池塘養(yǎng)殖水與水產(chǎn)品中孔雀石綠殘留的相關(guān)性分析

□ 李春青 高麗娜 時(shí)文博 陳永平 李連慶 農(nóng)業(yè)部漁業(yè)環(huán)境及水產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（天津）

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池塘養(yǎng)殖水與水產(chǎn)品中孔雀石綠殘留的相關(guān)性分析

□ 李春青 高麗娜 時(shí)文博 陳永平 李連慶 農(nóng)業(yè)部漁業(yè)環(huán)境及水產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（天津）

本文進(jìn)行了含有孔雀石綠的水體對(duì)以色列鯉污染情況的模擬實(shí)驗(yàn)。由實(shí)驗(yàn)可知，有色孔雀石綠進(jìn)入水體后，23.2%～24.3%保留在水體中并隨時(shí)間逐步下降，部分被魚(yú)體吸收，其他大部分被沉積物吸收。沉積物中的孔雀石綠也會(huì)少量釋放到水體中，從而對(duì)養(yǎng)殖魚(yú)類產(chǎn)生二次污染。以色列鯉肌肉在實(shí)驗(yàn)前15 d中，無(wú)色孔雀石綠殘留濃度緩慢升高，在15 d以后，無(wú)色孔雀石綠濃度逐漸下降，30～42 d基本穩(wěn)定在1.0 μg/kg左右。孔雀石綠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中逐漸下降，15～42 d基本穩(wěn)定在0.5 μg/kg左右。

孔雀石綠是三苯甲烷型染料，歷史上曾在水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中用作殺菌劑，主要用于寄生蟲(chóng)、真菌和細(xì)菌性疾病的治療，功效顯著。但由于其高毒性、高殘留、高致癌和高致畸的“四高”特性，我國(guó)在《無(wú)公害食品漁用藥物使用準(zhǔn)則》（NY 5071—2002）中已將其列為禁用藥物。

然而，在日常對(duì)水產(chǎn)品的檢查過(guò)程中還是偶有陽(yáng)性水產(chǎn)品出現(xiàn)。陽(yáng)性水產(chǎn)品中孔雀石綠的引入往往是多途徑的，目前為了杜絕在魚(yú)藥、飼料、苗種和水產(chǎn)品的生產(chǎn)或養(yǎng)殖過(guò)程中違規(guī)使用孔雀石綠，各級(jí)監(jiān)管部門加大了監(jiān)督和查處力度，取得了一定成效。

不過(guò)，曾經(jīng)使用過(guò)孔雀石綠的池塘養(yǎng)殖環(huán)境（養(yǎng)殖水、沉積物）中孔雀石綠也可能再次遷移至水產(chǎn)品中造成污染，環(huán)境中孔雀石綠檢測(cè)方法研究報(bào)道較少，也無(wú)相應(yīng)的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)此的監(jiān)控成為難點(diǎn)。因此，本文研究了孔雀石綠在池塘養(yǎng)殖水與水產(chǎn)品中的遷移情況，以期為解決上述問(wèn)題了提供技術(shù)參考。

材料和方法

養(yǎng)殖箱處理

在養(yǎng)殖箱中放入含有孔雀石綠濃度為0.1 mg/L的養(yǎng)殖用水120 L。每隔1～2日更換養(yǎng)殖水一次，換水量約25～30 L。設(shè)立3個(gè)平行試驗(yàn)和1個(gè)對(duì)照試驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)對(duì)象

實(shí)驗(yàn)選用體長(zhǎng)5～6 c m的健康以色列鯉魚(yú)苗種為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，購(gòu)取自天津西青水產(chǎn)養(yǎng)殖基地。運(yùn)至實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地后，進(jìn)行消毒處理并放在暫養(yǎng)箱中暫養(yǎng)，同時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)用魚(yú)進(jìn)行為期7天的馴化工作，待魚(yú)正常進(jìn)食并適應(yīng)環(huán)境后取健康活潑的個(gè)體進(jìn)行試驗(yàn)，每個(gè)養(yǎng)殖箱中投放鯉魚(yú)苗種30尾。

采樣過(guò)程

于1 、2、3、7、1 4、21、28、35、42 d分別抽取鯉魚(yú)幼苗3尾和養(yǎng)殖水1 L進(jìn)行測(cè)定。養(yǎng)殖水測(cè)定項(xiàng)目包括水溫、pH值、溶解氧和孔雀石綠；水產(chǎn)品測(cè)定項(xiàng)目為孔雀石綠。

水中孔雀石綠的測(cè)定

量取500 mL水樣于1 000 mL分液漏斗中，分別加入100 n g/ml孔雀石綠內(nèi)標(biāo)200 μL和二氯甲烷20 mL，充分震蕩，靜置30 min，將下層溶液放入50 mL雞心瓶中。殘留樣品再次加入二氯甲烷20 m L，充分震蕩，靜置30 min，將下層溶液合并放入同一雞心瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，加入2 m L流動(dòng)相，漩渦混合1 min，超聲5 min，濾膜過(guò)濾后進(jìn)樣測(cè)定，色譜質(zhì)譜條件參照《水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留量的測(cè)定》（GB/T 19857- 2005）進(jìn)行。以信噪比S/N=3計(jì)算，方法檢出限為0.2 ng/L。

以色列鯉魚(yú)肌肉中孔雀石綠的測(cè)定

參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留量的測(cè)定》（GB/T 19857-2005）進(jìn)行檢測(cè)。

結(jié)果

池塘水中孔雀石綠的殘留

水中的有色孔雀石綠在投入水體后，迅速降低至初始濃度的23.2%～24.3%，之后有色孔雀石綠濃度下降速度有所減緩。經(jīng)過(guò)對(duì)沉積物檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，有色孔雀石綠在投入水體后部分被魚(yú)體吸收，其他大部分被沉積物吸收，并在較長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)在水和沉積物之間保持動(dòng)態(tài)平衡。即沉積物中的孔雀石綠會(huì)少量返回到水質(zhì)中，從而對(duì)養(yǎng)殖魚(yú)類產(chǎn)生二次污染。

魚(yú)體肌肉中孔雀石綠的殘留

檢測(cè)結(jié)果顯示，以色列鯉魚(yú)在前15 d中，無(wú)色孔雀石綠濃度逐漸升高，最高殘留量達(dá)5.97 μg/kg，而15 d以后，無(wú)色孔雀石綠逐漸呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，30～42 d基本穩(wěn)定在1.0 μg/kg左右。與此同時(shí)，有色孔雀石綠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中逐漸下降，15～42 d基本穩(wěn)定在0.5 μg/kg左右。

實(shí)驗(yàn)前15 d中，有色孔雀石綠在以色列鯉體內(nèi)轉(zhuǎn)化為無(wú)色孔雀石綠的速度超過(guò)魚(yú)體代謝速度，因而無(wú)色孔雀石綠濃度有所升高；當(dāng)魚(yú)體外界孔雀石綠濃度下降后，轉(zhuǎn)化速度便低于代謝速度，無(wú)色孔雀石綠的濃度因而開(kāi)始逐漸下降。

本研究過(guò)程中以色列鯉肌肉中無(wú)色孔雀石綠殘留最高量達(dá)5.97 μg/kg。在經(jīng)過(guò)42 d后，濃度仍有1.0 μg/kg，說(shuō)明低濃度無(wú)色孔雀石綠在以色列鯉體內(nèi)降解速度緩慢，主要由無(wú)色孔雀綠的非離子和親脂性的特點(diǎn)所致。

討論

本研究表明，如果曾經(jīng)使用過(guò)孔雀石綠進(jìn)行殺菌，即便是在水中檢測(cè)到的孔雀石綠含量比較低，孔雀石綠仍有通過(guò)富集作用對(duì)魚(yú)體產(chǎn)生二次污染，或蓄積在沉積物中，在未來(lái)養(yǎng)殖過(guò)程中，通過(guò)緩慢釋放孔雀石綠至水中的方式對(duì)水產(chǎn)品產(chǎn)生二次污染。因此，對(duì)使用過(guò)孔雀石綠的養(yǎng)殖場(chǎng)除了換水外，對(duì)沉積物進(jìn)行處理也是十分重要的。在有條件的前提下，應(yīng)徹底更換沉積物，以確?？兹甘G不會(huì)對(duì)將來(lái)放養(yǎng)的水產(chǎn)品產(chǎn)生二次污染。即便無(wú)法做到徹底清坑，也需要進(jìn)行翻耕、暴曬或使用生物制劑降解孔雀石綠，并檢測(cè)沉積物中孔雀石綠含量，待其含量降至安全限量以下或基本消失后再行放養(yǎng)。