一次離心運動對大鼠骨骼肌線粒體移動相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

于 瀅，于 亮，李云廣，李俊平，周 越，王宏坤，武俸羽，王瑞元

?運動人體科學(xué)

一次離心運動對大鼠骨骼肌線粒體移動相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

于 瀅1，于 亮2，李云廣3，李俊平2，周 越2，王宏坤1，武俸羽1，王瑞元2

（1.哈爾濱體育學(xué)院運動科學(xué)與健康系，黑龍江哈爾濱150008；2.北京體育大學(xué)運動人體科學(xué)學(xué)院，北京100084；3.黑龍江科技大學(xué)體育部，黑龍江哈爾濱150022）

目的：觀察一次離心運動后線粒體移動相關(guān)蛋白的表達(dá)變化。方法：42只SD大鼠經(jīng)適應(yīng)后隨機(jī)分為安靜組（6只）和離心運動組（36只）。離心運動組在跑臺上進(jìn)行90min速度為16m／min的離心運動，坡度－16°。運動后分別在即刻、6 h、12 h、24 h、48 h和72 h取材。Western blotting測定骨骼肌Miro1、Miro2、KIF5B、VDAC1、Dynlt1蛋白的表達(dá)。結(jié)果：一次離心運動后，與安靜組相比，離心運動后各時間點Miro1、Miro2蛋白表達(dá)顯著升高；KIF5B變化不顯著；VDAC1在6 h、12 h、24 h和72 h顯著升高；Dynlt1蛋白表達(dá)在運動后6 h和48 h顯著升高。結(jié)論：一次離心運動后骨骼肌中Miro、VDAC1和Dynlt1蛋白表達(dá)上調(diào)，表明離心運動損傷后骨骼肌線粒體移動活躍，有利于離心運動導(dǎo)致的骨骼肌損傷修復(fù)。

離心運動；大鼠；骨骼??；線粒體移動

線粒體是重要的細(xì)胞器，也是動態(tài)的細(xì)胞器［1］。其在細(xì)胞內(nèi)也要進(jìn)行運動，且需要相關(guān)的分子馬達(dá)為動力才得以運動［2］，驅(qū)動其在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行移動，進(jìn)而到達(dá)其需要的位置，形成一定的分布形式，應(yīng)對能量需求改變。對線粒體運動的研究很多集中在生殖細(xì)胞和神經(jīng)組織，例如線粒體在生殖細(xì)胞尤其是卵細(xì)胞中的分布特點可以反映其成熟度。線粒體移動的機(jī)制研究剛剛起步，對于線粒體移動相關(guān)蛋白的影響研究尚屬少見，對細(xì)胞中線粒體移動的變化及調(diào)控的分子機(jī)制認(rèn)識尚不明確。本研究團(tuán)隊前期研究發(fā)現(xiàn)一次離心運動誘導(dǎo)骨骼肌損傷，同時觀察到線粒體分布出現(xiàn)肌膜下聚集現(xiàn)象，提示線粒體發(fā)生了移動，且移動方向有向肌細(xì)胞膜方向移動的趨勢，進(jìn)而表現(xiàn)為肌膜下聚集。線粒體重新分布的直接動力自于分子馬達(dá)蛋白及其相關(guān)的受體蛋白，因此有必要對線粒體移動相關(guān)馬達(dá)蛋白及其受體蛋白在運動后不同時程的變化進(jìn)行研究。

1 線粒體移動相關(guān)馬達(dá)分子研究現(xiàn)狀

機(jī)體的一切生命活動，如果追蹤到分子水平，可以認(rèn)為都是來源于具有馬達(dá)功能的蛋白質(zhì)大分子做功推動的結(jié)果，如細(xì)胞內(nèi)部的運輸、細(xì)胞分裂及肌肉的收縮等。這些功能蛋白質(zhì)大分子是可以將化學(xué)能轉(zhuǎn)變?yōu)闄C(jī)械能的，或者將機(jī)械能轉(zhuǎn)變?yōu)榛瘜W(xué)能，因此被稱為分子馬達(dá)（molecular motor）或蛋白質(zhì)馬達(dá)（protein motor）等［3］。極性細(xì)胞類型中，線粒體移動是維持細(xì)胞健康的基礎(chǔ)，且主要通過motor蛋白及adapter蛋白的配合來完成［4］。線粒體的運動需要動力源，為線粒體運動提供動力源的馬達(dá)分子包括驅(qū)動蛋白（kinesin）、動力蛋白（dynein）和肌球蛋白（myosin）。在哺乳類動物細(xì)胞內(nèi)的線粒體移動是由前兩者參與進(jìn)行的［5］。

1.1 驅(qū)動蛋白

驅(qū)動蛋白（KIF）家族通過系譜分析包括15個蛋白，從Kinesin1到Kinesin 14B。所有驅(qū)動蛋白頭部結(jié)構(gòu)域都含有相似的氨基酸序列［6］。傳統(tǒng)的驅(qū)動蛋白，如驅(qū)動蛋白-1，是由兩條重鏈（KHCs；120 KDa），以及兩條輕鏈（KLCs；64 KDa）和螺旋纏繞（coiled-coil）的尾部組成的。Kinesin1是第一個被鑒定出來的驅(qū)動蛋白馬達(dá)，其重鏈被稱作KIF5［7］。KIF5有三個亞型，分別是KIF5 A、KIF5B、KIF5C。KIF5 A、KIF5C是神經(jīng)特異性的亞型，而KIF5B幾乎在大部分組織都存在［8］。一項阿爾海默茨病神經(jīng)病理研究線粒體運動指出Kinesin1中KHC與線粒體結(jié)合協(xié)助線粒體移動［9］。也有研究報道神經(jīng)組織中KIF1Bα和KIF5是轉(zhuǎn)運線粒體的主要驅(qū)動蛋白［10－11］。研究認(rèn)為細(xì)胞中不同馬達(dá)蛋白亞型運送不同貨物，以此保證生命機(jī)體內(nèi)部的復(fù)雜細(xì)胞器定位［12］。

線粒體與kinesin相聯(lián)需要adaptor蛋白參與。哺乳動物中kinesin潛在adaptor為milton，其受體蛋白是Miro。從酵母到人類，Miro是一種保守的線粒體Rho GTPase，Miro屬于小GTPase家族。Miro在人類中有兩種同源物：hMiro1和hMiro2。它們的結(jié)構(gòu)中都含有兩個不同的GTP酶結(jié)構(gòu)域、兩個EF手形（EF-hand）鈣聯(lián)區(qū)域和一段跨膜的C端尾巴。神經(jīng)元線粒體運動調(diào)節(jié)蛋白Miro1，Miro2和Milton主要功能是調(diào)節(jié)神經(jīng)元中線粒體的移動，保證線粒體的正確分布，并能夠應(yīng)對病理損傷［13］。KHC／milton／Miro形成的復(fù)合體是當(dāng)前關(guān)于線粒體運動研究的最好模型。KHC與milton、Miro形成復(fù)合體時，KLC是獨立的；果蠅敲除KLC基因后，不影響線粒體轉(zhuǎn)運，這表明KIF5B的招募和線粒體運輸是獨立于KLC的，其是可有可無的自己的運動［14］，可能承載轉(zhuǎn)運其他貨物的使命。研究發(fā)現(xiàn)KIF5B定位主要在骨骼肌Z-disks和M線周圍，顯示它的作用可能與肌原纖維組裝或是與肌原纖維的定位有關(guān)，且KIF5B在肌肉發(fā)育過程中發(fā)揮了重要作用［15］。另一項研究發(fā)現(xiàn)，驅(qū)動蛋白kinesin-1（KIF5B）缺乏會導(dǎo)致線粒體的核周聚集，線粒體分布出現(xiàn)異常［16］。有報道Miro-1突變會抑制線粒體的運輸，進(jìn)而導(dǎo)致線粒體聚集成簇，并會形成絲狀線粒體［17］。Miro有可能感知細(xì)胞的變化，從而影響線粒體的運動［18］。Miro1可直接與馬達(dá)蛋白KIF5結(jié)合［19］。對線粒體移動的分子調(diào)控機(jī)制，可能是通過改變馬達(dá)蛋白的募集、活性變化或錨定來進(jìn)行的。

1.2 動力蛋白

胞質(zhì)動力蛋白（Dynein）是真核細(xì)胞內(nèi)沿微管進(jìn)行負(fù)向運動的主要馬達(dá)蛋白。其行使功能時，總是與dynactin（動力激活蛋白）相結(jié)合。胞質(zhì)動力蛋白復(fù)合體的核心是兩條重鏈多肽以及相關(guān)的中間體，輕中間體和輕鏈多肽構(gòu)成的同型二聚體。其功能之一就是參與到各種膜細(xì)胞器的運輸。dynein的馬達(dá)結(jié)構(gòu)域是由六個AAA（ATPase associated with various cellular activities）結(jié)構(gòu)域形成的六聚體排列環(huán)［20］。一項關(guān)于大鼠肺組織的研究表明，dynein敲除會使線粒體在核周聚集［21］。

Dynlt1也稱TCTEX1，是動力蛋白輕鏈的一種［22］。對心肌中動力蛋白輕鏈Dynlt1的研究發(fā)現(xiàn)其與線粒體相關(guān)聯(lián)，具有減輕缺氧早期心肌線粒體通透性轉(zhuǎn)換的作用［23］。以FITC（綠）標(biāo)記抗體顯示胞漿中的Dynlt分布，以Rhodamine（紅）標(biāo)記抗體顯示胞漿中線粒體線粒體的電壓依賴性陰離子通道1（VDAC1）的分布，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Dynlt1與VDAC1有著緊密的共區(qū)域分布特征。Dynlt1作為動力蛋白Dynein的組成分子之一，與線粒體外膜蛋白VDAC1間的共同定位關(guān)系提示在線粒體功能和線粒體胞內(nèi)運輸?shù)确矫?，Dynlt1對其可能有重要影響［24］。

以上研究認(rèn)為KHC和Miro形成的復(fù)合體，以及Dynlt1與線粒體的VDAC1相互作用，可以共同調(diào)控線粒體的移動，并且Dynlt1上調(diào)可以對線粒體的功能具有一定的保護(hù)作用。對于骨骼肌中線粒體移動的相關(guān)研究較少，而對骨骼肌細(xì)胞中線粒體移動和分布調(diào)控分子機(jī)制的研究更少。

2 材料與方法

2.1 實驗動物的分組與損傷模型建立

實驗動物為SPF級雄性8周齡SD大鼠，體重為（213.57±10.12）g，購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司，許可證編號：SCXK（京）2012－0001。大鼠飼養(yǎng)和訓(xùn)練均在北京體育大學(xué)科學(xué)研究中心的動物房內(nèi)進(jìn)行。大鼠適應(yīng)環(huán)境3 d后進(jìn)行后續(xù)實驗。大鼠按體重隨機(jī)分為2大組：對照組（C組，n＝6）和一次離心運動組（E組，n＝36）。一次離心運動組大鼠按照運動后不同時間，又隨機(jī)分為離心運動后即刻組（E0 h組，n＝6）、離心運動后6 h組（E6 h組，n＝6）、離心運動后12 h組（E12 h組，n＝6）、離心運動后24 h組（E24 h組，n＝6）、離心運動后48 h組（E48 h組，n＝6）和離心運動后72 h組（E72 h組，n＝6）。運動方案根據(jù)Armstong的離心運動模型［25］，采取在跑臺上持續(xù)性下坡跑，坡度為－16°，速度為16m／min，運動時間為90 min。運動組進(jìn)行3 d速度為16 m／min的適應(yīng)性跑臺運動。第1天坡度0度跑臺運動5 min，第2天坡度0°跑臺運動10 min；第3天休息；第4天進(jìn)行正式實驗，坡度－16°跑臺運動90 min。

2.2 測試樣本的收集

各組大鼠在其對應(yīng)的時間點進(jìn)行處理，大鼠稱重后，水合氯醛（0.8 m l／100 g）進(jìn)行腹腔麻醉。將腹主動脈血抽取干凈，迅速分離比目魚肌，做好標(biāo)記，錫紙包裹，立刻投入到液氮罐中進(jìn)行暫時保存。待取材完成后將比目魚肌標(biāo)本轉(zhuǎn)移至－80℃冰箱保存，備用。

2.3 Western blot測試指標(biāo)

100 mg凍存骨骼肌組織使用液氮在研缽中研磨成粉末，后將其加入到1 m l含蛋白酶抑制劑和PMSF的裂解液中。進(jìn)行電泳前以4：1比例加入5倍的上樣緩沖液，煮沸10 min。蛋白含量測定按試劑盒說明（BCA法）進(jìn)行。各蛋白電泳上樣量為20 μg，電泳后采用濕法進(jìn)行蛋白質(zhì)電轉(zhuǎn)印，5%BSA封閉液室溫孵育2 h。用5%BSA封閉液稀釋一抗Miro1（1：200，Santa），Miro2（1：500，Santa），KIF5B（1：2000，abcam），VDAC1（1：2000，abcam），Dynlt1（1：500，Santa），4℃過夜。以5%BSA封閉液稀釋二抗（1：4000，中杉金僑公司），室溫孵育2 h。用ECL發(fā)光試劑在凝膠成像系統(tǒng)中使用Image Lab 4.1軟件

拍攝條帶照片。使用Gelpro軟件對目的蛋白進(jìn)行光

密度相對定量分析，以GAPDH為內(nèi)參。

2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計方法

所有數(shù)據(jù)用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差的形式表示。采用單因素方差（One-ANOVA）分析，方差齊性時用LSD方法，方差不齊性時用Tamhane’s方法。顯著性水平定為P＜0.05，非常顯著性水平定為P＜0.01。

3 結(jié)果

3.1 一次離心運動后不同時相Miro1蛋白表達(dá)的變化

實驗結(jié)果顯示，一次離心運動組在干預(yù)后Miro1蛋白表達(dá)呈現(xiàn)上升趨勢，各時刻點與安靜對照組相比差異具有顯著性（P＜0.01），運動后即刻Miro1蛋白的表達(dá)即出現(xiàn)升高，在6h和12 h又出現(xiàn)下降，運動后24 h又出現(xiàn)升高，運動后72 h達(dá)到峰值。

表1 一次離心運動后骨骼肌M iro1蛋白表達(dá)變化

圖1 一次離心運動后骨骼肌M iro1蛋白表達(dá)變化

3.2 一次離心運動后不同時相Miro2蛋白表達(dá)的變化

實驗結(jié)果顯示一次離心運動組在干預(yù)后Miro2蛋白的表達(dá)呈現(xiàn)上升趨勢，與安靜組相比，各時間點差異均具有顯著性（P＜0.01）。運動后即刻Miro2蛋白的表達(dá)升高，在24 h出現(xiàn)峰值。

圖2 一次離心運動后骨骼肌M iro2蛋白表達(dá)變化

3.3 一次離心運動后不同時相KIF5B蛋白表達(dá)的變化

實驗結(jié)果顯示一次離心運動組干預(yù)后各組KIF5B蛋白的表達(dá)變化有下降趨勢，但各組間無顯著性差異。

圖3 一次離心運動后骨骼肌K IF5B蛋白表達(dá)變化

3.4 一次離心運動后不同時相VDAC1蛋白表達(dá)的變化

實驗結(jié)果顯示，一次離心運動組VDAC1蛋白的表達(dá)呈現(xiàn)升高趨勢。6 h（P＜0.01）、12 h（P＜0.05）、24 h（P＜0.01）、72 h（P＜0.01）組VDAC1蛋白的表達(dá)與安靜對照組相比差異具有顯著性。

表2 一次離心運動后骨骼肌VDAC1、Dynlt1蛋白表達(dá)變化

圖4 一次離心運動后骨骼肌VDAC1蛋白表達(dá)變化

3.5 一次離心運動后不同時相Dynlt1蛋白表達(dá)的變化

實驗結(jié)果顯示，一次離心運動組Dynlt1蛋白的表達(dá)也呈現(xiàn)升高趨勢，12 h（P＜0.01）和48 h（P＜0.05）Dynlt1蛋白的表達(dá)與安靜對照組相比升高明顯，差異具有顯著性。

圖5 一次離心運動后骨骼肌Dynlt1蛋白表達(dá)變化

4 分析與討論

4.1 神經(jīng)組織線粒體移動相關(guān)分子馬達(dá)的研究

極性細(xì)胞類型中，線粒體移動是維持細(xì)胞健康的基礎(chǔ)，且主要通過motor蛋白及adaptor蛋白的配合來完成［26］。一項對果蠅的研究發(fā)現(xiàn)，驅(qū)動蛋白和動力蛋白是果蠅運動神經(jīng)元軸突線粒體快速運輸?shù)幕緞恿Γ?7］。而馬達(dá)分子與線粒體相連依靠adaptor蛋白，常見的adaptor蛋白有Miro、Syntabulin和Milton［28］。驅(qū)動蛋白kinesin和動力蛋白dynein負(fù)責(zé)細(xì)胞內(nèi)貨物的長距離運輸，包括線粒體的運輸，而這個過程依賴細(xì)胞骨架微管。線粒體運動調(diào)控機(jī)制研究尚處于探索研究階段，關(guān)于具體調(diào)控機(jī)制尚不明確，但有一點是肯定的，那就是一個復(fù)雜調(diào)控體系［29］。線粒體的長距離運動受到這兩類馬達(dá)蛋白的調(diào)控，但有的研究也指出當(dāng)機(jī)體功能異常時，kinesin也會向相反的方向運動［30］。

姚斌彬以坐骨神經(jīng)夾持大鼠損傷模型模擬臨床中周圍神經(jīng)的壓迫損傷，通過推拿干預(yù)后，檢測了脊髓中Dynein、Kinesin的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)推拿能夠提高坐骨神經(jīng)損傷大鼠脊髓中馬達(dá)蛋白的表達(dá)。認(rèn)為馬達(dá)蛋白從動力層面促進(jìn)了軸漿的運輸，并從神經(jīng)營養(yǎng)物質(zhì)傳遞層面改善了軸漿運輸?shù)墓δ?，認(rèn)為是推拿治療周圍神經(jīng)損傷起效的機(jī)理之一［31］。分子馬達(dá)參與營養(yǎng)物質(zhì)的運輸，而推拿可以提高分子馬達(dá)的蛋白表達(dá)，保證損傷部位的能源物質(zhì)提供，可以促進(jìn)損傷的恢復(fù)。于曉偉報道8周有氧運動可以上調(diào)6月齡APP／PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠（阿爾茨海默病模型）皮層線粒體順向轉(zhuǎn)運馬達(dá)蛋白Kinesin重鏈和輕鏈的表達(dá)，并改善線粒體順向軸漿轉(zhuǎn)運障礙，增加線粒體在突觸末梢的分布，進(jìn)而改善突觸結(jié)構(gòu)和功能，認(rèn)為Kinesin重鏈和輕鏈的表達(dá)上調(diào)，是有氧運動促進(jìn)APP／PS1轉(zhuǎn)基因小鼠行為學(xué)能力的機(jī)制之一［32］。

4.2 一次離心運動對骨骼肌線粒體移動相關(guān)蛋白的影響

目前運動對于線粒體移動的相關(guān)蛋白的研究較少。Miro是GTPase家族成員，參與到線粒體移動的調(diào)節(jié)。有研究認(rèn)為它也參與到了線粒體運動和動力學(xué)變化。劉慧君報道了小鼠一次中等強(qiáng)度負(fù)荷跑臺運動后30 min、60 min、90 min和120 min后骨骼肌線粒體的移動相關(guān)基因Miro1表達(dá)，發(fā)現(xiàn)經(jīng)過30 min、60 min、90 min和120 min急性運動后，骨骼肌中Miro1 mRNA表達(dá)與安靜組相比顯著升高，急性運動中骨骼肌MirolmRNA表達(dá)較安靜時顯著增加，認(rèn)為這種變化可能有利于促進(jìn)運動過程中的線粒體呼吸和ATP合成，并以此來應(yīng)對細(xì)胞對能量的高需求［33］。本研究發(fā)現(xiàn)一次離心運動骨骼肌中Miro蛋白表達(dá)增加，與前人的研究結(jié)果一致。

KIF5B是細(xì)胞內(nèi)參與線粒體移動的重要馬達(dá)蛋白。一項6周耐力跑臺訓(xùn)練對脲鏈霉素致糖尿病大鼠脊髓和坐骨神經(jīng)KIF5B蛋白表達(dá)的研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病組的KIF5B蛋白表達(dá)升高，耐力運動可調(diào)節(jié)KIF5B的蛋白表達(dá)，并使它們接近正常水平。耐力運動也可以調(diào)節(jié)非糖尿病組的KIF5B的蛋白表達(dá)。研究認(rèn)為糖尿病可以使脊髓和坐骨神經(jīng)KIF5B蛋白表達(dá)升高，而耐力運動可以改善這種狀況，可能是運動使血糖降低的原因之一［34］。而本研究中一次離心運動對KIF5B的蛋白表達(dá)影響不明顯。

VDAC1是存在于線粒體外膜上的膜蛋白，當(dāng)前關(guān)于其的研究大部分集中在對疾病的研究，并且認(rèn)為其是啟動線粒體介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的重要原因之一［35］，也參與到了自噬的過程［36］。但是作為線粒體的離子通道，也可以促進(jìn)ATP釋放，參與細(xì)胞氧化還原反應(yīng)，對維持細(xì)胞的氧化還原平衡狀態(tài)有重要影響。心肌中VDAC1與Dynlt1關(guān)聯(lián)，且上調(diào)Dynlt1表達(dá)后可以穩(wěn)定缺氧狀態(tài)下的線粒體通透性。在神經(jīng)組織中，VDAC1與Dynlt1關(guān)聯(lián)是神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的線粒體運動的主要調(diào)節(jié)方式之一。本研究發(fā)現(xiàn)一次離心運動干預(yù)后VDAC1蛋白的表達(dá)呈現(xiàn)升高趨勢，且具有波動性，在6 h、12 h、24 h、72 h時間點與安靜組有顯著性差異。單純運動組Dynlt1蛋白的表達(dá)也呈現(xiàn)明顯升高趨勢。VDAC1與Dynlt1均有上調(diào)，有利于運動后線粒體的重新分布，對于骨骼肌能量生成、轉(zhuǎn)運起到良好的作用，是機(jī)體在運動后的一種有利于恢復(fù)的調(diào)節(jié)過程。

一次離心運動可以使Miro、VDAC1和Dynlt1蛋白表達(dá)升高。結(jié)果提示一次離心運動使骨骼肌內(nèi)線粒體移動相關(guān)蛋白的表達(dá)增高，因而線粒體移動的動力源得以保證，同時可以使線粒體的移動活躍，推測由于向膜下方向運動的線粒體較多，進(jìn)而導(dǎo)致了肌膜下線粒體積聚。而這一過程是由線粒體移動相關(guān)蛋白協(xié)助線粒體向膜下運動結(jié)果，推測膜下線粒體的積聚與這些蛋白的表達(dá)改變有密切關(guān)系。此外，運動使骨骼肌內(nèi)的能源物質(zhì)消耗增多，肌膜的活動增強(qiáng)，線粒體需要移動到肌膜下，有利于快速的獲取氧和能源物質(zhì)，滿足活動時的能量需求，進(jìn)而出現(xiàn)肌膜下線粒體聚集，而線粒體的這種分布與Miro、VDAC1和Dynlt1蛋白表達(dá)升高有關(guān)聯(lián)。由于一次離心運動時可以導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的內(nèi)環(huán)境發(fā)生復(fù)雜的變化，蛋白之間的相互作用可能會受到影響，因此具體的調(diào)節(jié)機(jī)制有待于進(jìn)行深入的研究。

5 結(jié)論

一次離心運動不同時相骨骼肌Miro、VDAC1、Dynlt1蛋白表達(dá)出現(xiàn)上調(diào)，表明離心運動后骨骼肌線粒體移動活躍，有利于運動后骨骼肌損傷的修復(fù)。

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責(zé)任編輯：郭長壽

Effect of an Eccentric Exercise on M itochond rial M ovem ent Related Proteins in Skeletal M uscle of Rats

YU Ying1，YU Liang2，LIYunguang3，LI Junping2，ZHOU Yue2，WANG Hongkun1，WU Fengyu1，WANG Ruiyuan2
（1.Department of Sports Science and Health，Harbin Institute of P.E.，Heilongjiang 150008，Harbin，China；2.Kinesiology School，Beijing Sport University，Beijing 100084，China；3.Dept of P.E.，Heilongjiang University of Science and Technology，Harbin 150022，Heilongjiang，China）

Objective：M itochondriamovement related proteins are observed after an eccentric exercise.Methods：42 SD rats are random ly divided into quiet group（6 rats）and an eccentric exercise group（36 rats）after adaptation.Exercise group rats should run on the treadm ill，－16°，16m／m in，90m in.Experimental samp lings are taken after exercise immediately，6 hours，12 hours，24 hours，48 hours and 72 hours.Western blotting is used to detect M iro1，M iro2，KIF5B，VDAC1 and Dynlt1 protein expression.Results：Compared with the quiet group，the protein expressions of M iro1 and Miro2 are increased significantly and the change of KIF5B is not significant after an eccentric exercise.The protein expressions of VDAC1 are increased in exercise group after6 hours，12 hours，24 hours，48hours and 72 hours significantly and Dynlt1 are increased after 6 hours and 48 hours.Conclusion：The increase of M iro，VDAC1 and Dynlt1 protein expression after an eccentric exercise in skeletalmuscle showed thatmitochondriawere active after exercise，which was beneficial to the repairof skeletalmuscle damage after exercise.

eccentric exercise；rat；skeletalmuscle；mitochondriamovement

G804.2

A

1004－0560（2016）06－0059－06

2016-11-09；

2016-12-03

哈爾濱體育學(xué)院校級學(xué)術(shù)骨干課題（2016XJ007）；國家自然科學(xué)基金項目（31471133）；中央高校基本科研業(yè)務(wù)費專項資金資助北京體育大學(xué)自主科研課題（2015ZD004，2015YB007，2016yb018，2016RB010，2016yb047）。

于 瀅（1979—），女，講師，博士，主要研究方向為骨骼肌損傷。

王瑞元（1956—），教授，博士，博士生導(dǎo)師，主要研究方向為骨骼肌損傷。E－mail：Wangry＠vip.sina.com。