雙葉制劑生產(chǎn)工藝研究

王蓮，肖繼椿，田垚，王嵐，張榮泉（天津市醫(yī)藥科學(xué)研究所，天津300020）

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雙葉制劑生產(chǎn)工藝研究

王蓮，肖繼椿，田垚，王嵐，張榮泉*
（天津市醫(yī)藥科學(xué)研究所，天津300020）

摘要：建立功能食品雙葉顆粒的生產(chǎn)工藝。以柿葉與山楂葉為主要原料，采用L9（34）正交試驗(yàn)篩選最佳的原料提取及生產(chǎn)工藝，制備成為雙葉顆粒。雙葉制劑的最佳提取條件為：提取溶劑純凈水，提取時(shí)間1.5 h，提取固液比為1∶8（g/mL），提取次數(shù)為3次；最佳生產(chǎn)工藝為：制劑輔料選擇淀粉、糊精和糖粉，配比1∶1∶1（g∶g∶g），使用65 %乙醇作為潤(rùn)濕劑制劑。按照試驗(yàn)確定的最佳工藝參數(shù)，可制備得到質(zhì)量穩(wěn)定、服用方便的功能食品-雙葉顆粒。

關(guān)鍵詞：柿葉；山楂葉；生產(chǎn)工藝

柿葉系柿樹科（Ebenaceae）柿樹屬（Diospyros）植物柿（Diospyros kaki L.f.）的新鮮或干燥葉子，具有清熱解毒、潤(rùn)肺強(qiáng)心、鎮(zhèn)咳止血、抗癌防癌等多種醫(yī)療保健功能[1]；山楂葉系薔薇科植物山里紅（Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.）或山楂（Crataegus pinnatifida Bge.）的干燥葉，能夠消食健胃、行氣散瘀[2]。我國(guó)是世界上最主要的柿樹和山楂樹生產(chǎn)國(guó)，二者葉片資源十分豐富。但是長(zhǎng)期以來，人們對(duì)于山楂樹和柿樹的利用主要集中于果實(shí)之上，大量的葉片資源易被忽視，多以堆成農(nóng)家肥、喂牛羊或放火燒掉，難以得到有效的利用及其開發(fā)。本文特提出對(duì)者易被忽視的葉片資源配方提取制粒工藝，探討以二葉片的提取物為原料配以輔料，通過工藝試驗(yàn)研究，研發(fā)制備出具有防治高脂血癥及預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化功能且質(zhì)量穩(wěn)定、服用方便的功能食品雙葉顆粒。

1　材料與儀器

1.1材料與試劑

柿葉與山楂葉：均產(chǎn)自天津市薊縣黃崖關(guān)，經(jīng)鑒定為柿科植物柿的干燥葉及薔薇科植物山楂的干燥葉，自然晾干。

微晶纖維素：遼寧奧達(dá)制藥有限公司；乳糖：DAVISCO FOODS INTERNATIONAL.INC；玉米淀粉：河北海玉食品有限責(zé)任公司；糊精：遼寧奧達(dá)制藥有限公司；砂糖：廣東恒福糖業(yè)集團(tuán)有限公司；粉碎，過100目篩網(wǎng)。

甲醇（優(yōu)級(jí)純）、無水乙醇、苯、石油醚均為分析純：天津市化學(xué)試劑批發(fā)公司；聚酰胺粉（100-200目）：江蘇長(zhǎng)豐化工有限公司；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品（10080-200707）：中國(guó)藥品生物制品鑒定所。

1.2儀器與設(shè)備

SPECORD 210 PLUS紫外可見光分光光度計(jì)：德國(guó)耶拿；AB204-E電子天平（精確值0.000 1 g）：METTLER TOLEDO；KQ-100超聲波清洗器：昆山市超聲儀器有限公司；DL-203B電熱干燥箱：天津?qū)嶒?yàn)儀器廠；LDZ5-2低速自動(dòng)平衡離心機(jī)：北京京立離心機(jī)有限公司。

2　方法

2.1雙葉顆粒的制備

將采集得到的柿葉、山楂葉分別干燥粉碎為粗粉，用適當(dāng)溶劑進(jìn)行煎煮提取，提取液濃縮為浸膏，加入規(guī)定濃度與用量的潤(rùn)濕劑，攪拌制軟材，14目篩網(wǎng)制粒，60℃干燥后整粒，并篩除細(xì)粉，備用。

2.2提取工藝研究

柿葉、山楂葉均為葉片型原料，纖維含量較多，直接制劑服用，功效成分不易釋出，故擬采用純凈水作為提取溶劑，對(duì)干燥后的柿葉和山楂葉進(jìn)行煎煮提取，濃縮成為浸膏后進(jìn)行制劑。本研究以雙葉浸膏的總黃酮含量作為考察指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，篩選原料最佳提取工藝。

根據(jù)柿葉、山楂葉功效成分的性質(zhì)，針對(duì)提取時(shí)間、提取固液比、提取次數(shù)3個(gè)主要影響因素，選用L9（34）正交試驗(yàn)篩選最佳水提工藝，正交試驗(yàn)因素水平見表1。

表1原料提取工藝試驗(yàn)因素水平表Table 1 The factors and levels of the raw material extraction experiment

根據(jù)設(shè)定的因素和水平，對(duì)柿葉和山楂葉進(jìn)行提取與濃縮，制備浸膏，以其總黃酮含量作為考察指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2.3制劑工藝研究

顆粒劑產(chǎn)品的顆粒成型性受到多方面條件的影響，其中原輔料、溶媒等影響較大。本部分試驗(yàn)以干燥后的柿葉與山楂葉的提取浸膏為主料，考察輔料為淀粉（D）、糊精（H）、糖粉（T）、乳糖（R）、微晶纖維素（W），使用不同濃度的食用乙醇作為潤(rùn)濕劑進(jìn)行制劑，通過L9（34）正交試驗(yàn)篩選最佳制劑工藝配方，正交試驗(yàn)因素水平見表2。

為判定各因素水平對(duì)制粒過程中顆粒成型的影響，以成品率、溶化性、粘網(wǎng)程度、粒型狀況等作為考察指標(biāo)，量化為分?jǐn)?shù)值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

表2制劑工藝試驗(yàn)因素水平表Table 2 The factors and levels of the preparation experiment

表3制劑工藝試驗(yàn)量化分值Table 3 The quantitative score of the preparation experiment

2.4總黃酮含量測(cè)定

柿葉和山楂葉中含有豐富的黃酮類化合物，文獻(xiàn)報(bào)道可有效調(diào)節(jié)體內(nèi)脂代謝功能，故本文將總黃酮含量作為該顆粒質(zhì)量控制的重要標(biāo)志成分。

2.4.1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線制作

精密稱取蘆丁對(duì)照品約20.0 mg，加甲醇溶解并定容至100 mL，得蘆丁對(duì)照品溶液。分別吸取0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL蘆丁對(duì)照品溶液于25 mL量瓶中，加水至6 mL，加入5 %亞硝酸鈉溶液1 mL，搖勻，放置6 min，加10 %硝酸鋁溶液1 mL，搖勻，放置6 min，加氫氧化鈉溶液10 mL，搖勻，加水至刻度，放置15 min，以0.0 mL對(duì)照品溶液制得的溶液作為空白，于波長(zhǎng)510 nm比色測(cè)定，進(jìn)行線性關(guān)系考察，計(jì)算回歸方程。2.4.2供試品總黃酮含量測(cè)定

依據(jù)確定的最佳工藝提取了3批浸膏，按照制劑工藝制成雙葉顆粒（批號(hào)為：201401、201402、201403）。精密稱取顆粒約1.0 g，置索氏提取器中，加入石油醚加熱回流提取至提取液無色，棄去石油醚液，樣渣揮去石油醚，轉(zhuǎn)移至具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 mL，密塞，稱定重量，超聲處理30 min，放冷至室溫，用甲醇補(bǔ)足重量，搖勻，離心，取上清液為供試品溶液，并于波長(zhǎng)510 nm處比色測(cè)定，計(jì)算總黃酮含量。

3　試驗(yàn)結(jié)果

3.1提取工藝研究

柿葉與山楂葉水提工藝的正交試驗(yàn)結(jié)果及方差分析見表4和表5。

表4原料提取工藝試驗(yàn)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)果Table 4 The orthogonal design and results of the raw material extraction experiment

表5原料提取工藝試驗(yàn)方差分析Table 5 The ANOVA results of the raw material extraction experiment

通過對(duì)正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，篩選出柿葉和山楂葉的最佳水提工藝為A2B2C3，即提取時(shí)間1.5 h，提取固液比為1∶8（g/mL），提取次數(shù)為3次。其中，提取次數(shù)對(duì)總黃酮提取率影響最大，其次是提取固液比，相對(duì)影響最小的是提取時(shí)間。

3.2制劑工藝研究

選擇最佳制劑工藝配方的正交試驗(yàn)結(jié)果及方差分析結(jié)果見表6和表7。

表6制劑工藝試驗(yàn)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)果Table 6 The orthogonal design and results of the preparation experiment

續(xù)表6制劑工藝試驗(yàn)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)果Continue table 6 The orthogonal design and results of the preparation experiment

表7制劑工藝試驗(yàn)方差分析Table 7 The ANOVA results of the preparation experiment

正交試驗(yàn)篩選出的最佳制劑工藝為A1B2C1，即輔料選擇淀粉、糊精和糖粉，配比1∶1∶1（g∶g∶g），使用65 %乙醇作為潤(rùn)濕劑制劑，其中，不同輔料配比對(duì)制劑工藝影響最大。按照確立的制劑處方及工藝制備雙葉顆粒，效果良好。

3.3總黃酮含量測(cè)定

3.3.1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線

以吸光度（A）為縱坐標(biāo)，蘆丁對(duì)照品溶液濃度（μg/mL）為橫坐標(biāo)繪制蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖1），線性回歸方程為y＝0.012 8x－0.005 3（R2＝0.999 7）。結(jié)果表明，蘆丁試樣在0.00 μg/mL～45.60 μg/mL濃度范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。

圖1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線圖Fig.1 The standard curve of rutin

3.3.2供試品總黃酮含量測(cè)定

對(duì)雙葉顆粒試樣分別進(jìn)行比色測(cè)定，計(jì)算總黃酮含量，結(jié)果見表8。

表8供試品測(cè)定結(jié)果Table 8 The results of total flavonoids detected

4　結(jié)論

1）本文以柿葉和山楂葉為主要原料，通過試驗(yàn)確定了雙葉制劑的最佳提取條件為：提取溶劑純凈水，提取時(shí)間1.5 h，提取固液比為1∶8（g/mL），提取次數(shù)為3次；最佳生產(chǎn)工藝為：制劑輔料選擇淀粉、糊精和糖粉，配比1∶1∶1（g∶g∶g），使用65 %乙醇作為潤(rùn)濕劑進(jìn)行制劑。以此工藝參數(shù)制備得到的功能食品雙葉顆粒色澤均勻一致，粒型適宜，質(zhì)量穩(wěn)定，為柿葉、山楂葉的配方配伍及加工利用提供了一條新途徑。

2）總黃酮的提取方法多為醇性溶劑提取[3-4]，其優(yōu)點(diǎn)是提取效率較高，但也存在提取過程醇消耗量大、生產(chǎn)成本高、易產(chǎn)生溶劑殘留等缺點(diǎn)；本文所采用水提法提取率相對(duì)較低，但其生產(chǎn)成本低廉、操作簡(jiǎn)便、無溶劑殘留，且安全生產(chǎn)性能高，在工業(yè)化大生產(chǎn)中更具有優(yōu)勢(shì)。

3）本文以L9（34）正交試驗(yàn)確定原料葉片的最佳水提工藝為提取時(shí)間1.5 h，提取固液比為1∶8（g/mL），提取次數(shù)為3次，雖然提取次數(shù)增加有可能進(jìn)一步提高原料的提取率（包括黃酮類等），但考慮到實(shí)際生產(chǎn)條件及能耗消耗等問題，故確定最佳提取次數(shù)為3次。

4）提取浸膏在制備顆粒的過程中，需考慮浸膏制成軟材的均勻性問題，經(jīng)試驗(yàn)反復(fù)摸索，需要將浸膏熱熔，再加入適量的食用酒精，當(dāng)呈現(xiàn)稠狀混合膏狀，方可加入一定比例的輔料，制作軟材，顆粒的均勻性才可得以保障，否則易出現(xiàn)顆粒色澤不均勻，干燥后顆粒總黃酮含量的測(cè)定結(jié)果差異較大的問題。

參考文獻(xiàn)：

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[3]王寧,李遠(yuǎn)志,徐莉珍,等.超聲波法提取柿葉總黃酮的工藝研究[J].現(xiàn)代食品科技,2008,24(7):687-690

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《食品研究與開發(fā)》是由天津市食品研究所有限公司和天津市食品工業(yè)生產(chǎn)力促進(jìn)中心主辦，國(guó)內(nèi)外公開發(fā)行的食品專業(yè)科技期刊，于1980年創(chuàng)刊，現(xiàn)為半月刊，采用國(guó)際流行開本大16開。其專業(yè)突出，內(nèi)容豐富，印刷精美，是一本既有基礎(chǔ)理論研究，又包括實(shí)用技術(shù)的刊物。本刊已被“萬方數(shù)據(jù)庫”、“中文科技期刊數(shù)據(jù)庫”、《烏利希期刊指南》、美國(guó)《化學(xué)文摘》、英國(guó)國(guó)際農(nóng)業(yè)與生物科學(xué)研究中心（CABI）等知名媒體收錄，并被列入“中文核心期刊”、“中國(guó)科技核心期刊”、RCCSE中國(guó)核心學(xué)術(shù)期刊（A）。主要欄目有：基礎(chǔ)研究、分離提取、食品研發(fā)、工藝技術(shù)、天然產(chǎn)物、檢測(cè)分析、生物工程、營(yíng)養(yǎng)保健、貯藏保鮮、質(zhì)量安全、專題論述、食品機(jī)械等。

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Study on Production Technology of Shuangye Preparation

WANG Lian，XIAO Ji-chun，TIAN Yao，WANG Lan，ZHANG Rong-quan*
（Tianjin Institute of Pharmaceutical and Medical Science，Tianjin 300020，China）

Abstract：To develop a production technology of Shuangye granule. Persimmon leaf and hawthorn leaf were used as raw material to prepare Shuangye granule，and the optimum extraction and production techniques were

beselectedby L9（34）orthogonaltest.Theoptimumextractionconditionof Shuangyepreparationwas：theextraction solvent was purified water，extraction time 1.5 h，extraction solid-liquid ratio 1∶8（g/mL），extraction times 3；

and the optimum production technology was：the excipients were starch，dextrin and powdered sugar，

excipients radio 1∶1∶1（g∶g∶g），the wetter was 65 % ethanol. The granule with stable quality and easy taking can be prepare by the optimal production technology.

Key words：persimmon leaf；hawthorn leaf；production technology

收稿日期：2015-12-10

*通信作者：張榮泉（1964—），男，研究員，研究方向：中藥、天然藥物的開發(fā)及研究、保健食品的研究開發(fā)申報(bào)及生產(chǎn)。

作者簡(jiǎn)介：王蓮（1982—），女（漢），助理研究員，碩士，主要從事天然產(chǎn)品和保健食品的研發(fā)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2016.03.032