瓜氨酸、腸型脂肪酸結(jié)合蛋白、腸三葉因子聯(lián)合檢測(cè)對(duì)兒童危重癥急性胃腸損傷的診斷價(jià)值

黎小年，謝蔓芳

(海南省婦幼保健院兒科，海南 ?？?571100)

瓜氨酸、腸型脂肪酸結(jié)合蛋白、腸三葉因子聯(lián)合檢測(cè)對(duì)兒童危重癥急性胃腸損傷的診斷價(jià)值

黎小年，謝蔓芳

(海南省婦幼保健院兒科，海南 ?？?571100)

目的 探討瓜氨酸、腸型脂肪酸結(jié)合蛋白(IFABP)、腸三葉因子(ITF)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)兒童危重癥急性胃腸損傷(AGI)的診斷價(jià)值。方法選擇2014年9月至2015年8月在我院兒科住院治療的危重癥患兒100例，按患兒是否合并AGI分為觀(guān)察組(合并AGI)52例和對(duì)照組(未合并AGI)48例。比較兩組患者的瓜氨酸、IFABP、ITF、C反應(yīng)蛋白(CRP)及降鈣素原（PCT）水平；并分析瓜氨酸、IFABP、ITF與CRP及PCT水平的相關(guān)性。結(jié)果觀(guān)察組患者的瓜氨酸水平顯著低于對(duì)照組[(15.08±8.84)μmol/L vs(25.07±12.05)μmol/L]，而IFABP[(1 373.38±410.55)ng/L vs (938.89±503.84)ng/L]、ITF[(14.51±4.90)ng/mLvs(9.79±4.82)ng/mL]、CRP[(60.65±21.08)mg/Lvs(28.12±10.13)mg/L]及PCT[(22.93±10.19)ng/mL vs（5.28±3.08)ng/mL]均顯著高于對(duì)照組，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；瓜氨酸、IFABP及ITF三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)兒童危重癥AGI的診斷價(jià)值最高，其中敏感度為98.08%，特異度為95.83%，準(zhǔn)確度為97.00%。根據(jù)Pearson法分析顯示，瓜氨酸與CRP及PCT均呈負(fù)相關(guān)(r=-0.661，-0.709；均P＜0.05），而IFABP和ITF與CRP及PCT無(wú)明顯相關(guān)性(r=0.108，0.201，0.097，0.113；均P＞0.05)。結(jié)論瓜氨酸與IFABP和ITF三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)危重癥AGI患兒的診斷具有較高價(jià)值，值得在臨床診斷過(guò)程中推廣應(yīng)用。

瓜氨酸；腸型脂肪酸結(jié)合蛋白；腸三葉因子；兒童危重癥；急性胃腸損傷；診斷價(jià)值

胃腸道作為人類(lèi)機(jī)體中最大的一個(gè)細(xì)菌庫(kù)，其在機(jī)體產(chǎn)生缺血及缺氧損傷時(shí)常被作為可犧牲器官，在早期時(shí)即可發(fā)生損傷，導(dǎo)致胃腸道的屏障功能損傷，并致使大量細(xì)菌異位，甚至進(jìn)入血液循環(huán)過(guò)程中，從而引發(fā)醫(yī)院感染，并最終形成全身性炎癥反應(yīng)。危重癥急性胃腸損傷(Acute gastrointestinal injury，AGI)患兒在臨床較為常見(jiàn)，若不盡早發(fā)現(xiàn)并進(jìn)行早期治療，則可能直接危及患兒的生命安全，但目前臨床并無(wú)準(zhǔn)確及簡(jiǎn)便的監(jiān)測(cè)指標(biāo)以及時(shí)發(fā)現(xiàn)危重癥患兒的AGI癥狀[1]。國(guó)外有報(bào)道，瓜氨酸、腸型脂肪酸結(jié)合蛋白(Intestinal fatty acid binding protein，IFABP)以及腸三葉因子(Intestinal trefoil factor，ITF)等指標(biāo)均與機(jī)體胃腸道的損傷具有一定的聯(lián)系[2]。但相關(guān)報(bào)道并未涉及三者與危重癥AGI患兒癥狀之間的關(guān)系。本文通過(guò)分析研究，旨在探索瓜氨酸、IFABP以及ITF三者對(duì)危重癥AGI患兒的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年9月至2015年8月在我院住院治療的危重癥患兒100例納入研究。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡1個(gè)月～12歲；(2)根據(jù)《小兒危重病例評(píng)分法》1995年版[3]進(jìn)行評(píng)價(jià)的分值＜80分；(3)入院時(shí)間＞48 h。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)有原發(fā)性胃腸道疾病者；(2)有慢性腎病者；(3)其他嚴(yán)重的心、肝等臟器的功能障礙者。按患兒是否合并AGI分為觀(guān)察組(合并AGI)52例和對(duì)照組(未合并AGI)48例。其中觀(guān)察組中男性30例，女性22例；年齡1個(gè)月～11歲，平均(5.14±1.03)歲；原發(fā)病位置：神經(jīng)系統(tǒng)33例，呼吸系統(tǒng)15例，其他4例。對(duì)照組中男性28例，女性20例；年齡2個(gè)月～12歲，平均(5.09±0.98)歲；原發(fā)病位置：神經(jīng)系統(tǒng)30例，呼吸系統(tǒng)13，其他5例。兩組患兒的臨床資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。本次研究已通過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)的審批，且所有患兒家屬均已知情同意。

1.2 AGI診斷標(biāo)準(zhǔn)[4](1)嘔吐；(2)胃潴留；(3)腹瀉；(4)消化道出血；(5)下消化道麻痹；(6)異常的腸鳴音；(7)腸擴(kuò)張等癥狀。

1.3 檢測(cè)方法 所有患兒在入院24 h采集其橈動(dòng)脈血4 mL，不同采血管保存后在室溫下靜置約30 min，4℃下行10 min的3 000 r/min離心，取上層血清置于-80℃下保存待測(cè)。利用高效液相色譜法對(duì)血清瓜氨酸水平進(jìn)行檢測(cè)，將血清樣品經(jīng)甲醇沉淀蛋白，再高速冷凍并離心，而后提取血清瓜氨酸，待自動(dòng)衍生化之后通過(guò)超高效液相色譜實(shí)施分離，因瓜氨酸及內(nèi)標(biāo)正纈氨酸和血清樣品內(nèi)其他物質(zhì)在色譜柱保留性質(zhì)差異而形成分離，所得化合物順序通過(guò)熒光檢測(cè)器，于230 nm的激發(fā)波長(zhǎng)及450 nm的發(fā)射波長(zhǎng)位置存在熒光吸收，相關(guān)信號(hào)得以記錄。計(jì)算信號(hào)響應(yīng)強(qiáng)度強(qiáng)弱以檢測(cè)瓜氨酸濃度水平。利用ELISA法測(cè)定血清IFABP及ITF水平，相關(guān)試劑盒均購(gòu)于深圳的晶美公司。按照試劑盒說(shuō)明實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)品稀釋和加樣，洗滌、顯色和終止，利用酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔的OD值，按標(biāo)準(zhǔn)品濃度水平和對(duì)應(yīng)OD值算出曲線(xiàn)回歸方程，使用OD值在方程中計(jì)算對(duì)應(yīng)ITF及IFABP濃度水平。

1.4 研究方法 比較兩組患兒的瓜氨酸、IFABP、ITF、CRP及PCT水平，將2012年歐洲危重病醫(yī)學(xué)會(huì)對(duì)AGI的定義作為診斷金標(biāo)準(zhǔn)[5]，比較相關(guān)指標(biāo)在兒童危重癥AGI中的診斷價(jià)值，分析相關(guān)指標(biāo)與CRP及PCT水平的相關(guān)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件分析進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)比較采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，以Pearson法進(jìn)行相關(guān)性分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒入院時(shí)的瓜氨酸、IFABP、ITF、CRP及PCT水平比較 觀(guān)察組患兒的瓜氨酸水平顯著低于對(duì)照組，而IFABP、ITF、CRP及PCT水平顯著高于對(duì)照組，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，見(jiàn)表1。

表1 兩組患兒入院時(shí)瓜氨酸、IFABP、ITF、CRP及PCT水平比較(±s)

表1 兩組患兒入院時(shí)瓜氨酸、IFABP、ITF、CRP及PCT水平比較(±s)

組別觀(guān)察組對(duì)照組t值P值例數(shù)52 48瓜氨酸(μmol/L) 15.08±8.84 25.07±12.05 4.752 0.000 IFABP(ng/L) 1373.38±410.55 938.89±503.84 4.743 0.000 ITF(ng/mL) 14.51±4.90 9.79±4.82 4.850 0.000 CRP(mg/L) 60.65±21.08 28.12±10.13 9.704 0.000 PCT(ng/mL) 22.93±10.19 5.28±3.08 11.520 0.000

2.2 相關(guān)指標(biāo)在兒童危重癥AGI中的診斷價(jià)值 瓜氨酸、IFABP及ITF三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)兒童危重癥AGI的診斷價(jià)值最高，其中敏感度為98.08%，特異度為95.83%，準(zhǔn)確度為97.00%，見(jiàn)表2。

表2 相關(guān)指標(biāo)在兒童危重癥AGI中的診斷價(jià)值（%）

2.3 相關(guān)指標(biāo)與CRP及PCT水平的相關(guān)性 根據(jù)Pearson法分析相關(guān)性可知，瓜氨酸與CRP及PCT均呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)，而IFABP和ITF與CRP及PCT無(wú)明顯相關(guān)性(P＞0.05)，見(jiàn)表3。

表3 相關(guān)指標(biāo)與CRP及PCT水平的相關(guān)性(r值)

3 討 論

AGI主要是由危重癥患者因急性疾病所引發(fā)的一種胃腸功能障礙。國(guó)外有報(bào)道指出，AGI是多臟器功能不全(衰竭)等癥狀的關(guān)鍵誘因，其可加重其他相關(guān)器官損傷程度，并加速疾病的進(jìn)展，致使危重癥患者的病死率上升，嚴(yán)重危害患者健康[6-7]。因此，盡早發(fā)現(xiàn)危重癥患者尤其是患兒的AGI癥狀對(duì)后續(xù)治療及預(yù)后的改善具有重要意義。但由于當(dāng)前相關(guān)檢查手段缺乏簡(jiǎn)便有效的實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)，尋找診斷價(jià)值較高的指標(biāo)成為了重要課題。近年來(lái)，國(guó)外相關(guān)報(bào)道表明，瓜氨酸、IFABP以及ITF均可在一定程度上反映患者的胃腸損傷情況，具有潛在的診斷價(jià)值，但并無(wú)報(bào)道深入地分析三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于胃腸損傷的應(yīng)用價(jià)值[8]。

本文通過(guò)檢測(cè)危重癥AGI患者的瓜氨酸、IFABP以及ITF等指標(biāo)的含量水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，觀(guān)察組的瓜氨酸水平顯著低于對(duì)照組，而IFABP、ITF、CRP及PCT水平顯著高于對(duì)照組，提示存在A(yíng)GI的危重癥患者機(jī)體瓜氨酸、IFABP、ITF、CRP及PCT等水平均出現(xiàn)明顯異常。原因在于瓜氨酸屬于非蛋白質(zhì)氨基酸，其以谷氨酰胺作為前體物質(zhì)，正常時(shí)可在小腸黏膜的上皮內(nèi)獲得特異性合成，在危重癥患者產(chǎn)生胃腸損傷后，經(jīng)小腸黏膜合成并進(jìn)至血液循環(huán)的瓜氨酸含量明顯下降。IFABP特異性存在于機(jī)體腸黏膜纖毛中，可參與到長(zhǎng)鏈脂肪酸的攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)，以及代謝等過(guò)程。若腸黏膜受損，致使通透性變大時(shí)則可被釋放進(jìn)血液，導(dǎo)致濃度水平上升[9]。ITF通?？稍谖改c道中得到大量表達(dá)，尤其在小腸絨毛的杯狀細(xì)胞基底膜處，其可保護(hù)與修復(fù)腸道上皮，在腸黏膜發(fā)生缺血及缺氧損傷后，ITF的水平隨之上升。而CRP是非特異性的一種急性炎癥標(biāo)志物，PCT是診斷及監(jiān)測(cè)細(xì)菌感染和炎癥程度的重要指標(biāo)，二者均可較好地呈現(xiàn)患者的胃腸道炎癥情況，因此在危重癥AGI患兒中明顯上升。本文根據(jù)Pearson法分析相關(guān)性可知，瓜氨酸與CRP及PCT均呈負(fù)相關(guān)(r=-0.661，-0.709；均P＜0.05)。而IFABP和ITF與CRP及PCT無(wú)明顯相關(guān)性。這提示胃腸炎癥程度越重的患者，其胃腸黏膜的損傷癥狀越重，則血清瓜氨酸水平的下降亦越明顯，因此，將瓜氨酸與IFABP和ITF聯(lián)合監(jiān)測(cè)危重癥AGI患兒的癥狀具有可行性。

此外，本文研究發(fā)現(xiàn)，瓜氨酸、IFABP及ITF三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)兒童危重癥AGI的診斷價(jià)值最高，其中敏感度為98.08%，特異度為95.83%，準(zhǔn)確度為97.00%。提示三者聯(lián)合檢測(cè)能夠更加準(zhǔn)確地診斷出兒童危重癥AGI。原因在于瓜氨酸與IFABP和ITF均可較好地監(jiān)測(cè)患兒的胃腸損傷變化，三者聯(lián)用具有優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)的作用，從而避免了單用某一種指標(biāo)可能具有的誤診或漏診等狀況的發(fā)生。IFABP可在早期時(shí)反映出胃腸損傷的情況，但隨著患者疾病的進(jìn)展，其監(jiān)測(cè)價(jià)值有待進(jìn)一步研究[10-13]。ITF雖可胃腸功能變化的影響，亦可在其他器官受損時(shí)發(fā)生變化。因此，三者聯(lián)合檢測(cè)獲得的結(jié)果更加準(zhǔn)確。

綜上所述，瓜氨酸與IFABP和ITF三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)危重癥AGI患兒的診斷具有較高價(jià)值，值得在臨床診斷過(guò)程中推廣應(yīng)用。

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Diagnosis value analysis of combined detection of citrulline,intestinal fatty acid binding protein and intestinal trefoil factor for critically ill children with acute gastrointestinal injury.

LI Xiao-nian,XIE Man-fang.Department of Pediatrics,Maternal and Child Health Hospital of Hainan Province,Haikou 571100,Hainan,CHINA

ObjectiveTo discuss diagnosis value of combined detection of citrulline,intestinal fatty acid binding protein(IFABP),intestinal trefoil factor(ITF)for critically ill children with acute gastrointestinal injury(AGI).MethodsA total of 100 cases of critical illness children in Department of Pediatrics in our hospital for treatment were included in the study from September 2014 to August 2015.According to whether the patients had AGI or not,the patients were divided into observation group(AGI,n=52)and control group(without AGI,n=48).The levels of citrulline, IFABP,ITF,C-reactive protein(CRP)and calcitonin gene-related peptide(PCT)were compared between the two groups, and correlations between the levels of citrulline,IFABP,ITF and CRP,PCT were analyzed.ResultsThe levels of citrulline in the observation group were significantly lower than those in the control group[(15.08±8.84)μmol/L vs(25.07± 12.05)μmol/L],and the levels of IFABP,ITF,CRP and PCT in the observation group were significantly higher than those in the control group[(1 373.38±410.55)ng/L vs(938.89±503.84)ng/L,(14.51±4.90)ng/mL vs(9.79±4.82)ng/mL, (60.65±21.08)mg/L vs(28.12±10.13)mg/L,(22.93±10.19)ng/mL vs(5.28±3.08)ng/mL].The differences were statistically significant(P＜0.01).Diagnostic value of combined detection of citrulline,IFABP and ITF for critically ill children with AGI were the highest,with the sensitivity of 98.08%,specificity of 95.83%and the accuracy of 97.00%.Pearson correlation analysis showed that citrulline was negatively correlated with CRP and PCT(r=-0.661,-0.709,P＜0.05). There was no significant correlation between ITF,IFABP and CRP and PCT(r=0.108,0.201,0.097,0.113,P＞0.05).ConclusionCombined detection of citrulline,iFABP and ITF has good application value in critically ill children with AGI and is worthy to be popularized in clinical diagnosis.

Citrulline;Intestinal fatty acid binding protein(IFABP);Intestinal trefoil factor(ITF);Critically ill children;Acute gastrointestinal injury(AGI);Diagnostic value

R725.7

A

1003—6350（2016）12—1948—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.12.017

2015-11-17)

黎小年。E-mail：66765088@qq.com