大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對亞胺培南的耐藥性研究

張美玲　丁健芳　邱淼林

【摘要】 目的：探究大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對亞胺培南耐藥性的研究。方法：收集筆者所在醫(yī)院2012年7月-2014年6月住院患者的標(biāo)本，采用梅里埃vitek 2 compact全自動(dòng)微生物分析儀對大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌進(jìn)行鑒定并行藥敏試驗(yàn)，探討大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對亞胺培南耐藥性變化。結(jié)果：近兩年來，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的檢出率由37.9%上升到45.0%，肺炎克雷伯菌的檢出率由20.0%下降到12.9%；大腸埃希菌平均耐藥率為0.12%，肺炎克雷伯菌平均耐藥率為2.06%，兩者均呈上升趨勢；產(chǎn)ESBLs多耐腸桿菌科菌株仍對亞胺培南保持高度敏感性，但是非產(chǎn)ESBLs菌株對亞胺培南的耐藥率卻呈上升趨勢，尤其是肺炎克雷伯菌，上升趨勢較為顯著。結(jié)論：產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌檢出率呈上升趨勢，肺炎克雷伯菌檢出率呈下降趨勢；但非產(chǎn)ESBLs菌株對亞胺培南的耐藥率卻呈上升趨勢，尤其是肺炎克雷伯菌。因此，院內(nèi)應(yīng)根據(jù)檢測結(jié)果指導(dǎo)臨床合理、逐級選用抗菌藥物，并加強(qiáng)多重耐藥菌監(jiān)測，防止交叉感染。

【關(guān)鍵詞】 超廣譜β-內(nèi)酰胺酶； 亞胺培南； 碳青霉烯酶； KPC酶

中圖分類號 R446.1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1674-6805（2016）8-0051-03

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2016.8.028

近兩年來，福建省人民醫(yī)院因肛腸科大量送檢膿液和分泌物標(biāo)本，使醫(yī)院臨床檢出的細(xì)菌分布始終以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌為主，并常檢出產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）的多藥耐藥菌株及耐亞胺培南的廣泛耐藥菌株。隨著亞胺培南在臨床中的廣泛使用，對亞胺培南耐藥的菌株快速增加，目前，國內(nèi)外均有報(bào)道肺炎克雷伯菌對碳青酶烯類抗菌藥物的耐藥現(xiàn)象[1]。近年來研究指出，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌已成為臨床最常見的多重耐藥菌[2]。為探究大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對亞胺培南的耐藥性變化情況，為臨床醫(yī)生提供合理選擇抗生素依據(jù)，控制耐藥菌擴(kuò)散，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本選擇

選取福建省人民醫(yī)院2012年7月-2014年6月住院患者標(biāo)本分離的大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌。

1.2 儀器與試劑

儀器為梅里埃vitek 2 compact全自動(dòng)微生物鑒定分析儀，GN13檢測卡，由法國生物梅里埃公司生產(chǎn)。標(biāo)準(zhǔn)菌株為大腸埃希菌ATCC25922，培養(yǎng)基由鄭州安圖生物工程有限公司提供。

1.3 菌株分離與鑒定

選取臨床標(biāo)本，按照常規(guī)方法分離菌株，嚴(yán)格按照衛(wèi)生部檢驗(yàn)操作規(guī)程進(jìn)行。獲純培養(yǎng)后采用梅里埃vitek 2 compact全自動(dòng)微生物鑒定分析儀對病菌菌種進(jìn)行鑒定，并做藥物敏感試驗(yàn)。菌株鑒定由檢驗(yàn)科經(jīng)驗(yàn)豐富的醫(yī)師嚴(yán)格按照操作說明進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 產(chǎn)ESBLs菌株檢出情況

近兩年來，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的檢出率由37.9%上升到45.0%，肺炎克雷伯菌的檢出率由20.0%下降到12.9%，詳見表1。

2.2 大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌對亞胺培南的耐藥情況

近兩年來，大腸埃希菌平均耐藥率為0.12%，肺炎克雷伯菌平均耐藥率為2.06%，兩者均呈上升趨勢，詳見表2。

2.3 產(chǎn)ESBLs與非產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對亞胺培南的耐藥情況

近兩年來，產(chǎn)ESBLs多耐腸桿菌科菌株仍對亞胺培南保持高度敏感性，但是非產(chǎn)ESBLs菌株對亞胺培南的耐藥率卻呈上升趨勢，尤其是肺炎克雷伯菌，上升趨勢較為顯著，詳見表3。

3 討論

研究指出，醫(yī)院內(nèi)臨床檢出率最高病菌為大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌，主要原因?yàn)闄z查分泌物和膿液標(biāo)本增加，兩種病菌檢出率約占整個(gè)病菌50%[3]。本次研究得出，近兩年來，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌檢出率呈逐年上升趨勢，2014年上半年檢出率達(dá)到45.0%，而產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌檢出率呈逐年下降趨勢，由20.0%下降為12.9%。兩者檢出率總和雖占主要臨床主要檢出率，但表明產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌檢出率呈上升趨勢，而產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌檢查率呈下降趨勢。

大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌為產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的代表病株，近年來隨著大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌臨床檢出率增加，產(chǎn)ESBLs的多耐藥菌株也隨之增加。臨床研究指出，亞胺培南對ESBLs革蘭氏陰性桿菌有強(qiáng)效殺滅作用，被作為控制多重耐藥菌的最后防線[4]。因此，亞胺培南是臨床中作為治療ESBLs和頭孢菌素酶（AmpC）等多重耐藥菌株的首選藥物[5]。但亞胺培南在臨床中應(yīng)用不合理，導(dǎo)致部分細(xì)菌產(chǎn)生可水解β-內(nèi)酰胺類抗生素的碳青霉烯酶，消滅藥物作用，從而產(chǎn)生耐藥性，同時(shí)也導(dǎo)致耐碳青霉烯酶類腸桿菌科呈上升趨勢。本次研究得出，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌耐藥性均呈上升趨勢，分別為0.12%、2.06%；產(chǎn)ESBLs多耐腸桿菌科菌株對亞胺培南保持高度敏感性，但非產(chǎn)ESBLs菌株對亞胺培南的耐藥率卻呈上升趨勢，尤其是肺炎克雷伯菌，上升趨勢較為顯著。

腸桿菌科細(xì)菌對碳青霉烯類抗生素的耐藥機(jī)制較為復(fù)雜，結(jié)合國內(nèi)外研究總結(jié)主要為以下原因：（1）產(chǎn)生碳青霉烯酶，如VIM型、IMP型金屬酶及KPC型碳青霉烯酶等；（2）AmpC酶和/或ESBL在過度表達(dá)的同時(shí)導(dǎo)致外膜孔蛋白嚴(yán)重丟失；（3）外排泵呈高表達(dá)形成膜屏障作用[6]；（4）藥物靶位改變。但大量研究指出，產(chǎn)碳青霉烯酶為腸桿菌科細(xì)菌對碳青霉烯酶類耐藥最主要的機(jī)制[7-9]。但研究表明，我國對亞胺培南耐藥大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌主要為肺炎克雷伯菌所產(chǎn)生的碳青霉烯酶（KPC）[10]。KPC可抵抗碳青霉烯類抗生素的殺菌作用，且可將該酶基因編碼于線粒體上，KPC編碼質(zhì)?？蓡为?dú)或在細(xì)菌細(xì)胞間轉(zhuǎn)移引起碳青霉烯類耐藥。

綜上所述，腸桿菌科細(xì)菌檢出率呈逐年上升趨勢，并對亞胺培南耐藥性逐年升高，給臨床抗生素治療感染性疾病帶來嚴(yán)重挑戰(zhàn)。對于感染患者，臨床醫(yī)師應(yīng)及時(shí)送檢標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)鑒定，并根據(jù)藥敏試驗(yàn)進(jìn)行抗生素選擇，降低耐藥性。同時(shí)臨床中應(yīng)加大對各種細(xì)菌進(jìn)行抗菌藥物分析，根據(jù)研究結(jié)果指導(dǎo)臨床醫(yī)師對抗生素的選擇。最后，加強(qiáng)多重耐藥菌監(jiān)測和防控，減少耐藥菌株產(chǎn)生與擴(kuò)散。

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（收稿日期：2015-11-13）