不同人工栽培培養(yǎng)基對蛹蟲草子實體發(fā)育的影響及效益分析

努爾買買提，焦子偉，楊曉絨, 張 娜，梁 月

(1.伊犁師范學院化學與生物科學學院，新疆伊寧　835000; 2. 沈陽農(nóng)業(yè)大學植物保護學院， 沈陽　110866)

?

不同人工栽培培養(yǎng)基對蛹蟲草子實體發(fā)育的影響及效益分析

努爾買買提1，焦子偉1，楊曉絨1, 張 娜1，梁 月2

(1.伊犁師范學院化學與生物科學學院，新疆伊寧835000; 2. 沈陽農(nóng)業(yè)大學植物保護學院， 沈陽110866)

摘要：【目的】蛹蟲草(Cordyceps militaris) 又名北蟲草、北冬蟲夏草，是一種藥(食)用真菌，具有替代名貴中藥冬蟲夏草的潛力，目前已大規(guī)模開發(fā)利用；但在人工栽培過程中，仍存在栽培基質(zhì)配方不佳、子實體形成及優(yōu)質(zhì)率不高等問題?！痉椒ā繌男陆焐絽^(qū)域采集野生蛹蟲草子實體，經(jīng)分離純化，篩選出優(yōu)良菌株，設(shè)計不同的人工栽培培養(yǎng)基配方，在恒溫培養(yǎng)條件下，明確不同培養(yǎng)基對新疆蛹蟲草的子實體生長影響。【結(jié)果】不同培養(yǎng)基對蛹蟲草的菌絲生長及子實體形成發(fā)育具有差異性影響。與對照處理相比，其它處理對蛹蟲草的子實體長度、鮮重、干重、鮮干比、生物轉(zhuǎn)化率，以及每瓶投入、產(chǎn)出和凈利潤等方面均呈顯著性差異(P<0.05)；不同的培養(yǎng)基配方對蛹蟲草的菌絲、子實體形成具有重要的影響，處理1(大米培養(yǎng)基，20 g/瓶)和處理10(大米∶小麥∶水稻殼=6∶3∶1)表現(xiàn)最好。【結(jié)論】蛹蟲草人工栽培可使用處理1或處理10配方培養(yǎng)基適宜新疆地區(qū)蛹蟲草的規(guī)?；a(chǎn)，豐富該地區(qū)人工栽培蛹蟲草培養(yǎng)基配方，為伊犁乃至新疆大面積人工栽培蛹蟲草提供技術(shù)支持。

關(guān)鍵詞：蛹蟲草；培養(yǎng)基配方；子實體；發(fā)育影響；效益分析

0 引 言

【研究意義】蛹蟲草(Cordycepsmilitaris) 又名北蟲草、北冬蟲夏草、蛹草，屬子囊菌綱，肉座菌目，麥角菌科，蟲草屬，與冬蟲夏草 (C.sinensis) 同屬異種[1-3]。蛹蟲草是一種營養(yǎng)和保健價值較高的藥(食)用真菌，含有蟲草素、蟲草酸、多糖、腺苷、多種氨基酸、有益微量元素、維生素、超氧化物歧化酶等多種營養(yǎng)物質(zhì)和抗衰老活性等物質(zhì)[4-5]。具有抗腫瘤、抗病源微生物、保護肝腎及呼吸系統(tǒng)、清除人體自由基和調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)等功效[6-7]。野生蛹蟲草的產(chǎn)地生態(tài)環(huán)境條件特殊，極大地限制了蛹蟲草的生長區(qū)域及產(chǎn)量，加之近年來人為地不斷采挖導致蛹蟲草野生資源日趨枯竭。經(jīng)過多年的研究，蛹蟲草作為名貴中藥冬蟲夏草的替代品以作為藥(食)用菌已被廣泛地接受，被廣為開發(fā)應用，市場開發(fā)潛力巨大，價格昂貴[8]?！厩叭搜芯窟M展】目前國內(nèi)外在蛹蟲草的人工栽培條件、化學成分組成、藥理作用、臨床醫(yī)療保健功效等方面取得了較大進展[9-10]。然而，我國在實現(xiàn)蛹蟲草人工栽培方面與國外相比較晚，且仍有一定差距。冉翠香等[11]發(fā)現(xiàn)人工栽培蛹蟲草的關(guān)鍵在于溫差刺激，進而誘發(fā)子實體原基形成，為實現(xiàn)人工栽培蛹蟲草奠定基礎(chǔ)。姜明蘭等[12]用野生蛹蟲草進行組織分離并純化出優(yōu)良的原種，擴大培養(yǎng)接種到大米培養(yǎng)基上，在特異性條件下獲得上半部膨大呈棒狀且有龜裂紋的子實體。高雯等[13]在蛹蟲草商品化栽培方面篩選出良好培養(yǎng)基配方(小麥96.5%，蛋白胨1%，酵母粉0.5%，蔗糖2%，KH2PO4、MgSO4、VB1微量)用于生產(chǎn)?！颈狙芯壳腥朦c】目前蛹蟲草的人工栽培逐步進入了產(chǎn)業(yè)化階段，但在人工栽培過程中往往存在菌種特異性、栽培基質(zhì)配方不佳、子實體優(yōu)質(zhì)率偏低、產(chǎn)品形態(tài)畸形等較多問題[9]。研究采用的菌種來自新疆天山地區(qū)野生蛹蟲草，是通過親本群體構(gòu)建，分離純化和篩選而獲得的優(yōu)質(zhì)菌種，仍需要根據(jù)新疆特異性生態(tài)條件優(yōu)化培養(yǎng)基質(zhì)，提高該地區(qū)蛹蟲草子實體的產(chǎn)出率和優(yōu)品率?！緮M解決的關(guān)鍵問題】結(jié)合伊犁地區(qū)特有的培養(yǎng)基質(zhì)資源，設(shè)計不同的栽培基質(zhì)配方，在恒溫培養(yǎng)條件下，研究不同人工栽培培養(yǎng)基對新疆蛹蟲草菌種的子實體形成和生長的影響，篩選最佳人工栽培的培養(yǎng)基質(zhì)配方，為伊犁乃至新疆地區(qū)大面積人工栽培蛹蟲草提供技術(shù)支持。

1材料與方法

1.1　 材 料

1.1.1 供試菌株

供試野生型蛹蟲草菌株采自新疆天山區(qū)域，經(jīng)單子囊孢子分離，并進行分子生物學鑒定，獲得了不同遺傳群體菌[14]，并篩選出優(yōu)良的栽培人工菌株。

1.1.2 供試培養(yǎng)基

改良馬鈴薯(PDA)固體培養(yǎng)基[15]：馬鈴薯 200 g，葡萄糖 20 g，蛋白胨 3 g，瓊脂16 g，磷酸二氫鉀(KH2PO4)2 g，七水硫酸鎂(MgSO4·7H2O)1 g，復合維生素B 25 mg， 用水補至1 000 mL， pH 6.5~7.0。

改良馬鈴薯(PD)液體培養(yǎng)基[15]：馬鈴薯 200 g， 葡萄糖 20 g，蛋白胨 3 g，(KH2PO4)2 g，七水硫酸鎂(MgSO4·7H2O)1 g，復合VB 25 mg，用水補至1 000 mL，pH 6.5~7.0。

1.1.3 供試培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)瓶350 ml，高108 mm，直徑75 mm，口徑69 mm ，含白色透氣式蓋。

1.1.4 供試培養(yǎng)基基質(zhì)

伊犁地區(qū)生產(chǎn)的小麥、大米及水稻殼等原料。

1.2　 方 法

1.2.1試驗設(shè)計

試驗共設(shè)計12個培養(yǎng)基基質(zhì)配方處理，按不同處理的配方要求，分別將培養(yǎng)基基質(zhì)加裝入350 mL的培養(yǎng)瓶中，混勻充分后，再加入20 mL改良PDA液體培養(yǎng)基，擰嚴白色透氣蓋后，于121℃高壓蒸汽滅菌15 min，每個培養(yǎng)基基質(zhì)處理重復6瓶，作為相應的試驗處理重復，同時處理12作為對照。表1

表1 不同處理人工培養(yǎng)基配方
Table 1 Artificial media ingredents by different treatments

處理Treatments人工培養(yǎng)基配方(g/瓶)Artificialcultivationmediumingredients1大米202大米18+水稻殼23大米16+小麥44大米14+小麥65大米12+小麥86大米10+小麥107小麥208小麥18+水稻殼29大米13+小麥6+水稻殼110大米12+小麥6+水稻殼211大米19+水稻殼112水稻殼20

1.2.2 蛹蟲草子實體培養(yǎng)

挑取冷藏保存的優(yōu)良菌株，置于改良型PDA培養(yǎng)基上(5 cm 培養(yǎng)皿)進行接種前活化。待菌株生長至近培養(yǎng)皿邊緣后，用滅菌牙簽挑取少量分生孢子，接種至裝有改良PD液體培養(yǎng)基50 mL的三角瓶中，170 r/min，21℃下恒溫震蕩培養(yǎng)3~4 d，獲得菌絲懸浮液。將上述制備好的菌懸液采用無菌水稀釋10倍后，將稀釋的菌懸液吸取10 mL均勻添加到不同處理的培養(yǎng)瓶中。將不同處理的培養(yǎng)瓶放在21℃的恒溫培養(yǎng)箱里進行培養(yǎng)，培養(yǎng)初期的前3 d黑暗培養(yǎng)(保持相對濕度60%)，然后在明暗交替條件下(16 h光照，8 h黑暗；相對濕度85%)培養(yǎng)50~60 d。定期對不同處理的蛹蟲草菌絲、子實體生長情況進行觀察，并做好相關(guān)記錄；對采收的蛹蟲草子實體的長度、鮮重、干重、鮮干比、生物轉(zhuǎn)化率等相關(guān)蛹蟲草生理及生產(chǎn)指標進行分析評價。

1.2.3 效益分析

經(jīng)調(diào)查，2015年農(nóng)產(chǎn)品市場價格大米5.5元/kg，小麥2.7元/kg，水稻殼0.15元/kg，蛹蟲草干草價格1 000元/kg，以每瓶培養(yǎng)基質(zhì)為計算單位，對每瓶投入、產(chǎn)出、產(chǎn)投比以及凈利潤等進行綜合分析。

1.3　數(shù)據(jù)統(tǒng)計

研究數(shù)據(jù)以平均值為計算依據(jù)，分析采用EXCEL數(shù)據(jù)整理和SPSS統(tǒng)計分析軟件(Version 11.5, USA)進行數(shù)據(jù)處理及方差分析(多重比較分析，ANOVA)。

2結(jié)果與分析

2.1　蛹蟲草菌絲生長

通過對不同培養(yǎng)基基質(zhì)處理的蛹蟲草菌絲生長情況觀察與記錄，獲得相關(guān)數(shù)據(jù)。不同處理經(jīng)接菌、人工栽培后，與對照(處理12)相比，各處理的蛹蟲草菌絲生長情況均表現(xiàn)較好態(tài)勢，接種后，3~5 d蛹蟲草菌絲體布滿整個培養(yǎng)基基質(zhì)，呈白色。隨著培養(yǎng)時間增加，各處理下的蛹蟲草菌絲長滿時間、菌絲密度、菌餅變黃時間及菌絲轉(zhuǎn)色情況開始出現(xiàn)不同。處理1、處理9、處理10的栽培瓶中長滿菌絲時間最短，菌絲密度最好，菌餅變黃時間最短及菌絲轉(zhuǎn)成橘黃色速度最快；處理2、處理3、處理4、處理5、處理6和處理12的栽培瓶中長滿菌絲時間短，菌絲密度好，變黃時間短及菌絲轉(zhuǎn)成橘黃色速度較快；處理7、處理8的栽培瓶中長滿菌絲時間較長，菌絲密度一般，菌餅變黃時間較長，且菌絲轉(zhuǎn)成橘黃色速度慢；對照(處理12)栽培瓶中長滿菌絲時間最長，菌絲密度差，變黃時間最長及菌絲轉(zhuǎn)成橘黃色速度最慢。表2

表2不同處理蛹蟲草的菌絲生長情況比較
Table 2 Comparison of growth of hypha inCordycepsmilitarisby different treatments

處理Treatments菌絲長滿時間Myceliaovergrowntime(d)菌絲密度Myceliadensity菌絲轉(zhuǎn)色Myceliacolortransformation菌餅變黃時間(d)Mediacolourtransformation(d)13++++白色變橘黃色快924+++白色變橘黃色較快1134++白色變橘黃色較快1144++白色變橘黃色較快1154+++白色變橘黃色較快1165+++白色變橘黃色較快1175+白色變橘黃色慢1285+白色變橘黃色慢1293++++白色變橘黃色快9103++++白色變橘黃色快9114+++白色變橘黃色較快1112(CK)6-白色變橘黃色最慢14

注：“++++”密度最好；“+++” 密度較好；“++” 密度好；“+” 密度一般；“-” 密度差

Note: “++++” indicates the best density; “+++” indicates better density；”++” indicates good density; “+” indicates ordinary density；”-“ indicates poor density

2.2 　蛹蟲草子實體生長

通過對不同培養(yǎng)基基質(zhì)處理的蛹蟲草子實體生長情況觀察與記錄，獲得相關(guān)數(shù)據(jù)。不同處理的蛹蟲草子實體生長及生物學指標各不相同。與對照相比，除了處理7和處理8外，其它各處理所形成的蛹蟲草的子實體均生長良好。處理1、處理9和處理10這三個處理表現(xiàn)最好，子實體形成時間最早，子座粗長、均勻，子實體正常，橘紅色，有子囊殼，出草質(zhì)量好；處理2、處理5、處理6和處理11均表現(xiàn)好，出草時間較早，子座較粗長、均勻，子實體較正常，橘紅色，有子囊殼，出草質(zhì)量較好；處理7和處理8出草較晚，子座粗而短，僅部分出草，橘紅色，出草質(zhì)量一般；對照則表現(xiàn)最差，僅少量出草，且細短，出草最慢，有子囊殼，出草質(zhì)量差。圖1，表2，表3

注：A，處理1；B，處理2；C，處理3；D，處理4；E，處理5；F，處理6；G，處理7；H，處理8；I，處理9；J，處理10，K，處理11；L，對照

Note: A, treatment 1; B, treatment 2; C, treatment 3; D, treatment 4; E, treatment 5; F, treatment 6; G, treatment 7; H, treatment 8; I, treatment 9; J, treatment 10; K, treatment 11; L, treatment 12

圖1 不同處理人工栽培蛹蟲草子實體效果
Fig.1 Effects on fruitbody ofCordycepsmilitarisin artificial cultivation served as different treatments
表3 不同處理蛹蟲草的子實體生長情況比較
Table 3 Comparison of growth of fruit body inCordycepsmilitarisby as different treatments

處理Treatments出草時間(d)Formationtimeoffruiting-body子座生長Stromataformation子實體生長及色澤Fruiting-bodygrowthandcolour子囊殼Ascocarp出草質(zhì)量Fruiting-bodyQuality126子座粗長,均勻出草早,正常,橘紅色有+++229子座較粗長,均勻出草較早,較正常,橘紅色有++329子座較粗長,均勻出草較早,較正常,橘紅色有+429子座較粗長,均勻出草較早,較正常,橘紅色有+529子座較粗長,均勻出草較早,較正常,橘紅色有++629子座較粗長,均勻出草較早,較正常,橘紅色有++732子座較粗短,不均勻出草晚,較差,僅部分出草,橘紅色有-832子座較粗短,不均勻出草晚,較差,僅部分出草。橘紅色有-926子座粗長,均勻出草早,正常、橘紅色有+++1026子座粗長,均勻出草早,正常、橘紅色有+++1130子座較粗長,均勻出草較晚,較正常,橘紅色有++12(CK)34子座細短,不均勻出草最晚,差,僅少數(shù)長出,橘紅色有-

注：“+++”表示80%的子實體直徑≥3 mm，長度≥7 cm；“++”表示80%的子實體直徑≥2 mm，長度≥6 cm；“+”表示80%的子實體直徑≥1 mm，長度≥5 cm。“-”表示80%的子實體直徑<1 mm，長度<5 cm

Note: “+++” means 80% of the fruit body dimeter ≥3 mm, and length ≥7 cm; “+ +” means means 80% of the fruit body dimeter ≥2 mm, and length ≥6 cm; “+” means 80% of the fruit body dimeter ≥1 mm, and length ≥5 cm; “-” means 80% of the fruit body dimeter <1 mm, and length <5 cm

待子實體成熟后，對不同處理的蛹蟲草子實體的相關(guān)生物學指標進行記錄分析。與對照相比，其他處理在子實體長度、鮮重、干重、鮮干比和生物轉(zhuǎn)化率方面均呈顯著性差異(P<0.05)。處理1的蛹蟲草的各項指標表現(xiàn)最好，子實體平均長度8.48 cm，鮮重12.77 g，干重2.05 g，鮮干比5.93，生物轉(zhuǎn)化率為60.54%；處理10的蛹蟲草的各項指標表現(xiàn)略次于處理1，與處理1相比，除鮮重、鮮干比、生物轉(zhuǎn)化率指標外，子實體長度和干重指標均低于處理1的，并呈顯著性差異(P<0.05)。其他各處理之間蛹蟲草相關(guān)指標均也不盡一致。處理7和處理8的蛹蟲草的各項指標均表現(xiàn)較差，這兩個處理之間除子實體長度呈顯著性差異(P<0.05)，其他指標如鮮干重、鮮干比、生物轉(zhuǎn)化率方面未呈現(xiàn)顯著性差異，但略好于對照處理的。對照的表現(xiàn)最差，子實體長度4.57 cm，鮮重0.75 g，干重0.08 g，鮮干比最高為9.49，生物轉(zhuǎn)化率最低，為3.78%。表4

表4不同處理的蛹蟲草子實體相關(guān)指標
Table 4Relative index Analysis of fruit body inCordycepsmilitarisby different treatments

處理Treatments子實體長度Fruiting-bodylength(cm)鮮重(g/瓶)Freshweight(gramperbottle)干重(g/瓶)Dryweight(gramperbottle)鮮干比FW/DWratio生物轉(zhuǎn)化率Biomasstransformationratio(%)18.48±0.34a12.77±0.41a2.05±0.06a5.93±0.16c60.54±1.45a26.59±0.44c9.98±1.33bcd1.57±0.16bc6.40±0.19c49.91±4.71bcd35.59±0.42d9.06±0.63cd1.48±0.08bc6.15±0.17c45.29±2.22cd45.35±0.39d8.98±0.45cd1.52±0.08bc5.95±0.14c44.88±1.59cd56.29±0.27c8.74±0.92cd1.43±0.11bc6.14±0.17c43.68±3.25cd66.19±0.43c8.32±0.71d1.29±0.09c6.46±0.09c41.60±2.51d73.65±0.31f4.32±0.30e0.60±0.03d7.30±0.23b21.60±1.05e83.04±0.34g3.48±0.36e0.47±0.05d7.41±0.24b17.41±1.79e97.75±0.51b10.30±1.56bc1.64±0.11b6.23±0.29c51.49±5.50bc107.55±0.39b11.08±1.39ab1.71±0.16b6.53±0.27c55.41±4.93ab116.35±0.50c8.28±0.29d1.33±0.02c6.25±0.18c41.39±1.04d12(CK)4.57±0.30e0.75±0.09f0.08±0.01e9.49±0.44a3.78±0.33f

注：數(shù)據(jù)為平均值和標準誤差。數(shù)據(jù)后不同字母(a-g)表示顯著性差異(P< 0.05),下同

Note: Data was shown by Mean (± standard error) values. (a-g), different letters indicate statistically significant (P< 0.05)，the same as below

2.3 　蛹蟲草子實體經(jīng)濟效益

通過對不同處理蛹蟲草培養(yǎng)基基質(zhì)的投入與產(chǎn)出分析，經(jīng)濟效益分析如下：各處理的每瓶投入，其中包括原料投入及其它投入(如人工費、電費等費用)，原料投入因基質(zhì)的不同各有差異，而其它投入均相同(經(jīng)分析估算以每瓶0.35元計算)。與對照相比，各個處理在產(chǎn)值、每瓶產(chǎn)投比、凈利潤方面均高于對照，呈顯著性差異(P<0.05)。處理1，盡管投入最高，但產(chǎn)值最高為2.05元/瓶，產(chǎn)投比最大為4.45，凈利潤最好為1.59元/瓶；處理10的表現(xiàn)緊隨其后，其與處理1在產(chǎn)投比方面，未呈顯著性差異，在產(chǎn)值、凈利潤方面呈顯著性差異(P<0.05)。其他的各處理間各項指標如產(chǎn)值、產(chǎn)投比、凈利潤等方面也不盡一致，在凈利潤方面均有一定的效益，處理7和處理8為最小的。對照表現(xiàn)最差，雖投入的最少，僅0.35元/瓶，但產(chǎn)值最低，為0.08元/瓶，凈利潤為負值，虧0.27元/瓶。表5

表5不同處理蛹蟲草子實體經(jīng)濟效益比較
Table 5Analysis of economic benifit of fruitbody inCordycepsmilitarisby as different treatments

處理Treatments投入(元/瓶)Input(yuanperbottle)產(chǎn)值(元/瓶)Output(yuanperbottle)每瓶產(chǎn)投比Ratioofoutputtointputperbottle凈利潤(元/瓶)Netprofit(yuanperbottle)10.462.05±0.06a4.45±0.12a1.59±0.06a20.451.57±0.16bc3.49±0.35bcd1.12±0.16bcd30.451.48±0.08bc3.30±0.17cd1.03±0.08bcd40.441.52±0.08bc3.42±0.17bcd1.07±0.0bcd50.441.43±0.11bc3.26±0.24cd0.99±0.11cd60.431.29±0.09c2.99±0.21d0.86±0.09d70.400.60±0.03d1.47±0.08e0.19±0.03e80.400.47±0.05d1.18±0.12e0.07±0.05e90.441.64±0.11b3.74±0.26bc1.20±0.11bc100.431.71±0.16b3.95±0.36ab1.28±0.16b110.461.33±0.02c2.92±0.04d0.87±0.02d12(CK)0.350.08±0.01e0.23±0.03f-0.27±0.01f

3 討 論

研究表明，蛹蟲草菌絲的生長可利用多種碳源和氮源，且碳氮比需要合適的比例[16]。LIU 等[17]研究表明最佳培養(yǎng)基質(zhì)配比促進蛹蟲草子實體生長及增加其成分含量。研究針對大米、小麥和水稻殼三種新疆地區(qū)常見材料作為基質(zhì)，通過進行不同比例混合配方，共設(shè)計12個處理。不同處理對蛹蟲草的菌絲長滿時間、菌絲密度、變黃時間、菌絲轉(zhuǎn)色情況，子實體的出草時間、子座生長、子實體生長及轉(zhuǎn)色、出草質(zhì)量，等方面表現(xiàn)也各不相同，并對不同處理的子實體長度、鮮重、干重、鮮干比和生物轉(zhuǎn)化率等指標進行了方差分析，各處理與對照之間，均呈顯著性差異(P<0.05)?；|(zhì)成分為100%的大米(處理1)，蛹蟲草的菌絲及子實體生長表現(xiàn)最好；基質(zhì)成分為米麥水稻殼混合物(6∶3∶1，處理10)，蛹蟲草的各項指標表現(xiàn)略次于前者；基質(zhì)成分為100%的小麥(處理7)，表現(xiàn)較差，與對照(基質(zhì)成分100%水稻殼)相比，處理7除蛹蟲草子實體長度低于對照外，其他的如鮮重、干重、生物轉(zhuǎn)化率等方面均高于對照，并呈顯著性差異(P<0.05)。盡管各處理均加入了少量改良PD培養(yǎng)液，其對蛹蟲草菌絲、子實體的正常形成有一定作用；但人工栽培固體培養(yǎng)周期長，碳、氮源等營養(yǎng)物質(zhì)主要還是通過不同的培養(yǎng)基質(zhì)提供以滿足其正常生長，進而說明不同的培養(yǎng)基配方對蛹蟲草的菌絲、子實體生長具有重要的影響，蛹蟲草菌絲和子實體的生長對培養(yǎng)基質(zhì)利用率呈現(xiàn)大米>小麥>水稻殼。

我國對蛹蟲草人工栽培研究很多，其產(chǎn)業(yè)化得到了廣泛的開展[18]。研究認為高粱、玉米渣和蠶蛹可替代大米栽培蛹蟲草[19]。另外，在大米中加入適量豬血的培養(yǎng)基更適合蛹蟲草菌絲的生長，促進子實體產(chǎn)量提高[20]。研究對各個處理生成的蛹蟲草子實體進行經(jīng)濟效益分析，其他處理從每瓶投入、產(chǎn)值、每瓶產(chǎn)投比、凈利潤方面均高于對照，呈顯著性差異(P<0.05)；尤其是100%大米(處理1)和大米、小麥、水稻殼混合物(處理10)表現(xiàn)最好，在產(chǎn)投比方面，兩處理間未呈顯著性差異，即研究表明新疆地區(qū)可使用利用本地大米培養(yǎng)基或大米∶小麥∶水稻殼(6∶3∶1)配方培養(yǎng)基進行大規(guī)模生產(chǎn)，進而豐富了新疆地區(qū)蛹蟲草人工栽培的培養(yǎng)基配方選擇，為伊犁乃至新疆大面積推廣栽培蛹蟲草提供技術(shù)支持和生產(chǎn)方案。當然，進一步對野生蛹蟲草的人工馴化及栽培介質(zhì)優(yōu)化、蛹蟲草產(chǎn)量與質(zhì)量提升、有效成分含量的保障與提高等方面還需做進一步研究。

4 結(jié) 論

人工栽培培養(yǎng)基配方對蛹蟲草的菌絲、子實體生長具有重要的影響，篩選出適合新疆特有生態(tài)特點與生產(chǎn)環(huán)境的最佳培養(yǎng)基配方。蛹蟲草人工栽培可使用大米培養(yǎng)基(20 g/瓶)或米∶麥∶水稻殼混合配方(大米∶小麥∶水稻殼=6∶3∶1)作為培養(yǎng)基進行規(guī)?；a(chǎn)，進而豐富了新疆地區(qū)野生蛹蟲草馴化與人工栽培方案，為伊犁乃至新疆大面積人工栽培蛹蟲草提供技術(shù)選擇與示范。

參考文獻(References)

[1]Kirk, P. M., Cannon, P. F., David, J. C., et al. (2001). Dictionary of Fungi (9th ed.) .Wallingford 0xon：CABInternational：1-655.

[2]蔣三俊.冬蟲夏草及蛹蟲草寄主昆蟲資源[J].特種經(jīng)濟動植物,2001,(5):15.

JIANG San-jun. (2001). Host insects' resources of Cordyceps sinensis and Cordyceps militaris [J].SpecialEconomicAnimalandPlant, (5):15. (in Chinese)

[3]梁宗琦.中國真菌志:第32 卷:蟲草屬[M]. 北京:科學出版社,2007：1-19.

LIANG Zong-qi. (2007).ChinaMycoflora:volume32,Cordyceps[M]. Beijing: Science Press：1-19. (in Chinese)

[4]劉春泉，李大婧，劉榮．蒽酮一硫酸法測定北冬蟲夏草多糖含量[J]．江蘇農(nóng)業(yè)科學，2006, (2):122-124.

LIU Cun-quan, LI Da-jing, LIU Rong. (2006). A anthrone-H2SO4 method determination of polysaccharide content in north Cordyceps sinensis [J].JiangsuAgriculturalSciences, (2):122-124. (in Chinese)

[5]宋江峰，劉春泉，李大婧，等．北冬蟲夏草多糖活性研究進展[J]．江蘇農(nóng)業(yè)科學，2006, (4)：145-148.

SONG Jiang-feng, LIU Cun-quan, LI Da-jing, et al. (2006). Advances in the studies on polysaccharide's activity of north Cordyceps sinensis [J].JiangsuAgriculturalSciences, (4):145-148. (in Chinese)

[6]Yongjie Zhang, Erwei Li, Chengshu Wang, Yuling Li, & Xingzhong Liu. (2012). Ophiocordyceps sinensis, the flagship fungus of china: terminology, life strategy and ecology. Mycology, 3(1)：2-10.

[7]林群英, 宋斌, 李泰輝. 蛹蟲草研究進展[J]. 微生物學通報，2006, 33(4):154-157.

LIN Qun-ying, SONG Bin, LI Tai-hui. (2006). Advances in the studies on Cordyceps militaris [J].Microbiology, 33(4):154-157. (in Chinese)

[8]楊海峰．北冬蟲夏草高效袋栽技術(shù)[J]．食用菌, 2007, (1):48-49.

YANG Hai-feng. (2007). Efficient bag cultivation technology of north Cordyceps [J].Ediblefungi, (1):48-49. (in Chinese)

[9]張姝，張永杰，SHRESTHA Bhushan, 等. 冬蟲夏草菌和蛹蟲草菌的研究現(xiàn)狀、問題及展望[J]. 菌物學報, 2013, 32(4): 577-597.

ZHANG Shu, ZHANG Yong-jie, Bhushan SHRESTHA, et al. (2013). Ophiocordyceps sinensis and Cordyceps militaris: research advances, issues and perspectives [J].Mycosystema, 32(4): 577-597. (in Chinese)

[10]Bhushan, S., Sang-Kuk, H., Jae-Mo, S., & Gi-Ho, S. (2012). Fruiting body formation of cordyceps militaris from multi-ascospore isolates and their single ascospore progeny strains.Mycobiology, 40(2)：100-106.

[11]冉翠香,王莉,許智宏，等.人工培育蛹蟲草子實體原基的誘發(fā)形成[J].食用菌,2001,23 (4):9.

RAN Cui-xiang, WANG Li, WU Zhi-hong. (2001). Induction and formation of the fruiting body primordia of Cordyceps militaris in artificial cultivation [J].EdibleFungi, 23 (4):9. (in Chinese)

[12]姜明蘭, 鐘文田. 北冬蟲夏草人工栽培技術(shù)研究[J].遼寧農(nóng)業(yè)科學,1995, (1):54.

JIANG Ming-lan, ZHONG Wen-tian. (1995). Study on artificial cultivation of north Lerdyceps sinensis [J].LiaoningAgriculturalSciences, (1): 54. (in Chinese)

[13]高雯,高世友,韋廷春. 蛹蟲草商品化栽培技術(shù)的研究[J]. 陜西農(nóng)業(yè)科學, 2008, 54(4):26-29.

GAO Wen, GAO Shi-you, WEI Ting-chun. (2008). Technological research on commercial cultivation of Cordyceps mlitaris [J].ShaanxiJournalofAgriculturalSciences, 54(4):26-29. (in Chinese)

[14]Zhang, G., & Liang, Y. (2013). Improvement of fruiting body production in cordyceps militaris by molecular assessment.ArchivesofMicrobiology,195(8)：579-585.

[15]梁月,張國珍,安沫平,等. 蛹蟲草子囊孢子萌發(fā)及其后代群體培養(yǎng)性狀觀察[J]. 菌物學報, 2005, 24(4):525-532.

LIANG Yue, ZHANG Guo-zhen, AN M0-ping, et al. (2005). Cordyceps militaris: ascospore germination and cultural characteristics of progeny population [J].Mycosystema, 24(4):525-532. (in Chinese)

[16]李燁. 蠶蛹蟲草菌絲生物學特性的研究[J].淮陰師范學院學報(自然科學版)，2003, 2(4):330.

LI Ye. (2003). Studies on biological characteristics of hypha in Cordyceps militaris grwon by silkworm [J].JournalofHuaiyinNormalUniversity(NaturalSciences), 2(4):330. (in Chinese)

[17]Zhu, L. I., & Liang, Z. Q. (2003). Effect of the components of medium on increasing the content of cordycepin.JournalofFungalResearch. 1(1)：9.

[18]楊杰,程紅艷.蛹蟲草人工培養(yǎng)研究進展[J].山西農(nóng)業(yè)科學,2011,39(7):747-750.

YANG Jie, CHENG Hong-yan. (2011). Advances in artificial cultivation of Cordyceps militaris [J].JournalofShanxiAgriculturalSciences, 39(7): 747-750. (in Chinese)

[19]張顯科,劉文霞.不同培養(yǎng)料栽培蛹蟲草實驗研究[J]. 中國食用菌,1997, 16(2):21.

ZHANG Xu-ke, LIY Wen-xia. (1997). Experimental studies on planting Cordyceps militaris (L: EX FR.) Link with different culture materials [J].EdibleFungiofChina, 16(2):21. (in Chinese)

[20]劉守華.代料栽培試驗研究[J]. 遼寧師專學報,1999, 1(1): 91.

Fund project:Supported by Science and Technology Xinjiang Supporting Program (2014091153) and Outstanding Scientific and Technical Personnel Support Program at Universities of Liaoning Province (LR2015058)

LIU Shou-hua. (1999). Experimental studies on cultivation [J].JournalofLiaoningTeachers'College, 1(1): 91. (in Chinese)

Growth Effects and Benefit Analysis on Fruiting Body Artificial

Cultivation ofCordycepsmilitarisin Different Culture Media

Nuermaimaiti1，JIAO Zi-wei1，YANG Xiao-rong1，ZHANG Na1，LIANG Yue2

(1.CollegeofChemistryandBiologicalSciences,YiliNormalUniversity,Yining,Xinjiang835000,China；2.CollegeofPlantProtection，ShenyangAgriculturalUniversity,ShenyangLiaoning110866,China)

Abstract：【Objective】 Cordyceps militaris, known as the north Cordyceps militaris or north Cordyceps sinensis, is a kind of medical and edible fungus. Currently, it is widely developed and utilized to be a complementary source of Cordyceps sinensis. However, there are still many concerns of medium ingredients, fruiting-body formation, and quality for the artificial culturing fruiting body of C. militaris. 【Method】In this study, wild C. militaris was collected, isolated, and purified to obtain the good qualified strains from Tianshan area in Xinjiang. The different artificial cultivation medium ingredients were designed based on the comprehensive consideration of locally featured natural resources to understand and optimize the effects of different artificially cultivate media in C. militaris. 【Result】 The different media affected the hyphal growth and formation and development of fruiting body of C. militaris. Compared with control treatment, fruiting body length, fresh weight, dry weight, ratio of fresh- and-dry weight, biotransformation ratio, the input/output of product, and net profit per bottle of C. militaris cultured in the other treatments were significantly different (P<0.05). It was shown that different culture medium ingredients exerted a critical influence on hyphae and fruiting body. The treatment 1 (rice, 20 g/bottle) and treatment 10 (rice: wheat: rice husk = 6∶3∶1) performed better results than others.【Conclusion】 Artificial cultivation of C. militaris could use treatment 1 or 10 for industrial productions, which enriched cultivate medium ingredients and provided the technical support for artificially cultivation of C. militaris in Ili prefecture, or even larger area in Xinjiang Uygur autonomous region.

Key words:Cordyceps militaris; medium ingredient; fruiting body; development effect; benefit analysis

通訊作者:焦子偉(1973-), 男，副教授，博士，研究方向為微生物生態(tài)，(E-mail)741285332@qq.com

作者簡介:努爾買買提(1971-)，男，博士研究生， 研究方向為植物分類，(E-mail) 2696232271 @qq.com

基金項目:自治區(qū)科技支疆項目 (2014091153)；遼寧省高等學校優(yōu)秀科技人才支持計劃(LR2015058)

收稿日期：2015-09-09

中圖分類號：S646

文獻標識碼：A

文章編號：1001-4330(2016)02-0359-08

doi:10.6048/j.issn.1001-4330.2016.02.024