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    兩種不同脫霉劑的解毒效果對(duì)比研究

    2016-05-18 07:37:29賀淼黃鑫龔阿瓊戴晉軍胡駿鵬
    中國(guó)飼料 2016年24期
    關(guān)鍵詞:肝酶黃曲霉霉菌

    賀淼,黃鑫,龔阿瓊,戴晉軍,胡駿鵬

    福邦酵母技術(shù)專欄

    兩種不同脫霉劑的解毒效果對(duì)比研究

    賀淼,黃鑫,龔阿瓊,戴晉軍,胡駿鵬*

    (安琪酵母股份有限公司,湖北宜昌443000)

    本研究旨在對(duì)比兩種不同脫霉劑的解毒效果。試驗(yàn)采用霉變玉米,以黃曲霉毒素(AFB1)構(gòu)建了中度污染模型,選用320只1日齡櫻桃谷商品代肉鴨,隨機(jī)分為5個(gè)組(每組4個(gè)重復(fù)):A組飼喂基礎(chǔ)日糧,B組飼喂基礎(chǔ)日糧+2 kg/t脫霉劑Ⅰ,C組飼喂霉菌毒素中度污染日糧,D組飼喂霉菌毒素中度污染日糧+2 kg/t脫霉劑Ⅰ,E組飼喂霉菌毒素中度污染日糧+2 kg/t脫霉劑Ⅱ。試驗(yàn)期35 d。結(jié)果表明:(1)C組1~14日齡采食量較B組降低了12.3%(P<0.05),與A組不存在顯著性差異(P≥0.05),D、E兩組的采食量與C組不存在顯著性差異(P≥0.05),B組的采食量與A組也不存在顯著性差異(P≥0.05);(2)B組21、28、35日齡肉鴨的平均體重較對(duì)照組A顯著提高了7.2%、13.2%、9.0%(P<0.05),C組7、14日齡肉鴨的體重較對(duì)照組A降低了9.4%、8.7%(P<0.05),D組35日齡肉鴨體重較C組提高了5.7%(P<0.05),E組各階段肉鴨的體重與C組差異不顯著(P≥0.05);(3)B組14~35日齡肉鴨血清球蛋白含量明顯高于A組(27.30 g/L比24.16 g/L),而C、D、E組處于同一水平;(4)21、35日齡肉鴨血清肝酶谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性的比較中發(fā)現(xiàn),B、D兩組ALT活性與A組無(wú)顯著差異(P>0.05),而C、E兩組的肝酶活性均顯著高于A組(P<0.05)。由此得出,在非霉變?nèi)占Z中,添加脫霉劑Ⅰ改善了肉鴨的增重和血液免疫;而在霉菌毒素中毒狀態(tài)下,肉鴨的采食量降低,增重減少,并且肝臟受到損傷,添加脫霉劑Ⅰ改善了中毒狀態(tài)下肉鴨增重和肝臟損傷,而脫霉劑Ⅱ效果不明顯。

    霉菌毒素;肉鴨;體增重;肝酶;血液免疫

    霉菌毒素中毒是由真菌有毒代謝產(chǎn)物(真菌毒素)所致的一種動(dòng)物毒性。飼料霉菌毒素污染對(duì)家禽的危害巨大,會(huì)導(dǎo)致家禽出現(xiàn)免疫抑制(Kamalavenkatesh等,2005)、產(chǎn)蛋率下降(Wyatt等,1975)、肝臟損傷(Lamont等,1979)、生長(zhǎng)緩慢(Asplin等,1961)、癱瘓和跛行(Okoye等,1988)等。目前飼料廠對(duì)霉菌毒素的控制,一方面是盡量采購(gòu)品質(zhì)良好的原料,另外一方面是在原料倉(cāng)儲(chǔ)的過(guò)程中使用防霉劑,并在一此輕微污染的原料中加脫霉劑一起用于全價(jià)飼料生產(chǎn),脫霉劑在飼料生產(chǎn)中的使用是非常普遍的。但是,目前市場(chǎng)上的脫霉劑產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊,這影響飼料生產(chǎn)廠家對(duì)脫霉劑的使用。因此,本試驗(yàn)通過(guò)研究?jī)煞N不同脫霉劑對(duì)櫻桃谷肉鴨生長(zhǎng)、采食、血液免疫和肝臟保護(hù)的影響,從而以對(duì)比其解毒效果的差異,為飼料廠合理使用脫霉劑提供一定參考和借鑒。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料脫霉劑Ⅰ:葡聚糖含量18%,甘露糖20%,灰分15%;脫霉劑Ⅱ:葡聚糖含量4%,甘露糖5%,灰分75%。

    1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與設(shè)計(jì)

    1.2.1 飼料污染模型的建立霉菌毒素:利用玉米霉變制備。玉米粉碎后,在30℃,濕度80%條件下,每天翻混1~2次,連續(xù)7 d,烘干備用。檢測(cè)霉變玉米所含的AFB1、嘔吐毒素(DON)和玉米赤霉烯酮(ZEN)含量和本地普通玉米的AFB1含量,數(shù)據(jù)如表1所示。

    表1 正常玉米與制備霉變玉米的霉菌毒素含量

    不同污染程度鴨料中霉菌毒素的濃度范圍如表2所示;污染程度判定標(biāo)準(zhǔn)中輕度污染,程度參照限量標(biāo)準(zhǔn),嚴(yán)重污染程度參照5倍限量標(biāo)準(zhǔn)(楊曉飛、陳代文,2007)。

    因此,可以根據(jù)所用霉變玉米的霉菌毒素含量,調(diào)整鴨料日糧中霉變玉米的配比,以使鴨料日糧中霉菌毒素達(dá)到不同濃度,從而建立飼料不同的污染模型,如表3。

    表2 不同污染程度鴨料中霉菌毒素的濃度范圍

    表3 根據(jù)AFB1含量建立的中度污染模型

    1.2.2 試驗(yàn)日糧與分組設(shè)計(jì)試驗(yàn)選用320只1日齡櫻桃谷商品代肉鴨,隨機(jī)分為5個(gè)處理組,每組4個(gè)重復(fù)。A組飼喂基礎(chǔ)日糧;B組飼喂基礎(chǔ)日糧+2 kg/t脫霉劑I;C組飼喂霉菌毒素中度污染日糧;D組飼喂霉菌毒素中度污染日糧+2 kg/t脫霉劑Ⅰ;E組飼喂霉菌毒素中度污染日糧+2 kg/t脫霉劑Ⅱ。

    試驗(yàn)期為35 d。試驗(yàn)日糧配方參照櫻桃谷肉鴨《飼養(yǎng)管理標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定的營(yíng)養(yǎng)水平標(biāo)準(zhǔn),如表4所示;預(yù)混料的配方如表5所示。肉鴨的飼養(yǎng)管理、舍內(nèi)環(huán)境控制依照櫻桃谷肉鴨《飼養(yǎng)管理標(biāo)準(zhǔn)》。由于受母源抗體保護(hù),前期不接種疫苗,僅在14日齡皮下接種禽流感H5疫苗。

    1.3 指標(biāo)測(cè)定

    1.3.1 體增重和采食量平均日增重:入欄前稱初始體重,并于第7、14、21、28、35天上午8點(diǎn)開(kāi)始,試驗(yàn)肉鴨全群稱重(空腹,停料12 h),計(jì)算各階段每只鴨的平均日增重。

    耗料量:記錄各階段的全群肉鴨耗料情況。

    1.3.2 血清球蛋白含量和肝酶活性于14、21、28、35日齡每個(gè)重復(fù)挑選一只肉鴨進(jìn)行采血,送往宜昌市中心醫(yī)院,測(cè)血清球蛋白含量,21日齡、35日齡血清測(cè)定血清肝酶ALT活性。

    1.4 數(shù)據(jù)分析處理試驗(yàn)記錄的數(shù)據(jù)用Excel預(yù)處理后,采用SPSS18.0對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析,采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較,以P<0.05作為差異顯著性的判斷標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

    2 試驗(yàn)結(jié)果

    2.1 不同脫霉劑處理對(duì)肉鴨體增重和采食量的影響各處理組肉鴨1~35日齡的平均體重如表6所示。

    表4 試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

    表5 預(yù)混料組成

    表6 不同處理對(duì)肉鴨體增重的影響

    B組肉鴨21、28、35日齡的平均體重較對(duì)照組A顯著提高了7.2%、13.2%、9.0%(P<0.05),C組肉鴨的7、14日齡體重較對(duì)照組A降低了9.4%、8.7%(P<0.05),D組35日齡肉鴨體重較C組提高了5.7%(P<0.05),E組肉鴨的各階段體重與C組差異不顯著(P≥0.05)。

    各處理組1~35日齡肉鴨的平均日采食量ADFI如表7所示。

    表7 不同處理對(duì)肉鴨平均日采食量的影響

    C組1~14日齡肉鴨采食量較B組降低了12.3%(P<0.05),與A組不存在顯著性差異(P≥0.05);D、E兩組的采食量與C組不存在顯著性差異(P≥0.05);B組的采食量與A組也不存在顯著性差異(P≥0.05)。

    2.2 血清球蛋白含量和肝酶活性

    各處理組14~35日齡肉鴨的血清球蛋白含量如表8所示。

    表8 不同處理對(duì)肉鴨血清球蛋白含量的影響

    14~35日齡肉鴨血清球蛋白含量的比較中發(fā)現(xiàn),B組明顯高于A組(27.30 g/L比24.16 g/L),而C、D、E組處于同一水平。

    各處理組21、35日齡肉鴨的血清肝酶ALT活性如表所示。

    表9 不同處理組肉鴨血清肝酶ALT活性的影響U/L

    在肉鴨21、35日齡血清肝酶ALT活性的比較中發(fā)現(xiàn),B、D兩組與對(duì)照組之間無(wú)顯著差異(P<0.05),而C、E兩組的肝酶活性較對(duì)照組顯著提高(P<0.05)。

    3 討論

    3.1 兩種不同脫霉劑對(duì)肉鴨生長(zhǎng)和采食量的影響霉菌毒素,特別是黃曲霉毒素會(huì)導(dǎo)致家禽生長(zhǎng)受阻(Asplin等,1961)。汪前紅(2011)報(bào)道,日糧中黃曲霉毒素由25 μg/kg遞增至75 μg/kg時(shí),雙頭鬼肉鴨的平均日增重由57.61 g/d遞減至51.05 g/d;溫子瑜(2013)報(bào)道,日糧中黃曲霉毒素由0 μg/kg增至50、100 μg/kg時(shí),櫻桃谷肉鴨21日齡的體重由1214.1 g降低至1084.0、847.0 g。本研究結(jié)果表明,黃曲霉毒素會(huì)導(dǎo)致家禽生長(zhǎng)受阻。日糧中的黃曲霉毒素由4.37 μg/kg增至20.08 μg/kg時(shí),櫻桃谷肉鴨7、14日齡的平均體重顯著降低(P<0.05);而生長(zhǎng)后期21、28、35日齡的肉鴨體重雖然有一定程度降低,但與對(duì)照組沒(méi)有顯著性差異(P≥0.05),可能是因?yàn)楸狙芯慷舅亟M(C組)中黃曲霉毒素的劑量較低。

    另外,本研究表明,添加2 kg/t脫霉劑Ⅰ肉鴨的平均體重較A組顯著提高,緩解了中度霉菌毒素中毒造成的平均體重降低。表明脫霉劑對(duì)肉鴨生長(zhǎng)增重和解毒有積極的作用,這與汪前紅(2011)和溫子瑜(2013)結(jié)果相符,。但是脫霉劑Ⅱ?qū)γ咕舅刂卸緺顟B(tài)下的肉鴨生長(zhǎng)沒(méi)有積極的作用,毒素日糧中添加脫霉劑Ⅱ,肉鴨平均體重反而降低了,這可能與脫霉劑Ⅱ的品質(zhì)有關(guān)。

    霉菌毒素同樣影響肉鴨的采食。何?。?011)報(bào)道,當(dāng)日糧中的霉變玉米比例達(dá)到50%,黃曲霉毒素達(dá)到61.74 μg/kg,肉鴨0~14日齡的ADFI顯著降低(P<0.05);馮光德(2011)報(bào)道,當(dāng)日糧中的黃曲霉毒素達(dá)到130.52 μg/kg,0~14日齡肉鴨的ADFI顯著降低,由61.62 g/d降低至33.36 g/d(P<0.05)。本研究的結(jié)果表明,霉菌毒素污染會(huì)影響肉鴨的采食量,但各處理組間無(wú)顯著性差異(P≥0.05),添加脫霉劑Ⅰ、Ⅱ?qū)θ怿啿墒沉恳膊痪哂酗@著性影響(P≥0.05);這可能與本研究采用的霉變玉米比例較低,霉菌毒素污染日糧的黃曲霉毒素含量較低有關(guān)。

    3.2 兩種不同脫霉劑對(duì)肉鴨體血液免疫和肝臟的影響黃曲霉毒素會(huì)造成機(jī)體出現(xiàn)免疫抑制(Kamalavenkatesh等,2005),免疫抑制通常是指動(dòng)物的免疫應(yīng)答全部清除或降低(陳成章,2008)。家禽霉菌毒素中毒,首先體現(xiàn)的是免疫指標(biāo)降低(Giambrone等,1985),例如血清球蛋白和白蛋白含量降低(Ghosh等,1985)。血清球蛋白,別名免疫血清球蛋白,含有健康肉鴨血清所具有的各種抗體,因而有增強(qiáng)機(jī)體抵抗力預(yù)防感染的作用。血清球蛋白的高低可反映機(jī)體是否出現(xiàn)免疫抑制。本研究的結(jié)果不能說(shuō)明黃曲霉度毒素污染會(huì)引起肉鴨出現(xiàn)免疫抑制,因?yàn)槲廴窘MC 14~35日齡肉鴨的血清球蛋白平均含量并不低于對(duì)照組A,這可能是由于霉菌毒素污染日糧的黃曲霉毒素含量較低。另外,C、D、E組14~35日齡肉鴨的血清球蛋白平均含量處于相同水平,說(shuō)明添加脫霉劑Ⅰ、Ⅱ不足以影響霉菌毒素中毒肉鴨血清的球蛋白含量。但是在正常日糧組中添加脫霉劑Ⅰ提高了14~35日齡肉鴨的血清球蛋白平均含量,表明脫霉劑Ⅰ對(duì)肉鴨的血液免疫有一定的積極作用。

    霉菌毒素污染,會(huì)造成動(dòng)物肝臟損傷(Lamont等,1979),其主要機(jī)理是由于黃曲霉毒素阻礙了脂類從肝臟往外運(yùn)輸,導(dǎo)致了脂肪在肝臟中的沉積,從而造成了脂肪肝,使肝臟指數(shù)上升,肝臟損傷(Cheng等,2001)。谷草轉(zhuǎn)氨酶主要存在于線粒體中,當(dāng)肝細(xì)胞受到損傷時(shí),ALT首先進(jìn)入血液,從而造成血液中ALT活性的增加;因此,ALT活性反映的是肝臟損傷的程度,血清中ALT活性越高,說(shuō)明肝臟損傷的程度越大。本研究結(jié)果表明,當(dāng)肉鴨飼喂正常日糧,21日齡和35日齡肉鴨的血清肝酶ALT活性分別為47 U/L和61 U/L,而霉菌毒素污染組C 21日齡和35日齡肉鴨的血清肝酶ALT活性分別升高至77 U/L和101 U/L,表明霉菌毒素污染組C的肝臟受到一定的損傷。添加脫霉劑Ⅰ的霉菌毒素污染日糧組,21日齡和35日齡肉鴨的血清肝酶ALT活性分別為43 U/L和56 U/L,與對(duì)照組接近,表明添加脫霉劑Ⅰ有助于緩解飼料中度霉菌毒素污染造成的肝臟損傷;而添加脫霉劑Ⅱ的霉菌毒素污染日糧組,21日齡和35日齡肉鴨的血清肝酶ALT活性分別為82 U/L和90 U/L,與霉菌毒素污染組C接近,表明添加脫霉劑Ⅱ并不能緩解飼料中度霉菌毒素污染造成的肝臟損傷。

    4 結(jié)論

    在非霉變?nèi)占Z中,添加脫霉劑Ⅰ可改善肉鴨的增重和血液免疫;而在霉菌毒素中毒狀態(tài)下,肉鴨的采食量降低,增重減少,并且肝臟受到損傷,添加脫霉劑Ⅰ改善了中毒狀態(tài)下肉鴨增重和肝臟損傷,而脫霉劑Ⅱ不能改善。

    [1]陳成章.免疫毒理學(xué)[M].河南:鄭州大學(xué)出版社.2008.

    [2]馮光德.自然霉變玉米對(duì)肉鴨生產(chǎn)性能和消化生理的影響及機(jī)制研究:[碩士學(xué)位論文][D].四川雅安:四川農(nóng)業(yè)大學(xué),2011.

    [3]何健,張克英,陳代文,等.自然霉變玉米對(duì)肉鴨生產(chǎn)性能及免疫功能的影響[J].中國(guó)畜牧雜志,2011,47(19):25~30.

    [4]汪前紅.黃曲霉毒素B1和復(fù)合吸附劑水平對(duì)肉鴨生長(zhǎng)及免疫功能的影響:[碩士學(xué)位論文][D].湖南長(zhǎng)沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué),2011.

    [5]溫子瑜,鄭萍,張克英,等.黃曲霉毒素污染的玉米及吸附劑對(duì)櫻桃谷肉鴨生產(chǎn)性能,血清生化指標(biāo)及器官指數(shù)的影響[J].中國(guó)畜牧雜志,2013,49(3). [6]楊曉飛.四川地區(qū)主要飼料霉菌毒素分布規(guī)律的研究:[碩士學(xué)位論文] [D].四川雅安:四川農(nóng)業(yè)大學(xué),2007.

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    [11]Giambrone J J,Diener U L,Davis N D,et al.Effects of aflatoxin on young turkeys and broiler chickens[J].Poultry Science,1985,64(9):1678~1684.

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    This experiment was conducted to study the effects of two different disinfectants.Based on the content of aflatoxin(AFB1),a mild mycotoxin contamination model was established.A total of 320 1-day-old commercial Cherry Valley ducks were randomly divided into 5 groups(4 replicates per group).Group A was fed basal diet.Group B was fed basal diet+2 kg/t of mildewⅠ.Group C was fed with mycotoxin and moderate contamination diet.Group D was fed with mycotoxin moderately contaminated diets+2 kg/t of mildewⅠ.Group E was fed with mycotoxin moderately contaminated diets+2 kg/t of mildewⅡ.The test period was 35 days.The results show that:(1)The feed intake in group C decreased by 12.3%compared with that in group B(P<0.05),and there was no significant difference between group A and group C,groups C,D and E,group B and group A(P≥0.05).(2)Compared with the control group A the average body weight of group B was increased by 7.2%,13.2%,9.0%at 21,28,35 days(P<0.05).The body weight of ducks in group C decreased by 9.4%and 8.7%at 7,14 days(P<0.05).Compared with group C,body weight of group D was increased by 5.7%(P<0.05).There was no significant difference in body weight between group E and group C(P≥0.05).(3)The serum globulin content in group B was significantly higher than that in group A(27.30 g/L vs 24.16 g/L),while the group C,D and E were at the same level.(4)The serum liver enzyme ALT activity in groups B and D have no significant difference compare with the control group A,C and E were higher than group A.In concluded,adding mildew-free agent to the non-mildew diet improved the weight gain and blood immunization of the ducks.In the mycotoxin-poisoned state,the feed intake and weight loss of the ducks was reduced,and the liver was damaged,The addition of de-mildew I improved the weight gain and liver damage of ducks in the poisoned state,while the effect of the mildew II was not obvious.

    mycotoxin;ducks;body weight gain;liver enzyme;blood immunization

    S816.7

    A

    1004-3314(2016)24-0030-05

    10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20162410

    *通訊作者

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