茯苓的化學成分及生物活性研究進展

徐　碩，姜文清，鄺詠梅，吳學軍，馬　捷，金鵬飛

(北京醫(yī)院藥學部，北京　100730)

?

·綜述·

茯苓的化學成分及生物活性研究進展

徐碩，姜文清，鄺詠梅，吳學軍，馬捷，金鵬飛*

(北京醫(yī)院藥學部，北京100730)

摘要：目的了解茯苓的化學成分及生物活性研究進展。方法通過查閱國內(nèi)外相關(guān)文獻，進行歸納和分析，對茯苓的化學成分及生物活性進行綜述。結(jié)果從茯苓中分離得到并鑒定的化學成分包括三萜類、二萜類、甾醇類、其他類及多糖類?，F(xiàn)代藥理研究表明，茯苓具有抗肝纖維化、利尿、免疫調(diào)節(jié)、調(diào)節(jié)腸道菌群、抗炎、抗腫瘤和增強機體免疫力等多種生物活性。結(jié)論茯苓的現(xiàn)代研究盡管取得了一定的進展，但仍存在一些問題，需要進一步探討。

關(guān)鍵詞：茯苓；化學成分；生物活性

茯苓為多孔菌科真菌茯苓Poriacocos(Schw.)Wolf的干燥菌核《中國藥典》2010年版一部收載)，為常用中藥，具有利水滲濕、健脾、寧心之功效；用于水腫尿少、痰飲眩悸、脾虛食少、便溏泄瀉、心神不安和驚悸失眠等癥[1]，在臨床上具有廣泛的應(yīng)用[2]。茯苓由于含有豐富的化學成分和多種生物活性而受到藥學工作者的關(guān)注，對其研究的范圍和數(shù)量不斷擴展。本文對近年來茯苓的化學成分及生物活性研究進行概述，為該藥材的進一步研究提供依據(jù)。

1化學成分研究

1.1三萜類化合物目前從茯苓中分離得到三萜類成分40個，根據(jù)化學結(jié)構(gòu)的差異，可分為4種類型(A～D)：羊毛甾-8-烯型三萜10個(A)[3-7]，如3β-乙酰氧基-16α-羥基-羊毛甾-8，24(31)-二烯-21-酸(茯苓酸)、3β-二羥基-羊毛甾-8，24(31)-二烯-21-酸(依布里酸)、3β-羥基-羊毛甾-8，24-二烯-21-酸等；羊毛甾-7，9(11)-二烯型三萜16個(B)[3-15]，如3α，16α-二羥基-羊毛甾-7，9(11)，24(31)-三烯-21-酸(3-表去氫土莫酸)、3α，16α，25-三羥基-羊毛甾-7，9(11)，24(31)-三烯-21-酸(25-羥基-3-表去氫土莫酸)、3-酮基-16α-羥基-羊毛甾-7，9(11)，24(31)-三烯-21-酸等；3，4-開環(huán)-羊毛甾-7，9(11)-二烯型三萜11個(C)[4,15-18]，如16α-羥基-3，4-開環(huán)-羊毛甾-4(28)，7，9(11)，24-四烯-3，21-二酸、6α-羥基-3，4-開環(huán)-羊毛甾-4(28)，8，24-四烯-3，21-二酸等；其他類3個(D)[7,18]，如齊墩果酸等。見圖1。

圖1茯苓中三萜類化合物的結(jié)構(gòu)母核

Fig.1 The skeleton of triperpenoids inPoriacocos(Schw.) Wolf

1.2二萜類化合物從茯苓中分離得到1個三環(huán)二萜類化合物，為去氫松香酸甲酯[17]。

1.3甾醇類化合物從茯苓中分離得到麥角甾醇類化合物10個，包括麥角甾醇[19]、ergost -7 - en - 3β-ol[20]、(22E) - ergosta -5，7，9(11)，22 - tetraen -3β-ol[20]、ergosta -5，7 -dien-3β-ol[20]、(22E) - ergosta -6，8(14)， 22 - trien -3β-ol[20]、(22E) - ergosta -7，22 - dien -3β-ol[20]、(22E) - ergosta -8(14)，22 - dien -3β-ol[20]、麥角甾醇過氧化物(1)[21]、麥角甾 -7，22 -二烯 -3β，5α，6β-三醇[(22E) - ergosta -7，22 - dien -3β，5α，6β-ol](2)[21]、biemnasterol(3)[22]，部分化合物的結(jié)構(gòu)見圖2。

圖2茯苓中部分甾醇類化合物的結(jié)構(gòu)

Fig.2 Parts of structures of sterols inPoriacocos(Schw.) Wolf

1.4其他類化合物從茯苓中也分離得到一些其他類化合物，包括乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷[23]、L-尿苷[23]、檸檬酸三甲酯[23]、(R)-蘋果酸二甲酯[23]、胡蘿卜苷[23]。

1.5多糖類見表1。

表1茯苓中的多糖

Tab.1 Polysaccharides inPoriacocos(Schw.) Wolf

名稱單糖的類型和組成方式 文獻pachyman具有β-(1→6)吡喃葡萄糖為支鏈的(1→3)葡萄糖聚糖[24]polysaccharideHI1β-(1→3)-(1→6)-D-glucan[25]PC1,PC2,PC2-A,PC3,PC4β-(1→3)-D-glucan[26]PCSC22mannose92%,galactose6.2%,ar-abinose1.3%[27]PCM1,PCM2由鼠李糖,D-巖藻糖,D-木糖,D-半乳糖,D-葡萄糖,D-葡萄糖醛酸組成[28]PCM3,PCM4β-(1→3)-D-glucan,少量葡萄糖醛酸和D-葡萄糖組成[28]ab-PCM1,ab-PCM2-I,ab-PCM2-Ⅱ,ab-PCM3-I,ab-PCMO由α-(1→3)-D-葡萄糖,α-D-甘露糖,β-D-乳糖和乙酰葡萄糖胺組成[29]ab-PCM3-Ⅱ,ab-PCM4-Ⅰ,ab-PCM4-Ⅱβ-(1→3)-D-glucan[29]PCS1,PCS2,PCS3-I含D-葡萄糖,D-半乳糖,D-甘露糖,D-巖藻糖,D-木糖的雜多糖[30]PCS3-Ⅱβ-(1→3)-D-glucan[30]PCS4-Ⅱ由含β-(1→6)支鏈的(1→3)-D-葡聚糖組成[30]PCS4-II由含葡萄糖支鏈的β-(1→3)-D-葡聚糖組成[30]wc-PCM3-1α-(1→3)-D-glucan[31]PC-PS中性多糖[32]

2生物活性研究

2.1抗肝纖維化作用建立大鼠肝纖維化模型，將茯苓水提物用于該模型和大鼠肝星狀細胞(HSC)，結(jié)果顯示，茯苓組的血清透明質(zhì)酸和Ⅳ型膠原含量下降；HSC細胞增殖抑制率升高；減少了肝組織基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子-1(TIMP-1)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGFβ1)及血小板衍生生長因子(PDGF)的表達。結(jié)果表明，茯苓可以使大鼠肝纖維化的發(fā)生減緩，作用機制可能是抑制HSC增殖活化、下調(diào) TGFβ1和 PDGF表達，促進細胞外基質(zhì)的降解和減少肝纖維結(jié)締組織的沉積[33]。

2.2利尿作用將茯苓水煎液分別給生理鹽水負荷大鼠和小鼠灌胃。結(jié)果顯示，茯苓有較為明顯的利尿作用，且作用時間長。與陰性對照組相比，茯苓中、高劑量組動物尿中 K+排出量顯著升高，Na+/K+排出量比值下降。研究表明，茯苓對電解質(zhì)的影響比西藥小，更適合高劑量長療程用藥[34]。

2.3免疫調(diào)節(jié)作用研究顯示，茯苓水提物、堿提物和醇提物都能促進小鼠腹腔內(nèi)巨噬細胞的吞噬指數(shù)和吞噬百分率，顯著增加小鼠血清內(nèi)免疫因子IL-2和TNF-α的含量，使胸腺及脾臟的質(zhì)量增加。結(jié)果表明，茯苓發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用的物質(zhì)基礎(chǔ)主要為三萜類、水溶性多糖和酸性多糖[35]。

2.4對小鼠腸道菌群的調(diào)節(jié)作用給小鼠灌胃茯苓水提物，檢測小鼠糞便中雙歧桿菌、乳桿菌、大腸桿菌和腸球菌的數(shù)量。結(jié)果表明，高劑量的茯苓能使腸道的雙歧桿菌數(shù)量明顯增加，說明茯苓對腸道菌群有良好的調(diào)節(jié)作用[36]。

2.5抗炎作用建立二甲苯致小鼠急性炎癥及無菌棉球致大鼠慢性炎癥模型，給予茯苓多糖。結(jié)果顯示，小劑量茯苓多糖可以抑制二甲苯所致的小鼠耳腫，并抑制棉球所致的大鼠皮下肉芽腫。研究表明，茯苓多糖對急慢性炎癥反應(yīng)具有抑制作用[37]。

2.6抗腫瘤作用研究表明，茯苓多糖能通過提高自然殺傷(NK)細胞活性，促進淋巴細胞增殖，發(fā)揮抗腫瘤作用[38]；茯苓多糖發(fā)揮抗腫瘤活性的作用機制是通過激活免疫監(jiān)視系統(tǒng)，增強免疫功能，抑制腫瘤細胞DNA和RNA的合成[39]。對羧甲基茯苓多糖(CMP)口服液的抗腫瘤作用研究發(fā)現(xiàn)，CMP能顯著提高荷瘤小鼠的腫瘤壞死因子含量，可使免疫低下小鼠的胸腺、脾臟質(zhì)量及溶血素抗體含量顯著升高，增強巨噬細胞的吞噬功能和NK細胞的活性，提高白細胞介素2(IL-2)至正常水平[40]。CMP對小鼠U-14宮頸癌、Lewis肺癌、S-180肉瘤細胞及h12肝癌細胞生長具有顯著地抑制作用[41]。

2.7增強機體免疫力給小鼠靜脈注射劑量為5，10和50 mg·kg-1的CMP，結(jié)果顯示，在該劑量下，CMP能明顯促進小鼠脾淋巴細胞的增殖及腹腔巨噬細胞的吞噬功能；當體外給藥質(zhì)量濃度在0.1～50 μg·mL-1時，可以直接促進小鼠脾淋巴細胞增殖。GMP對小鼠混合淋巴細胞反應(yīng)具有明顯的促進作用，還可顯著增強刀豆蛋白A(conA)和磷酸脂多糖(LPS)活化的小鼠脾淋巴細胞的增殖反應(yīng)，增強小鼠腹腔巨噬細胞吞噬中性紅的作用。結(jié)果表明，羧甲基茯苓多糖體內(nèi)外給藥均可顯著增強小鼠免疫功能[42]。CMP能上調(diào)人外周血源性樹突狀細胞CCR7的表達，并減少IL-10的分泌，增強其遷移能力[43]。

2.8抗衰老作用以正常小鼠和老齡大鼠為實驗對象，研究茯苓多糖對丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和單胺氧化酶(MAO)的活性以及對動物抗寒和抗疲勞實驗產(chǎn)生的影響。結(jié)果顯示，茯苓多糖可以使血清中T-SOD和Cu- SOD的活性均有不同程度的增加，而不影響MAO的活性，同時還可以使小鼠游泳死亡時間延緩，說明茯苓多糖具有較好的抗動物衰老作用[44]。符輝等[45]研究顯示，與空白對照組相比，CMP可以延長小鼠負荷游泳時間，CMP中、高劑量組可以顯著降低血清尿素氮和血乳酸含量并提高肝臟SOD活性。結(jié)果表明，CMP對小鼠具有很好的抗疲勞作用，其機制可能與降低血清尿素氮、血乳酸含量以及提高肝臟SOD活性有關(guān)。

2.9治療糖尿病鄭彩云[46]用四氧嘧啶誘導糖尿病模型大鼠，觀察了茯苓多糖灌胃后5，15和30 d的空腹血糖濃度(FBG)的改變以及肝臟中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的含量。結(jié)果顯示，茯苓多糖可減緩糖尿病模型大鼠體質(zhì)量的負增長，降低MDA，升高SOD，與模型組比較顯著差異；降低糖尿病模型大鼠的血糖，且與處理濃度和時間呈正相關(guān)性，但茯苓多糖對GSH-Px無明顯影響。結(jié)果表明，茯苓多糖具有降血糖和抗脂質(zhì)過氧化作用。

3結(jié)語

從茯苓中分離并鑒定的化學成分包括三萜類、二萜類、甾醇類、其他類及多糖類?，F(xiàn)代藥理研究表明，茯苓具有抗肝纖維化、利尿、免疫調(diào)節(jié)、調(diào)節(jié)腸道菌群、抗炎、抗腫瘤、增強機體免疫力、抗衰老、抗糖尿病等多種生物活性，這些研究成果為臨床更好地應(yīng)用茯苓提供了依據(jù)。茯苓的研究盡管取得了一定進展，但目前仍存在一些問題，有待進一步探討。在化學成分研究方面，報道較多的是脂溶性成分；水溶性成分報道較多的是多糖類。藥理實驗研究顯示，茯苓水提物有多種生物活性，因此可加強對水溶性小分子化合物的分離鑒定，以期待進一步豐富茯苓的化學成分。在生物活性研究方面，目前的藥理作用報道主要是茯苓粗提物，茯苓的傳統(tǒng)功效主要是利水滲濕，但具體藥效成分及其作用機制尚不明確，需加強對分離得到化學成分單體如三萜類、二萜類、甾醇類等的活性測試，發(fā)現(xiàn)更多的活性成分，進而更好地闡述藥理活性的物質(zhì)基礎(chǔ)。因此，對于茯苓的研究尚待進一步深入，以便更好地開發(fā)利用該藥材資源。

參考文獻：

[1]國家藥典委員會.中國藥典2010年版[S].一部. 北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010: 224.

[2]付萌，黃執(zhí)霞，王燕妮，等. 我院2006～2007年中藥飲片使用情況分析[J].西北藥學雜志， 2008，23(6): 398-399.

[3]Shingu T，Tai T，Akahori A. A lanostane triterpenoid fromPoriacocos[J]. Phytochemistry， 1992，31(7): 2548-2549.

[4]Tai T，Akahori A，Shingu T. Triterpenes ofPoriacocos[J]. Phytochemistry，1993，32(5): 1239-1244.

[5]Tai T，Shingu T，kikuchi T.Isolation of lanostane-type triterpene acids having an acetoxyl group from sclerotia ofPoriacocos[J]. Phytochemistry，1995，40(1): 225-231.

[6]Nukaya H，Yamashiro H，F(xiàn)ukazawa H，et al. Isolation of inhibitors of TPA-induced mouse ear edema from Hoelen，Poriacocos[J]. Chem Pharm Bull，1996，44(4): 847-849.

[7]王利亞，萬惠杰. 茯苓化學成分的研究[J]. 中草藥，1998，29(3): 145-148.

[8]Tai T，Akita Y，Kinoshita K，et al. Anti-emetic principles ofPoriacocos[J]. Planta Med， 1995，61(6): 527-530.

[9]Zhou L，Zhang Y，Gapter L A，et al. Cytotoxic and anti-oxidant activities of lanostane-type triterpenes isolated fromPoriacocos[J]. Chem Pharm Bull，2008，56(10): 1459-1462.

[10]Akihisa T，Uchiyama E，Kikuchi T，et al.Anti-tumor-promoting effects of 25-methoxyporicoic acid A and other triterpene acids fromPoriacocos[J]. J Nat Prod，2009，72(10): 1786-1792.

[11]Cuélla M J，Giner R M，Recio M C，et al. Two fungal lanostane derivatives as phoshpolipase A2 inhibitors[J]. J Nat Prod，1996，59(10): 977-979.

[12]許先棟，許津.茯苓環(huán)酮雙烯三萜酸的晶體結(jié)構(gòu)和分子結(jié)構(gòu)研究[J].中國藥物化學雜志， 1994，4(1): 23-27.

[13]Zheng Y，Yang X W. Two new lanostane triterpenoids fromPoriacocos[J]. J Asian Nat Prod Res，2008，10(3/4): 323-328.

[14]Yasukawa K，Kaminaga T,Kitanaka S,et al. 3β-p-hydroxybenzoyldehydro tumulosic acid fromPoriacocos,and its anti-inflammatory effect[J]. Phytochemistry，1998，48(8): 1357-1360.

[15]Tai T，shingu T,kikuchi T,etfal.Akahori A，Shingu T. Triterpenoids fromPoriacocos[J]. Phytochemistry，1991，30(8): 2796-2797.

[16]Tai T，Shingu T,Kikuchi T,et al. Triterpenes from the surface layer ofPoriacocos[J]. Phytochemistry，1995， 39(5): 1165-1169.

[17]Ukiya M，Akihisa T，Tokuda H，et al. Inhibition of tumor-promoting effects by poricoic acids G and H and other lanostane-type triterpines and cytotoxic activity of poricoic acids A and G fromPoriacocos[J]. J Nat Prod，2002，65(4)，462-465.

[18]李典鵬，梁小燕，陳海珊，等.云南茯苓皮的化學成分研究[J].廣西植物，1998，18(3): 267-270.

[19]Yokoyama A，Natori S,Aoshima K.Distribution of tetracyclic triterpenoids of lanostane group and sterols in the higher fungi especially of the polyporaceae and related families[J]. Phytochemistry， 1975，14(2): 487-497.

[20]Yasunori Y，Masafumi K,Masao K. Sterol constituents fromPoriacocos(Natural Medicine Note)[J]. Nat Meds， 2002，56(2): 63-67.

[21]王帥，姜艷艷，石任兵，等. 茯苓化學成分分離與結(jié)構(gòu)鑒定[J].北京中醫(yī)藥大學學報， 2010，33(12): 841-844.

[22]楊丹， 程忠泉， 劉玉清， 等. 茯苓皮的化學成分研究[J]. 安徽農(nóng)學通報， 2010， 16(19): 45-46.

[23]胡斌，楊益平，葉陽. 茯苓化學成分研究[J]. 中草藥，2006，37(5): 655-658.

[24]Hoffmann G C，Simson B W，Timell T E. Structure and molecular size of pachyman[J]. Carbohyd Res，1971，20(1): 185-188.

[25]Kanayama H，Adachi N，Togami M . A new antitumor polysaccharide from the mycelia ofPoriacocosWolf[J]. Chem Pharm Bull，1983，31(3): 1115-1118.

[26]Zhang L N，Ding Q，Zhang P Y，et al. Molecular weight and aggregation behaviour in solution ofβ-D-glucan fromPoriacocossclerotium[J]. Carbohyd Res，1997，303(2): 193-197.

[27]Rhee S D，Cho S M，Park J S，et al. Chemical composition and biological activities of immunostimulants purified from alkali extract ofPoriacocossclerotium[J].Korean J Mycol, 1999，27(4): 293-298.

[28]丁瓊，張俐娜，張志強.茯苓菌絲體多糖的分離及結(jié)構(gòu)分析[J].高分子學報，2000，(2): 224-227.

[29]林雨露，張俐娜，金勇，等. 人工培養(yǎng)菌種茯苓菌絲體多糖的分離、組成和分子量[J]. 高分子學報，2003，(1): 97-103.

[30]Wang Y，Zhang M，Ruan D，et al. Chemical components and molecular mass of six polysaccharides isolated from the sclerotium ofPoriacocos[J]. Carbohydr Res，2004，339(2): 327-334.

[31]Jin Y，Zhang L N，Tao Y Z，et al. Solution properties of a water-insoluble(l，3)-D-glucan isolated fromPoriacocosmycelia[J]. Carbohydr Polym，2004，57(2): 205-209.

[32]Chen Y Y，Chang H M. Antiproliferative an differentiating effects of polysaccharide fraction from fu-ling(Poriacocos) on human leukemic U937 and HL-60 cells[J].Food Chem Toxicol， 2004，42(5): 759-769.

[33]何綺微，楊潔. 苦參與茯苓對肝纖維化的作用及機制的研究[J]. 熱帶醫(yī)學雜志，2010，10 (8): 930-931.

[34]李森，謝人明，孫文基. 茯苓、豬苓、黃芪利尿作用的比較[J]. 中藥材，2010，33(2): 264-267.

[35]鄧媛媛，邵貝貝，王光忠，等.茯苓調(diào)節(jié)免疫功能有效物質(zhì)的比較研究[J].中國醫(yī)藥指南，2012，10(12): 94-95．

[36]宋克玉，江振友，嚴群超，等. 黨參及茯苓對小鼠腸道菌群調(diào)節(jié)作用的實驗研究[J]. 中國臨床藥理學雜志，2011，27(2): 142-145.

[37]侯安繼，彭施萍，項榮. 茯苓多糖抗炎作用研究[J].中藥藥理與臨床， 2003，19(3): 15-16.

[38]王愛云，陳群，李成付，等. 茯苓多糖修飾物抗腫瘤作用及其機制研究[J].中草藥，2009， 40(2): 268-271.

[39]霍文，孫廣利，劉鵬. 正交實驗法優(yōu)選茯苓多糖提取工藝[J]. 西北藥學雜志，2006，21(1): 18-19.

[40]徐琳本，肖梅英，樊湘紅.羧甲基茯苓多糖口服液的免疫作用及抗腫瘤作用研究[J].中成藥，2000，22(3): 222-223.

[41]陳春霞，趙大明，張秀軍，等. 羧甲基茯苓多糖的抗腫瘤實驗[J]. 福建中醫(yī)藥，2002，28(3): 38-40.

[42]張秀軍，徐儉，林志彬.羧甲基茯苓多糖對小鼠免疫功能的影響[J].中國藥學雜志，2002， 37(12): 913-915.

[43]錢高潮，丁志祥，潘薇，等. 羧甲基茯苓多糖增強人外周血源性樹突狀細胞遷移功能的研究[J]. 免疫學雜志，2014，30(7): 604-607.

[44]侯安繼，陳騰云，彭施萍，等. 茯苓多糖抗衰老作用研究[J].中藥藥理與臨床，2004，20(3): 10-11.

[45]符輝，吳奇輝，王廣蘭，等. 羧甲基茯苓多糖抗疲勞作用研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)， 2014，26(3): 403-406.

[46]鄭彩云. 茯苓多糖抗糖尿病作用的實驗研究[J]. 中國醫(yī)療前沿，2010，5(14): 12-13.

Research advances on chemical constituents and bioactivities of Poria cocos (Schw.) Wolf

XU Shuo，JIANG Wenqing，KUANG Yongmei，WU Xuejun，MA Jie，JIN Pengfei*

(Department of Poria cocos(Schw.) Wolf Pharmaceutical Science，Beijing Hospital，Beijing 100730，China)

Abstract:ObjectiveTo summerize the advances on chemical constituents and bioactivities of Poria cocos(Schw.) Wolf.MethodsThe domestic and foreign researches on chemical constituents and bioactivities of Poria cocos(Schw.) Wolf were reviewed and analyzed.ResultsTriperpenoids，diterpenoids，sterols， and polysaccharides have been isolated from Poria cocos(Schw.) Wolf. Modern pharmacological investigations indicated that Poria cocos (Schw.) Wolf showed anti-fibrotic，diuretic，immunomodulatory，intestinal flora modulation， anti-inflammatory，antitumor and immunity enhancing effects.ConclusionAlthough much progress had been made，there were still some problems for the further exploration.

Key words:Poria cocos(Schw.) Wolf；chemical constituent；bioactivity

(收稿日期：2015-10-11)

中圖分類號：R282

文獻標志碼：A

文章編號：1004-2407(2016)03-0327-04

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.03.032

*通信作者：金鵬飛，男，博士，副主任藥師

作者簡介：徐碩，女，博士，主管藥師