NF-κB信號(hào)通路研究進(jìn)展＊

趙運(yùn)旺，朱嘉寧

（西北師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，甘肅 蘭州730070）

NF-κB信號(hào)通路研究進(jìn)展＊

趙運(yùn)旺，朱嘉寧△

（西北師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，甘肅 蘭州730070）

轉(zhuǎn)錄因子NF-κB作為一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的可誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子已經(jīng)超過(guò)20年了。眾多的可激活NF-κB的刺激，以及大量的受NF-κB調(diào)節(jié)的基因，確保了這一轉(zhuǎn)錄因子仍然是研究熱點(diǎn)。在這里，我試圖總結(jié)一下從這些NF-κB的研究中所浮現(xiàn)出的一些基本規(guī)律，并希望能找出一個(gè)較統(tǒng)一的關(guān)于NF-κB調(diào)節(jié)的觀點(diǎn)。

NF-κB；信號(hào)通路；家族蛋白

1 NF-κB信號(hào)通路概述

NF-κB(nuclear factor-κB)是一種細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子,因其能夠與B細(xì)胞免疫球蛋白的κ輕鏈基因的增強(qiáng)子κB序列GGGRNWYYCC(N-任意堿基; R-嘌呤;W-腺嘌呤或胸腺嘧啶;Y-嘧啶)特異結(jié)合而得名[1-3]。NF-κB 調(diào)控一大類(lèi)基因的表達(dá),它調(diào)控的靶基因包括免疫相關(guān)受體、細(xì)胞因子(如IL-1、IL-2、IL-6、IL-12和TNF2α、LTα、LTβ、GM-CSF)、炎癥因子 (IL-8、MIP-1α、MCP1)、黏附分子(ICAM、VCAM和E-selectin)、急性期蛋白(如SAA)等,在調(diào)控免疫細(xì)胞的激活、T、B淋巴細(xì)胞的發(fā)育、細(xì)胞凋亡、腫瘤形成、病毒復(fù)制、炎癥反應(yīng)及多種自身免疫性疾病方面發(fā)揮重要作用[4-5]。

NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路屬于受調(diào)蛋白水解酶依賴(lài)的受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。在未受刺激的細(xì)胞中，NF-κB轉(zhuǎn)錄因子與抑制性I?B(InhibitorofkappaB)蛋白結(jié)合在一起，因而被滯留在細(xì)胞質(zhì)中。上游信號(hào)的刺激導(dǎo)致IκB蛋白在IKK(IκB kinase)的作用下被磷酸化修飾，繼而被泛素連接酶復(fù)合體識(shí)別，促使IκB蛋白以蛋白酶體依賴(lài)的方式被降解，NF-κB從而被釋放出來(lái)，進(jìn)入細(xì)胞核并啟動(dòng)靶基因的表達(dá)。

2 NF-κB信號(hào)通路的主要成員

2.1 NF-κB家族蛋白

NF-κB家族成員主要包括RelA(p65),c-Rel, RelB,NF-κB1(p50蛋白及其前體p105)和NF-κB2 (p52蛋白及其前體p100),各成員可形成同源或異源二聚體而行使功能。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中最常見(jiàn)的是NF-κBp65與p50結(jié)合形成p65/p50二聚體。NF-κB家族蛋白的共同點(diǎn)是均含有一個(gè)高度保守的由大約300個(gè)氨基酸組成的結(jié)構(gòu)域—Rel同源結(jié)構(gòu)域（Relhomologydomain，簡(jiǎn)稱(chēng)RHD），該結(jié)構(gòu)域與DNA結(jié)合、蛋白二聚化以及與IκB蛋白結(jié)合等功能有關(guān)。RHD 同時(shí)還含有核定位信號(hào)序列（nuclear localization signal，簡(jiǎn)稱(chēng)NLS），是活化的NF-κB進(jìn)入細(xì)胞核所必需的，在細(xì)胞質(zhì)中NF-κB與IκB蛋白結(jié)合，IκB掩蔽了NF-κB的NLS，使NF-κB滯留在胞質(zhì)內(nèi)，當(dāng)IκB被降解后，NF-κB的NLS暴露，使NF-κB進(jìn)入核內(nèi)并與靶基因結(jié)合。不同的是RelA (p65),c-Rel,RelB的C端含有一個(gè)轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域（transactivationdomain，簡(jiǎn)稱(chēng)TAD），可以通過(guò)募集轉(zhuǎn)錄共激活物和移除轉(zhuǎn)錄阻礙物而促進(jìn)轉(zhuǎn)錄；而NF-κB1和NF-κB2的C端則為多拷貝的錨蛋白重復(fù)序列（ankyrin repeats），該重復(fù)序列可以與RHD結(jié)構(gòu)域結(jié)合，從而通過(guò)掩蔽核定位序列（NLS）抑制蛋白的入核，此外，NF-κB1和NF-κB2的前體蛋白可以通過(guò)有限剪切等方式轉(zhuǎn)變成短的、有活性的蛋白形式。p52和p50的同源二聚體缺少TAD，因此沒(méi)有真正的能力去驅(qū)使轉(zhuǎn)錄，事實(shí)上，在靜息細(xì)胞中，p52和p50的同源二聚體抑制基因轉(zhuǎn)錄，但p52和p50可以通過(guò)與含TAD的NF-κB蛋白形成異源二聚體而起始轉(zhuǎn)錄。

通過(guò)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究，我們對(duì)NF-κB家族蛋

白的功能有了更精確的了解，這些主要是通過(guò)基因敲除實(shí)驗(yàn)得到的，現(xiàn)在幾乎所有的NF-κB家族成員的基因敲除小鼠都已經(jīng)被報(bào)道，下面分別介紹NF-κB家族蛋白各個(gè)成員的功能。

遺傳學(xué)研究顯示p65在TNFα引起的細(xì)胞凋亡中起到關(guān)鍵性的保護(hù)作用。P65-/-小鼠在胚胎發(fā)生期E14-E15時(shí)，由于TNFα誘導(dǎo)大量發(fā)育中的肝細(xì)胞發(fā)生凋亡而死亡。P65-/-TNFα-/-或p65-/-TNFR-/-雙敲除的小鼠在TNFα誘導(dǎo)下沒(méi)有出現(xiàn)大范圍的肝細(xì)胞凋亡，仍然可以正常發(fā)育，可以研究在其它組織中p65敲除的影響。但p65-/-TNFR-/-雙敲除的小鼠對(duì)細(xì)菌感染的易感性增強(qiáng)，所以出生后死亡率很高，這也提醒我們注意p65在固有免疫應(yīng)答中的作用和由非造血系統(tǒng)細(xì)胞起始的固有免疫應(yīng)答。除了抑制TNFα介導(dǎo)的肝細(xì)胞的凋亡之外，p65還能保護(hù)很多其他類(lèi)型的細(xì)胞免受TNFα的毒性影響，包括巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞、和T細(xì)胞。同時(shí)，p65的抗凋亡的功能也不僅局限于對(duì)TNFα刺激的應(yīng)答，有研究表明p65也可以保護(hù)雙鏈RNA（dsRNA）引起的細(xì)胞死亡[6]。P65的抗凋亡功能與它能夠誘導(dǎo)許多抑制凋亡的靶基因表達(dá)有關(guān)，包括c-FLIP、cIAP1、cIAP2、A20、GADD45β和MnSOD等[7]。此外在嵌合鼠模型中，p65的敲除實(shí)驗(yàn)還顯示出其在各種刺激下的B細(xì)胞和淋巴細(xì)胞增殖時(shí)的類(lèi)別轉(zhuǎn)換中發(fā)揮重要作用。

p50蛋白是由 NFKB1基因編碼的，并通過(guò)p105前體蛋白剪切而成。p105蛋白轉(zhuǎn)變成p50蛋白的過(guò)程似乎是細(xì)胞中持續(xù)發(fā)生的，從而可以提供充足且成熟的p50亞基，并與其它NF-κB家族蛋白形成二聚體[8]。p105蛋白通過(guò)限制性的蛋白酶水解產(chǎn)生p50的過(guò)程，依賴(lài)于一個(gè)在氨基酸376～404之間的甘氨酸富集區(qū)（GRR），它是一個(gè)蛋白水解的終止信號(hào)。與p65敲除小鼠不同，p50缺失小鼠沒(méi)有任何發(fā)育缺陷。p50-/-小鼠表現(xiàn)出免疫球蛋白產(chǎn)量下降并存在體液免疫應(yīng)答缺陷。

p52/p100蛋白是由NFKB2基因編碼的，p52蛋白來(lái)自于p100蛋白誘導(dǎo)后剪切的N端部分，它是與RelB形成異源二聚體的主要亞基。p100蛋白被剪切成p52蛋白是受上游信號(hào)嚴(yán)格調(diào)控的，只有在某些特定的刺激下（如某些TNFR家族蛋白的激活）才會(huì)發(fā)生，在未受刺激的細(xì)胞中僅有極少的p100的組成型加工處理。p100的加工處理過(guò)程首先是由NIK（NF-κB-inducing kinase）活化IKK(IκB kinase) α，激活的IKKα促使p100的磷酸化，從而募集SCFβTrCP，導(dǎo)致p100的Lys855的多聚泛素化，再經(jīng)過(guò)蛋白酶體的剪切產(chǎn)生成熟的p52蛋白。有研究顯示在此過(guò)程中，NIK不僅是IKKα的激酶而且是一個(gè)連接IKKα和p100的對(duì)接蛋白。此外，p100的C端死亡區(qū)（DD）可能是一個(gè)加工處理過(guò)程的抑制區(qū)，缺失此區(qū)的p100表現(xiàn)出增加的組成型加工處理。同p105，p100的GRR區(qū)對(duì)于部分處理產(chǎn)生p52和釋放活化的p52：NF-κB復(fù)合體也是必需的。p52-/-小鼠不能正常發(fā)育出B細(xì)胞囊泡、生發(fā)中心并且脾的結(jié)構(gòu)和派伊爾結(jié)（Peyer’spatches）的發(fā)育有缺陷[9-11]，此外還表現(xiàn)出不正常的T細(xì)胞功能。類(lèi)似的免疫系統(tǒng)缺陷也發(fā)生在缺失淋巴毒素β（lymphotoxinβ，簡(jiǎn)稱(chēng)LTβ）、淋巴毒素β受體（lymphotoxinβreceptor,簡(jiǎn)稱(chēng) LTβR）、NF-κB誘導(dǎo)激酶 （NF-κB-inducing kinase，簡(jiǎn)稱(chēng)NIK）或RelB的小鼠中[12]。上述結(jié)果表明，這些基因的表達(dá)產(chǎn)物可能共同參與LTβR誘導(dǎo)的信號(hào)途徑?？傊?，p52敲除小鼠的表型與p52在LTβR誘導(dǎo)的信號(hào)途徑中的作用一致，尤其是與次級(jí)淋巴器官的發(fā)育有關(guān)。

RelB的獨(dú)特之處在于不能形成同源二聚體，也不與c-Rel或p65形成異源二聚體，它僅與p100，p52，p50形成異源二聚體，且除了與p100相互作用外不與其它I-κB蛋白作用。只有胸腺、淋巴結(jié)和派伊爾結(jié)（Peyer’s patches）的特定區(qū)域才能檢測(cè)到RelB的大量表達(dá)。與它的表達(dá)分布一致的是，RelB的主要功能是促進(jìn)次級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)的形成和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答中某些類(lèi)型細(xì)胞的發(fā)育和功能。研究表明，RelB:p52二聚體表現(xiàn)出組成型的核定位，而且RelB參與多種組織中NF-κB的組成型激活。RelB-/-小鼠的胸腺和脾臟細(xì)胞中表現(xiàn)出NF-κB活性的下降，并且使多種器官中的炎性浸潤(rùn)增強(qiáng)，適應(yīng)性免疫應(yīng)答也有嚴(yán)重缺陷，如果p50也敲除，這種表型會(huì)更加明顯，這表明p50和RelB共同調(diào)節(jié)限制炎癥的基因的表達(dá)。各種研究顯示，RelB對(duì)于淋巴器官的發(fā)生很重要，尤其是派伊爾結(jié)的發(fā)育，這些發(fā)現(xiàn)使人們開(kāi)始關(guān)注RelB：P52在淋巴器官發(fā)生中的作用（很可能是通過(guò)LTβR信號(hào)通路）。

c-Rel可以形成同源二聚體，也可以與p65或p50形成異源二聚體。c-Rel-/-小鼠不能產(chǎn)生有價(jià)值的體液免疫應(yīng)答，并且外周的T、B細(xì)胞對(duì)典型的抗原刺激不應(yīng)答。缺少c-Rel的TAD區(qū)，但有完整的

RHD區(qū)的小鼠表現(xiàn)出更嚴(yán)重的表型，如次級(jí)淋巴器官顯著增生和骨髓增生。表明c-Rel對(duì)機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)可能具有重要的作用。

以上主要通過(guò)基因敲除的研究結(jié)果討論了NF-κB各亞基蛋白的功能，但是由于NF-κB各亞基之間可能具有功能上的重疊性以及相關(guān)性，所以單獨(dú)敲除一個(gè)亞基的基因可能不能完全表現(xiàn)出該基因的功能。多亞基敲除的實(shí)驗(yàn)可以幫助我們更深入地研究NF-κB轉(zhuǎn)錄因子的功能，并且已有研究表明，多亞基缺失的小鼠確實(shí)表現(xiàn)出新的表型或者更加嚴(yán)重的病理癥狀[12]。

2.2 IκB家族蛋白

NF-κB抑制因子(InhibitorofkappaB,I-κBs)是一類(lèi)NF-κB抑制蛋白,其中包括IκBα、IκBβ、IκBλ、IκBε、IκBNS、Bcl-3、IκBζ以及果蠅的Cactus蛋白等亞基，它們的分子中都含有五到七個(gè)在進(jìn)化上很保守的錨蛋白重復(fù)序列，該重復(fù)序列可以通過(guò)與NF-κB的RHD結(jié)構(gòu)域結(jié)合，掩蔽NF-κB的核定位序列，從而使NF-κB滯留在胞質(zhì)中。另外，IκB家族中還包括一些不具有抑制NF-κB活化功能的蛋白，如Bcl-3和IκBζ等。下面分別介紹一下各亞基的功能。

靜息狀態(tài)下IκBα通過(guò)與NF-κB轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合掩蔽了NF-κB二聚體的核定位信號(hào)，同時(shí)也干擾了NF-κB與DNA的結(jié)合，從而阻抑了NF-κB的轉(zhuǎn)錄功能。NF-κB信號(hào)通路可被多種外來(lái)信號(hào)如TNFα、生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子、淋巴因子、紫外線(xiàn)、藥物、壓力等激活。在外來(lái)信號(hào)的作用下,IκBα蛋白N端的兩個(gè)保守的絲氨酸Ser32和Ser36被IKKβ磷酸化，繼而被SCFβ-TrCPE3泛素連接酶復(fù)合體識(shí)別，從而促使IκBα分子中的Lys21及Lys22位點(diǎn)被泛素化修飾，并被26S蛋白酶體識(shí)別和快速降解。NF-κB被釋放出來(lái)并進(jìn)入細(xì)胞核，與特定基因的啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合，從而啟動(dòng)靶基因的轉(zhuǎn)錄。IκBα-/-小鼠表現(xiàn)出增強(qiáng)的NF-αB的DNA結(jié)合活性，但并不是組成性的，說(shuō)明p65:p50二聚體可能還受到其它機(jī)制的調(diào)控。新合成的IκBα參與反饋調(diào)節(jié)從而阻止NF-κB的進(jìn)一步激活，與此一致，IκBα-/-小鼠在TNF-α刺激下的NF-κB信號(hào)通路的結(jié)束顯著推遲。

IκBβ和IκBε的功能與IκBα相似，只是與不同的NF-κB二聚體的親和力不同，而且它們也受蛋白N端位點(diǎn)的磷酸化調(diào)控，如IκBβ的絲氨酸Ser19和 Ser23被IKKβ磷酸化，但是磷酸化和降解的動(dòng)力學(xué)反應(yīng)比IκBα要慢得多，可能是由于上游IKK激酶復(fù)合物與底物IκB的親和力差異等原因造成的。研究顯示，IκBε含有一個(gè)非經(jīng)典的NES，是c-Rel和IκBε返回胞質(zhì)所必需的，而且由于IκBε是在NF-κB激活后誘導(dǎo)的，因此它可能在調(diào)節(jié)NF-κB晚期基因的激活方面起一定作用。

Bcl-3和IκBζ與經(jīng)典的IκBs蛋白不同，而且與其他IκBs的同源性很差。Bcl-3可能作為共激活因子與p50（或p52）同源二聚體特異性結(jié)合，形成轉(zhuǎn)錄激活復(fù)合體，促進(jìn)轉(zhuǎn)錄，解除p50（或p52）同源二聚體的抑制作用。Bcl-3-/-小鼠可存活，但對(duì)于各種病原體無(wú)法產(chǎn)生合適的體液免疫應(yīng)答，它們?nèi)鄙倨⑸l(fā)中心，但血清抗體水平正常，并且無(wú)抗原特異性應(yīng)答，表型部分與p52-/-相似，也支持了Bcl-3與p52同源二聚體結(jié)合形成轉(zhuǎn)錄激活復(fù)合體，IκBζ可能促進(jìn)一系列NF-κB靶基因（如IL-6等）的活化[13]，但沒(méi)有其它直接證據(jù)證明它是IκB家族的有功能的成員，并且未顯示其與Rel家族成員相互作用。

2.3 IKK蛋白

IKK(IκBkinase)，它可以使NF-κB的抑制者IκB磷酸化，隨后引起IκB的泛素化和蛋白酶的降解，釋放和活化NF-κB。IKK主要以IKK復(fù)合體的形式發(fā)揮作用，IKK復(fù)合體主要包括IKKα（IKK1）、IKKβ（IKK2）和NEMO（NF-κBessential modulator，也叫IKKγ、IKKAP1、Fip-3），其中IKKα和IKKβ是催化亞基，NEMO是調(diào)節(jié)亞基。IKKα、IKKβ是一類(lèi)絲/蘇氨酸激酶，N端含一個(gè)蛋白激酶結(jié)構(gòu)域，C端是螺旋-環(huán)-螺旋結(jié)構(gòu)域 （HLH）和亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域（LZ），NEMO是一個(gè)分子量約為48KDa的蛋白，與IKKα、IKKβ不同，它的N端和C端含有大量的卷曲螺旋結(jié)構(gòu)（CC），C端還有一個(gè)鋅指樣結(jié)構(gòu)域（ZF）和一個(gè)亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域（LZ）。IKKα、IKKβ的二聚化依賴(lài)于LZ結(jié)構(gòu)域，而且此結(jié)構(gòu)域?qū)τ谄涞募っ富钚砸灿胸暙I(xiàn)。HLH結(jié)構(gòu)域?qū)τ贗KK的激活是必須的，而且它和IKK激酶活性的負(fù)調(diào)控有關(guān)。IKKα、IKKβ與NEMO的作用是通過(guò)C端的六肽序列（Leu-Asp-Trp-Ser-Trp-Leu），即 NBD（NEMO binding domain）實(shí)現(xiàn)的。NEMO也能通過(guò)其CC和LZ結(jié)構(gòu)域形成多聚體，主要是三聚體或四聚體。由于 IKK復(fù)合體中存在兩個(gè) IKKα/IKKβ二聚體，NEMO很可能是以四聚體的形式存在的。組裝IKK

復(fù)合體時(shí)，NEMO通過(guò)其N(xiāo)端的CC結(jié)構(gòu)域與IKKβ的C端的NBD結(jié)構(gòu)域結(jié)合，而且有研究顯示，移除HLH結(jié)構(gòu)域，IKK與NEMO無(wú)法結(jié)合，這說(shuō)明HLH結(jié)構(gòu)域可能促進(jìn)IKK與NEMO的裝配。IKKα和IKKβ的序列具有很高的同源性，其全部序列有52%的同源性，催化區(qū)有65%的同源性。IKKα、IKKβ和IKKγ的蛋白分子量總和約為220kDa，但I(xiàn)KK復(fù)合體的分子量約為700～900KDa，這說(shuō)明IKK復(fù)合體中還有其他組分，或IKK復(fù)合體中的亞基以聚合體的形式存在。下面分別介紹一下IKK復(fù)合物各亞基的功能。

IKKβ亞基主要在TNF、IL-1和LPS等誘導(dǎo)的促炎反應(yīng)信號(hào)通路中行使磷酸化IκB蛋白的功能，是IKK復(fù)合物的主要的催化亞基，而且是快速激活NF-κB所必需的。IKKβ能特異地磷酸化IκBα、IκBβ和IκBε分子中特定的Ser殘基。以IκBα為例，IKKβ活化后將IκBα的Ser32和Ser36兩個(gè)位點(diǎn)磷酸化，IκBα隨即被E3泛素連接酶識(shí)別并導(dǎo)致26S蛋白酶體依賴(lài)的降解，從而使NF-κB二聚體被釋放并活化，這條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑叫做NF-κB激活的經(jīng)典信號(hào)途徑。IKKβ-/-小鼠由于肝細(xì)胞發(fā)生凋亡，在胚胎發(fā)育的E12.5-E14.5天時(shí)死亡，這與p65-/-及p65-/-p50-/-基因敲除小鼠的表型一致。IKKβ-/-細(xì)胞比野生型細(xì)胞對(duì)TNFα誘導(dǎo)的凋亡更加敏感，而且TNFα、IL-1和dsRNA等刺激不能誘導(dǎo)IKKβ-/-細(xì)胞中NF-κB的活化。IKKβ+/-細(xì)胞中IKKβ的表達(dá)量降低了一半，導(dǎo)致IKK的激酶活性降低了～50%，NF-κB的活性則降低了～70%～80%。IKKβ-/-TNFR-/-雙敲除小鼠在細(xì)菌感染的固有免疫應(yīng)答中存在明顯缺陷，出生后僅存活幾天，但p65-/-TNFR-/-雙敲除小鼠可存活數(shù)月，這說(shuō)明IKKβ的作用不能被IKKα或其它激酶補(bǔ)償。以上結(jié)果都表明IKKβ是固有免疫和炎癥反應(yīng)等過(guò)程中激活NF-κB所必需的蛋白激酶，主要在NF-κB的經(jīng)典途徑中發(fā)揮作用。

雖然IKKα和IKKβ的的序列有很高的相似性，但是它們?cè)诠δ苌蠀s有很大的不同。IKKα-/-小鼠在出生后4小時(shí)就由于多種形態(tài)缺陷而死亡，尤其是表皮和骨骼的發(fā)育存在明顯缺陷。與IKKβ-/-小鼠不同，IKKα-/-小鼠中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞的凋亡，而且在IKKα-/-小鼠的胚胎成纖維細(xì)胞、原初上皮細(xì)胞和肝細(xì)胞中，TNFα、IL-1和LPS的刺激均能誘導(dǎo)正常的IKK復(fù)合物的活化和IκB的降解，表明IKKα不是固有免疫和炎癥反應(yīng)中NF-κB活化所必需的，而可能在發(fā)育過(guò)程中有重要作用，因?yàn)樾律腎KKα-/-小鼠表現(xiàn)出缺乏四肢、尾巴和耳朵，顱面部發(fā)育失常，皮膚光滑緊繃，上皮的形成和構(gòu)造明顯異常等表型。研究發(fā)現(xiàn)，IKKα的激酶失活突變體IKKα(AA)（IKKα的激酶區(qū)的兩個(gè)絲氨酸突變?yōu)楸彼幔┠軌蜃钄郚IK誘導(dǎo)的p100的剪切作用；反之，過(guò)量表達(dá)持續(xù)激活的IKKα（EE）（IKKα的激酶區(qū)的兩個(gè)絲氨酸突變?yōu)槟M磷酸化的谷氨酸）突變體則能促進(jìn)p100的剪切。同時(shí)，IKKα-/-小鼠與p100-/-小鼠表型相似，并且在IKKα-/-細(xì)胞中，p100不能被正常剪切，而p100的剪切在IKKβ和IKKλ缺失的情況下沒(méi)有明顯異常。以上突變體和基因敲除實(shí)驗(yàn)表明，IKKα可能通過(guò)被上游蛋白激酶NIK激活的方式誘導(dǎo)p100蛋白的磷酸化和剪切，最終生成特定的NF-κB二聚體形式——p52:RelB，這條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑叫做NF-κB激活的非經(jīng)典途徑，因此IKKα主要參與NF-κB激活的非經(jīng)典途徑。研究發(fā)現(xiàn)，IKKα的上述活化方式是在某些TNF家族成員的刺激下發(fā)生的，包括B細(xì)胞激活因子 （Bcell-activating factor，簡(jiǎn)稱(chēng)BAFF），淋巴毒素β（LTβ）以及CD40的配體等。但在某些情況下IKKα也會(huì)參與經(jīng)典的NF-αB激活途徑。此外，IKKα還與角質(zhì)細(xì)胞的分化有關(guān)，但此功能是不依賴(lài)其激酶活性的，而且與NF-κB激活無(wú)關(guān)，但有研究表示可能與其N(xiāo)LS有關(guān)。

IKKα-/-IKKβ-/雙敲除小鼠在NF-κB信號(hào)通路中有更多的缺陷，發(fā)育過(guò)程中無(wú)法形成神經(jīng)胚，IKKα-/-IKKβ-小鼠的胚胎成纖維細(xì)胞對(duì)于TNFα、IL-1和LPS的刺激不應(yīng)答，但神經(jīng)胚的缺失在IKKλ-/-小鼠中沒(méi)有出現(xiàn)。

同IKKβ一樣，NF-κB活化的經(jīng)典信號(hào)途徑也需要IKKλ。IKKλ負(fù)責(zé)將IKK復(fù)合物的催化亞基與上游信號(hào)通路聯(lián)系起來(lái)，它通過(guò)C端與上游的接頭蛋白作用激活I(lǐng)KK，而N端與IKKα、IKKλ結(jié)合。但在IKKα依賴(lài)的非經(jīng)典信號(hào)途徑中不需要IKKλ。IKKλ的功能失活（loss-of-function）和基因敲除實(shí)驗(yàn)都表明，IKKλ是NF-κB激活的經(jīng)典信號(hào)途徑中IKK激酶復(fù)合物活化所必需的。IKKλ-/-小鼠在E12.5-E13天由于大量的肝細(xì)胞凋亡而死，用TNFα、IL-1和LPS等處理IKKλ-/-小鼠的胚胎成纖維細(xì)胞，IKK激酶復(fù)合物和NF-κB均不能被活化，

NF-κB的激活完全阻斷。IKKλ可能將兩個(gè)IKKα/β二聚體在空間距離上拉近，從而使它們通過(guò)transautophosphorylation作用互相活化來(lái)介導(dǎo)信號(hào)通路。

3 NF-κB活化的信號(hào)途徑

如前所述，NF-κB激活的信號(hào)途徑主要分為經(jīng)典信號(hào)途徑（classicalpathway或canonicalpathway）和非經(jīng)典信號(hào)途徑 （alternativepathway或noncanonicalpathway）(Senftlebenetal.,2001)。除此之外，研究表明還存在其它的NF-κB活化信號(hào)途徑。

3.1 NF-κB激活的經(jīng)典信號(hào)途徑

在病原微生物感染或其誘導(dǎo)的炎癥因子的刺激下，NF-κB通常依賴(lài)經(jīng)典信號(hào)途徑被活化。簡(jiǎn)言之就是NF-κB二聚體，如p50:RelA，通過(guò)與抑制性IκB蛋白（通常是IκBα）結(jié)合而被滯留在細(xì)胞質(zhì)中；某些配體與細(xì)胞表面受體（如TNF受體或Toll樣受體等）的結(jié)合招募下游接頭蛋白（如TRAF家族蛋白或RIP等），繼而招募IKK復(fù)合物 （包括IKKα、IKKβ催化亞基和IKKλ調(diào)節(jié)亞基），并導(dǎo)致IKK復(fù)合物的活化；IKK復(fù)合物，尤其是IKKβ亞基磷酸化IκB蛋白的兩個(gè)絲氨酸殘基，導(dǎo)致IκB蛋白的泛素化和蛋白酶體依賴(lài)的降解，并釋放NF-κB進(jìn)入細(xì)胞核，激活下游基因轉(zhuǎn)錄。經(jīng)典途徑被認(rèn)為是大多數(shù)NF-κB激活的主要模式，但不是唯一模式。經(jīng)典途徑激活主要誘導(dǎo)產(chǎn)生黏附分子VCAM-1、ICAM-1、E-selectin，炎癥趨化因子IL-8、RANTES、MCP-1，細(xì)胞因子IL-6、TNFα、IL-1β等，因此對(duì)于炎癥反應(yīng)和固有免疫應(yīng)答很重要。TNF信號(hào)通路的特征是它既可以誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡又可以促使細(xì)胞存活，這兩條通路的平衡導(dǎo)致細(xì)胞的活化。如果激活NF-κB的信號(hào)通路活化，結(jié)果就是使細(xì)胞存活，但如果NF-κB的活化被阻遏，TNF就變成一個(gè)有力的細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)因子。TNF信號(hào)通路的兩個(gè)靶轉(zhuǎn)錄因子，NF-κB和AP-1，也直接參與凋亡或存活的選擇，長(zhǎng)時(shí)間的JNK/AP-1的激活導(dǎo)致凋亡，而NF-κB可誘導(dǎo)合成一些效應(yīng)物來(lái)阻斷JNK/AP-1信號(hào)通路，因此限制JNK/AP-1的激活，如GADD45β，通過(guò)阻斷上游的激酶MKK7抑制JNK/AP-1信號(hào)通路。但JNK和NF-κB的作用也不是完全對(duì)立的，如抗凋亡蛋白cIAP1就是JNK和NF-κB共同調(diào)節(jié)的。

研究表明，很多NF-κB信號(hào)途徑的負(fù)調(diào)節(jié)分子通過(guò)抑制TIR受體家族誘導(dǎo)的信號(hào)通路來(lái)發(fā)揮作用，如SIGIRR（singleimmunoglobulinIL-1Rrelatedmolecule）、ST2、IRAK-M、MyD88s（splicing variantof MyD88）等。SIGIRR是TIR受體家族的一種孤受體（orphan receptor），可能通過(guò)與受體、IRAK和TRAF6等蛋白形成復(fù)合體從而競(jìng)爭(zhēng)性地抑制TIR信號(hào)通路；ST2也屬于TIR受體家族中的孤受體，ST2缺失小鼠的巨噬細(xì)胞在IL-1或LPS刺激時(shí)均比野生型細(xì)胞產(chǎn)生了更多的促炎細(xì)胞因子，有實(shí)驗(yàn)證明ST2可以在LPS等刺激下誘導(dǎo)產(chǎn)生，并抑制MyD88依賴(lài)的TLR/IL-1R激活NF-κB的信號(hào)通路；IRAK-M是IRAK家族成員之一，它只在單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中表達(dá)，并且在細(xì)胞受到TLR/IL-1R的配體刺激時(shí)表達(dá)量有所增加，它可能通過(guò)干擾IRAK1的功能，阻礙IRAK1與TRAF6之間的相互作用來(lái)行使負(fù)調(diào)控功能的。MyD88s是MyD88的一種剪切形式，缺失了DD和TIR結(jié)構(gòu)域之間很短的一段序列。MyD88s在單核細(xì)胞中受LPS的誘導(dǎo)時(shí)表達(dá)量上調(diào)，但是它不能與IRAK4結(jié)合，因此它通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性地阻止IRAK4被招募到受體復(fù)合物上，從而成為T(mén)IR受體家族介導(dǎo)的NF-κB活化信號(hào)途徑的負(fù)反饋調(diào)節(jié)因子。

NF-κB激活的非經(jīng)典信號(hào)途徑。B細(xì)胞和T細(xì)胞器官發(fā)育過(guò)程中，某些胞外信號(hào) （如LTβ、BAFF或CD40L等）的刺激會(huì)誘導(dǎo)NF-κB非經(jīng)典信號(hào)途徑的激活。該途徑主要通過(guò)激活信號(hào)分子NIK激酶，繼而磷酸化含有兩個(gè)IKKα亞基的復(fù)合體；IKKα復(fù)合體通過(guò)磷酸化p100導(dǎo)致其被剪切，從而促成p52:RelB二聚體的形成，激活特定基因轉(zhuǎn)錄。p52:RelB是細(xì)胞中存在的一種NF-αB異源二聚體形式，當(dāng)p52的前體分子p100與RelB結(jié)合時(shí)，二聚體處于非活性狀態(tài)，當(dāng)p100被剪切產(chǎn)生p52時(shí)形成有活性的p52:RelB。NF-κB激活的非經(jīng)典途徑是不依賴(lài)IKKβ和IKKλ的，它是由TNFR家族的部分成員，如B細(xì)胞上的BAFF-R和CD40以及脾基質(zhì)細(xì)胞上的LTβR等介導(dǎo)的(Bonizzi et al.,2004)。非經(jīng)典信號(hào)途徑的激活對(duì)于次級(jí)淋巴器官的發(fā)育和維持及適應(yīng)性免疫應(yīng)答很重要。

3.2 NF-κB激活的其他信號(hào)途徑

除了上述經(jīng)典途徑和非經(jīng)典途徑之外，NF-κB的激活也可以由IKK非依賴(lài)性的信號(hào)途徑介導(dǎo)。比如，紫外線(xiàn)（UV）輻射等刺激誘導(dǎo)的NF-κB的活化似乎就不需要IKK復(fù)合物的參與，而是p50（或

p52）同源二聚體與共激活因子Bcl-3等相互作用，從而具有轉(zhuǎn)錄激活活性。

4 NF-κB信號(hào)通路的調(diào)節(jié)機(jī)制

細(xì)胞內(nèi)NF-κB的活性是受到嚴(yán)格的調(diào)控的，因?yàn)橐坏㎞F-κB活化失控，就會(huì)破壞機(jī)體的平衡，導(dǎo)致包括各種癌癥、神經(jīng)退行性疾病、毛細(xì)血管擴(kuò)張失調(diào)癥、慢性炎癥及各種自身免疫疾病等多種疾病的發(fā)生。因此，研究NF-κB的活性調(diào)節(jié)機(jī)制不僅對(duì)研究細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的基礎(chǔ)理論有重要意義，而且也為相關(guān)疾病的治療及藥物研發(fā)提供了新的途徑和靶標(biāo)。

許多激活NF-κB的信號(hào)通路在IKK水平上交匯，因此它是NF-κB調(diào)節(jié)機(jī)制的關(guān)鍵。IKK活化的模式可能是：在靜息狀態(tài)時(shí)，IKKα和 IKKβ與NEMO結(jié)合，掩蔽了IKK的激酶區(qū)，因此阻礙了IKK的活化。NEMO與接頭蛋白R(shí)IP等的結(jié)合或NEMO的泛素化修飾導(dǎo)致NEMO的寡聚化，從而使IKK復(fù)合體的構(gòu)象發(fā)生改變，使IKK的激酶區(qū)暴露出來(lái)，接著激酶區(qū)內(nèi)的活化環(huán)結(jié)構(gòu)中兩個(gè)保守的Ser殘基通過(guò)transautophosphorylation或IKK激酶如TAK1等被磷酸化修飾，導(dǎo)致IKK的活化?；罨腎KK接著使下游的底物磷酸化，包括IκB、IKK的NBD的Ser740和IKK的C端HLH結(jié)構(gòu)域中的多個(gè)Ser位點(diǎn)和NEMO的Ser68等。NEMO的磷酸化使NEMO從IKK復(fù)合體上解離下來(lái)，接著分子伴侶Hsp-90/Cdc37和蛋白磷酸化酶 PP2A（protein phosphatase2A）或PP2Cβ使IKK復(fù)合體重新裝備成無(wú)活性的形式。

IKK復(fù)合物的活化是依賴(lài)于磷酸化修飾的，IKK復(fù)合物在用蛋白磷酸化酶PP2A或PP2Cβ處理時(shí)失去激酶活性，而用PP2A的抑制劑okadaic acid處理時(shí)又能恢復(fù)IKK的活性。像其它蛋白激酶一樣，IKKα和IKKβ的激酶結(jié)構(gòu)域中都包含一個(gè)活化環(huán)（activation loop）結(jié)構(gòu)，IKK激酶復(fù)合物受到上游信號(hào)刺激后，活化環(huán)結(jié)構(gòu)中兩個(gè)保守的Ser殘基被磷酸化修飾，導(dǎo)致IKK的激活。IKKα主要依賴(lài)活化環(huán)結(jié)構(gòu)中的Ser177和Ser181兩個(gè)位點(diǎn)被磷酸化而獲得激酶活性，活化的IKKβ還可以通過(guò)自身磷酸化使C端HLH結(jié)構(gòu)域中的多個(gè)Ser位點(diǎn)進(jìn)一步磷酸化。如果將IKKβ中的Ser177和Ser181都替換成丙氨酸，即將IKKβ(SS)替換成IKKβ(AA)，就會(huì)阻斷IKKβ的活化；反之，如果將它們替換成模擬磷酸化的谷氨酸，即IKKβ(EE)，則會(huì)導(dǎo)致IKKβ的持續(xù)活化。同樣的，IKKα蛋白的活化環(huán)結(jié)構(gòu)中相應(yīng)位置的Ser176和Ser180在細(xì)胞受到刺激時(shí)也有類(lèi)似的修飾和功能。IKKβ的C端Ser富集區(qū)的缺失突變體在TNFα刺激下正常激活，但活化的持續(xù)時(shí)間增長(zhǎng)，說(shuō)明IKKβ的C端HLH結(jié)構(gòu)域中Ser富集區(qū)的自身的磷酸化是一個(gè)負(fù)調(diào)節(jié)機(jī)制。

活化IKK復(fù)合物的激酶叫做IKK-K，很多上游的激酶被認(rèn)為是IKK-K，但在基因敲除實(shí)驗(yàn)中大多數(shù)都缺乏證據(jù)，這更說(shuō)明IKK可能主要是通過(guò)自身的磷酸化來(lái)調(diào)節(jié)的，而更多的IKK-K可能是接頭蛋白而非激酶。IKK的自身的磷酸化可能是由于受到上游信號(hào)刺激后使得IKKα-IKKβ之間的空間距離接近或構(gòu)象改變從而導(dǎo)致互相活化，這可以由IKK的多聚化或多種接頭蛋白如RIP、TRAF募集IKK來(lái)介導(dǎo)。研究表明參與NF-κB活化經(jīng)典信號(hào)途徑的IKK-K可能主要是TAK1，而參與非經(jīng)典信號(hào)通路的是NIK。TAK1在TNFα或IL-1等刺激下可以被激活，并且活化的TAK1存在于IKK激酶復(fù)合物中。NIK則是通過(guò)直接磷酸化并活化IKKα的方式，激活由LTβR和BAFF-R等誘導(dǎo)的NF-κB活化的非經(jīng)典信號(hào)途徑[14]。

因?yàn)镮KK的激活與很多接頭蛋白有關(guān)，如RIP、TRAF等，所以也可以通過(guò)這些接頭蛋白間接的調(diào)節(jié)IKK的激活。如前所述，泛素化的修飾在此類(lèi)調(diào)節(jié)中發(fā)揮了很重要的作用，研究表明，通過(guò)泛素分子第48位賴(lài)氨酸（K48）連接的多聚泛素鏈的修飾通常與蛋白降解有關(guān)，而K63位連接的泛素化修飾通常與蛋白功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。TRAF家族蛋白可以作為E3泛素連接酶將自身和IKKλ以K63位連接的方式泛素化，并通過(guò)共價(jià)連接的多聚泛素鏈與TAB2-TAB3-TAK1復(fù)合體相互作用，從而使TAK1活化激活 IKK復(fù)合物。而去泛素化酶DUB通過(guò)去除RIP、TRAF以及IKKλ等蛋白的K63位泛素化而起到負(fù)調(diào)節(jié)的作用，如A20和CYLD。A20依賴(lài)其N(xiāo)端去泛素化酶結(jié)構(gòu)域OTU去除RIP蛋白的K63位連接的多聚泛素鏈，從而抑制RIP的功能；再借助其C端鋅指結(jié)構(gòu)域的泛素連接酶功能使RIP被K48位連接的泛素化修飾，從而使RIP被蛋白酶體降解。因此A20是通過(guò)去除RIP蛋白的K63位功能調(diào)節(jié)型泛素化和誘導(dǎo)K48位降解型泛素化修飾的

雙重作用來(lái)進(jìn)行負(fù)調(diào)控的。CYLD依賴(lài)其C端的一個(gè)在Dubs家族中廣泛存在的UBP結(jié)構(gòu)域發(fā)揮去泛素化作用，它通過(guò)與TRAF2和IKKα分別相互作用，特異地去除它們的K63位連接的泛素鏈，從而阻斷IKK復(fù)合物的活化。

另外，還有一些蛋白通過(guò)與IKK結(jié)合來(lái)調(diào)節(jié)IKK的激活，如Hsp-90/Cdc37和ELKS。Hsp90可能在IKK激酶復(fù)合物中充當(dāng)分子伴侶的作用，促進(jìn)激酶蛋白的正確折疊，Hsp-90/Cdc37的抑制者GA，抑制了TNFα刺激下的IKK的激活，它也可以和NF-κB信號(hào)通路中的多種激酶作用，如RIP、NIK、TBK1等，有研究表明，Hsp-90/Cdc37可能和IKKα結(jié)合從而調(diào)節(jié)IKKα的寡聚狀態(tài)。ELKS是通過(guò)免疫親和純化的方法篩選出來(lái)的與IKKα相互作用的蛋白，它的結(jié)構(gòu)與IKKα相似也含有CC結(jié)構(gòu)域和LZ結(jié)構(gòu)域。在未受刺激的細(xì)胞中，ELKS是IKK復(fù)合物的化學(xué)組分之一。RNAi介導(dǎo)的ELKS表達(dá)量的降低抑制了IKK的激活以及TNFα和IL-1誘導(dǎo)的前期NF-κB的激活，但是對(duì)NF-κB后期激活沒(méi)有顯著影響。另外，在免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)中ELKS與IκBα能夠相互結(jié)合，而降低ELKS的表達(dá)量則破壞了IKK復(fù)合物與IκBα的結(jié)合，表明ELKS可能招募IκBα到IκBα復(fù)合物中IKK。

NF-κB的活化還可以通過(guò)IκB蛋白來(lái)調(diào)節(jié)，主要涉及IκBα。我們都知道IκB蛋白的降解釋放了NF-κB二聚體，使其可以入核激活相應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄。IκBα也是NF-κB轉(zhuǎn)錄激活的靶基因之一，NF-κB的活化導(dǎo)致IκBα的表達(dá)，產(chǎn)生的IκBα蛋白進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)與活化的NF-κB結(jié)合，由于NF-κB與IκBα的親和力大于其與DNA結(jié)合的親和力，于是NF-κB和IκBα復(fù)合體從DNA上解離下來(lái)，并通過(guò)IκBα分子上的核輸出信號(hào) （nuclearexportsignal，簡(jiǎn)稱(chēng)NES）將NF-κB帶回細(xì)胞質(zhì)中，從而中止NF-κB的活化。因此，NF-κB的活化一方面啟動(dòng)很多效應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄，另一方面生成IκBα蛋白負(fù)反饋調(diào)節(jié)NF-κB的活性，中止NF-κB活化信號(hào)，從而控制NF-κB的應(yīng)答的強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間[16]。除了誘導(dǎo)產(chǎn)生IκBα對(duì)NF-κB的轉(zhuǎn)錄激活進(jìn)行調(diào)節(jié)外，還有很多方式影響NF-IκB的轉(zhuǎn)錄激活活性，如NF-κB家族蛋白的翻譯后的修飾、與一些轉(zhuǎn)錄共因子作用等。NF-κB家族蛋白的翻譯后的修飾涉及磷酸化修飾及乙酰化修飾，以p65為例，蛋白激酶A（PKA）可以使p65的Ser276磷酸化，此磷酸化有兩個(gè)作用，一是可以增強(qiáng)p65與DNA的結(jié)合能力；一是為轉(zhuǎn)錄共激活因子CBP/p300提供一個(gè)作用位點(diǎn)，未磷酸化的p65，C端與Rel區(qū)相互作用，因此阻礙了p65與DNA及CBP/p300的結(jié)合，Ser276位的磷酸化阻止了這種分子內(nèi)的C端與N端的作用，因此增強(qiáng)了NF-κB的轉(zhuǎn)錄激活活性；此外IKK也可以通過(guò)對(duì)p65的Ser536位磷酸化來(lái)增強(qiáng)NF-κB的轉(zhuǎn)錄激活活性。研究表明p65共有4個(gè)磷酸化位點(diǎn)，2個(gè)在Rel同源區(qū)（Ser276、Ser311），2個(gè)在TAD區(qū)，轉(zhuǎn)錄的激活可能需要每組中至少一個(gè)位點(diǎn)磷酸化。而p65的乙?；婕岸鄠€(gè)位點(diǎn)，其中K218、K221的乙?；鰪?qiáng)轉(zhuǎn)錄激活活性，可能是通過(guò)減弱與核內(nèi)IκBα的結(jié)合的方式來(lái)作用，而K122、K123的乙?；瘎t抑制轉(zhuǎn)錄激活活性，可能是降低了與DNA的親和力。NF-κB還可以與一些轉(zhuǎn)錄共因子作用，如C/EBP，AP-1，Sp-1，SRF，STAT6等，來(lái)調(diào)節(jié)其轉(zhuǎn)錄激活[17]。

5 小結(jié)與展望

總之，NF-κB信號(hào)通路對(duì)于機(jī)體的固有免疫和炎癥反應(yīng)以及適應(yīng)性免疫等生理病理過(guò)程是非常關(guān)鍵的，因此NF-κB信號(hào)通路的失控會(huì)導(dǎo)致許多人類(lèi)疾病，尤其是與慢性炎癥、免疫缺陷以及癌癥相關(guān)的疾病，如哮喘、動(dòng)脈粥樣硬化、炎性腸炎，AIDS、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、癌癥等。研究表明，許多類(lèi)型的癌癥中都存在NF-κB的組成型激活。因此，對(duì)轉(zhuǎn)錄因子NF-κB活化機(jī)制的研究，不僅對(duì)于探討細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的基礎(chǔ)理論有重要的意義，而且也為某些疾病的治療及藥物開(kāi)發(fā)奠定了理論基礎(chǔ)，提供了新的途徑和靶標(biāo)。近年來(lái)的研究已極大的完善和補(bǔ)充了NF-κB信號(hào)通路，但仍有許多問(wèn)題等待解決，如對(duì)于不同的NF-κB二聚體的調(diào)節(jié)、泛素化修飾的確切的調(diào)節(jié)功能、以及細(xì)胞應(yīng)激引起的NF-κB的活化的具體機(jī)制等等，都需要更深入的研究。

[1]Hayden M.S,GhoshS.Shared Principles in NF-κBSignaling [J].Cell.2008,132:344-362.

[2]Karin M,Greten F.R."NF-κB:linking inflammation and immunity to cancer development and progression[J].Nature Re views Immunology.2005,5:749-759.

[3]Bonizzi G,Karin M.The two NF-kappaB activation pathways and their role in innate and adaptive immunity[J].Trends in immunology.2014,25:280-288. [4]SenR,Baltimore D.Multiple nuclear factors interact with the immunoglobulinenhancersequences[J].Cell.1986（46）:705-716.

[5]Atchison M.L,Perry R.P.The role of the enhancer and its binding factor NF-κBinthe developmental regulation of gene transcription[J].Cell.1986,48:121-128.

[6]Hayden M.S,Ghosh S.Signaling to NF-κB[J].Genes&De velopment.2013,18:2195-2224.

[7]Ghosh S.;May M.J and Kopp E.B.NF-κB and rel proteins: evolutionarily conserved mediators of immune responses[J]. Annual Reviewof Immunology.2008,16:225-260.

[8]Pahl H.L.Activators and target genes of Rel/NF-κB tran scription factors[J].Oncogene.1999（18）:6853-6866.

[9]Guttridge D.C,Albanese C.etal.NF-κB controls cell growth and differentiation through transcriptional regulation of cyclin D1[J].Molecularand Cellular Biology.1999（19）:5785-5799.

[10]Karin,Ben-NeriahY.Phosphorylation meets ubiquitination: the control of NF-kappaB activity[J].Annual Review of Immunology.2006,18:621-663.

[11]ChenY.H,Carmody R.J.Nuclear Factor-κB:activation and regulation during Toll-Like receptor signaling[J].Cellular& Molecular Immunology.2007,4(1):31-41.

[12]AkiraS,TakedaK.Toll-likereceptorsignalling.NatRev Im munol.2004,4:499-511.

[13]BeutlerB.Inferences,questions and possibilities in Toll-like receptor signalling[J].Nature.2014,430:257-263.

[14]ChenZ.J.Ubiquitin signalling in the NF-kappaB pathway[J]. Nat Cell Biol.2005,7:758-765.

[15]DuttaJ,Fan Y,Gupta N,Fan G,Gelinas C.Current insights in to the regulation of programmed cell deathby NF-kappaB[J]. Oncogene.2006,25:6800-6816.

[16]Ea C.K,Deng L,Xia Z.P,Pineda G,Chen Z.J.Activation of IKK by TNFalpha requires site-specific ubiquitination of RIP1 and polyubiquitin bindingby NEMO[J].MolCell.2006, 22:245-257.

[17]PerkinsN.D.Post-translational modifications regulating the activity and function of the nuclear factor kappa B pathway[J]. Oncogene.2013,25:6717-6730.

TN911.6

甘肅省自然科學(xué)基金項(xiàng)目（NO.1107RJZA141）；蘭州市社會(huì)發(fā)展項(xiàng)目（NO.2013-3-72）

△ 通訊作者：朱嘉寧，碩士。研究方向：動(dòng)物保護(hù)生物學(xué)，Email:bluedreame@163.com。