• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    七項(xiàng)自身抗體在肺癌診斷中的應(yīng)用

    2018-07-04 10:19:02徐思璞喬金平費(fèi)廣鶴
    關(guān)鍵詞:良性受試者肺部

    徐思璞,喬金平,費(fèi)廣鶴

    肺癌是世界上最常見(jiàn)的癌癥之一,近年來(lái)患病率持續(xù)升高[1]。肺癌的診斷,從依據(jù)細(xì)胞學(xué)和組織病理檢查到檢測(cè)血清中的單個(gè)腫瘤標(biāo)志物,再到腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測(cè),敏感性和特異性得到提高[2]。對(duì)于肺癌的早期診斷,自身抗體的敏感性和特異性已引起重視。血清中抑癌基因p53(tumor protien 53,p53)和抗p53抗體與癌癥風(fēng)險(xiǎn)的增加密切相關(guān),并且可以作為惡性腫瘤早期診斷的血清學(xué)標(biāo)志物[3],通過(guò)使用ELISA法檢測(cè)血清p53(S-p53)基因的改變,證實(shí)S-p53基因可作為無(wú)癥狀、高風(fēng)險(xiǎn)群體的常規(guī)篩查標(biāo)志物[4-5]。肺癌中蛋白基因產(chǎn)物9.5(protein gene product 9.5,PGP9.5)的表達(dá)可能在人類(lèi)肺上皮細(xì)胞的致癌轉(zhuǎn)化中起到一個(gè)因果作用[6]。SOX2(SRY-box containing gere 2)的表達(dá)與小細(xì)胞肺癌的分期和增殖密切相關(guān),支持了SOX2是真正的小細(xì)胞肺癌驅(qū)動(dòng)基因的設(shè)想[7]。G抗原7(G antigen 7,GAGE7)在多種癌癥中廣泛表達(dá),表明其在腫瘤發(fā)生中起作用,高水平的GAGE7表達(dá)在鱗狀細(xì)胞癌中更常見(jiàn)[8-9]。腫瘤抗原(GBU4-5)具有的免疫原性、癌癥特異性的,可能為癌癥的診斷和治療提供潛在的靶標(biāo)[10]。黑色素瘤抗原(melanoma antigen, MAGE)在黑素瘤、胃癌、結(jié)腸癌、肝細(xì)胞癌和非小細(xì)胞肺癌中都發(fā)現(xiàn)了MAGE-A1和-A3的表達(dá);由MAGE啟動(dòng)子去甲基化介導(dǎo)的MAGE表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌的侵襲性進(jìn)展密切相關(guān)[11]。人癌抗原(cancer antigen,CAGE)能在胃癌、胰腺癌和一部分肺癌中誘導(dǎo)自身抗體的應(yīng)答[10]。該文通過(guò)使用受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic curve, ROC)分析評(píng)價(jià)p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGEA1、CAGE等七項(xiàng)自身抗體單獨(dú)和聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肺癌的診斷的敏感性和特異性,并對(duì)受試者進(jìn)行了不同的組合分類(lèi),探討這些自身抗體對(duì)肺癌輔助診斷的應(yīng)用價(jià)值。

    1 材料與方法

    1.1病例資料收集2017年1~4月期間就診于安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院病例122例,男59例,女63例,年齡32~85(62.8±10.6)歲。將受試者分為肺外腫瘤組、肺部良性病變組、小細(xì)胞肺癌組、非小細(xì)胞肺癌組、體檢組。其中肺外腫瘤65例,男29例,女36例,年齡55~79(66.0±7.3)歲。肺部良性病變20例,男11例,女9例,年齡32~81(58.0±13.0)歲;小細(xì)胞肺癌3例,男1例,女2例,年齡58~78(67.0±10.1)歲;體檢20例,男10例,女10例,年齡40~75(53.5±9.9)歲;非小細(xì)胞肺癌14例,男8例,女6例,年齡48~85(67.4±11.7)歲。

    1.2標(biāo)本采集與檢測(cè)采集患者空腹晨血3 ml,離心后使用ELISA試劑盒(杭州凱保羅生物科技有限公司),參照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)。七項(xiàng)自身抗體陽(yáng)性參考值分別為:p53>13.1 U/ml, PGP9.5>11.1 U/ml,SOX2>10.3 U/ml, GAGE7>14.4 U/ml, GBU4-5>7 U/ml, MAGEA1>11.9 U/ml, CAGE>7.3 U/ml。

    2 結(jié)果

    2.1不同類(lèi)型的受試者者血清七項(xiàng)自身抗體水平測(cè)定良性病變組和體檢組的自身抗體濃度均較低,各癌變組的自身抗體濃度有不同程度的增高,經(jīng)兩兩比較可得,小細(xì)胞癌組的p53、SOX2、GBU4-5、MAGEA1自身抗體:與體檢組、肺外腫瘤、肺部良性病變組相比較,差異均有顯著性(P<0.05)。見(jiàn)表1。

    2.2肺癌組和其他組七項(xiàng)自身抗體的ROC曲線p53的AUC>0.5,且P<0.05,提示p53自身抗體對(duì)肺癌組(非小細(xì)胞肺癌組、小細(xì)胞肺癌組)和其他組(體檢組、肺外腫瘤組、肺部良性病變組)差異有顯著性(AUC>0.5,P<0.05)。見(jiàn)圖1。

    2.3肺部病變組和其他組七項(xiàng)自身抗體的ROC曲線單個(gè)自身抗體的AUC<0.5,七項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的AUC稍大于0.5,診斷價(jià)值較低,即表示本組分類(lèi)的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見(jiàn)圖2。

    2.4非惡性腫瘤組和腫瘤組七項(xiàng)自身抗體的ROC曲線GBU4-5的AUC=0.639,七項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的AUC=0.635,介于0.5~0.7之間,有一定的診斷價(jià)值,故 GBU4-5及七項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)本組分類(lèi)的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 見(jiàn)圖3。

    圖1 肺癌組和其他組七項(xiàng)自身抗體的ROC曲線

    圖2 肺部病變組和其他組的ROC曲線

    組別p53PGP9.5SOX2GAGE7GBU4-5MAGEA1CAGE體檢1.2±0.7?4.3±1.92.9±2.8?3.7±3.21.3±1.5?0.9±1.0?0.9±0.4肺外腫瘤2.9±6.3?12.3±32.910.3±22.0?4.0±6.84.2±8.0?0.7±1.5?1.6±3.3肺部良性病變0.9±1.0?4.1±5.62.5±3.6?3.7±5.50.7±1.1?0.7±1.1?1.0±1.8非小細(xì)胞肺癌2.8±3.5?10.9±30.4?8.0±19.1?3.0±3.85.5±9.7?0.5±0.6?2.3±4.5小細(xì)胞肺癌20.3±22.337.0±52.133.2±37.28.3±10.620.9±17.89.4±14.23.5±2.4F值8.21.32.50.56.010.90.9

    與小細(xì)胞肺癌組比較:*P<0.05

    2.5小細(xì)胞肺癌組和其他組七項(xiàng)自身抗體的ROC曲線MAGEA1、CAGE、PGP9.5、SOX2、七項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的AUC均>0.5,故均有診斷價(jià)值(AUC>0.5,P<0.05),其診斷價(jià)值排序?yàn)镸AGEA1> CAGE>PGP9.5=SOX2>七項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè),見(jiàn)圖4。

    圖3 非惡性腫瘤組和腫瘤組七項(xiàng)自身抗體的ROC曲線

    圖4 小細(xì)胞肺癌組和其他組七項(xiàng)自身抗體的ROC曲線

    2.6非小細(xì)胞肺癌組和其他組七項(xiàng)自身抗體的ROC曲線僅p53和七項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的AUC>0.5,但P>0.05,小細(xì)胞肺癌組和其他組(體檢組、肺外腫瘤、肺部良性病變、非小細(xì)胞肺癌組)的七項(xiàng)自身抗體差異無(wú)顯著性,見(jiàn)圖5。

    2.7肺外腫瘤組和其他組七項(xiàng)自身抗體的ROC曲線僅七項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的AUC>0.5,且P<0.05,肺外腫瘤組和其他組(體檢、肺部良性病變、非小細(xì)胞肺癌組、小細(xì)胞肺癌)單獨(dú)檢測(cè)七項(xiàng)自身抗體無(wú)顯著差異,七項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)差異有顯著性(AUC>0.5,P<0.05)。見(jiàn)圖6。

    圖5 非小細(xì)胞肺癌組和其他組七項(xiàng)自身抗體的ROC曲線

    圖6 肺外腫瘤組和其他組七項(xiàng)自身抗體的ROC曲線

    2.8體檢組和其他組七項(xiàng)自身抗體的ROC曲線僅MAGEA1的AUC=0.333,且P<0.05,體檢組和其他組(肺外腫瘤、肺部良性病變、非小細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌)MAGEA1自身抗體差異有顯著性(P<0.05),見(jiàn)圖7。

    2.9肺部良性病變和其他組七項(xiàng)自身抗體的ROC曲線僅p53、PGP9.5、GBU4-5、CAGE、七項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)值的AUC與0.5相差較大,且P<0.05,其診斷價(jià)值排序?yàn)镚BU4-5>七項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)值> p53>CAGE >PGP9.5,故p53、PGP9.5、GBU4-5、CAGE自身抗體及七項(xiàng)聯(lián)合指標(biāo)可鑒別診斷肺部良性病變和其他組(體檢、肺外腫瘤組、非小細(xì)胞肺癌組、小細(xì)胞肺癌),依據(jù)其AUC大小,以GBU4-5的診斷價(jià)值最高,見(jiàn)圖8。

    圖7 體檢組和其他組七項(xiàng)自身抗體的ROC曲線

    圖8 肺部良性病變和其他組七項(xiàng)自身抗體的ROC曲線

    3 討論

    與檢測(cè)某一種自身抗體相比,檢測(cè)一組自身抗體對(duì)疾病的診斷具有更高水平的靈敏度,6個(gè)腫瘤相關(guān)性抗原即p53,NY-ESO-1,CAGE,GBU4-5,Annexin 1和SOX2組成的血清自身抗體測(cè)試組證實(shí)了檢測(cè)一組自身抗體的價(jià)值[12]。但是由于歐洲和亞洲肺癌患者的基因構(gòu)成存在顯著差異,因此這一組自身抗體聯(lián)合檢測(cè)可能不適合中國(guó)人群,近期有研究驗(yàn)證了另外七項(xiàng)自身抗體即p53、GAGE7、PGP9.5、CAGE、MAGEA1、SOX2 和GBU4-5的聯(lián)合檢測(cè)與低劑量CT掃描相結(jié)合對(duì)于表現(xiàn)為磨玻璃樣結(jié)節(jié)或?qū)嵭越Y(jié)節(jié)患者的診斷準(zhǔn)確率更高[13]。

    本實(shí)驗(yàn)通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析122例受試者的血清七項(xiàng)自身抗體的水平,探討其對(duì)肺癌的輔助診斷的應(yīng)用價(jià)值。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示:相對(duì)于其他四組,p53、SOX2、GBU4-5和MAGEA1在小細(xì)胞癌組中的表達(dá)水平顯著增高。但由于該組別病例數(shù)相對(duì)較少,可能會(huì)影響結(jié)果的準(zhǔn)確性,后續(xù)研究將加大樣本量。

    ROC曲線是生物標(biāo)志物對(duì)疾病的診斷價(jià)值的一種非常有效的評(píng)價(jià)方法。曲線下面積AUC可反映診斷試驗(yàn)的價(jià)值的大小。依據(jù)Swets標(biāo)準(zhǔn)[14],AUC常常取值范圍在0.5~1,為0.5時(shí)完全無(wú)診斷價(jià)值;為1時(shí)是完全理想的診斷;通常認(rèn)為,在0.5~0.7時(shí)有較低的準(zhǔn)確性;在0.7~0.9時(shí)有較高的準(zhǔn)確性;在0.9以上時(shí)準(zhǔn)確性很高。但由于可以對(duì)數(shù)據(jù)按照公式換算后重新繪制ROC曲線旋轉(zhuǎn)180度,從而使AUC大于0.5,所以在ROC分析診斷價(jià)值時(shí)主要是曲線離分隔線越遠(yuǎn)好。本實(shí)驗(yàn)中,體檢組和其他組的ROC曲線以及肺部良性病變和其他組的ROC曲線中有幾個(gè)指標(biāo)均小于0.5,并且P<0.05,實(shí)際的意義是,這些自身抗體在這些組別里越低越具有診斷價(jià)值,如果對(duì)這些指標(biāo)的檢測(cè)值進(jìn)行倒數(shù)后再進(jìn)行ROC分析,即可得到數(shù)值大于0.5的AUC值。

    為了更精細(xì)化地評(píng)價(jià)這些自身抗體對(duì)肺癌的診斷價(jià)值,本實(shí)驗(yàn)對(duì)受試者進(jìn)行不同的分類(lèi),結(jié)果顯示:p53(AUC=0.664,P<0.05)對(duì)肺癌組和其他組的鑒別診斷有意義。MAGEA1、CAGE、PGP9.5、SOX2、七項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的對(duì)小細(xì)胞肺癌組和其他組的鑒別診斷具有較高的診斷價(jià)值(均AUC>0.8,P<0.05)。由不同的分組模式所得到的數(shù)據(jù)可見(jiàn)這七項(xiàng)自身抗體對(duì)不同的肺癌類(lèi)型的診斷也是有區(qū)別的。

    綜上所述,依據(jù)分組的不同,本實(shí)驗(yàn)中的七項(xiàng)自身抗體及其聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肺癌的鑒別診斷均具有一定的價(jià)值。

    [1] Torre L A, Siegel R L , Jemal A. Lung cancer statistics[J]. Adv Exp Med Biol, 2016,893:1-19.

    [2] 陳 鋒, 李為民, 王冬梅, 等. 聯(lián)合檢測(cè)血清腫瘤標(biāo)志物在肺癌診斷中的價(jià)值[J]. 四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版), 2008, 39(5): 832-5.

    [3] Wu M, Mao C, Chen Q, et al. Serum p53 protein and anti-p53 antibodies are associated with increased cancer risk: a case-control study of 569 patients and 879 healthy controls [J]. Mol Biol Rep, 2010, 37(1):339-43.

    [4] Shimada H, Ochiai T, Nomura F, et al. Titration of serum p53 antibodies in 1,085 patients with various types of malignant tumors: a multiinstitutional analysis by the Japan p53 Antibody Research Group [J]. Cancer, 2003, 97(3):682-9.

    [5] Park Y, Kim Y, Lee J H, et al. Usefulness of serum anti-p53 antibody assay for lung cancer diagnosis [J]. Arch Pathol Lab Med, 2011, 135(12):1570-5.

    [6] Hibi K, Westra W H, Borges M, et al. PGP9.5 as a candidate tumor marker for non-small-cell lung cancer [J]. Am J Pathol, 1999, 155(3):711-5.

    [7] Rudin C M, Durinck S, Stawiski E W, et al. Comprehensive genomic analysis identifies SOX2 as a frequently amplified gene in small-cell lung cancer [J]. Nat Genet, 2012, 44(10):1111-6.

    [8] Lowe F J, Shen W, Zu J, et al. A novel autoantibody test for the detection of pre-neoplastic lung lesions [J]. Mol Cancer, 2014, 13:78.

    [9] Gjerstorff M F, Pohl M, Olsen K E, et al. Analysis of GAGE, NY-ESO-1 and SP17 cancer/testis antigen expression in early stage non-small cell lung carcinoma [J]. BMC Cancer, 2013, 13:466.

    [10] Chapman C J, Murray A, McElveen J E, et al. Autoantibodies in lung cancer: possibilities for early detection and subsequent cure [J]. Thorax, 2008, 63(3):228-33.

    [11] Yanagawa N, Tamura G, Oizumi H, et al. MAGE expressions mediated by demethylation of MAGE promoters induce progression of non-small cell lung cancer [J]. Anticancer Res, 2011,31(1):171-5.

    [12] Murray A, Chapman C J, Healey G, et al. Technical validation of an autoantibody test for lung cancer [J]. Ann Oncol, 2010, 21(8):1687-93.

    [13] Ren S, Zhang S, Jiang T, et al. Early detection of lung cancer by using an autoantibody panel in Chinese population [J]. OncoImmunology, 2017:e1384108.

    [14] Swets J A. Measuring the accuracy of diagnostic systems [J]. Science, 1988, 240(4857):1285-93.

    猜你喜歡
    良性受試者肺部
    涉及人的生物醫(yī)學(xué)研究應(yīng)遵循的倫理原則
    涉及人的生物醫(yī)學(xué)研究應(yīng)遵循的倫理原則
    走出睡眠認(rèn)知誤區(qū),建立良性睡眠條件反射
    中老年保健(2022年6期)2022-08-19 01:41:22
    呼倫貝爾沙地實(shí)現(xiàn)良性逆轉(zhuǎn)
    涉及人的生物醫(yī)學(xué)研究應(yīng)遵循的倫理原則
    《結(jié)締組織疾病肺部表現(xiàn)》已出版
    《結(jié)締組織疾病肺部表現(xiàn)》已出版
    《結(jié)締組織疾病肺部表現(xiàn)》已出版
    《結(jié)締組織疾病肺部表現(xiàn)》已出版
    涉及人的生物醫(yī)學(xué)研究應(yīng)遵循的倫理原則
    日韩电影二区| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 国产国拍精品亚洲av在线观看| 精品人妻视频免费看| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 色综合色国产| 亚洲久久久国产精品| 免费看不卡的av| 久热这里只有精品99| 一级黄片播放器| 下体分泌物呈黄色| 热re99久久精品国产66热6| 99久久人妻综合| 成人综合一区亚洲| 免费人成在线观看视频色| 精品一区二区三卡| 免费看不卡的av| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 插逼视频在线观看| 全区人妻精品视频| 2022亚洲国产成人精品| 日韩av免费高清视频| 免费观看性生交大片5| 美女内射精品一级片tv| 国产成人a∨麻豆精品| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 91精品伊人久久大香线蕉| 91久久精品国产一区二区成人| 日韩免费高清中文字幕av| 大香蕉97超碰在线| 国产乱来视频区| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 国产久久久一区二区三区| av在线app专区| 免费黄频网站在线观看国产| 青春草视频在线免费观看| 另类亚洲欧美激情| 97超碰精品成人国产| 不卡视频在线观看欧美| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲精品,欧美精品| 亚洲伊人久久精品综合| 国产男女内射视频| 亚洲欧美日韩无卡精品| 又大又黄又爽视频免费| 最近最新中文字幕免费大全7| freevideosex欧美| 蜜臀久久99精品久久宅男| 亚洲av二区三区四区| 人体艺术视频欧美日本| 国产有黄有色有爽视频| 寂寞人妻少妇视频99o| 在线观看免费日韩欧美大片 | 久久99热6这里只有精品| 国产精品国产三级国产专区5o| 九九爱精品视频在线观看| 免费人成在线观看视频色| 伊人久久精品亚洲午夜| 国产有黄有色有爽视频| 国产精品无大码| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 少妇人妻久久综合中文| 一边亲一边摸免费视频| 99九九线精品视频在线观看视频| 能在线免费看毛片的网站| 亚洲精品第二区| 久久久久久久国产电影| 精品久久久噜噜| 秋霞伦理黄片| 欧美日本视频| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲精品亚洲一区二区| av免费观看日本| 色吧在线观看| 黑人猛操日本美女一级片| 美女福利国产在线 | 中文字幕久久专区| 99国产精品免费福利视频| 色网站视频免费| 边亲边吃奶的免费视频| 欧美日韩视频精品一区| 我的女老师完整版在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产成人免费无遮挡视频| 精品一区二区三区视频在线| 美女高潮的动态| 高清在线视频一区二区三区| 日韩视频在线欧美| 亚洲国产精品999| 黄色日韩在线| 亚洲精品自拍成人| www.色视频.com| 亚洲国产精品一区三区| 日本一二三区视频观看| 国产精品蜜桃在线观看| 国产 一区 欧美 日韩| 另类亚洲欧美激情| 久久久久久久久久人人人人人人| 国产极品天堂在线| 日韩制服骚丝袜av| 亚洲欧洲日产国产| 91精品伊人久久大香线蕉| 热re99久久精品国产66热6| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产伦在线观看视频一区| 夫妻性生交免费视频一级片| 免费观看在线日韩| av国产免费在线观看| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 成人漫画全彩无遮挡| 能在线免费看毛片的网站| 啦啦啦啦在线视频资源| 久久久精品免费免费高清| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 久久毛片免费看一区二区三区| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 日本av免费视频播放| 我要看日韩黄色一级片| 男人爽女人下面视频在线观看| 国产深夜福利视频在线观看| 一个人看视频在线观看www免费| 免费人妻精品一区二区三区视频| 97超视频在线观看视频| 少妇人妻久久综合中文| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产黄片视频在线免费观看| 免费在线观看成人毛片| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲av日韩在线播放| 精品久久久久久电影网| 国产av国产精品国产| 欧美精品亚洲一区二区| 国产大屁股一区二区在线视频| 免费大片黄手机在线观看| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 精品人妻视频免费看| av又黄又爽大尺度在线免费看| 99九九线精品视频在线观看视频| 水蜜桃什么品种好| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 日韩一区二区视频免费看| 熟女av电影| 97超碰精品成人国产| 免费大片黄手机在线观看| 美女脱内裤让男人舔精品视频| h日本视频在线播放| 人体艺术视频欧美日本| 国产精品人妻久久久影院| 在线观看免费高清a一片| a 毛片基地| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 亚洲欧美成人精品一区二区| 久久人妻熟女aⅴ| 久久久成人免费电影| 丰满迷人的少妇在线观看| 色婷婷久久久亚洲欧美| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 午夜视频国产福利| 国产精品久久久久久久电影| freevideosex欧美| xxx大片免费视频| 久久青草综合色| 久久人人爽人人片av| 亚洲美女搞黄在线观看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 老司机影院毛片| 少妇丰满av| 久久青草综合色| 成人二区视频| 亚洲最大成人中文| 久久久午夜欧美精品| 我的女老师完整版在线观看| 91精品国产国语对白视频| 最近的中文字幕免费完整| 观看免费一级毛片| 亚洲电影在线观看av| 精品久久久久久电影网| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 亚洲最大成人中文| 高清午夜精品一区二区三区| 亚洲真实伦在线观看| 亚州av有码| 黄色怎么调成土黄色| 51国产日韩欧美| 国产欧美日韩精品一区二区| 九九在线视频观看精品| 777米奇影视久久| 午夜福利影视在线免费观看| 国产成人a区在线观看| 国产伦精品一区二区三区四那| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 91aial.com中文字幕在线观看| 亚洲内射少妇av| 我要看黄色一级片免费的| 亚洲国产精品国产精品| 久久女婷五月综合色啪小说| 中国三级夫妇交换| 亚洲成人手机| 人妻系列 视频| 国产成人午夜福利电影在线观看| 寂寞人妻少妇视频99o| 日日撸夜夜添| 一级毛片我不卡| 纯流量卡能插随身wifi吗| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 国产精品一区二区在线观看99| 日本-黄色视频高清免费观看| 精华霜和精华液先用哪个| 亚洲国产欧美在线一区| 国产在视频线精品| 97在线人人人人妻| 看十八女毛片水多多多| av播播在线观看一区| 五月玫瑰六月丁香| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 亚洲精品456在线播放app| 美女中出高潮动态图| 永久免费av网站大全| 亚洲怡红院男人天堂| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲精品国产av成人精品| 成年av动漫网址| 麻豆成人av视频| 在线观看免费日韩欧美大片 | 国产精品.久久久| 精品国产乱码久久久久久小说| 校园人妻丝袜中文字幕| 欧美丝袜亚洲另类| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 美女国产视频在线观看| 91精品国产九色| 国产精品一区二区性色av| 久久精品久久精品一区二区三区| 午夜免费男女啪啪视频观看| 七月丁香在线播放| av女优亚洲男人天堂| 午夜免费男女啪啪视频观看| 插逼视频在线观看| 一区二区av电影网| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲成人一二三区av| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 国产真实伦视频高清在线观看| 午夜免费鲁丝| 欧美3d第一页| 亚洲第一av免费看| 精品酒店卫生间| 日本wwww免费看| 一区二区三区免费毛片| 中文在线观看免费www的网站| 99视频精品全部免费 在线| 777米奇影视久久| 国产亚洲一区二区精品| 高清黄色对白视频在线免费看 | 国产一级毛片在线| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 国产淫片久久久久久久久| 亚洲中文av在线| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 街头女战士在线观看网站| 在线 av 中文字幕| 亚洲国产高清在线一区二区三| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 久久久久久久久久久丰满| 亚洲欧美精品专区久久| 国产片特级美女逼逼视频| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 在线精品无人区一区二区三 | 欧美激情国产日韩精品一区| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲人成网站高清观看| 久久久久久久久大av| 日本黄色片子视频| 这个男人来自地球电影免费观看 | 校园人妻丝袜中文字幕| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 国产精品三级大全| 日韩视频在线欧美| 亚洲国产av新网站| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 亚洲欧美日韩无卡精品| 青春草国产在线视频| 大话2 男鬼变身卡| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲最大成人中文| 午夜免费鲁丝| 伦精品一区二区三区| 一级片'在线观看视频| 国产在线一区二区三区精| 国产精品无大码| 国产精品99久久99久久久不卡 | 麻豆成人av视频| 国产男女内射视频| 欧美97在线视频| 久久99热这里只有精品18| 99热这里只有是精品在线观看| 永久免费av网站大全| 日韩欧美精品免费久久| .国产精品久久| 午夜免费鲁丝| 欧美人与善性xxx| 多毛熟女@视频| 亚洲人成网站高清观看| 97超视频在线观看视频| 免费黄频网站在线观看国产| 高清日韩中文字幕在线| 国产日韩欧美亚洲二区| 日本vs欧美在线观看视频 | 欧美激情极品国产一区二区三区 | 成人免费观看视频高清| av国产精品久久久久影院| 久久毛片免费看一区二区三区| 777米奇影视久久| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 日韩制服骚丝袜av| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲成人中文字幕在线播放| 嘟嘟电影网在线观看| 亚洲精品自拍成人| 男人爽女人下面视频在线观看| 国产精品99久久久久久久久| 国产一区亚洲一区在线观看| 少妇人妻 视频| 国产永久视频网站| 成人无遮挡网站| 久热久热在线精品观看| 交换朋友夫妻互换小说| 国产精品女同一区二区软件| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 成人亚洲欧美一区二区av| 亚洲精品乱久久久久久| 国产精品蜜桃在线观看| 国产精品一区二区性色av| 在线观看美女被高潮喷水网站| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 国产极品天堂在线| 午夜老司机福利剧场| 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲天堂av无毛| 91精品伊人久久大香线蕉| 国产成人精品一,二区| av在线蜜桃| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜 | 国产在线男女| 少妇丰满av| 亚洲国产色片| 免费大片黄手机在线观看| 国产精品女同一区二区软件| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 免费大片18禁| 99re6热这里在线精品视频| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲人成网站在线观看播放| 激情 狠狠 欧美| 国产精品国产av在线观看| 夫妻午夜视频| 午夜视频国产福利| 舔av片在线| kizo精华| 18禁在线播放成人免费| 欧美激情国产日韩精品一区| av国产精品久久久久影院| 十八禁网站网址无遮挡 | 婷婷色av中文字幕| 精品久久久久久久久亚洲| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲真实伦在线观看| 成人亚洲欧美一区二区av| 爱豆传媒免费全集在线观看| 99热全是精品| 精品国产露脸久久av麻豆| 青春草亚洲视频在线观看| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 免费人妻精品一区二区三区视频| 国内精品宾馆在线| 大香蕉久久网| 国产精品爽爽va在线观看网站| 精品亚洲成国产av| 五月伊人婷婷丁香| 水蜜桃什么品种好| 国产熟女欧美一区二区| 嫩草影院新地址| 一个人看视频在线观看www免费| 观看美女的网站| 伊人久久精品亚洲午夜| 卡戴珊不雅视频在线播放| 岛国毛片在线播放| 嫩草影院入口| 欧美三级亚洲精品| 丝袜脚勾引网站| av网站免费在线观看视频| 麻豆成人午夜福利视频| 国产黄色免费在线视频| 久久精品久久久久久久性| 亚洲精品,欧美精品| 国产69精品久久久久777片| 欧美精品一区二区免费开放| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 亚洲av国产av综合av卡| 久久精品久久久久久久性| 深夜a级毛片| 如何舔出高潮| 亚洲国产精品专区欧美| 精品久久久噜噜| 一边亲一边摸免费视频| 97超碰精品成人国产| 99九九线精品视频在线观看视频| 国产成人一区二区在线| av国产精品久久久久影院| 伦理电影大哥的女人| 美女福利国产在线 | 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲色图av天堂| 日韩欧美精品免费久久| 我的老师免费观看完整版| 国产片特级美女逼逼视频| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲真实伦在线观看| 婷婷色av中文字幕| 亚洲怡红院男人天堂| 国产大屁股一区二区在线视频| 国产精品人妻久久久影院| 精品一品国产午夜福利视频| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 久久久久久久久久成人| 99久久综合免费| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 男人和女人高潮做爰伦理| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲av免费高清在线观看| 午夜福利高清视频| 欧美丝袜亚洲另类| 精华霜和精华液先用哪个| 国产久久久一区二区三区| 最近最新中文字幕免费大全7| 欧美一级a爱片免费观看看| 免费av中文字幕在线| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲精品久久午夜乱码| 大陆偷拍与自拍| 一本一本综合久久| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 亚洲精品456在线播放app| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 极品少妇高潮喷水抽搐| 一级片'在线观看视频| 蜜桃在线观看..| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 少妇高潮的动态图| 99久国产av精品国产电影| 中文字幕av成人在线电影| 啦啦啦啦在线视频资源| 久久久成人免费电影| 日韩视频在线欧美| 欧美性感艳星| 少妇高潮的动态图| 热99国产精品久久久久久7| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲不卡免费看| 街头女战士在线观看网站| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 高清日韩中文字幕在线| av视频免费观看在线观看| 久久久久久久精品精品| 精品国产露脸久久av麻豆| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产真实伦视频高清在线观看| 直男gayav资源| 国产亚洲欧美精品永久| 中文资源天堂在线| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 亚洲av日韩在线播放| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 26uuu在线亚洲综合色| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 九色成人免费人妻av| 91精品一卡2卡3卡4卡| av在线播放精品| 人体艺术视频欧美日本| 少妇人妻精品综合一区二区| 在线观看一区二区三区| 欧美97在线视频| 偷拍熟女少妇极品色| 免费av不卡在线播放| av女优亚洲男人天堂| 欧美日韩在线观看h| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 欧美国产精品一级二级三级 | 一区在线观看完整版| 乱码一卡2卡4卡精品| 成人特级av手机在线观看| 不卡视频在线观看欧美| 插阴视频在线观看视频| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 男人狂女人下面高潮的视频| 97超视频在线观看视频| kizo精华| videossex国产| 久久热精品热| 午夜精品国产一区二区电影| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 91精品一卡2卡3卡4卡| 国产成人a∨麻豆精品| 成人毛片60女人毛片免费| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 99久久精品热视频| 午夜免费观看性视频| 色视频在线一区二区三区| 国产有黄有色有爽视频| 99热这里只有是精品在线观看| 久久久成人免费电影| 午夜视频国产福利| 天天躁日日操中文字幕| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 亚洲av成人精品一二三区| 精品一区二区三卡| 久久精品久久精品一区二区三区| 身体一侧抽搐| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲精品色激情综合| 国产伦在线观看视频一区| 亚洲综合精品二区| 国产极品天堂在线| av黄色大香蕉| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 久久女婷五月综合色啪小说| 久久精品夜色国产| 久久久成人免费电影| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 六月丁香七月| 日韩一本色道免费dvd| 国产爽快片一区二区三区| 一级a做视频免费观看| 亚洲欧美日韩东京热| 五月天丁香电影| 亚洲欧美日韩无卡精品| 精品久久久噜噜| 亚洲精品久久午夜乱码| 我的老师免费观看完整版| 晚上一个人看的免费电影| 国产一区亚洲一区在线观看| 日韩国内少妇激情av| 国产精品熟女久久久久浪| 久久国产乱子免费精品| 联通29元200g的流量卡| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 欧美日韩亚洲高清精品| 亚洲内射少妇av| 岛国毛片在线播放| 国产美女午夜福利| 亚洲美女视频黄频| kizo精华| 高清欧美精品videossex| 国产真实伦视频高清在线观看| 亚洲第一av免费看| 亚洲av日韩在线播放| 精品人妻熟女av久视频| 中文字幕av成人在线电影| 久久精品国产亚洲网站| 亚洲天堂av无毛| 欧美高清性xxxxhd video| 久久久成人免费电影| 在线观看一区二区三区激情| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产精品一区二区在线观看99| 一级毛片我不卡| 亚洲精品aⅴ在线观看| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产精品成人在线| 亚洲欧洲国产日韩| 99热这里只有精品一区| 亚洲自偷自拍三级| 久久av网站| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 全区人妻精品视频| 午夜激情福利司机影院| 久久99蜜桃精品久久| 久久久久久久大尺度免费视频| 欧美日韩精品成人综合77777| 97在线人人人人妻| 国产精品三级大全| 伦精品一区二区三区| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲第一区二区三区不卡| 99热这里只有是精品在线观看| 欧美日韩在线观看h| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 国产亚洲欧美精品永久| 99国产精品免费福利视频| 午夜福利影视在线免费观看| 日韩一本色道免费dvd| 香蕉精品网在线| 亚洲国产精品专区欧美| 联通29元200g的流量卡| 日本av手机在线免费观看| 欧美区成人在线视频| 黄色视频在线播放观看不卡| 哪个播放器可以免费观看大片| 国产高清三级在线| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | av免费观看日本| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 欧美国产精品一级二级三级 | 我的老师免费观看完整版| 性色av一级| 久久99热这里只有精品18| 午夜免费观看性视频| 久久 成人 亚洲| 久久女婷五月综合色啪小说|