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    一種生物X射線小角散射光束線站自動(dòng)換樣溶液蠕動(dòng)裝置

    2016-03-26 01:55:47洪春霞李怡雯曾建榮邊風(fēng)剛中國(guó)科學(xué)院上海應(yīng)用物理研究所張江園區(qū)上海20204中國(guó)科學(xué)院大學(xué)北京00049
    核技術(shù) 2016年1期
    關(guān)鍵詞:輻射損傷

    洪春霞  周 平  李怡雯,2  曾建榮  邊風(fēng)剛  王 劼(中國(guó)科學(xué)院上海應(yīng)用物理研究所 張江園區(qū)  上海 20204)2(中國(guó)科學(xué)院大學(xué)  北京 00049)

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    一種生物X射線小角散射光束線站自動(dòng)換樣溶液蠕動(dòng)裝置

    洪春霞1周平1李怡雯1,2曾建榮1邊風(fēng)剛1王劼1
    1(中國(guó)科學(xué)院上海應(yīng)用物理研究所張江園區(qū)上海201204)2(中國(guó)科學(xué)院大學(xué)北京100049)

    摘要利用同步輻射X射線小角散射技術(shù)可以研究溶液中蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息。但是在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,高通量的X射線易造成蛋白質(zhì)的輻射損傷,發(fā)生結(jié)構(gòu)變化。本文介紹了一種自動(dòng)換樣溶液樣品蠕動(dòng)裝置,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中利用Hamilton的PSD/4注射泵控制樣品上下運(yùn)動(dòng),減小單位體積照射時(shí)間以降低X射線對(duì)蛋白質(zhì)的輻射損傷。此外,通過(guò)對(duì)注射泵、準(zhǔn)直調(diào)節(jié)臺(tái)和樣品/緩沖液支撐臺(tái)的協(xié)調(diào)控制實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)換樣、回樣和清洗功能,提高了實(shí)驗(yàn)效率。在上海光源生物X射線小角散射實(shí)驗(yàn)站進(jìn)行了實(shí)驗(yàn),通過(guò)對(duì)靜止模式和蠕動(dòng)模式下溶菌酶的散射曲線及回旋半徑的測(cè)量,表明該裝置可達(dá)到很好的防輻射損傷效果,實(shí)現(xiàn)了預(yù)期的樣品蠕動(dòng)裝置功能。關(guān)鍵詞實(shí)驗(yàn)物理及工業(yè)控制系統(tǒng),生物X射線小角散射,控制系統(tǒng)工具箱,輻射損傷

    國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃)項(xiàng)目(No.2011CB911104)、國(guó)家自然科學(xué)基金(No.11305242)資助

    第一作者:洪春霞,女,1984年出生,2009年于南京航空航天大學(xué)獲碩士學(xué)位,研究方向?yàn)樾〗巧⑸鋵?shí)驗(yàn)站控制系統(tǒng)

    SupportedbyNationalKeyBasicResearchDevelopmentProgram(973Program)(No.2011CB911104),NationalNaturalScienceFoundationofChina (No.11305242)

    Firstauthor:HONGChunxia,female,bornin1984,graduatedfromNanjingUniversityofAeronautics&Astronauticswithamaster’sdegreein2009,focusingonsmallanglescatteringexperimentalstationcontrolsystem

    An automatic solution-sample-changing peristaltic device at biological small angle X-ray scattering beamline

    HONGChunxia1ZHOUPing1LIYiwen1,2ZENGJianrong1BIANFenggang1WANGJie1
    1(Shanghai Institute of Applied Physics, Chinese Academy of Sciences, Zhangjiang Campus, Shanghai 201204, China)2(University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049,China)

    Abstract Background:Proteinstructureinsolutioncanbestudiedbysmall-angleX-rayscatteringtechniquesat synchrotronradiationfacilities.However,thestructureofproteinispronetovaryastheradiationdamageinducedby theintenseX-raybeamduringtheexperiments.Purpose:Thisstudyaimstodevelopanautomaticsolution-samplechangingperistalticdeviceforbiologicalsmallangleX-rayscatteringexperiment.Methods:Theinjectionpump PSD/4ofHamiltonisappliedtoeliminatetheradiationdamageofproteinbyminimizingtheX-rayirradiationtimeof unitvolume.Inaddition,automaticsample-changing,retrievingandcleaningwasrealizedbythecoordinatedcontrol ofPSD/4,thealignmentcontrolstageandthesample/buffercontrolstage.Thustheexperimentefficiencyis improved.Results:Thescatteringcurvesandgyrationradiusoflysozymeunderstationarycollectionmodeand peristalticcollectionmodeweremeasuredbyexperimentscarriedoutatbiologicalsmallangleX-rayscattering beamlineofShanghaiSynchrotronRadiationFacility(SSRF).Andresultsshowthatthisdevicecanpreventradiation damageofsampleefficiently.Conclusion:Thedesignedfunctionalitieshavebeenachievedasexpected.

    Key words EPICS(ExperimentalPhysicsandIndustrialControlSystem),BioSAXS,CSS(ControlSystemStudio),Radiationdamage

    上海同步輻射光源(ShanghaiSynchrotron RadiationFacility,SSRF)是第三代同步輻射裝置,是目前世界上已建造或正在建造中的第三代同步輻射光源中最先進(jìn)的裝置之一。生物X射線小角散射光束線站(BiologicalSmallAngleX-RayScattering,BioSAXS線站,代號(hào)BL19U2)是國(guó)家蛋白質(zhì)科學(xué)研究上海設(shè)施五線六站之一,BioSAXS實(shí)驗(yàn)站以蛋白質(zhì)在自然狀態(tài)下的結(jié)構(gòu)、動(dòng)態(tài)變化和相互作用為主要研究方向。蛋白質(zhì)處于液體狀態(tài)時(shí),更接近于生理?xiàng)l件下蛋白質(zhì)的狀態(tài)[1]。在BioSAXS測(cè)量中,蛋白質(zhì)若受到輻射損傷,容易發(fā)生變性和結(jié)構(gòu)變化。為避免同步輻射測(cè)量過(guò)程中對(duì)蛋白質(zhì)的傷害,需要使用溶液樣品蠕動(dòng)裝置,而控制系統(tǒng)是該裝置的關(guān)鍵部分,用于調(diào)節(jié)樣品的照射位置與照射時(shí)間以降低輻射傷害。

    目前國(guó)際上雖有商品化的實(shí)驗(yàn)室溶液進(jìn)樣設(shè)備,但鑒于國(guó)內(nèi)外同步輻射實(shí)驗(yàn)站的布局和具體要求,需要進(jìn)行軟硬件改造才可以與實(shí)驗(yàn)站其它設(shè)備集成為一體。例如由歐洲分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室(EuropeanMolecularBiologyLaboratory,EMBL)-Hamburg、EMBL-Grenoble和歐洲同步輻射光源(EuropeanSynchrotronRadiationFacility,ESRF)共同研發(fā)的BioSAXS自動(dòng)換樣器,主要用于生物小角散射實(shí)驗(yàn),它使用樣品的體積為10-40μL,樣品濃度為0.5-10mg·mL-1,已經(jīng)安裝在ESRFBM29光束線、EMBLP12光束線和英國(guó)“鉆石”同步輻射光源I22/B21光束線,后來(lái)Bruker公司把它研制成商品化設(shè)備[2-3]。

    美國(guó)斯坦福同步輻射光源(StanfordSynchrotron RadiationLightsource,SSRL)生物小角X射線散射/衍射實(shí)驗(yàn)站(BL4-2)的自動(dòng)進(jìn)樣器,用于生物溶液樣品散射實(shí)驗(yàn),例如蛋白質(zhì)、DNA、RNA、油脂及其復(fù)合物,使用樣品體積為10-30μL,控制軟件使用BluIce編寫,可以完全集成于實(shí)驗(yàn)站BluIce控制系統(tǒng)[4]。而國(guó)內(nèi)尚未有相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,因此需要自行研制適用于上海光源BioSAXS實(shí)驗(yàn)站的溶液進(jìn)樣設(shè)備。主題名稱為一種溶液樣品蠕動(dòng)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(實(shí)用新型專利號(hào):ZL201410038379;發(fā)明專利申請(qǐng)?zhí)枺?01410038379.5)的專利實(shí)現(xiàn)了一種溶液蠕動(dòng)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)[5],但是該裝置主要用在SSRF的小角散射光束線站(BL16B1),并且每次只能做一個(gè)樣品,由于BL16B1與BL19U2實(shí)驗(yàn)站硬件平臺(tái)和軟件平臺(tái)都不相同,因而本研究在該專利的基礎(chǔ)上進(jìn)行了升級(jí)改造,包括硬件和軟件改造,本文研究的溶液裝置使用樣品體積?。?0μL),注射泵抽取樣品體積的精度為3%,一次可以做多個(gè)樣品實(shí)驗(yàn),并且可以自動(dòng)開(kāi)啟實(shí)驗(yàn)站快門和探測(cè)器進(jìn)行數(shù)據(jù)采集,操作更加自動(dòng)化,進(jìn)一步提高了實(shí)驗(yàn)效率。

    1 溶液樣品蠕動(dòng)裝置介紹

    蛋白質(zhì)溶液在進(jìn)行X射線小角散射研究時(shí)易發(fā)生輻射損傷,使用蠕動(dòng)方式可有效地抑制輻射損傷,即樣品在檢測(cè)位置上下運(yùn)動(dòng)。本裝置采用Hamilton 的PSD/4注射泵控制樣品的運(yùn)動(dòng),通過(guò)對(duì)注射泵、準(zhǔn)直調(diào)節(jié)臺(tái)和樣品/緩沖液支撐臺(tái)的協(xié)調(diào)控制實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的定位、清洗、干燥、取樣、樣品蠕動(dòng)、速度設(shè)定、回樣等功能。

    1.1溶液樣品蠕動(dòng)裝置硬件結(jié)構(gòu)

    樣品蠕動(dòng)裝置硬件包括控溫裝置、石英毛細(xì)管樣品室、上/下導(dǎo)管、樣品暫存室、兩個(gè)二維調(diào)節(jié)臺(tái)、清洗液容器、廢液容器和八孔閥注射泵。二維調(diào)節(jié)臺(tái)由控制電腦通過(guò)基于VME總線的控制機(jī)箱和電機(jī)驅(qū)動(dòng)器進(jìn)行控制,可以達(dá)到較高的位置精度[6]。

    為降低背景散射,使用的石英毛細(xì)管樣品室的壁厚為10μm,直徑為1mm,它安裝在銅制的循環(huán)水控溫裝置內(nèi),控溫裝置安裝在二維光路準(zhǔn)直調(diào)節(jié)臺(tái)上。為提高實(shí)驗(yàn)的自動(dòng)化、實(shí)驗(yàn)效率和機(jī)時(shí)利用率,專門設(shè)計(jì)可以同時(shí)放置兩種緩沖液和6種樣品的樣品暫存室,樣品暫存室放置在另一個(gè)控溫裝置內(nèi),同時(shí)在此溫控裝置上設(shè)計(jì)一個(gè)用于連接外部廢液容器的小孔,該控溫裝置安裝在二維樣品/緩沖液調(diào)節(jié)臺(tái)上,和注射泵配合實(shí)現(xiàn)自動(dòng)換樣。

    X射線照射到蛋白質(zhì)溶液樣品上,散射后的強(qiáng)度被Pilatus1M探測(cè)器記錄,可以得到SAXS的原始數(shù)據(jù),待數(shù)據(jù)處理后可得到蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息。該裝置硬件實(shí)物圖及在光路中的位置如圖1所示。溶液樣品蠕動(dòng)裝置結(jié)構(gòu)圖如圖2所示。

    圖1 裝置硬件示意圖Fig.1 Schematics of hardware installation.

    圖2 溶液樣品蠕動(dòng)裝置結(jié)構(gòu)圖Fig.2 Schemetic diagram of the solution peristaltic device.

    1.2控制軟件開(kāi)發(fā)平臺(tái)EPICS和CSS簡(jiǎn)介

    實(shí)驗(yàn)物理及工業(yè)控制系統(tǒng)(Experimental PhysicsandIndustrialControlSystem,EPICS)是由美國(guó)洛斯阿拉莫斯國(guó)家實(shí)驗(yàn)室(LosAlamosNational Laboratory,LANL)和阿貢國(guó)家實(shí)驗(yàn)室(Argonne NationalLaboratory,ANL)等聯(lián)合研制開(kāi)發(fā)的實(shí)驗(yàn)物理和工業(yè)控制系統(tǒng)軟件包[7]。EPICS提供豐富的控制系統(tǒng)軟件開(kāi)發(fā)工具,可以用來(lái)建立分布式的控制系統(tǒng)體系結(jié)構(gòu)。上海光源整體控制系統(tǒng)使用EPICS控制軟件[8],為與上海光源整體控制系統(tǒng)進(jìn)行集成,該裝置的控制部分也采用EPICS控制系統(tǒng)軟件包實(shí)現(xiàn)。

    控制系統(tǒng)工具箱(ControlSystemStudio,CSS)主要是由美國(guó)橡樹(shù)嶺國(guó)家實(shí)驗(yàn)室散裂中子源(SpallationNeutronSource,SNS)、美國(guó)布魯克海文國(guó)家實(shí)驗(yàn)室(BrookhavenNationalLaboratory,BNL)和德國(guó)電子同步加速器研究所(Deutsches ElektronenSynchrotron,DESY)合作開(kāi)發(fā)而成,采用了EclipseRCP(RichClientPlatform)的框架結(jié)構(gòu)[9],是一個(gè)集成多個(gè)應(yīng)用程序插件的開(kāi)發(fā)工具軟件,用于監(jiān)控和操作大型控制系統(tǒng),在本研究中用于控制軟件的界面制作。

    SSRF首批7條光束線和國(guó)家蛋白質(zhì)研究設(shè)施五線六站的控制硬件均采用標(biāo)準(zhǔn)化的基于VME總線的MAXv控制器,軟件在EPICS平臺(tái)下開(kāi)發(fā)完成[10]。

    2 溶液樣品蠕動(dòng)裝置系統(tǒng)設(shè)計(jì)與實(shí)現(xiàn)

    2.1硬件設(shè)計(jì)

    溶液樣品蠕動(dòng)裝置實(shí)現(xiàn)了溶液樣品自動(dòng)進(jìn)樣、自動(dòng)換樣、自動(dòng)清洗、樣品蠕動(dòng)等功能,滿足了同步輻射實(shí)驗(yàn)站溶液樣品自動(dòng)化操作的需求。

    注射泵上安裝八孔閥,在本裝置中,使用了標(biāo)號(hào)是1、3、6、8的4個(gè)閥孔,分別連接石英毛細(xì)管樣品室的上導(dǎo)管、裝有酒精的容器、超純水容器和空氣,后三種用于溶液沖洗。兩個(gè)二維調(diào)節(jié)臺(tái)均包括水平位置調(diào)節(jié)和垂直位置調(diào)節(jié),分別用于石英毛細(xì)管樣品室的光路準(zhǔn)直和樣品暫存室的調(diào)節(jié)。

    本裝置控制過(guò)程為:

    1)調(diào)節(jié)光路準(zhǔn)直調(diào)節(jié)臺(tái)的垂直和水平位置,使樣品室中心對(duì)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)站的光束。

    2)調(diào)節(jié)樣品/緩沖液電動(dòng)臺(tái)位置,使廢液池孔(直徑最小的孔)的中心對(duì)準(zhǔn)樣品蠕動(dòng)裝置的下導(dǎo)管處。

    3)標(biāo)定其余樣品緩存室不同孔的水平和垂直位置,以便進(jìn)行多個(gè)樣品實(shí)驗(yàn)時(shí),設(shè)備能夠自動(dòng)取到不同位置的樣品。

    注射泵上標(biāo)號(hào)1的閥孔連接至光路準(zhǔn)直調(diào)節(jié)臺(tái)樣品室的上導(dǎo)管處,實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí),控制注射泵將樣品暫存室中的樣品抽到樣品室中心。樣品蠕動(dòng)開(kāi)始后,控制軟件自動(dòng)開(kāi)啟快門和探測(cè)器進(jìn)行數(shù)據(jù)采集。實(shí)驗(yàn)完成后,控制注射泵排液至對(duì)應(yīng)的樣品室中完成回收樣品功能;也可以調(diào)節(jié)暫存室樣品臺(tái)的位置,使廢液孔移至下導(dǎo)管處,控制注射泵排液至廢液孔,完成不回收功能。

    2.2軟件設(shè)計(jì)

    計(jì)算機(jī)運(yùn)行在Linux系統(tǒng)下,使用EPICS平臺(tái)及第三方編程語(yǔ)言python設(shè)計(jì)并開(kāi)發(fā)樣品蠕動(dòng)裝置的控制程序。

    為便于用戶操作樣品蠕動(dòng)裝置軟件,專門設(shè)計(jì)參數(shù)設(shè)置模塊,可以設(shè)置的參數(shù)包括閥門位置、實(shí)驗(yàn)樣品體積、抽取樣品后需要抽取空氣的體積、沖洗體積、沖洗次數(shù)、樣品蠕動(dòng)速度、空氣沖洗速度、水沖洗速度、抽取樣品速度等。由于測(cè)試過(guò)程中樣品需要持續(xù)蠕動(dòng),高通量同步輻射光可以照射到樣品不同位置,導(dǎo)致單位體積樣品的曝光時(shí)間減小,樣品所受輻射損傷降低,所以在參數(shù)設(shè)置模塊需要設(shè)定樣品蠕動(dòng)速度。

    蠕動(dòng)裝置控制軟件在樣品準(zhǔn)備好后可以通過(guò)網(wǎng)絡(luò)觸發(fā)探測(cè)器和快門進(jìn)行數(shù)據(jù)采集及數(shù)據(jù)保存。探測(cè)器控制軟件是利用synApps的areaDetector模塊在EPICS平臺(tái)下進(jìn)行編譯及改進(jìn)。快門控制器控制快門,快門控制器通過(guò)RS232轉(zhuǎn)網(wǎng)絡(luò)設(shè)備實(shí)現(xiàn)與計(jì)算機(jī)的網(wǎng)絡(luò)通信。通過(guò)編寫快門的Softioc并后臺(tái)運(yùn)行,使用探測(cè)器數(shù)據(jù)采集界面上的shutter控制按鈕可以實(shí)現(xiàn)探測(cè)器與快門的同步。探測(cè)器和電離室數(shù)據(jù)保存文件的格式為樣品名_曝光時(shí)間_序列號(hào)。

    溶液樣品蠕動(dòng)裝置控制系統(tǒng)的軟件設(shè)計(jì)采用了模塊化[11]設(shè)計(jì)方案,主要包含以下10個(gè)模塊:1)變量定義模塊;2)參數(shù)設(shè)置模塊;3)函數(shù)定義模塊;4)主程序模塊;5)電機(jī)控制模塊(帶編碼器);6)注射泵控制模塊;7)實(shí)驗(yàn)?zāi)K;8)沖洗模塊;9)回收樣品模塊;10)電離室數(shù)據(jù)的自動(dòng)保存模塊。

    PSD/4注射泵采用RS232通訊接口,采用5mL注射器和八孔閥。溶液樣品蠕動(dòng)裝置控制軟件模塊如圖3所示。

    圖3 溶液樣品蠕動(dòng)裝置控制軟件模塊Fig.3 Modules of control software for solution peristaltic device.

    為方便用戶選擇從第幾個(gè)樣品開(kāi)始實(shí)驗(yàn)到第幾個(gè)樣品結(jié)束實(shí)驗(yàn),所以在程序界面上設(shè)置了From 和To的選擇。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始首先進(jìn)行兩者大小的比較,以便決定是做Buffer實(shí)驗(yàn)、樣品實(shí)驗(yàn)還是兩者同時(shí)實(shí)驗(yàn)。主程序流程圖如圖4所示。

    本程序的關(guān)鍵部分是實(shí)驗(yàn)?zāi)K,實(shí)驗(yàn)?zāi)K主要實(shí)現(xiàn)注射泵和電動(dòng)臺(tái)的協(xié)調(diào)控制、樣品蠕動(dòng)和觸發(fā)探測(cè)器等功能。

    用戶操作界面使用CSS開(kāi)發(fā),界面友好且操作簡(jiǎn)單。界面顯示包括樣品裝置控制部分、Pilatus探測(cè)器控制部分和電離室數(shù)據(jù)顯示及曲線顯示部分。其控制界面如圖5所示。

    圖4 樣品蠕動(dòng)裝置主程序流程圖Fig.4 Main flow diagram of the solution peristaltic device.

    圖5 樣品蠕動(dòng)裝置控制界面Fig.5 Interface of control software for the solution peristaltic device.

    2.3樣品蠕動(dòng)裝置測(cè)試

    控制軟件完成后,對(duì)軟件的性能進(jìn)行了測(cè)試,驗(yàn)證了系統(tǒng)功能。

    為進(jìn)行該裝置的防輻射損傷效果實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)前把該裝置安裝在SSRF的BL19U2以進(jìn)行SAXS測(cè)試。探測(cè)器采用的是Pilatus1M,實(shí)驗(yàn)選取的入射光能量為12keV,通量約為4.0×1012,樣品到探測(cè)器距離為1350mm。

    按照SSRFBL16B1實(shí)驗(yàn)站測(cè)試樣品蠕動(dòng)裝置的實(shí)驗(yàn)方法[12]在BL19U2實(shí)驗(yàn)站上做了驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)方法如下:實(shí)驗(yàn)前先將溶菌酶蛋白(Lysozyme FromHenEggWhite,F(xiàn)luka)純化,并溶于20mmol·L-1Tris-Base、100mmol·L-1NaCl及5%甘油的緩沖溶液中,配成濃度為8.5mg·mL-1的溶液。在靜止和蠕動(dòng)兩種模式下,分別連續(xù)曝光10次,曝光時(shí)間為2s。散射曲線(散射強(qiáng)度I-散射矢量q)如圖6所示,曝光順序依次為圖示中的從下到上。由圖6(b)可見(jiàn),在靜止模式下,隨著曝光次數(shù)的增加,在低q區(qū)的散射曲線出現(xiàn)上揚(yáng),相應(yīng)的Guinier圖斜率變大,溶菌酶蛋白逐漸發(fā)生集聚[13];由圖6(a)可見(jiàn),樣品在蠕動(dòng)模式下,散射曲線幾乎不隨曝光次數(shù)增加而變化,低q區(qū)散射曲線重合,相應(yīng)的Guinier圖斜率幾乎不變,樣品未發(fā)生明顯集聚。將兩種模式測(cè)得的溶菌酶回旋半徑值示于圖7,在蠕動(dòng)模式下,溶菌酶回旋半徑基本不隨曝光次數(shù)變化。此外,將蠕動(dòng)模式下曝光10次測(cè)得的散射曲線平均,并與標(biāo)準(zhǔn)散射曲線相比較結(jié)果示于圖8。

    圖6 8.5 mg·mL-1溶菌酶在蠕動(dòng)(a)和靜止(b)兩種模式下測(cè)得的散射曲線Fig.6 Scattering curves obtained from 8.5 mg·mL-1 lysozyme using stationary collection mode (a) and peristaltic collection mode?。╞).

    圖7 靜止模式和蠕動(dòng)模式下回旋半徑隨曝光時(shí)間的變化(標(biāo)準(zhǔn)溶菌酶參考值1.52±0.1)Fig.7 The change of gyration radii with the exposure time measured in stationary mode and peristaltic mode?。╰he Gyration radius of standard lysozyme is 1.52±0.1).

    圖8 蠕動(dòng)模式下曝光10次所得平均散射與標(biāo)準(zhǔn)散射曲線Fig.8 Average scattering curves obtained from 10 times peristaltic-collection mode exposure and standard scattering curves.

    3 結(jié)語(yǔ)

    為驗(yàn)證蠕動(dòng)裝置的防輻射損傷效果,本文在一次實(shí)驗(yàn)中采取了靜止曝光和蠕動(dòng)曝光兩種曝光模式,通過(guò)對(duì)比兩種曝光模式下樣品的散射曲線及回旋半徑,可以分析得出樣品在蠕動(dòng)曝光模式下受到的輻射損傷程度明顯降低。

    然后,將蠕動(dòng)模式下曝光10次測(cè)得的溶菌酶平均散射曲線與標(biāo)準(zhǔn)散射曲線相比較,可知在q值小于4的范圍內(nèi)兩個(gè)散射曲線基本重合,說(shuō)明該蠕動(dòng)測(cè)量裝置不僅可以準(zhǔn)確地得到樣品的散射信息,而且也抑制了蛋白質(zhì)的集聚。

    該裝置使用的樣品體積小,控制精度高。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,該溶液蠕動(dòng)裝置有效減小了X射線在測(cè)量過(guò)程中對(duì)蛋白質(zhì)樣品的損壞,該裝置硬件及其控制軟件的研制滿足實(shí)驗(yàn)要求。

    參考文獻(xiàn)

    1 劉帥,胡紅雨.小角X-射線散射法解析多結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)或復(fù)合物的溶液結(jié)構(gòu)[J].生命科學(xué),2009,21(1): 15-20

    LIUShuai,HUHongyu.Elucidatingthesolution structuresofmulti-domainproteinsandcomplexesby smallangleX-rayscattering[J].ChineseBulletinofLife Sciences,2009,21(1):15-20

    2 ClementEB,AlessandroS,F(xiàn)rankS,et al.Versatile sampleenvironmentsandautomationforbiological solutionX-rayscatteringexperimentsattheP12beamline (PETRAIII,DESY)[J].AppliedCrystallography,2015,48(2):431-443.DOI:10.1107/S160057671500254X

    3 AdamR,F(xiàn)ranckF,LukasF,et al.BioSAXSsample changer:aroboticsamplechangerforrapidandreliable high-throughputX-raysolutionscatteringexperiments[J]. ActaCrystallographica,2015,71:67-75.DOI:10.1107/ S1399004714026959

    4 AnneM,LiuP,WeissTM,et al.Anintegrated high-throughputdataacquisitionsystemforbiological solutionX-rayscatteringstudies[J].Journalof SynchrotronRadiation,2012,19:431-434.DOI: 10.1107/S0909049512008072

    5 邊風(fēng)剛,李怡雯,洪春霞,等.一種溶液樣品蠕動(dòng)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)[P].中國(guó)專利103776854A,2014-05-07 BIANFenggang,LIYiwen,HONGChunxia,et al.A solutionperistalticdevice[P].China103776854A,2014-05-07

    6 雷凱,鄒麗新,張耀明,等.同步輻射光束位置監(jiān)測(cè)系統(tǒng)中電細(xì)分控制技術(shù)[J].光學(xué)精密工程,2003,11(3): 276-280

    LEIKai,ZOULixin,ZHANGYaoming,et al. Subdivisioncontroltechniqueinsynchronicradiation beampositionmonitoringsystem[J].OpticsandPrecision Engineering,2003,11(3):276-280

    7 KraimerMR,AndersonJB,JohnsonAN,et al.EPICS applicationdeveloper’sguide[DB/OL].http://www.aps. anl.gov/epics,2015-02

    8 蔣舸揚(yáng),方文定,沈立人.嵌入式上海光源EPICS插入件控制系統(tǒng)[J].強(qiáng)激光與粒子束,2013,25(4): 1001-1004

    JIANGGeyang,F(xiàn)ANGWending,SHENLiren. EmbeddedEPICSbasedcontrolsystemofinsertion devicesofShanghaiSynchrotronRadiationFacility[J]. HighPowerLaserandParticleBeams,2013,25(4): 1001-1004

    9 郭冰,張寧,徐海霞,等.TMSRCSS集成開(kāi)發(fā)工具軟件的實(shí)現(xiàn)與應(yīng)用[J].核技術(shù),2013,36(11):110602.DOI: 10.11889/j.0253-3219.2013.hjs.36.110602

    GUOBing,ZHANGNing,XUHaixia,et al.Research andimplementationofcontrolsystemstudioforTMSR[J]. NuclearTechniques,2013,36(11):110602.DOI: 10.11889/j.0253-3219.2013.hjs.36.110602

    10 劉倩,邊風(fēng)剛,柳義,等.基于EPICS的SSRF-X射線小角散射實(shí)驗(yàn)站運(yùn)動(dòng)控制系統(tǒng)[J].光學(xué)精密工程,2009,17(8):1804-1809

    LIUQian,BIANFenggang,LIUYi,et al.EPICS-based motioncontrolsystemofSSRF-SAXS[J].Opticsand PrecisionEngineering,2009,17(8):1804-1809

    11 夏紹建,張耀明,鄒麗新.用于同步輻射光束線工程的三維精密調(diào)整平臺(tái)[J].光學(xué)精密工程,2002,10(6): 578-581

    XIAShaojian,ZHANGYaoming,ZOULixin.High precision3-Dstageforsynchrotronradiationbeamline engineering[J].OpticsandPrecisionEngineering,2002,10(6):578-581

    12 李怡雯,邊風(fēng)剛,洪春霞,等.同步輻射X射線小角散射溶液樣品蠕動(dòng)實(shí)驗(yàn)裝置的研制[J].原子能科學(xué)技術(shù),2015,49(10):1914-1920.DOI:10.7538/yzk.2015.49. 10.1914

    LIYiwen,BIANFenggang,HONGChunxia,et al. Developmentofperistalticdeviceforsolutionsample measurementbysynchrotronradiationsmall-angleX-ray scattering[J].AtomicEnergyScienceandTechnology,2015,49(10):1914-1920.DOI:10.7538/yzk.2015.49. 10.1914

    13 KuwamotoS,AkiyamaS,F(xiàn)ujiS.Radiationdamagetoa proteinsolution,detectedbysynchrotronX-ray small-anglescattering:dose-relatedconsiderationsand suppressionbycryoprotectants[J].JournalofSynchrotron Radiation,2004,11:462-468

    收稿日期:2015-10-26,修回日期:2015-12-29

    Correspondingauthor:BIANFenggang,E-mail:bianfenggang@sinap.ac.cn

    通信作者:邊風(fēng)剛,E-mail:bianfenggang@sinap.ac.cn

    DOI:10.11889/j.0253-3219.2016.hjs.39.010102

    中圖分類號(hào)TP273+.5

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