滋陰通絡顆粒中柚皮苷的含量測定

薛曉娜，李慧峰，荊 然，程艷剛，裴妙榮

（山西中醫(yī)學院，山西太原030024）

滋陰通絡顆粒中柚皮苷的含量測定

薛曉娜，李慧峰，荊 然，程艷剛，裴妙榮

（山西中醫(yī)學院，山西太原030024）

目的：建立測定滋陰通絡顆粒中柚皮苷含量的HPLC法。方法：采用Diamonsil C18柱（200mm×4.6mm，5μm）色譜柱；以甲醇-0.5%冰醋酸溶液為流動相，流速為1.0 mL/min，柱溫為30℃，檢測波長為283 nm。結果：柚皮苷在0.086～1.72μg范圍內呈良好的線性關系，r=0.999 5；平均回收率為99.54%；RSD為1.60%（n=6）。結論：該方法簡便、準確、靈敏度高、重復性好、穩(wěn)定性高，可作為該制劑含量的測定方法。

滋陰通絡顆粒；柚皮苷；HPLC；含量測定

滋陰通絡顆粒由生地黃、麥冬、枳實、當歸、甘草等九味中藥組成，具有滋陰清熱、通腑醒神的作用，用于腦血管病早期或后遺癥期津虧熱結、腑氣不通等癥的治療。為了建立該制劑的質量標準，本文采用HPLC法對處方中枳實的有效成分柚皮苷進行了含量測定，現報道如下。

1 實驗材料

1.1 實驗儀器

Waters2695（美國）高效液相色譜儀，Waters2998紫外二極管陣列檢測器，Empower色譜工作站（美國沃特世公司）。AB135-S電子天平（十萬分之一，瑞士METTLER TOLEDO）；SB-5200DTDN型超聲波清洗機（寧波新芝生物科技股份有限公司）；DHG-9075A型電熱恒溫鼓風干燥箱（上海一恒科學儀器有限公司）。

1.2 試劑與藥材

滋陰通絡顆粒（3批，批號分別為20130718、20130719、20130720）由山西中醫(yī)學院中藥化學教研室提供；柚皮苷對照品（批號：110722-201111，中國藥品生物制品檢定所）；流動相所用甲醇為色譜純，水為娃哈哈純凈水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱為Diamonsil C18柱（200 mm×4.6 mm，5 μm），流動相為甲醇-0.5%冰醋酸溶液（33∶67），流速為1.0mL/min，柱溫為30℃，檢測波長為283 nm。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備 取柚皮苷對照品適量，精密稱定，置10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，制成每毫升含柚皮苷1.72mg的溶液，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備 取本品內容物適量，研細，取約0.8 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定重量，超聲處理（功率150W，頻率40 KHz）30 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.3 陰性對照品溶液的制備 取缺枳實藥材的滋陰通絡顆粒陰性樣品適量，研細，取約0.8 g，精密稱定，照供試品溶液制備方法制備，即得。

2.3 方法學考察

2.3.1 專屬性試驗 分別精密吸取滋陰通絡顆粒對照品溶液、供試品溶液和陰性對照溶液各10μL，在“2.1色譜條件”下注入液相色譜儀中進行測定，測定結果顯示，供試品溶液中柚皮苷色譜峰達到完全分離，陰性對照溶液中相應位置無干擾。結果見圖1～圖3。

圖1 柚皮苷對照品色譜圖

圖2 供試品溶液色譜圖

圖3 陰性對照溶液色譜圖

2.3.2 線性關系的考察 精密吸取柚皮苷對照品溶液（0.086 mg/mL）0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.6、2.0 mL至2mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，得不同濃度的對照品溶液。分別進樣10μL，測定峰面積積分值。以峰面積積分值y為縱坐標，進樣量x為橫坐標做標準曲線，得一直線回歸方程：y=1 759.3x-19 667，r= 0.999 5，結果表明，柚皮苷進樣量在86～1 720 ng范圍內與峰面積呈良好線性。

2.3.3 精密度實驗 精密吸取柚皮苷對照品溶液（0.086 mg/mL）10μL，分別進樣6次，測定峰面積積分值。測得柚皮苷含量的RSD=0.31%，表明精密度良好。

2.3.4 穩(wěn)定性實驗 取供試品溶液（批號20130719）在0、2、4、6、8、10、12 h分別進樣10μL，測得樣品中柚皮苷峰面積積分值。得柚皮苷含量的RSD=1.17%，表明供試品溶液在12 h內穩(wěn)定性良好。

2.3.5 重復性實驗 按擬定的含量測定方法，對同一批樣品（批號20130719）分別制備6份供試品溶液，精密吸取10μL進樣，測定峰面積積分值并計算含量，得RSD=1.70%。表明該方法重復性良好。

2.3.6 回收率實驗 采用加樣回收法實驗，精密稱取已知含量的樣品（批號20130719，5.55mg/g）6份，分別精密添加柚皮苷對照品適量，按樣品測定項下操作，計算回收率，結果平均加樣回收率為99.54%，RSD=1.60%（n=6）。結果見表1。

表1 回收率實驗結果

2.3.7 樣品的含量測定 按上述方法對3批樣品進行柚皮苷含量測定，結果見表2。

表2 樣品中柚皮苷含量測定結果

3 討 論

本實驗所用的對照品為柚皮苷，在流動相的選擇時，首先參考2010版《中國藥典》［1］中化橘紅的測定方法選擇甲醇-醋酸-水（35∶4∶61）為流動相，但是此條件下色譜峰不能達到很好的分離，參考文獻［2］，并通過多次實驗比較最終確定以甲醇-0.5%冰醋酸溶液（33∶67）進行洗脫，結果較好。

本實驗采用HPLC法，建立了滋陰通絡顆粒中柚皮苷含量測定的方法。實驗方法的線性、精密度、穩(wěn)定性和重復性等方法學考察結果良好，操作簡便可行，可以作為該制劑含量測定的有效方法。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：80-81.

［2］盛華剛.HPLC測定枳實薤白桂枝湯顆粒中柚皮苷的含量［J］.食品與藥品，2013（2）：126-128.

（編輯：翟春濤）

Determ ination of naringin in Ziyin Tongluo granules by HPLC

Xue Xiaona，Li Huifeng，Jing Ran，Cheng Yangang，PeiMiaorong
（ShanxiCollege of TCM，Taiyuan Shanxi030024）

Objective：To establish amethod for determining the content of naringin in Ziyin Tongluo granules by HPLC. Method：The separation was performed on Diamonsil C18（200mm×4.6mm，5μm），and themobile phasewas consisted of a methanol-0.5%Glacial acetic acid with a flow-rate of 1.0 mL/min.The temperature was 30℃and the detection wavelength was at 283 nm.Results：Naringin was in good linear in the range of 0.086～1.72μg，r=0.999 5，and the average recovery rate was 99.54%，RSD=1.60%（n=5）.Conclusion：The method is simple，reliable and good repeatability and could be used for determination of the Ziyin Tongluo granules.

Ziyin Tongluo granules；naringin；HPLC；content determination

R285

A

1671-0258（2016）01-0031-02

薛曉娜，在讀碩士，E-mail：755268028@qq.com

裴妙榮，教授，博士研究生導師，E-mail：peimr602@163.com