OsTIP4-3. Except for OsTIP4-3， all the genes in transgenic lines7-5 had higher expression than in wild-type. （4）OsNIP1-1， OsNIP2-1 and OsNIP2-2 could be detected， while OsNIP1-2， OsNIP1-4， OsNIP3-2， OsNIP3-3 and OsNIP4-1 could not be detected in all the strains. The expression of OsNIP2-1 and OsNIP2-2 was higher in the wild-type than in transgenic lines. （5）OsSIP1-1 showed no expression in both transgenic lines and wild-type strain. The expression of OsSIP1-2 and OsSIP2-1 was higher in wild-type than in transgenic line. In conclusion， OsTIPs had the highest expression in rice flag leaves on the day of the flowering stage， and over-expression of OsPIN1a could affect the expression of some aquaporin genes.

Key words Rice；Flag leaf；Aquaporin；Water stress；Flowering stage

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2016.08.012

水稻開花期對水分脅迫最為敏感，若此時發(fā)生水分脅迫對籽粒受精及充實均有很大影響，所以維持花期水分供應(yīng)顯得極為重要。植物體內(nèi)水分運輸主要通過不同類型的水通道蛋白完成，水稻水通道蛋白主要由質(zhì)膜嵌入蛋白（plasma membrane intrinsicprotein，PIP）、液胞膜嵌入蛋白（tonoplast intrinsicprotein，TIP）、類Nod26膜嵌入蛋白（nudolin 26-like intrinsic protein，NIP）和膜嵌入小分子堿性蛋白（small basic intrinsic protein，SIP）33個基因組成的家族[1]，正是由于水通道蛋白家族存在，可以使水分子快速地通過跨膜運輸，阻擋其他的小分子和離子的運輸[2]。旗葉作為水稻最重要功能葉，其生理活性直接影響到籽粒的充實過程[3-4]。有研究發(fā)現(xiàn)，氮高效品種揚稻6號的旗葉與氮低效品種農(nóng)墾57及日本晴相比，揚稻6號的旗葉不易衰老， 更利于籽粒灌漿和充實[5]。也有研究認為，水分供應(yīng)水平對旗葉光合速率的影響程度要大于氮肥的影響[6]，說明水分供應(yīng)對旗葉生理功能的維持是至關(guān)重要，若水稻開花期水分虧缺，則會顯著降低稻米產(chǎn)量和品質(zhì)[7]。項目組前期研究表明，水稻盛花期當(dāng)天稻穗相對含水量最低，若在高溫脅迫下，稻穗的相對含水量下降則更為明顯，超表達生長素（IAA）極性運輸輸出載體OsPIN1a的轉(zhuǎn)基因水稻耐高溫能力明顯優(yōu)于野生型，可能是OsPIN1a超表達后加強了IAA的極性運輸能力，提高對高溫脅迫的抗性所致[8]。近年來，IAA參與植物對逆境脅迫的響應(yīng)已受廣泛的關(guān)注，有研究認為IAA合成及其應(yīng)答關(guān)鍵基因受環(huán)境脅迫的調(diào)控，但在分子水平上深入研究逆境脅迫與生長素的調(diào)控響應(yīng)機制還有待深入[9]；還有研究發(fā)現(xiàn)，局部IAA合成在抵抗高溫和干旱等逆境脅迫中均有重要的作用[10]。項目組前期研究還發(fā)現(xiàn)，在氣培缺水時，IAA能誘導(dǎo)水稻根毛著生密度和生長速率，增強根系在空氣中對水分吸收能力，并能誘導(dǎo)部分水通道蛋白基因表達[11]，因此IAA在植物響應(yīng)逆境調(diào)節(jié)過程中可能起到積極作用，而旗葉是水稻生長后期最重要功能葉，葉片內(nèi)水分含量對其生理功能的維持有著重要意義，但旗葉水分供給與水通道蛋白基因家族基因表達是否受IAA極性運輸?shù)挠绊憛s鮮有報道，筆者通過探討超表達OsPIN1a轉(zhuǎn)基因和野生型水稻花期旗葉水通道蛋白基因家族的表達差異，為水稻花期水分供應(yīng)提供新的理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試水稻（Oryza sativa L.）品種為粳稻中花11、轉(zhuǎn)OsPIN1a水稻株系正常表達株系3和極高表達的株系7-5[12]。

1.2 方法

于2015年4月中旬在紹興文理學(xué)院生物基地采用盆栽種植，盆缽（直徑45 cm、高25 cm）內(nèi)裝過篩并充分拌勻的砂壤土10 kg，按常規(guī)水肥方式管理。在2015年7月底在水稻盛花期當(dāng)天，取轉(zhuǎn)基因和野生型水稻的旗葉，用RNA plant Regeant（TIANGEN，北京）植物總RNA提取試劑盒提取總RNA后，再合成cDNA，其中cDNA第一鏈合成使用Reverse Transcriptase M-MLV（RNAase H）反轉(zhuǎn)錄酶（TIANGEN，北京），參照試劑盒說明書進行。采用半定量RT-PCR方法檢測轉(zhuǎn)基因與野生型水稻水通道蛋白基因家族表達，根據(jù)前人研究結(jié)果[1]，使用表1的RT-PCR引物，以反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA為模板進行PCR擴增，反應(yīng)體系（25 μL）（TIANGEN，北京）：2×MasterMix12.5 μL、Primer F（10 μM）1.0 μL、Primer R（10 μmol/L）1.0 μL、cDNA第一鏈0.7～1.1 μL（根據(jù)β-actin擴增的電泳結(jié)果進行調(diào)整）、加dd H2O補足到25 μL，PCR儀為美國Bio-Rad公司（型號：BS97MyCycler）。

PCR反應(yīng)條件是：94 ℃變性5 min；94 ℃變性30 s，59.5 ℃退火45 s，72 ℃延伸45 s，32個循環(huán)；72 ℃下保溫5 min；內(nèi)參基因β-actin上游引物5′-CAGCACATTCCAGCAGATGT-3′，β-actin下游引物5′-TAGGCCGGTTGAAAACTTTG-3′，內(nèi)參基因β-actin的PCR反應(yīng)條件是： 94 ℃變性5 min；94 ℃變性30 s，56.5 ℃退火45 s，72 ℃延伸45 s，30個循環(huán)；72 ℃下保溫10 min，PCR 擴增產(chǎn)物以1.2%的瓊脂糖凝膠電泳檢測，并對電泳結(jié)果比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 轉(zhuǎn)基因與野生型水稻旗葉OsPIPs基因家族表達的比較

由圖1可知，質(zhì)膜水通道蛋白OsPIPs基因家族中，轉(zhuǎn)基因和野生型均呈現(xiàn)出OsPIP1-1和OsPIP2-7表達量最大，然后是OsPIP2-6，而OsPIP2-4和OsPIP2-2表達則相對較低。但OsPIP1-2、OsPIP1-3、OsPIP2-1、OsPIP2-3和OsPIP2-8在轉(zhuǎn)基因及野生型中均不表達，可能這些基因在旗葉水分運輸中作用不大。此外，轉(zhuǎn)基因株系7-5的OsPIP1-1、OsPIP2-4和OsPIP2-7的表達量明顯高于野生型，轉(zhuǎn)基因株系3的OsPIP2-4，OsPIP2-6則明顯高于野生型。說明超表達OsPIN1a后，提高旗葉部分OsPIP基因的表達，但在不同轉(zhuǎn)基因株系間存在一定的差異，可能與OsPIN1a在不同株系間表達量不同有關(guān)。

2.2 轉(zhuǎn)基因與野生型水稻旗葉水通道蛋白OsTIPs基因家族表達的比較

由圖2可知，液泡膜水通道蛋白OsTIPs基因家族中，除OsTIP2-1基因不表達外，其余基因均能表達，轉(zhuǎn)基因和野生型均呈現(xiàn)出OsTIP1-1、OsTIP1-2、OsTIP2-2、OsTIP3-1、OsTIP4-2與OsTIP4-3表達水平較高，而OsTIP3-2與OsTIP5-1的表達水平則相對較低。轉(zhuǎn)基因株系3中OsTIP3-2和OsTIP5-1的表達水平明顯高于野生型，但OsTIP3-1、OsTIP4-1和OsTIP4-3則明顯低于野生型；在轉(zhuǎn)基因7-5株系中，除了OsTIP4-3基因表達低于野生型外，其余基因的表達量均高于野生型。說明超表達OsPIN1a后影響部分OsTIPs的表達。

2.3 轉(zhuǎn)基因與野生型水稻旗葉水通道蛋白OsNIPs基因家族表達的比較

由圖3可知，OsNIPs基因家族中，OsNIP1-1、OsNIP2-1與OsNIP2-2在轉(zhuǎn)基因和野生型中均能表達，而OsNIP3-1只在野生型株系和轉(zhuǎn)基因株系3中表達，在7-5株系中則不表達。無論是轉(zhuǎn)基因還是野生型水稻旗葉中的OsNIP1-2、OsNIP1-4、OsNIP3-2、OsNIP3-3和OsNIP4-1均不表達，說明這些基因在旗葉內(nèi)可能對水分運輸?shù)淖饔貌淮?。在野生型的OsNIP2-1與OsNIP2-2表達水平明顯高于2個轉(zhuǎn)基因株系，而OsNIP1-1與OsNIP3-1則明顯低于轉(zhuǎn)基因株系。其中在7-5株系中，整個OsNIPs基因家族的表達水平都低于野生型。

2.4 轉(zhuǎn)基因與野生型水稻旗葉水通道蛋白OsSIPs基因家族表達的比較

由圖4可知，在OsSIPs基因家族中，OsSIP1-1在轉(zhuǎn)基因和野生型中均不表達。其中OsSIP1-2的表達水平很低，而野生型的OsSIP2-1的表達水平明顯高于2個轉(zhuǎn)基因株系，說明超表達OsPIN1a后降低OsSIPs的表達。

3 討論與結(jié)論

3.1 不同水通道蛋白基因家族在旗葉內(nèi)的表達模式不同

植物液泡在調(diào)節(jié)細胞膨壓、滲透作用、儲存物質(zhì)等方面都有重要作用[13]。如液泡中的TIPs與PIPs都可以調(diào)控水分跨膜運輸[14]。本研究結(jié)果表明，轉(zhuǎn)基因和野生型水稻，盛花期的旗葉內(nèi)4類水通道蛋白基因家族之間表達有明顯的差異性，表達量最大是OsTIPs基因家族，說明旗葉液泡膜水通道蛋白在旗葉的水分轉(zhuǎn)運中可能起著最重要的作用。因為有研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，水稻的OsTIP1-1在油菜中超表達后，能顯著提高轉(zhuǎn)基因油菜根系水分運輸效率，增強其耐旱能力[15]。本研究結(jié)果也發(fā)現(xiàn)，除OsTIP1-1高表達以外，其他8個OsTIPs的表達量也很高；其次是質(zhì)膜水通道蛋白OsPIPs基因家族，有研究結(jié)果表明質(zhì)膜有OsPIPs是細胞水分運輸?shù)年P(guān)鍵蛋白，參與多種重要物質(zhì)的運輸與交換，在植物發(fā)育的各個階段均發(fā)揮重要作用[16]；而且OsPIP2-6還受ABA處理及淹水、鹽脅、干旱等逆境脅迫后表達量明顯提高，可能更利于水分的快速運輸，減輕逆境脅迫導(dǎo)致的水分脅迫[17]。OsNIPs和OsSIPs基因家族表達水平比較低，說明2種基因家族在旗葉水分轉(zhuǎn)運過程的作用可能較小，本研究結(jié)果與前人發(fā)現(xiàn)不同的水通道蛋白基因在不同組織表達存在的差異性一致[18-19]。因此，在水稻盛花期的旗葉內(nèi)，不同類型水通道蛋白的差異表達可能與對水分運輸?shù)墓δ芊止び嘘P(guān)，具體原因還需深入研究。

3.2 超表達OsPIN1a影響旗葉部分水通道蛋白基因表達

本研究結(jié)果表明，超表達OsPIN1a后旗葉中OsPIP2-4、OsPIP2-6、OsTIP1-2、OsTIP3-2、OsTIP5-1、OsNIP1-1和OsNIP3-1的表達量明顯高于野生型，這些基因表達上調(diào)可能更有利于水分運輸，因為前人研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在擬南芥內(nèi)超表達PgTIP1后，改變了水分透過液泡膜的速率達到提高耐旱、耐鹽和耐低溫脅迫能力[20]。項目組的前期研究結(jié)果也表明，在高溫脅迫下轉(zhuǎn)OsPIN1a水稻稻穗的相對含水量高于野生型，可能是超表達后OsPIN1a對加強了水分的運輸能力所致[8]。如當(dāng)IAA合成增加后，不但能促進根系和根毛的數(shù)量增多，還能顯著提高水分吸收和耐旱性[21-22]，如適度干旱則啟動水稻根尖ABA的快速積累，再促進IAA合成和運輸效率，不但增強根尖細胞的可塑性，還能保證逆境下根系獲得更多水分[23]。所以轉(zhuǎn)OsPIN1a基因水稻在增加IAA運輸效率后，可能通過一定的方式調(diào)控不同的水通道蛋白基因表達，增強水分運輸能力，相應(yīng)地提高抗逆能力[24]，如超表達OsTIP1-1的轉(zhuǎn)基因油菜，耐旱能力明顯高于野生型[15]。本研究結(jié)果也發(fā)現(xiàn)，超表達OsPIN1a轉(zhuǎn)基因水稻的OsTIP3-1、OsTIP4-1和OsTIP4-3、OsNIP2-1、OsNIP2-2、OsSIP1-2和 OsSIP2-1基因表達都低于野生型，可能是不同的水通道蛋白基因的功能差異所致，也許降低這些基因表達后，能抑制旗葉細胞內(nèi)水分外排，達到提高旗葉的水分含量。如在淹水條件下OsPIP2-6還能起到將過多水分外排的作用，以維持植株水分的平衡[17]。因此，水通道蛋白一方面能促進水分進入細胞，以利于水分在細胞間的運輸[25]，如在干旱脅迫初期，通過提高PIP1表達量，增加對水分吸收能力，但隨著加劇，PIP1表達量明顯下降，達到減少細胞水分外排作用，因此水通道蛋白功能的雙重性在提高植物抗逆性方面有著積極作用[26-28]，超表達OsPIN1a后，IAA具體通過何種途徑影響旗葉內(nèi)不同的水通道蛋白基因差異表達還需深入研究。

本研究表明水稻盛花期當(dāng)天，轉(zhuǎn)基因和野生型水稻旗葉的OsTIPs基因家族表達最高，然后是OsPIPs和OsNIPs基因家族，最低是OsSIPs基因家族，說明液泡膜水通道蛋白在旗葉水分供應(yīng)能起著最重要作用；超表達OsPIN1a的轉(zhuǎn)基因水稻提高IAA極性運輸速率后，促進多個水通道蛋白基因表達；但相同類型水通道蛋白基因間的差異表達，可能與其分工不同有關(guān)。

參考文獻

[1] Sakurai J， Ishikawa F， Yamaguchi T， et al. Identification of 33 rice Aquaporin genes and analysis of their expression and function[J]. Plant Cell and Physiology， 2005， 46（9）： 1 568-1 577.

[2] 朱美君， 康 蘊， 陳 珈， 等. 植物水通道蛋白及其活性調(diào)節(jié)[J]. 植物學(xué)報， 1999， 16（1）： 44-50.

[3] 蔡瑞國， 張 敏， 尹燕枰， 等. 小麥灌漿過程中旗葉光合及抗氧化代謝與氮素營養(yǎng)關(guān)系研究[J]. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2008， 41（1）： 53-62.

[4] 史正軍， 樊小林. 干旱脅迫對不同基因型水稻光合特性的影響[J]. 干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究， 2003， 21（3）： 123-126.

[5] 王碧茜， 范曉榮， 徐國華， 等. 不同氮效率水稻品種旗葉的衰老特征[J]. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報， 2010， 33（2）：8-12.

[6] 徐 璇， 周 瑞， 谷艷芳， 等. 不同水氮耦合對小麥旗葉主要光合特性的影響[J]. 河南大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版）， 2010， 40（1）： 53-57.

[7] 劉 凱， 張 耗， 張慎鳳，等. 結(jié)實期土壤水分和灌溉方式對水稻產(chǎn)量與品質(zhì)的影響及其生理原因[J]. 作物學(xué)報， 2008， 34（2）： 268-276.

[8] 馮芳玖， 李靜婷， 郭丹鳳， 等. 年份氣溫差異對野生型和轉(zhuǎn)OsPIN1a基因水稻胚乳發(fā)育及種子萌發(fā)的影響[J]. 核農(nóng)學(xué)報， 2015， 29（11）： 2 198-2 207.

[9] 李 靜， 崔繼哲， 弭曉菊. 生長素與植物逆境脅迫關(guān)系的研究進展[J]. 生物技術(shù)通報， 2012（6）： 13-17.

[10] 翟開恩， 潘偉槐， 葉曉帆， 等. 高等植物局部生長素合成的生物學(xué)功能及其調(diào)控機制[J]. 植物學(xué)報， 2015， 50（2）： 149-158.

[11] 莫億偉， 李夏杰， 王 海， 等. IAA 對水稻根毛形成與水通道蛋白基因表達關(guān)系的研究[J]. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2015， 48（21）： 422（2）： 83-89.

[13] Wink M. The plant vacuole： a multifunctional compartment[J]. Journal of Experimental Botany， 1993， 44（258）： 231-246.

[14] Maurel C， Tacnet F， Guclu J， et al. Purified vesicles of tobacco cell vacuolar and plasma membranes exhibit dramatically different water permeability and water channel activity[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences， 1997， 94（13）： 7 103-7 108.

[15] 張 帆， 李玉萍， 孫衛(wèi)寧， 等. 液泡膜內(nèi)在蛋白基因OsTIP1； 1異位表達對油菜根皮層細胞水分關(guān)系參數(shù)的影響[J]. 植物生理學(xué)報， 2014， 50（12）： 1 863-1 870.

[16] 魏毅東， 張 揚， 許惠濱， 等. 水稻OsPIP1； 2植物過表達及亞細胞定位載體的構(gòu)建[J]. 分子植物育種， 2013， 11（4）： 485-493.

[17] 李 嶸， 牛向麗， 苗雁文， 等. 水通道蛋白基因OsPIP2； 6的功能分析[J]. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2013， 46（15）： 3 079-3 086.

[18] Wudick M M， Luu D T， Maurel C. A look inside：Localization patterns and functions of intracellular plant aquaporins[J]. New Phytologist， 2009， 184（2）： 289-302.

[19] 林燕飛， 李紅梅， 丁岳練，等. 2013. 唐菖蒲質(zhì)膜水孔蛋白基因GhPIP1； 1的克隆及表達分析[J]. 園藝學(xué)報， 40（1）： 145-154.

[20] Peng Y， Lin W， Cai W， et al. Overexpression of a Panax ginseng tonoplast aquaporin alters salt tolerance， drought tolerance and cold acclimation ability in transgenic Arabidopsis plants[J]. Planta， 2007， 226（3）： 729-740.

[21] Park H C， Cha J Y， Yun D J. Roles of YUCCAs in auxin biosynthesis and drought stress responses in plants[J]. Plant Signaling and Behavior， 2013， 8（6）： e24495-1-e24495-3.

[22] Kim J I， Baek D， Park H C， et al. Overexpression of Arabidopsis YUCCA6 in potato results in high-Auxin developmental phenotypes and enhanced resistance towater deficit[J]. Molecular Plant， 2013， 6（2）： 337- 349.

[23] Xu W， Jia L， Shi W， et al. Abscisic acid accumulation modulates auxin transport in the root tip to enhance proton secretion for maintaining root growth under moderate water stress[J]. New Phytologist， 2013， 197（1）： 139-150.

[24] Jarzyniak K M， Jasinski M. Membrane transporters and drought resistance-a complex issue[J]. Frontiers in Plant Science，2014， 5（12）： 1-15.

[25] 侯曉婉， 胡 偉， 顏 彥，等. 香蕉MaPIP2-2基因的克隆、亞細胞定位及表達分析[J]. 熱帶作物學(xué)報， 2015， 36（7）： 1 267-1 273.

[26] 徐 娜， 辛士超， 強曉晶， 等. 番茄SlMIP基因參與轉(zhuǎn)基因擬南芥的滲透調(diào)節(jié)[J]. 植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報， 2014， 20（1）： 195-204 .

[27] 孫琳琳， 辛士超， 強曉晶，等. 非生物脅迫下植物水通道蛋白的應(yīng)答與調(diào)控[J]. 植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報， 2015， 21（4）： 1 040-1 048.

[28] Liu C， Fukumoto T， Matsumoto T， et al. Aquaporin OsPIP1； 1 promotes rice salt resistance and seed germination[J]. Plant Physiology and Biochemistry， 2013， 63（4）： 151-158.