劉健鵬，劉　偉，郝萬東

(1.榆林市動物疫病預防控制中心，陜西榆林 719000；2.神木縣爾林兔鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)工作站，陜西神木 719300；3.綏德縣動物疫病預防控制中心，陜西綏德 718000)

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獸醫(yī)臨床

豬瘟、豬O型口蹄疫和高致病性豬藍耳病疫苗不同免疫方法試驗

劉健鵬1，劉偉2，郝萬東3

(1.榆林市動物疫病預防控制中心，陜西榆林 719000；2.神木縣爾林兔鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)工作站，陜西神木 719300；3.綏德縣動物疫病預防控制中心，陜西綏德 718000)

為掌握不同廠家生產(chǎn)的豬瘟疫苗、豬O型口蹄疫疫苗和高致病性豬藍耳病疫苗按說明劑量使用的免疫效果，找出適應當前生產(chǎn)中3種疫苗兩兩組合和3種同時分點注射的免疫方法，進行了不同方法免疫試驗。結(jié)果表明，3種疫苗兩兩組合同時分點肌肉注射，互不干擾；3種疫苗同時分點肌肉注射，互不干擾，且可以促進高致病性豬藍耳病疫苗的免疫效果，但個別豬會出現(xiàn)體溫升高、拒食等反應。

豬瘟；口蹄疫；高致病性豬藍耳??；疫苗；接種方法

豬瘟(Classical swine fever，CSF)、口蹄疫(Foot-and-mouth disease，F(xiàn)MD)和高致病性豬藍耳病(Highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome ，HP-PRRS)均為我國強制免疫的動物疫病，但3種疫苗分3次注射工作量大，費時耗力，因此臨床上出現(xiàn)了免疫程序混亂、抗體水平達不到國家標準要求、不能起到有效保護作用的現(xiàn)象，豬瘟、豬O型口蹄疫和高致病性豬藍耳病疫情形勢仍然十分嚴峻。為了有效控制豬瘟、豬O型口蹄疫和高致病性豬藍耳病疫情的發(fā)生和流行，準確掌握不同廠家生產(chǎn)的豬瘟疫苗、豬O型口蹄疫疫苗和高致病性豬藍耳病疫苗按說明劑量使用的免疫效果，找出適應當前生產(chǎn)中3種疫苗兩兩組合和3種同時分點注射的免疫途徑，在確保提高免疫質(zhì)量的前提下，減少人力和財力的浪費，減少防疫工作的阻力和難度，科學指導動物防疫工作，榆林市動物疫病預防控制中心進行了豬瘟疫苗、豬O型口蹄疫疫苗和高致病性豬藍耳病疫苗不同免疫方法試驗，現(xiàn)將試驗結(jié)果報告如下。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1試驗用豬品種一致、體重相近、40日齡～50日齡、豬瘟、豬口蹄疫和高致病性豬藍耳病抗體均為陰性的健康仔豬123頭。

1.1.2器材體溫計，消毒藥品，生理鹽水，采血器，注射器，針頭，藥棉，耳標，耳鉗，實驗室相關儀器和試劑等。

1.1.3疫苗豬瘟疫苗:分別為A集團生物疫苗有限公司、B動物保健品有限公司和C實業(yè)有限公司產(chǎn)品;豬O型口蹄疫疫苗:分別為金宇保靈生物藥品有限公司、新疆天康畜牧生物技術股份有限公司和中農(nóng)威特生物科技股份有限公司產(chǎn)品;高致病性豬藍耳病疫苗:分別為中牧實業(yè)股份有限公司、杭州薦量獸用生物制品有限公司和楊凌綠方生物工程有限公司產(chǎn)品。

1.1.4診斷液豬瘟抗原、陽性血清、陰性血清、稀釋液，由中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所提供；豬O型口蹄疫抗原、陽性血清、陰性血清、稀釋液，由中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所提供；豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測ELISA試劑盒，由北京天之泰生物科技有限公司提供。

1.2方法

1.2.1試驗設計試驗分兩部分：其一是不同生產(chǎn)廠家的同一種疫苗按說明劑量單獨使用免疫效果試驗；其二是3種疫苗兩兩組合分點肌肉注射和3種疫苗同時分點肌肉注射免疫效果試驗。試驗所采用的檢測方法和判定依據(jù)都嚴格按照國家標準，豬瘟和豬O型口蹄疫免疫抗體測定采用正向間接血凝試驗法，高致病性豬藍耳病病毒抗體測定采用ELISA。

1.2.2不同生產(chǎn)廠家的同一種疫苗免疫效果對比試驗將健康豬隨機分成3大組，豬瘟組30頭，口蹄疫組30頭，高致病性豬藍耳病組23頭，每個大組再隨機分成3小組。

每頭豬采集2 mL～3 mL血液，分離血清，進行豬瘟、豬O型口蹄疫和高致病性豬藍耳病抗體檢測，抗體水平檢測結(jié)果陰性的豬只用于下一步的試驗。

每個大組的3個小組分別注射不同生產(chǎn)廠家的同一種疫苗，注射方法和劑量參照生產(chǎn)廠家說明書進行。

豬瘟組和豬O型口蹄疫組在免疫后21 d后采血檢測抗體，高致病性豬藍耳病組在免疫后28 d后采血檢測抗體。

1.2.33種疫苗兩兩組合和3種疫苗同時分點肌肉注射免疫效果試驗將健康豬隨機分成4組，每組10頭，進行豬瘟、豬O型口蹄疫和高致病性豬藍耳病抗體檢測，抗體水平檢測結(jié)果陰性的豬只用于下一步的試驗。

第1組，先注射豬瘟疫苗(哈藥集團生物疫苗有限公司生產(chǎn))，7 d后再同時分點肌肉注射豬O型口蹄疫疫苗(新疆天康畜牧生物技術股份有限公司生產(chǎn))和高致病性豬藍耳病疫苗(楊凌綠方生物工程有限公司生產(chǎn)的滅活苗)。

第2組，先注射豬O型口蹄疫疫苗(中農(nóng)威特生物技術股份有限公司生產(chǎn))，再同時分點肌肉注射豬瘟疫苗(齊魯動物保健品有限公司生產(chǎn))和高致病性豬藍耳病疫苗(杭州薦量獸用生物有限公司生產(chǎn)的滅活苗)。

第3組，先注射高致病性豬藍耳病疫苗(中牧實業(yè)股份有限公司生產(chǎn)凍干苗)，再同時分點肌肉注射豬瘟疫苗(中牧實業(yè)股份有限公司生產(chǎn))和豬O型口蹄疫疫苗(中農(nóng)威特生物科技股份有限公司生產(chǎn))。

第4組，同時分點肌肉注射豬瘟疫苗(齊魯動物保健品有限公司生產(chǎn))、豬O型口蹄疫疫苗(中農(nóng)威特生物科技股份有限公司生產(chǎn))和高致病性豬藍耳病疫苗(楊凌綠方生物工程有限公司生產(chǎn))。

按說明書劑量和部位注射疫苗。

在注射疫苗后21 d和28 d分別采集每頭豬血液3 mL～5 mL，分離血清后按試劑盒說明書進行抗體檢測。

2　結(jié)果

2.1單苗免疫抗體水平檢測結(jié)果

2.1.1豬瘟疫苗組3個廠家生產(chǎn)的豬瘟兔化弱毒疫苗肌肉注射21 d后采血，通過正向間接血凝試驗檢測抗體，抗體水平都為1∶28。

2.1.2口蹄疫疫苗組3個廠家生產(chǎn)的O型口蹄疫疫苗肌肉注射21 d后采血，通過正向間接血凝試驗檢測抗體，抗體水平都為1∶28。

2.1.3高致病性豬藍耳病疫苗組3個廠家生產(chǎn)的疫苗肌肉注射28 d后采血，通過ELISA檢測抗體，中牧實業(yè)股份有限公司生產(chǎn)的高致病性豬藍耳病凍干苗肌肉注射28 d后都能產(chǎn)生有效免疫抗體，而楊凌綠方生物工程有限公司和杭州薦量獸用生物制品有限公司生產(chǎn)的滅活苗肌肉注射28 d后檢測不到有效免疫抗體。

2.2組合苗免疫抗體水平檢測結(jié)果

2.2.1組合組第1組肌肉注射豬瘟疫苗21 d (注射口蹄疫苗和高致病性豬藍耳病苗14 d)、28 d(注射口蹄疫苗和高致病性豬藍耳病苗21 d)和36 d(注射口蹄疫苗和高致病性豬藍耳病苗28 d)采血檢測抗體，豬瘟抗體和豬O型口蹄疫抗體都為1∶28。檢測不到高致病性豬藍耳病有效免疫抗體。

2.2.2組合組第2組肌肉注射豬O型口蹄疫21 d(注射豬瘟疫苗和高致病性豬藍耳病苗14 d)、28 d(注射豬瘟疫苗和高致病性豬藍耳病疫苗21 d)和36 d(注射豬瘟疫苗和高致病性豬藍耳病疫苗28 d)采血檢測抗體，豬O型口蹄疫疫苗抗體水平都為1∶28；注射豬瘟疫苗14d檢測抗體水平為1∶23～1∶28，21 d和28 d檢測抗體水平都為1∶28；注射高致病性豬藍耳病疫疫苗14 d和21 d檢測不到有效免疫抗體，28 d都可以檢測到有效免疫抗體。

2.2.3組合組第3組肌肉注射高致病性豬藍耳病疫苗30 d(注射豬瘟疫苗和豬口蹄疫疫苗21 d)采血檢測抗體，豬瘟和豬口蹄疫疫苗抗體水平都為1∶28；檢測高致病性豬藍耳病抗體，檢出率為75%。

2.2.4組合組第4組3種苗同時分點肌肉注射后21 d和28 d采血檢測抗體，豬瘟和口蹄疫疫苗抗體水平都為1∶28；21 d和28 d高致病性豬藍耳病疫苗抗體檢出率都為66.67%。

2.3免疫后的應激情況

3種疫苗兩兩組合同時分點肌肉注射，互不干擾。

3種疫苗同時分點肌肉注射，互不干擾，且可以促進高致病性豬藍耳病疫苗免疫效果。

個別豬出現(xiàn)免疫副反應，10頭試驗豬注射疫苗后有2頭體溫升至41℃，并且拒食。

3　討論

從單苗免疫效果來看，對于豬瘟疫苗而言，不同的3個疫苗生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的豬瘟疫苗都可以使豬群產(chǎn)生有效免疫抗體。對于豬口蹄疫疫苗而言，不同的3個疫苗生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的豬口蹄疫疫苗都可以使豬群產(chǎn)生有效免疫抗體。對于高致病性豬藍耳病疫苗而言，凍干苗可以使豬群產(chǎn)生有效免疫抗體，滅活苗免疫檢測不到有效免疫抗體。從疫苗組合免疫效果來看，3種疫苗兩兩組合同時分點肌肉注射，互不干擾。3種疫苗同時分點肌肉注射，互不干擾，且可以促進高致病性豬藍耳病疫苗免疫效果，可以考慮應用推廣。

陸國林等[1]的研究表明，對未實施程序化免疫的養(yǎng)豬場(戶)和農(nóng)村散養(yǎng)的生豬, 采用豬瘟弱毒疫苗、口蹄疫滅活疫苗、高致病性豬藍耳病滅活疫苗分點同時接種的免疫方法是可行的。特木爾巴根等[2]的試驗結(jié)果表明，O型口蹄疫、豬瘟和豬藍耳病疫苗同時分點免疫注射，臨床上3個試驗點免疫豬無嚴重的不良反應，免疫抗體差異不顯著。張長龍等[3]的試驗結(jié)果表明，先免疫接種豬瘟疫苗，1 周后免疫接種口蹄疫和高致病性豬藍耳病疫苗，二者有明顯的協(xié)同促進作用，適宜在農(nóng)村散戶中使用；3 種疫苗同時分點注射，相互之間干擾較大，豬瘟病毒抗體產(chǎn)生時間推遲，不宜推廣使用。黃文忠等[4]采用豬瘟脾淋苗、豬O型口蹄疫多肽苗(或滅活苗)和高致病性豬藍耳病滅活苗同時分點注射，結(jié)果發(fā)現(xiàn)3種疫苗聯(lián)合免疫，臨床上未發(fā)現(xiàn)嚴重的免疫副反應，對豬瘟脾淋苗、豬O型口蹄疫多肽苗的免疫效果無明顯的干擾或抑制作用，對高致病性豬藍耳病和豬O型口蹄疫滅活苗免疫效果有顯著的干擾或抑制作用。曹世禎等[5]的試驗結(jié)果表明，豬瘟脾淋苗、豬O 型口蹄疫緬甸98 滅活疫苗(濃縮)和高致病性豬藍耳病滅活苗同時分點注射，對豬瘟和豬O型口蹄疫產(chǎn)生的抗體水平無明顯的免疫抑制或干擾作用，但對高致病性豬藍耳病免疫效果有顯著的抑制或干擾作用。

從本試驗結(jié)果和上述參考文獻的試驗結(jié)果來看，豬瘟、O型口蹄疫和高致病性豬藍耳病疫苗同時分點免疫注射時，3種疫苗相互之間會產(chǎn)生不同的影響，但各個試驗結(jié)果均存在一定的差異，甚至有相反的試驗結(jié)果出現(xiàn)?？磥矸浅１匾獙ωi瘟、O型口蹄疫和高致病性豬藍耳病疫苗聯(lián)合免疫程序進行深入的研究，摸索出3種疫苗聯(lián)合免疫的標準化方案，以供全國參考應用。

[1]陸國林，陳偉杰，洪建偉，等.高致病性豬藍耳病、豬瘟、口蹄疫疫苗分點同時接種免疫效果試驗[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2009(5)：28-30.

[2]特木爾巴根，李瑞剛，馬立峰，等.豬藍耳病、豬瘟和口蹄疫疫苗聯(lián)合免疫效果評價[J].獸醫(yī)導刊，2009(7)：32-33.

[3]張長龍，嚴寶英，賈文孝，等.豬瘟、豬口蹄疫、高致病性豬藍耳病疫苗有效免疫試驗初探[J].動物醫(yī)學進展，2009，30(7)：101-103.

[4]黃文忠，徐志斌，呂粵，等.豬瘟、豬O型口蹄疫、高致病性豬藍耳病疫苗聯(lián)合免疫效果評價[J].云南畜牧獸醫(yī),2011(2):5-7.

[5]曹世禎，李景云，嚴建鵬，等.豬瘟豬O型口蹄疫高致病性豬藍耳病疫苗聯(lián)合免疫試驗報告[J].當代畜牧，2012(7)：25-26.

Immune Effect Test Using Different Inoculation Methods of Classical Swine Fever,Foot-and-mouth Disease Type O and HP-PRRS Vaccines

LIU Jian-peng1，LIU Wei2，HAO Wan-dong3

(1.AnimalDiseasePreventionandControlCenterofYulinCity，Yulin,Shaanxi,719000,China；2.AnimalHusbandryandVeterinaryStationofErlintuTownShenmuCounty，Shenmu,Shaanxi,719300,China;3.AnimalDiseasePreventionandControlCenterofSuideCounty,Suide,Shaanxi,718000,China)

In order to understand the immune effects of classical swine fever vaccine,swine foot-and-mouth disease type O vaccine and highly pathogenic PRRS vaccine according to the manufacturer instructions,and find out the suitable combination immunization methods of three kinds of vaccines,the immune method experiments were carried out.The results showed that the combination of three kinds of vaccines by pairwise and equinox intramuscular injection and by three points at the same time injection,do not interfere with each other,and can promote the immune effect of high pathogenic PRRS vaccine,but individual pigs appeared immunological side effects.

Classical swine fever；Foot-and-mouth disease；Highly pathogenic PRRS；vaccine；inoculation method

2016-04-25

劉健鵬(1966-)，男，陜西綏德人，高級獸醫(yī)師，碩士，主要從事動物疫病預防控制等方面工作。

S858.28;S852.52

B

1007-5038(2016)10-0116-03