干黃茶乳劑對(duì)慢性牙周炎患者齦溝液中TNF-α、IL-6 和IL-10水平的影響及療效觀察

李海燕林洋洋徐 丹鄒玉龍叢軍茲

（1牡丹江醫(yī)學(xué)院紅旗醫(yī)院藥學(xué)部，牡丹江，157000；2牡丹江醫(yī)學(xué)院紅旗醫(yī)院口腔科，牡丹江，157011；3牡丹江醫(yī)學(xué)院紅旗醫(yī)院經(jīng)內(nèi)一科，牡丹江，157011）

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干黃茶乳劑對(duì)慢性牙周炎患者齦溝液中TNF-α、IL-6 和IL-10水平的影響及療效觀察

李海燕1林洋洋2徐 丹3鄒玉龍1叢軍茲1

（1牡丹江醫(yī)學(xué)院紅旗醫(yī)院藥學(xué)部，牡丹江，157000；2牡丹江醫(yī)學(xué)院紅旗醫(yī)院口腔科，牡丹江，157011；3牡丹江醫(yī)學(xué)院紅旗醫(yī)院經(jīng)內(nèi)一科，牡丹江，157011）

摘要目的：觀察干黃茶乳劑對(duì)慢性牙周炎患者齦溝液中TNF-α、IL-6和IL-10水平的影響及其療效。方法：慢性牙周炎患者82例隨機(jī)分為治療組（41例）和對(duì)照組（41例）。2組患者均給予齦上潔治、齦下刮治和根面平整等常規(guī)牙周基礎(chǔ)治療。治療組給予干黃茶乳劑注滿牙周袋內(nèi)，對(duì)照組給予等量復(fù)方碘甘油液。1次／周，連續(xù)6周治療。觀察2組患者治療前后齦溝液中TNF-α、IL-6和IL-10水平變化，比較臨床有效率。結(jié)果：治療結(jié)束后，2組患者齦溝液中TNF-α、IL-6水平均明顯下降，IL-10水平明顯升高（P＜0. 05或P＜0. 01），且治療組下降或升高幅度較對(duì)照組更顯著（P＜0. 05）。治療組臨床總有效率為95. 12%，明顯優(yōu)于對(duì)照組75. 61%（P＜0. 05）。結(jié)論：干黃茶乳劑局部治療慢性牙周炎的效果良好，能夠降低齦溝液中TNF-α、IL-6水平，提高IL-10水平，從而有效控制牙周組織炎性反應(yīng)損傷，改善局部炎性反應(yīng)狀況。

關(guān)鍵詞慢性牙周炎；干黃茶乳劑；炎性因子；療效

The Influence of Ganhuangcha Cream on TNF-α，IL-6 and IL-10 Levels ln Glnglval Crevlcular Fluld of Patlents wlth Chronlc Perlodontltls and lts Curatlve Effect

Li Haiyan1，Lin Yangyang2，Xu Dan3，Zou Yulong1，Cong Junzi1
（1 Department of Pharmacy，Hongqi Hospital of Mudanjiang Medical College，Mudanjiang 157000，China；2 Stamotology Department of Hongqi Hospital of Mudanjiang Medical College，Mudanjiang 157011，China；3 First Internal Medicine Department of Hongqi Hospital of Mudanjiang Medical College，Mudanjiang 157011，China）

Abstract Objectlve：To observe the influence of Ganhuangcha cream and its influence on tumor necrosis factor-α（TNF-α），interleukin-6（IL-6）and interleukin-10（IL-10）levels in gingival crevicular fluid of patients with chronic periodontitis. Methods：A total of 82 cases of patients with chronic periodontitis were selected and divided into observation group（41 cases）and control group（41 cases）by random number table. All patients were given the routine periodontal non-surgical treatment，including supragingival scaling，subgingival scaling，scaling and root planning. The patients in the observation group were given Ganhuangcha cream filled in the periodontal pockets，and the control group were given compound iodine glycerol liquids，the treatment was performed once a week，lasting for 6 weeks. The changes in TNF-α，IL-6 and IL-10 levels in gingival crevicular fluid of patients before and after treatment were observed，and the curative effect was compared as well. Results：After treatment，the levels of TNF-α and IL-6 in the two groups were obviously declined，and the IL-10 levels were obviously increased（P＜0. 05 or P＜0. 01）. Besides，the change degree of the observation group was much higher than that of the control group（P＜0. 05）. The total clinical efficiency in the observation group（95. 12%）was much higher than that of the control group（75. 61%）（P＜0. 05）. Concluslon：Ganhuangcha cream has favorable clinical effect in treating chronic periodontitis. It can reduce TNF-α and IL-6 levels in gingival crevicular fluid and increase IL-10 levels；thus controlling the inflammatory damage in periodontium effectively and improving the local inflammation. .

Key Words Chronic periodontitis；Ganhuangcha cream；Inflammatory factors；Curative effect

慢性牙周炎是口腔科常見(jiàn)的多發(fā)常發(fā)疾病，嚴(yán)重影響人們的生活質(zhì)量。現(xiàn)代研究表明慢性牙周炎是由牙菌斑中細(xì)菌及其產(chǎn)物引起牙齦及牙周組織的慢性炎性反應(yīng)性疾?。?］。慢性牙周炎的病變過(guò)程復(fù)雜，其發(fā)生與牙菌斑微生物激活宿主免疫機(jī)制破壞，引起炎性反應(yīng)細(xì)胞因子產(chǎn)生并釋放密切相關(guān)［2］。目前牙周的基礎(chǔ)治療只能對(duì)牙石及菌斑進(jìn)行清理，而對(duì)炎性反應(yīng)的控制效果不顯著。干黃茶乳劑是由干姜、黃連和兒茶等中藥組成，并根據(jù)處方中各藥材有效成分或有效部位的理化特性通過(guò)正交試驗(yàn)篩選出的最佳的熱回流提取工藝而制成［3］，且對(duì)可二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹和蛋清所引起的大鼠足跖腫脹具有明顯抑制作用［4］。本研究觀察了干黃茶乳劑對(duì)慢性牙周炎患者齦溝液中TNF-α、IL-6及IL-10水平的影響及療效，初步探討其對(duì)牙周炎性反應(yīng)狀態(tài)的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1. 1 一般資料 收集2012年1月至2013年1月牡丹江醫(yī)學(xué)院紅旗醫(yī)院口腔科門診進(jìn)行牙周治療的慢性牙周炎患者82例，所有納入慢性牙周炎患者均符合《牙周病學(xué)》診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者現(xiàn)存自然牙≥20顆，牙齦指數(shù)≥2，牙周袋深度≥4 mm。排除標(biāo)準(zhǔn)包括：1）急性牙周炎及牙髓疾?。?）心血管疾病、糖尿病、感染性疾病等；3）治療前3周使用過(guò)抗炎性藥物及抗炎性漱口藥水等；4）近期進(jìn)行過(guò)牙周治療患者；5）不愿進(jìn)行本研究治療患者。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前告知所有患者并簽署知情同意書。采用隨機(jī)數(shù)字表方法將所有入選患者隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組，2組分別41例。2組患者性別、年齡和病程時(shí)間方面進(jìn)行比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0. 05），2組之間具有可比性，見(jiàn)表1。

表1　一般資料比較（±s）

表1　一般資料比較（±s）

組別　　例數(shù)　　性別男　　女　　年齡（歲）　　病程（月）治療組41　 22　 19　 47. 9±4. 3　 15. 9±3. 6對(duì)照組41　 21　 20　 48. 1±3. 8　 16. 2±2. 5

1. 2 治療方法 對(duì)2組患者均給予牙齦上潔治，牙齦下刮治和牙根面平整等基礎(chǔ)治療。治療組給予干黃茶乳劑（本院制劑室提供，濾液濃縮至0. 3 g／mL，配置藥物濃度為80%干黃茶乳劑），注入牙周袋內(nèi)；對(duì)照組給予等量復(fù)方碘甘油液注入牙周袋內(nèi)，告知受試者1 h內(nèi)勿飲食及漱口等，待藥物充分發(fā)揮療效。2組治療均同時(shí)進(jìn)行，1次／周，連續(xù)6周進(jìn)行治療，在治療期間內(nèi)2組受試者均不服用其他藥物和采用其他治療手段。

1. 3 觀察指標(biāo)

1. 3. 1 齦溝液中TNF-α、IL-6及IL-10水平測(cè)定將消毒濾紙（3 mm×9 mm）插入牙周袋內(nèi)取樣位點(diǎn)獲取齦溝液樣本，每個(gè)受試者取位點(diǎn)均選擇在相同或相近位置，將取樣濾紙稱重，放入EP管中置于－70℃存放。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）測(cè)定樣本中TNF-α、IL-6及IL-10水平含量，實(shí)驗(yàn)所需試劑盒均由北京華英生物有限公司提供。

1. 3. 2 療效評(píng)估 療效評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)參照趙軍［6］等預(yù)后評(píng)估分級(jí)方法。顯效：牙周袋深度減小≥2 mm，牙齦指數(shù)降低≥1／2，臨床癥狀基本消失或較治療前明顯改善；有效：牙周袋深度減小≥1 mm，臨床癥狀較前減輕；無(wú)效：牙周袋深度無(wú)明顯變化或加深，臨床癥狀無(wú)改變或加重。以顯效和有效合計(jì)為總有效。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS 17. 0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，所有計(jì)量資料均采用（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；所有計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P值以0. 05作為統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的標(biāo)準(zhǔn)。

2　結(jié)果

2. 1 2組患者治療前后TNF-α、IL-6和IL-10水平變化 在治療前，2組患者齦溝液中TNF-α、IL-6和IL-10水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0. 05）。治療后2組患者齦溝液中TNF-α、IL-6水平分別與治療前比較，均明顯下降（P＜0. 05），其中治療組下降更為明顯（P＜0. 01），2組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0. 05）。治療后2組IL-10水平分別與治療前比較，均表現(xiàn)為升高，其中治療組升高更加明顯（P ＜0. 01），治療組水平較對(duì)照組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0. 05）。參見(jiàn)表2。

表2　2組患者治療前后TNF-α、IL-6和IL-10水平

2. 2 2組患者治療后療效對(duì)比 在完成連續(xù)6周治療后，治療組患者的臨床總有效率為95. 62%，對(duì)照組的臨床總有效率為76. 41%，2組比較顯示，治療組明顯優(yōu)于對(duì)照組（P＜0. 05）。見(jiàn)表3。

表3　2組患者治療后療效對(duì)比

3　討論

隨著現(xiàn)代研究對(duì)牙周炎發(fā)病機(jī)制的深入，慢性牙周炎牙周組織的損傷主要由于牙周局部微生態(tài)平衡紊亂、宿主免疫炎性反應(yīng)等等因素共同導(dǎo)致［7-9］，其炎性反應(yīng)過(guò)程容易反復(fù)交替持續(xù)發(fā)作［10］。當(dāng)炎性反應(yīng)發(fā)作時(shí)，牙周袋內(nèi)的細(xì)菌毒素及其分泌物可以通過(guò)受損上皮進(jìn)入血液系統(tǒng)，激活體內(nèi)的免疫系統(tǒng)，從而促使免疫細(xì)胞活化，釋放大量的免疫炎性分子參與炎性反應(yīng)［11-12］，其中促炎性反應(yīng)因子和抗炎因子的失衡對(duì)疾病的產(chǎn)生起重要作用［13］。TNF-α一種具有廣泛生物活性的低分子蛋白質(zhì)，在炎性反應(yīng)的發(fā)生過(guò)程中會(huì)大量分泌，激活炎性反應(yīng)遞質(zhì)、趨化因子等從而啟動(dòng)炎性反應(yīng)，刺激成纖維細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞等導(dǎo)致結(jié)締組織和骨質(zhì)破壞，從而導(dǎo)致牙周組織的損傷［14］。IL-6是一種多功能的炎性因子，其與人體免疫、造血等密切相關(guān)。在慢性牙周炎中，IL-6參與了炎性分子的生成調(diào)節(jié)及牙槽骨的破壞，加重炎性反應(yīng)，抑制了牙周組織的修復(fù)［15］。IL-10是主要由單核巨噬細(xì)胞、活化的B細(xì)胞等分泌的一種抗炎性反應(yīng)因子，其可以抑制多種炎性反應(yīng)遞質(zhì)的產(chǎn)生，縮小炎性反應(yīng)范圍，減輕牙齦組織炎性反應(yīng)狀況，防止牙槽骨吸收，起到抗炎和修復(fù)作用［16］。這幾種主要的炎性反應(yīng)小分子物質(zhì)在牙周炎的發(fā)病發(fā)展過(guò)程中具有十分重要的作用。

慢性牙周炎是局部慢性炎性反應(yīng)性疾病，局部用藥是較為適合的方法，且臨床應(yīng)用較為普遍。干黃茶乳劑是由中藥干姜、黃連和兒茶3種中草藥配伍組成，并根據(jù)處方中各藥材有效成分或有效部位的理化特性，以水為溶劑，以正交試驗(yàn)篩選出的最佳提取時(shí)間、次數(shù)等，采用熱回流提取法加工而成。先前研究表明其對(duì)制二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹和蛋清所引起的大鼠足跖腫脹具有明顯的抑制作用，其具有良好的抗炎性［4］。本研究顯示，與治療前比較，2組慢性牙周炎患者在治療后TNF-α、IL-6水平均降低，IL-10水平均升高，且與對(duì)照組比較治療組降低或升高的范圍更明顯（P＜0. 05），表明干黃茶乳劑能夠有效的減少促炎性反應(yīng)因子的產(chǎn)生，增強(qiáng)局部抗炎性反應(yīng)因子的分泌，達(dá)到抑制局部炎性反應(yīng)發(fā)展、控制牙周組織炎性損傷及改善牙周局部組織的炎性反應(yīng)狀況。2組患者治療后總有效率比較，治療組明顯優(yōu)于對(duì)照組（P＜0. 05），表明干黃茶乳劑對(duì)于慢性牙周炎患者的治療效果具有較高的有效率，可以推廣使用。

本研究顯示干黃茶乳劑能夠有效調(diào)節(jié)局部炎性反應(yīng)因子水平，改善慢性牙周炎患者牙周組織局部炎性反應(yīng)狀態(tài)，促進(jìn)牙周病變修復(fù)，有效治療慢性牙周炎。

參考文獻(xiàn)

［1］陳宏宇，巫家曉.牙周炎的研究進(jìn)展［J］.醫(yī)學(xué)綜述，2013，19（6）：1037-1039.

［2］Tancharoen S，Matsuyama T，Kawahara K，et al. Cleavage of host cytokeratin-6 by lysine-specific gingipain induces gingival inflammation in periodontitis patients［J］. PLoS One，2015，10（2）：e117775.

［3］翟登奎，陳巖.干黃茶乳膏提取工藝研究［J］.哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，42（6）：658-659.

［4］米娜，翟登奎，畢良佳，等.干黃茶乳劑的抗炎藥效學(xué)及毒理性研究［J］.口腔醫(yī)學(xué)研究，2009，25（4）：427-429.

［5］孟煥新.牙周病學(xué)［M］. 3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：156-158.

［6］趙軍，甘慧玲，黃月霞，等.米諾環(huán)素軟膏對(duì)慢性牙周炎患者齦溝液中炎性反應(yīng)因子水平的影響及療效觀察［J］.中國(guó)藥物與臨床，2013，13（12）：1592-1593.

［7］Jin Y，Wang L，Liu D，et al. Tamibarotene modulates the local immune response in experimental periodontitis［J］. Int Immunopharmacol，2014，23（2）：537-545.

［8］Hajishengallis G. Periodontitis：from microbial immune subversion to systemic inflammation［J］. Nat Rev Immunol，2015，15（1）：30-44.

［9］Wang L Y，Jin Y，Lin X P. The role of adaptive immune response in periodontitis［J］. Chinese Journal of Stomatology，2013，48（2）：115-118.

［10］鄒亞光，黃琪，張萍.中西醫(yī)結(jié)合治療正畸患者牙周炎臨床研究［J］.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，12（8）：33-34.

［11］Jakovljevic A，Knezevic A，Karalic D，et al. Pro-inflammatory cytokine levels in human apical periodontitis：Correlation with clinical and histological findings［J］. Aust Endod J，2014. doi：10. 1111／aej. 12072.

［12］Moradi J，Abbasipour F，Zaringhalam J，et al. Anethole，a Medicinal Plant Compound，Decreases the Production of Pro-Inflammatory TNF-alpha and IL-1beta in a Rat Model of LPS-Induced Periodontitis［J］. Iran J Pharm Res，2014，13（4）：1319-1325.

［13］Zhang YM，Zhong LJ，Liang P，et al. Relationship between microorganisms in coronary atheromatous plaques and periodontal pathogenic bacteria［J］. Chin Med J（Engl），2008，121（8）：1595-1597.

［14］李巖濤，賀蘭，李潔，等.牙周炎齦組織腫瘤壞死因子α的含量及其與牙周炎的關(guān)系［J］.口腔醫(yī)學(xué)，2002，22（1）：12-14.

［15］吳亞菲，趙川江，張靜儀，等.牙齦溝液中白細(xì)胞介素-6含量與牙周炎關(guān)系的研究［J］.華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，31（4）：494-496.

［16］于新波，鐘德鈺，許曉燕，等.慢性牙周炎患者牙周治療前后齦溝液中白介素-10水平的變化［J］.口腔醫(yī)學(xué)，2006，26（5）：373-375.

［17］王科峰，楊海卿.中藥抗菌作用研究思路探討［J］.臨床合理用藥雜志，2012，5（3B）：83-84.

（2015－09－15收稿 責(zé)任編輯：王明）

老中醫(yī)經(jīng)驗(yàn)

中圖分類號(hào)：R285. 6

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A dol：10. 3969／j. issn. 1673－7202. 2016. 02. 020

通信作者：鄒玉龍（1989. 04—），男，碩士，主要從事中藥藥理學(xué)研究工作，E-mail：450191181＠qq. com

作者簡(jiǎn)介：李海燕（1986. 07—），女，碩士，主要從事臨床藥學(xué)研究工作，E-mail：lihaiyan37＠163. com

基金項(xiàng)目：黑龍江省衛(wèi)生廳科研課題（編號(hào)：2004-089）——干黃茶乳劑對(duì)牙周炎治療機(jī)制的研究