食品中罌粟殼理化檢測相關問題的探討*

張　婷，俞祖亮，孫　冊，梁俊陽

(中國刑事警察學院法化學系,遼寧　沈陽　110035)

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食品中罌粟殼理化檢測相關問題的探討*

張婷，俞祖亮，孫冊，梁俊陽

(中國刑事警察學院法化學系,遼寧沈陽110035)

罌粟殼及其提取物作為一類麻醉物質被非法添加在食品中會危害人體的健康。對食品中非法添加罌粟殼的行為認定、監(jiān)督和管理，在司法實踐工作中存在一些問題，其中最主要的理化檢測中存在的問題制約了對食品安全違法行為的有效監(jiān)管。探討罌粟殼檢測標準化方法制定、快速檢驗和實驗室確證檢驗、安全性閾值設定、實驗室間能力驗證等問題，以期對罌粟殼的檢測分析提供幫助。

食品；罌粟；理化檢驗；問題

食品安全越來越受到人們的關注，食品中使用罌粟殼(籽)屬于違法行為，因此對食品中罌粟殼進行理化檢測是證明此類違法行為的重要證據。但目前在對食品中罌粟殼檢測的科學性、規(guī)范性、法律性、安全性等方面還存在一些問題，導致在違法行為追究中的工作效率不高、對違法行為的處理依據不足等后果。因此，從理化檢測的角度研究和探討食品安全問題，以期能為食品中罌粟殼理化檢測的標準制定和實際檢驗鑒定工作提供參考。

1　理化檢測依據的問題

從1991年開始，衛(wèi)生部、公安部等多部門聯(lián)手發(fā)布了《關于查處在食品中使用罌粟殼(籽)等違法行為的通知》。當時因大型分析儀器不普及，理化檢測主要分析方法是薄層色譜法[1]、化學法和電化學法等[2-3]。因此各地所進行的食品中罌粟殼的檢驗方法根據“衛(wèi)生部衛(wèi)監(jiān)發(fā)(1992)第21號”文件《食品中阿片生物堿成分測定方法(暫行)》進行。

2008年和2011年衛(wèi)生部先后2次公布的第5批可能違法添加的非食用物質名錄中，再次將罌粟殼禁用的產品類別范圍擴大為“火鍋底料及小吃類食品”。1987年，罌粟殼列入國務院頒布的《麻醉藥品管理辦法》名錄中，在1997年之后罌粟均按麻醉藥品進行管理。此時有關食品中罌粟的理化檢測方法依據公安部行業(yè)標準GA/T 104-1995《鴉片毒品中嗎啡、可待因、蒂巴因、罌粟堿、那可汀的定性分析及嗎啡、可待因的定量分析方法》進行。

近年來，隨著高效液相色譜(HPLC)或高效液相色譜-質譜聯(lián)用儀(HPLC-MS)等高靈敏檢測分析儀器的出現(xiàn)，上海市食品藥品監(jiān)督管理局率先于2010年，頒布了《火鍋食品中罌粟堿、嗎啡、那可丁、可待因和蒂巴因的測定液相色譜-串聯(lián)質譜法》的地方性標準[4]。目前尚無國家標準化的有關食品中罌粟殼的檢驗方法出臺。

從各種理化檢測方法的變遷過程可以看出，已有的食品中罌粟殼的檢驗標準制定年代較早，薄層色譜法無法完成定量分析。氣相色譜法和氣相色譜-質譜聯(lián)用法定性分析和定量分析中有關雜質的去除未提及。HPLC-MS分析方法沒有規(guī)范統(tǒng)一的國家標準，也沒有開展實驗室檢測驗證能力的比較，統(tǒng)一標準缺乏和滯后將導致爭議下的工作被動，以及影響辦案工作進度。本著對食品中罌粟殼理化檢驗規(guī)范性的要求出發(fā)，制定相關的國家標準具有重要意義。

2　檢測方法的科學性和可行性問題

近些年來，國家及行業(yè)標準的制定范圍和新建標準的增速很快，但比起眾多實踐領域和不斷出現(xiàn)的新問題，標準制定則具有滯后性。盡管食品中罌粟殼的檢驗方法很多，但各個實驗室間的方法、水平、檢測設備的不同，很有可能面臨著檢測結果不一致的情況。

標準的制定過于嚴苛或需要配備昂貴的檢測設備，在我國目前經濟發(fā)展不平衡的情況下，基層單位將不能嚴格執(zhí)行標準，發(fā)揮不了食品安全的監(jiān)督和管理的作用。標準的制定如果直接照搬其他食品中非法添加物的檢測標準或者標準規(guī)定不細致、論證不充分的話，會加重理化檢驗的工作難度和工作強度。因此，行之有效的方法的檢驗方法制定后，開展實驗室間的有關食品中罌粟殼檢測的能力測試不失為是保證檢驗科學性的好方法。

3　檢測過程中的問題

食品中罌粟殼(籽)的檢驗過程分為現(xiàn)場快速檢驗和實驗室確證分析2個過程，目前在各個過程中均存在一些不完善和亟待解決的問題。

3.1免疫法快速檢測中的問題

現(xiàn)場快速檢測方法主要有化學法和免疫法[5-6]，其中免疫法具有快速、高通量、高靈敏和高特異性等優(yōu)點，在現(xiàn)場檢驗中更具優(yōu)勢。罌粟殼(籽)的主要生物堿有5種，其中含量較高的為嗎啡，約占10%，其次為那可汀，約占2%～5%，再次是罌粟堿，可待因，蒂巴因的含量約為0.2%～1%，因此嗎啡免疫膠體金試紙板應用較多[7]。嗎啡測試板主要用于吸食毒品者尿液的初篩檢驗。目前尚無針對食品檢測使用的專用測試板，在用于火鍋底料、調味品和鹵制品等食品時，常因蛋白質、脂肪等雜質含量過高而使得試紙擴散難進行。如果加水浸泡和提取后再進行免疫法測定，嗎啡的提取率不高，會出現(xiàn)假陰性結果。

張冬升、鈕偉民等[7-8]分別則是制備了罌粟堿抗體，應用酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測火鍋底料和湯料中罌粟堿的成分。盡管該方法的檢測限為0.1 μg/kg，檢測范圍為0.1～20 μg/kg，但罌粟堿抗體與其他阿片類生物堿有一定交叉反應，因此，初篩檢測中會有假陽性等問題。

此外免疫試紙法的準確性和穩(wěn)定性與生產廠家的工藝及試紙的保存、測試溫度、測試時間等使用情況有很大關系。免疫試紙法通常也只能作為初篩定性使用，不能用作定量分析。

3.2實驗室確證檢測的問題

實驗室確證方法包括有氣相色譜法(GC)[9-10]、氣相色譜-質譜聯(lián)用法(GC/MS)[11-13]、高效液相色譜法(HPLC)[14-20]、液相色譜-質譜聯(lián)用法(LC-MS)[21-25]、質譜法等[26-28]。所有上述儀器檢測前，均需要將食品等檢材制備成較潔凈且濃縮后的溶液才能進行分析。因此樣品的前處理方法對檢測結果影響較大。

3.2.1液液萃取前處理的問題

罌粟含有的生物堿具有在堿性條件下可溶于有機溶劑，在酸性條件下溶于水的特點，可以分別調節(jié)溶液至酸性后，用水及乙醇的混合溶液提取生物堿的鹽溶液，張靖采用酸性乙醇提取幾種生物堿的檢出限分別為嗎啡0.8 μg/L、可待因3 μg/L、罌粟堿0.3 μg/L。熊劍娟等采用硝酸銀溶液沉淀過濾后直接測定的方法。這樣的方法操作比較簡便，但由于雜質去除不徹底，很難應用在高靈敏的液-質聯(lián)用分析儀器中。

另一種前處理方法則是酸性條件下有機溶劑去除雜質后，再將水溶液調至堿性有機溶劑反萃取。有機溶劑萃取多選用混合有機溶劑，如李永芳等[10]用三氯甲烷-甲醇(3:1)提取。張艷萍[12]采用三氯甲烷-異丙醇(4:1)溶液提取。董南采用三氯甲烷-乙醇(9:1)溶液提取。上述方法中油脂去除較好，但有機溶劑用量過大，提取和旋轉揮發(fā)等操作次數多，較為繁瑣。

3.2.2固相萃取前處理的問題

近年使用LC-MS法，方法的靈敏度大為改善，但其對檢材有凈化要求，當分析食品中農藥殘留時一般采用固相萃取法，選用的萃取材料有MCX、ChemElut、PSA和無水硫酸鎂等。但HPLC-MS檢測過程中，不同的生物堿在質譜中的響應強度不同，通常選用的C18色譜柱檢測，由于嗎啡的分子極性較大，在該柱子上保留性差，嗎啡的檢出限要低于罌粟堿和那可汀。王力清等對調料中罌粟殼成分采用了超聲波提取，MCX固相萃取柱凈化，HPLC-MS/MS法進行檢測，調料中罌粟堿、那可丁的最低檢出限分別為0.8 μg/kg、1.0 μg/kg，嗎啡、可待因和蒂巴因的最低檢出限為50 μg/kg。劉敏敏等采用水提取、乙腈萃取火鍋底料中的生物堿成分，用PSA及無水硫酸鎂凈化，嗎啡的檢出限為37 μg/kg，其他4種檢出限為1 μg/kg?？紤]到嗎啡的極性較大，王柯等采用QuECHERS提取管提取罌粟殼中的生物堿成分，并使用了親水性的ACQUITY UPLC BEH HILIC色譜柱，結果罌粟堿、那可丁的檢出限均為5 μg/kg，其余為10 μg/kg。

可見，盡管HPLC-MS有較高的靈敏度，但在同一條件下，不可能使極性不同、結構相異的所有生物堿都有很高的響應，在所報道的方法中含量較低的罌粟堿檢出限要高于嗎啡。

3.2.3測定閾值的問題

分析測定閾值問題，這個檢測閾值不僅與樣品的前處理方法有關，也與儀器的靈敏度及運行保養(yǎng)有關，眾多的文獻檢出限較低只是計算出的檢出限而非真正測定的檢出限，罌粟中生物堿的檢測閾值設定應考慮對人體的安全接受量的前提下，合理制定，不能以無限追求最低的檢出靈敏度為標準。國外通行的認定嗎啡尿液陽性的閾值為10～40 ng/mL，低于這個值認定為陰性，這個閾值應區(qū)別于工作領域的入職測試和常態(tài)化的濫用毒品人員的毒品檢測[29-30]。在一些歐洲和南美國家有食用罌粟籽的習慣，匈牙利成年人們每日食用源自食物中的嗎啡含量為78.6 μg/kg左右，兒童是116.9 μg/kg，咖喱飯中食用的嗎啡含量為200.4～1002 μg；可待因為95.9～479.5 μg。實驗證明從食用罌粟籽人員中的尿液、血液和毛發(fā)的濃度可以看出其含量均超過這個閾值,并且在使用量更大的人群中這一濃度會延續(xù)至48 h[31-33]，因此閾值的制定需要一些懂得藥理和毒理的專業(yè)人士以及懂得儀器分析的專業(yè)人士，共同討論得出。

食品中罌粟殼的理化檢驗是提供執(zhí)法辦案的重要證據，為保證鑒定結論的法律性、科學性，需要在具有可行性的標準應在充分調研的基礎上盡快制定出臺，同時應加強從事理化檢驗鑒定實驗室鑒定能力的管理，對實驗室人員、設備、環(huán)境等方面進行定期的，專項的實驗室能力測試，實驗室間數據比對等工作，以保證檢驗鑒定的客觀性。另外對現(xiàn)場執(zhí)法人員進行適當的能力和業(yè)務培訓，對有沖突的規(guī)范或標準，對無法執(zhí)行的規(guī)定要適時地進行調整和修訂。通過全面的努力來保證百姓的食品安全，以促進人們的健康生活。

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Discussion on Determination of Illegal Papaver in Food*

ZHANG Ting，YU Zu-liang，SUN Ce，LIANG Jun-yang

(Department of Forensic Chemistry,National Police University of Chinese,Liaoning Shenyang 110035,China)

Poppy shell and its extract as a class of narcotic substances are illegally added in the food will harm the health of the human body.State superintendence,behavior identification and administration of illegal added papaver in food need to be develop standard examination method.However,already existing testing method about opium poppy have provided some practical problems in the judicial practice.These problems including standardization determination procedure,fast test and confirm test,conclusion expression,analytical threshold value,analysis ability acknowledgement among labs,and so on,were discussed,hoped to provide some advices in drafting about the standard of illegal papaver in food as quickly as possible.

food; papavers; determination; problems

中國刑警學院大學生創(chuàng)新計劃項目(201410175033)；中國刑警學院青年基金項目(2014)。

張婷(1975-)，女，講師，主要從事毒物和毒品分析。

TS201.6

A

1001-9677(2016)011-0013-03