熒光試劑在潛血手印顯現(xiàn)中的增強(qiáng)效果及程序研究

陳蕊麗，　逄文耀，　朱威龍，　李　波

(中國(guó)人民公安大學(xué)刑事科學(xué)技術(shù)學(xué)院， 北京　100038)

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熒光試劑在潛血手印顯現(xiàn)中的增強(qiáng)效果及程序研究

陳蕊麗，逄文耀，朱威龍，李波

(中國(guó)人民公安大學(xué)刑事科學(xué)技術(shù)學(xué)院， 北京100038)

摘要目的 為探求熒光試劑在潛血手印顯現(xiàn)中的二次增強(qiáng)效果和操作流程。方法 按照客體類型即滲透性客體和非滲透性客體針對(duì)不同顯現(xiàn)方法進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，從顯現(xiàn)結(jié)果篩選出最佳顯現(xiàn)流程。結(jié)果 按照顯現(xiàn)效果篩選顯現(xiàn)流程，得出DFO和酸性黃熒光試劑具有較好的二次增強(qiáng)效果。結(jié)論 在傳統(tǒng)潛血手印顯現(xiàn)試劑顯現(xiàn)效果不理想的情況下，按照流程圖可以進(jìn)行熒光試劑的二次增強(qiáng)。

關(guān)鍵詞潛血手??； DFO； 酸性黃； 顯現(xiàn)

0引言

在案件現(xiàn)場(chǎng)，血跡印痕除了要提取DNA外，對(duì)于紋線不清晰的指紋，往往要進(jìn)行處理和增強(qiáng)。本文著重探討對(duì)于案件現(xiàn)場(chǎng)不同的客體上潛血印痕最適合的顯現(xiàn)增強(qiáng)方法。潛血印痕泛指用肉眼和常規(guī)方法不能看清紋線或數(shù)量足夠多的細(xì)節(jié)特征時(shí)，需要采用特殊方法增強(qiáng)的血跡印痕。

潛血印痕常規(guī)處理路徑為：先進(jìn)行犯罪現(xiàn)場(chǎng)血跡印痕的常規(guī)拍照記錄，光學(xué)檢驗(yàn)如果清晰則盡量先采用無(wú)損的提取方法，再提取DNA，如果現(xiàn)場(chǎng)血跡足夠多，可以先在紋線不清晰的印痕處提取DNA。對(duì)于其他印痕可以按承痕客體的類型決定顯現(xiàn)方法，對(duì)于常規(guī)客體首先進(jìn)行光學(xué)檢驗(yàn)，并按照不同的客體選擇固定方式。固定就是在血跡增強(qiáng)處理時(shí)，為了防止血跡擴(kuò)散而采取的將血跡變性的處理方法。最為常見(jiàn)的方法為無(wú)水乙醇固定法，還有加熱變性法及紫外照射法等。由于血跡增強(qiáng)后一般紋線都為深色，所以對(duì)于淺色客體顯現(xiàn)試劑較多，如最為常見(jiàn)的是四甲基聯(lián)苯胺、氨基黑10B、溴甲酚綠、考馬斯亮藍(lán)等；對(duì)于滲透性淺色客體最為常用試劑為四甲基聯(lián)苯胺；對(duì)于效果較差或背景復(fù)雜、顏色較深的客體可以采用具有熒光效果的試劑較為理想，如DFO、酸性黃等；對(duì)于深色非滲透性客體上的潛血手印是血跡顯現(xiàn)的難點(diǎn)，常用為酸性黃、二氧化鈦懸浮液等。下面將通過(guò)實(shí)驗(yàn)加以驗(yàn)證其顯現(xiàn)效果和合適的顯現(xiàn)程序。

1材料與方法

1.1器材和試劑

FYFC-Ⅲ微電腦502手印熏顯柜、多波段光源、電熱恒溫干燥箱、尼康單鏡頭反光數(shù)碼相機(jī)D7100、蒸鍋等。

四甲基聯(lián)苯胺(TMB)、 DFO、 氨基黑、酸性黃、過(guò)氧化氫、無(wú)水乙醇、甲醇、冰醋酸、純凈水、二氧化鈦 、茚三酮、熒光粉末、有機(jī)試劑等。

1.2方法

1.2.1客體選取

滲透性客體為：白紙、報(bào)紙；非滲透性客體為：白色塑料購(gòu)物袋，黑色塑料垃圾袋。

1.2.2制作樣本

將樣本制作成寬約3 cm，長(zhǎng)約25 cm的長(zhǎng)條若干，志愿者雙手用洗手液洗干凈后自然晾干，將10%比例的稀釋血均勻的涂抹于一個(gè)手指表面(不能堆積)，然后在樣本表面順序捺印5～6枚手印。捺印手印時(shí)，盡量保持接觸時(shí)間、捺印力度和捺印方式一致。捺印后，分別將每種不同的客體樣本一分為二，并且用相同的數(shù)字編號(hào)，相同編號(hào)的兩半樣本為一組，將樣本存留15天。

1.2.3配制溶液

四甲基聯(lián)苯胺(TMB)溶液甲液：稱取1.2 g四甲基聯(lián)苯胺放于燒杯中，加入100 mL無(wú)水乙醇，用玻璃棒攪拌均勻；乙液：30%過(guò)氧化氫；按照甲液∶乙液=10∶1比例混合使用(建議現(xiàn)配現(xiàn)用，保存最多不要超過(guò)5天)。

茚三酮試劑稱取2 g茚三酮放于燒杯中，先后加入50 mL丙酮和50 mL乙醚(注意先丙酮后乙醚，順序不可逆)，玻璃棒攪拌至充分溶解。

DFO試劑稱取0.19 g DFO放于燒杯中，分別加入50 mL無(wú)水乙醇，50 mL乙酸乙酯，10 mL冰醋酸，390 mL正己烷，用玻璃棒充分?jǐn)嚢柚寥芙狻?/p>

氨基黑顯現(xiàn)液稱取1 g氨基黑10 B，放入容量為1 000 mL的燒杯中，量取50 mL冰醋酸，倒入盛有氨基黑10 B的上述燒杯中，最后量取450 mL的甲醇，倒入上述燒杯中，用玻璃棒攪拌約30 min，溶液呈藍(lán)黑色即可。

考馬斯亮藍(lán)G250試劑稱取0.5 g考馬斯亮藍(lán)粉末放入400 mL燒杯中，然后量取10 mL醋酸和90 mL無(wú)水乙醇分別倒入上述燒杯中，用玻璃棒攪拌至完全溶解即可。

酸性黃試劑固定液：量取1 000 mL蒸餾水倒入到容量為2 000 mL的燒杯中，稱取20 g 5-磺基水楊酸溶于蒸餾水中并用磁力攪拌器攪拌至充分溶解；染色液：稱取1 g酸性黃晶體放置于容量為1 000 mL的燒杯中，用量筒量取50 mL乙酸加入燒杯中，再取250 mL無(wú)水乙醇加入燒杯中，量取700 mL蒸餾水加入燒杯中并用磁力攪拌器攪拌至完全溶解即可；漂洗液：用量筒量取40 mL乙酸、200 mL無(wú)水乙醇和560 mL蒸餾水先后倒入同一個(gè)燒杯中混合均勻。

溴甲酚綠試劑稱取2 g溴甲酚綠放入容量為2 000 mL的燒杯中，量取750 mL無(wú)水乙醇和250 mL蒸餾水倒入上述燒杯中，用攪拌至溶液呈黃色透明狀即可。

二氧化鈦懸浮液取10 g二氧化鈦加入足夠大燒杯中，加入300 mL無(wú)水乙醇充分?jǐn)嚢瑁偻鶡屑尤?.2 g十二烷基硫酸鈉和少許乙酸攪拌至溶液成懸浮狀即可。

1.2.4操作方法

(1)滲透性客體顯現(xiàn)方法

滲透性客體顯現(xiàn)試劑有3種，分別是四甲基聯(lián)苯胺、DFO、和茚三酮，按照編號(hào)1～30的順序，將30組樣本分別用無(wú)水乙醇固定并自然晾干，然后每種試劑各顯現(xiàn)10組樣本。

四甲基聯(lián)苯胺顯現(xiàn)方法將配制好的四甲基聯(lián)苯胺溶液倒入培養(yǎng)皿中，深度要適中，大約5～8 mm深為宜，用鑷子夾取固定好的待顯樣本迅速在試劑中浸泡一遍，只要保證樣本完全浸潤(rùn)即可，然后將樣本自然晾干。

DFO顯現(xiàn)方法將配制好的DFO溶液倒入精霧化噴壺中，均勻的噴撒在固定好的待顯樣本上，自然晾干后放入電熱恒溫干燥箱中，用150 ℃溫度加熱1 min，取出樣本在藍(lán)綠光下觀察，指紋呈亮黃色。

茚三酮顯現(xiàn)方法將配置好的茚三酮溶液倒入大小適中的培養(yǎng)皿中，深度適中，用鑷子夾取固定好的待顯樣本迅速的在茚三酮溶液中浸泡一遍，保證樣本完全浸潤(rùn)，自然晾干后用蒸鍋(使用蒸鍋時(shí)注意避免有水珠滴落在樣本上)加熱加濕，保證印痕在短時(shí)間內(nèi)快速顯現(xiàn)出來(lái)。

(2)非滲透性客體方法

顯現(xiàn)分為深色和淺色兩類客體。

淺色客體顯現(xiàn)方法淺色客體顯現(xiàn)試劑有四種，分別是氨基黑10B、考馬斯亮藍(lán)、酸性黃和溴甲酚綠。按照編號(hào)1～60的順序，將氨基黑10B、考馬斯亮藍(lán)、酸性黃和溴甲酚綠的共60組樣本分別用無(wú)水乙醇噴霧固定后自然晾干，然后每種試劑各顯現(xiàn)15組。

氨基黑10B顯現(xiàn)方法將配制好的氨基黑10B溶液倒入培養(yǎng)皿中，深度適中，然后將待顯樣本浸泡在氨基黑10B溶液中，大約3 min將樣本夾出，放入無(wú)水乙醇中漂洗，漂洗過(guò)程中可以輕輕晃動(dòng)容器，將過(guò)量的氨基黑從背景上洗掉。當(dāng)無(wú)水乙醇過(guò)度污染時(shí)，可以處理掉，換為新的溶液。

考馬斯亮藍(lán)和溴甲酚綠的顯現(xiàn)方法參照氨基黑10B顯現(xiàn)方法進(jìn)行操作。

深色客體顯現(xiàn)方法常用試劑為502、二氧化鈦懸浮液和酸性黃。將一組待顯客體直接放入502熏顯箱中熏顯。其他兩組先用無(wú)水乙醇噴霧固定，再放入二氧化鈦懸乳濁液浸泡3 min，之后用無(wú)水乙醇沖洗；將固定后的一組客體放入酸性黃試劑中浸泡3 min后，用專用漂洗液漂洗。

1.3實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3.1正交試驗(yàn)

客體選用3種滲透性客體，兩種非滲透性客體。滲透性客體正交試驗(yàn)：將第一次顯現(xiàn)完的檢材樣本的右半部分分別用其他兩種顯現(xiàn)試劑顯現(xiàn)各5組并做好標(biāo)記；非滲透性客體正交試驗(yàn)：將第一次顯現(xiàn)完的檢材樣本的右半部分分別用其他3種顯現(xiàn)試劑顯現(xiàn)各5組并做好標(biāo)記。

1.3.2遺留時(shí)間實(shí)驗(yàn)

不同客體所做的樣本材料各放入一個(gè)檔案袋低溫、干燥保存，在捺印15天之后進(jìn)行顯現(xiàn)操作。

2結(jié)果與分析

2.1效果比較

將上述客體按滲透性客體和非滲透性客體分為兩組，每組先用上述試劑分別實(shí)驗(yàn)，在按順序?qū)@現(xiàn)結(jié)果正交，得出結(jié)果作出正交表。滲透性客體顯現(xiàn)

效果正交表(見(jiàn)表1)，白紙上正交顯現(xiàn)效果圖(見(jiàn)圖1)、報(bào)紙上正交顯現(xiàn)效果圖(見(jiàn)圖2)。非滲透性客體按淺色和深色客體分類，分別為白色塑料袋和深色塑料袋。顯現(xiàn)效果正交表分別為(表2和表3)，顯現(xiàn)效果圖分別為(圖3和圖4)。

表1　滲透性客體上顯現(xiàn)效果統(tǒng)計(jì)表

注: +++表示紋線非常清楚; ++表示紋線可以鑒定; +表示紋線不清晰；-表示紋線被破壞。

圖1　白紙上正交顯現(xiàn)效果圖

圖2　報(bào)紙上正交顯現(xiàn)效果圖

一次顯現(xiàn)氨基黑考馬斯亮藍(lán)溴甲酚綠酸性黃初顯效果+++++++++二次顯現(xiàn)氨基黑++++-考馬斯亮藍(lán)-+++-溴甲酚綠++++-酸性黃--++

注: +++表示紋線非常清楚; ++表示紋線可以鑒定; +表示紋線不清晰；-表示紋線被破壞。

表3　黑色塑料袋顯現(xiàn)效果統(tǒng)計(jì)表

注: +++表示紋線非常清楚; ++表示紋線可以鑒定; +表示紋線不清晰；-表示紋線被破壞。

圖3　白色塑料袋正交效果圖

圖4　黑色塑料袋顯現(xiàn)效果圖

2.2討論

(1)由于氨基黑、考馬斯亮藍(lán)、溴甲酚綠的易污染背景，所以上述3種方法用于非滲透性客體的顯現(xiàn)中。

(2)對(duì)于滲透性客體，通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)可以得出最佳顯現(xiàn)路線為：DFO+茚三酮，如果背景較為復(fù)雜，由于DFO的顯現(xiàn)條件較為苛刻，可以先用茚三酮后再用DFO顯現(xiàn)。流程圖(見(jiàn)圖5)。

圖5　滲透性客體潛血手印顯現(xiàn)流程圖

(3)對(duì)于深色非滲透性客體，通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)可以得出最佳顯現(xiàn)路線為：酸性黃或502+酸性黃。流程圖(見(jiàn)圖6 )。

參考文獻(xiàn)

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圖6　非滲透性客體潛血手印顯現(xiàn)流程

訊,2013(7):210.

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(責(zé)任編輯陳小明)

中圖分類號(hào)D918.91

作者簡(jiǎn)介陳蕊麗(1968—)，女，吉林長(zhǎng)春人，副教授，碩士生導(dǎo)師。研究方向?yàn)楹圹E檢驗(yàn)技術(shù)。