飼料磷脂水平對蘇氏圓腹血清生化指標和肌肉磷脂含量的影響

麻艷群++黃凱++于丹++陳濤

摘要：研究飼料磷脂水平對蘇氏圓腹血清生化、肌肉磷脂等生理機制的影響。將900尾蘇氏圓腹（Pangasius sutchi）[初始體質(zhì)量約（1.45±0.08）g/尾]隨機分成5組，分別投喂5組飼料，各組磷脂水平分別為0%（PL0組）、1%（PL1組）、2%（PL2組）、3%（PL3組）、4%（PL4組）。結(jié)果表明：（1）各組間血清磷脂含量差異不明顯；（2）PL4組的膽固醇含量最低，為（5.53±0.23） mmol/L；（3）蘇氏圓腹肌肉磷脂含量隨飼料磷脂水平的升高而升高?？梢钥闯觯猴暳现刑砑恿字苡行ё柚鼓懝檀荚谘軆?nèi)壁沉積，促進脂類的代謝；同時相應增加蘇氏圓腹幼魚肌肉中貯存的磷脂量，從而滿足魚體生長需要、提高蘇氏圓腹肉的品質(zhì)風味。

關鍵詞：磷脂；蘇氏圓腹；血清生化指標；肌肉磷脂

中圖分類號： S963.16+1文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2016）02-0274-03

收稿日期：2015-01-13

基金項目：廣西自然科學基金（編號：2012GXNSFBA053053）；廣西大學科研基金（編號：XBZ130020）。

作者簡介：麻艷群（1980—），女，廣西南寧人，博士，副教授，主要從事水產(chǎn)動物營養(yǎng)與生理的研究。E-mail：mayanqun@163.com。 蘇氏圓腹（Pangasius sutchi）是我國新興的一種名貴淡水養(yǎng)殖品種，屬鲇形目科圓腹屬，別稱巴沙魚、虎頭鯊、暹羅河鲇或八珍魚，原產(chǎn)于馬來西亞、泰國等地[1-2]，近幾年來我國開始引種馴養(yǎng)。蘇氏圓腹在生長過程中，腹腔內(nèi)會逐漸積累出3塊較大的油脂肪，可達體質(zhì)量的5%～8%，這一特征在其他魚類中極為罕見。蘇氏圓腹在越南等地因此被稱為卡巴沙——三塊脂肪魚，該魚肉質(zhì)細嫩，無細小骨刺，口感鮮美，同時在其類似海鯊的軟骨組織中含有營養(yǎng)及藥用價值頗高的硫酸軟骨素，被譽為飲食中的“軟黃金”，具有廣闊的市場前景[3]。

國外對蘇氏圓腹的研究報道不多，關于蘇氏圓腹營養(yǎng)需求方面的研究報道較少。Zainuddin用4種含磷水平（0.151%、0.658%、1.162%、1.664%）的等能、等氮的日糧飼喂初始體質(zhì)量為（0.600+0.014）g的蘇氏圓腹幼魚 56 d，發(fā)現(xiàn)魚體、魚骨中的磷、鈣、鎂濃度隨日糧中磷水平的升高（0.151%～1.162%）而升高[4]。在我國，由于蘇氏圓腹引進的時間不長，因此目前國內(nèi)對蘇氏圓腹的研究多數(shù)集中在人工繁殖試驗[5-6]，池塘、網(wǎng)箱或水泥池養(yǎng)殖模式[7-10]，以及工廠化養(yǎng)殖技術[11]的初探上，對營養(yǎng)需求、機體生理機能方面的研究很少。

磷脂是魚類尤其是仔稚魚生長的重要營養(yǎng)因子；另一方面，磷脂也是重要的香味前體物質(zhì)，肌肉中磷脂含量的多少會直接影響肉的品質(zhì)風味。

本試驗用不同水平磷脂飼料飼喂蘇氏圓腹，研究各組血清生化指標、血清磷脂含量和肌肉磷脂含量的變化規(guī)律，以期通過營養(yǎng)調(diào)控方式，為今后在蘇氏圓腹人工飼料中添加磷脂、推廣養(yǎng)殖蘇氏圓腹提供必要的理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1試驗用魚蘇氏圓腹（Pangasius sutchi）由廣西水產(chǎn)引育種中心提供。馴養(yǎng)7 d后選擇健康、狀態(tài)佳的魚苗900尾，初始體質(zhì)量約（1.45±0.08） g/尾，隨機分成5組，每組設3個重復，每個重復60尾，將每個重復的魚放養(yǎng)于1個水泥池（規(guī)格為1.52 m×1.00 m×1.00 m）中。

1.1.2飼料在基礎飼料中添加不同比例的大豆磷脂（磷脂含量75%），配制成5組試驗飼料，各組飼料組成、營養(yǎng)組成分別見表1、表2，各組磷脂水平分別為0%（PL0組）、1%（PL1組）、2%（PL2組）、3%（PL3組）、4%（PL4組）。

1.2飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)周期為56 d，各組使用相應的飼糧。每天9：00、17：00 投喂，投喂量一般為魚體質(zhì)量的3%，以每次投食在1 h內(nèi)吃完為宜。飼養(yǎng)期間于每日清晨投喂前用虹吸法吸出飼料殘渣、糞便，測定水溫、pH值、溶解氧含量、氨態(tài)氮含量，觀察記錄各池魚體活動及采食情況。

1.3測定指標及方法

1.3.1血清生化指標的測定飼養(yǎng)試驗結(jié)束后，每個重復取10尾魚，尾靜脈抽血，4 000 r/min離心10 min，取上清，使用美國邁瑞B(yǎng)S-300全自動生化分析儀測定相關血清生化指標。采用紫外-蘋果酸脫氫酶法測定谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）活性、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase，AST）活性；用氧化酶法測定甘油三酯（triglyceride，TG）含量；用CHOD-PAP法測定膽固醇（cholesterol，CHOL）含量；用直接選擇抑制法測定高密度脂蛋白（high density lipoprotein cholesterol，HDLC）含量、低密度脂蛋白（low density lipoprotein cholesterol，LDLC）含量；用連續(xù)監(jiān)測法測定淀粉酶（amylase，AMY）活性；用乳酸-丙酮酸法測定乳酸脫氫酶（LDH）活性；用酶顯色法測定磷脂（phospholipid，PL）含量。

1.3.2肌肉磷脂的測定取2 g左右的肌肉樣品，加入Folch液（三氯甲烷 ∶甲醇=2 ∶1）5 mL，研磨組織樣；隨后轉(zhuǎn)到圓底燒瓶中，加15 mL Folch液，回流2 h；過濾液體，裝入25 mL容量瓶定容。從容量瓶中取10 mL溶液，用氮氣吹干，稱總脂質(zhì)量。而后采用溶劑法（即液-液分離法）將總脂分離為極性脂（主要是磷脂）、中性脂，2個液相分別為石油醚（90 ～120 ℃，上層）、95%的含水甲醇（下層）。具體步驟：（1）制備飽和的上述2個液相，按1 ∶1比例等體積加至總脂中，充分振蕩后靜置分層，移去下層甲醇溶液；再用等量的甲醇重復前面操作2次，將極性脂、中性脂徹底分離。在甲醇中的為極性脂（即磷脂），在石油醚層中的為中性脂。將含極性脂的甲醇溶液用氮氣吹干并準確稱質(zhì)量，計算肌肉磷脂含量：

肌肉磷脂含量=磷脂質(zhì)量肌肉鮮樣質(zhì)量×100%。

以上各測定指標中用到的各種化學試劑均為分析純，水為蒸餾水。

1.4數(shù)據(jù)處理與分析

數(shù)據(jù)均以“平均值±標準誤差”表示。用SPSS 11.5軟件對所有數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，結(jié)合Duncans多重比較法，顯著水平為0.05。

2結(jié)果與分析

2.1飼料磷脂水平對蘇氏圓腹血清生化指標的影響

由表3可知，各組間血清磷脂含量差異不明顯；PL4組的膽固醇含量最低，為（5.53±0.23）mmol/L；甘油三酯、高密度脂蛋白含量基本隨著飼料磷脂水平的提高而降低；PL4組的低密度脂蛋白含量最低，但與其他4組差異不明顯。

由表3還可以看出，PL4組的谷草轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶活性最低，分別為（438.90±3.00）、（748.10±52.50） U/L，與其他4組差異顯著（P<0.05）。淀粉酶活性以PL2組的最高，與其他4組差異顯著（P<0.05），對照組最低。

2.2飼料磷脂水平對蘇氏圓腹肌肉磷脂含量的影響

由表4可見，蘇氏圓腹肌肉磷脂含量隨飼料磷脂水平的升高而升高，PL4組的肌肉磷脂含量最高，與PL3組沒有顯著差異，分別比PL2、PL1、PL0組高17.74%、32.73%、40.38%（P<0.05）。

表4飼料磷脂對蘇氏圓腹肌肉磷脂含量的影響

組別磷脂含量（%）PL01.04±0.09cPL11.10±0.09cPL21.24±0.08bPL31.43±0.06aPL41.46±0.10a

3結(jié)論與討論

3.1飼料磷脂水平對蘇氏圓腹血清生化指標的影響

一般認為，臨床血清生化指標能有效且靈敏地反映出魚類機體的生理病理變化狀況[12-13]。有研究表明，飼料磷脂會降低血液中的膽固醇、甘油三酯的濃度[14]。在本試驗中，飼料中添加磷脂，蘇氏圓腹血液中的膽固醇、甘油三酯含量均有不同程度的下降，其中對膽固醇的影響最為明顯，這說明飼料中添加一定量的磷脂能有效阻止膽固醇在血管內(nèi)壁沉積，促進脂類的代謝。對于膽固醇含量的降低，可能是因為飼料中添加磷脂降低HDL、LDL的含量，而HDL、LDL又是膽固醇的主要載體，從而最終導致膽固醇含量的降低。

谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是氨基酸代謝過程中的重要酶類。ALT催化丙酮酸、谷氨酸之間的氨基轉(zhuǎn)運；AST催化草酰乙酸和谷氨酸之間的氨基轉(zhuǎn)換。這2種酶中，ALT更能專一反映肝臟細胞的損傷性，AST的反映靈敏度更高[13]。乳酸脫氫酶作為糖酵解過程中的重要酶，主要催化乳酸轉(zhuǎn)化為丙酮酸，它存在于機體內(nèi)所有組織細胞的胞質(zhì)中。如果肝細胞損傷，AST、LDH就會從胞質(zhì)中逸出進入血液，從而導致血漿中的AST、LDH含量升高[13]。本試驗發(fā)現(xiàn)，隨著飼料中磷脂水平添加量增加，AST、LDH含量大致降低；當飼料磷脂水平達到4%時，AST、LDH含量顯著低于其他4組，這說明飼料中添加一定量的磷脂可有效緩解魚體肝臟細胞的損傷程度。

淀粉酶主要催化糖原、淀粉的分解，提高魚類利用碳水化合物的能力，并通過影響血糖水平的方式最終影響脂肪的代謝[15]。本試驗中，對照組的AMY活性最低，間接說明了該組動員、轉(zhuǎn)運脂肪的能力最弱。

3.2飼料磷脂水平對蘇氏圓腹肌肉磷脂含量的影響

趙娜用不同磷脂水平餌料飼喂黃顙魚仔稚魚，發(fā)現(xiàn)14日齡的黃顙魚體磷脂含量隨著餌料中磷脂水平的升高而升高[16]。本試驗結(jié)果與趙娜的報道[16]類似，隨著飼料磷脂水平的升高，蘇氏圓腹幼魚肌肉的磷脂含量顯著升高，這表明飼料中添加磷脂能夠使幼魚體內(nèi)肌肉中貯存的磷脂量相應增加，以滿足魚體生長需要，這也與筆者之前做過的飼料磷脂對蘇氏圓腹生長影響的試驗結(jié)果相吻合。由于磷脂是香味的重要前體物質(zhì)，肌肉磷脂的含量也會影響肉的品質(zhì)風味[17]，根據(jù)本試驗結(jié)果，在飼料中添加磷脂有助于提高蘇氏圓腹肉的品質(zhì)風味。

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