腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)在良惡性胸腔積液鑒別診斷中的應(yīng)用

葉輝 歐雙余

【摘要】目的：探討癌胚抗原（CEA）、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE） 、細(xì)胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）及糖類抗原125（CA125）聯(lián)合檢測(cè)在良惡性胸腔積液診斷中的應(yīng)用。方法：應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法對(duì)37例惡性胸腔積液、30例良性胸腔積液患者胸水行CEA、NSE 、CYFRA21-1及CA125水平檢測(cè)， 比較兩組檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果：惡性組CEA、NSE、CYFRA21-1、CA125水平均明顯高于良性組 （P<0.05） 。四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)良惡性胸腔積液診斷的敏感性、準(zhǔn)確性均高于單項(xiàng)指標(biāo)（P<0.05） 。結(jié)論：胸水CEA、NSE、CYFRA21-1及CA125聯(lián)合檢測(cè)明顯提高惡性胸腔積液診斷的敏感性和準(zhǔn)確性，對(duì)良惡性胸腔積液的鑒別診斷具有重要臨床意義。

【關(guān)鍵詞】腔積液； 腫瘤標(biāo)志物；聯(lián)合檢測(cè)

【中圖分類號(hào)】R561.3 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2016）01-0088-02

胸腔積液是一種常見的臨床病癥，可由多種病因引起，常見的有肺部或胸膜結(jié)核、惡性腫瘤、肺部感染、心衰等。目前惡性腫瘤所致的胸腔積液越來越多，若不能盡快明確診斷并治療，病情往往會(huì)迅速惡化，預(yù)后較差[1]。因此良、惡性胸腔積液的鑒別診斷對(duì)于臨床治療的選擇具有重要指導(dǎo)意義。近年來，胸水腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)因其簡(jiǎn)便、快速，逐漸廣泛應(yīng)用于臨床。本研究選取我院37例確診為惡性胸腔積液，30例良性胸腔積液患者行胸水CEA、NSE、CYFRA21-1、CA125檢測(cè)，以評(píng)價(jià)其在良惡性胸水鑒別診斷中的意義及價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2012年1月至2013年8月本院資料完整的住院病人，其中病理或脫落細(xì)胞學(xué)檢查確診為惡性積液37例，良性積液30例。惡性組：男性28例，女性9例，年齡40～78歲，平均年齡（61.1±5.3）歲；疾病種類為：肺癌28例、乳腺癌4例、食管癌2例、惡性淋巴瘤3例。良性組：男19例，女11例；年齡40～68歲，平均年齡（56.7±4.8）歲；疾病種類為：結(jié)核性胸腔積液12例，膿胸13例，肺部感染5例。兩組的性別、年齡等差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 臨床診斷標(biāo)準(zhǔn) 惡性胸腔積液組診斷標(biāo)準(zhǔn)： 胸水細(xì)胞學(xué)檢查及原發(fā)或轉(zhuǎn)移的肺部病灶活檢發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞則被認(rèn)定為惡性胸腔積液。良性胸腔積液組包括結(jié)核性胸腔積液和炎性胸腔積液。結(jié)核性胸腔積液的診斷依據(jù)： ①胸膜活檢提示干酪樣肉芽腫； ②胸水或痰檢中發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌； ③有胸膜結(jié)核的臨床和CT表現(xiàn)，經(jīng)抗結(jié)核治療有效； ④胸水ADA明顯升高（>100U/L），抗結(jié)核治療有效，隨訪復(fù)查積液完全吸收。炎性胸腔積液診斷依據(jù)有： ①急性起病，出現(xiàn)高熱、胸痛、胸悶、氣促、咳膿痰；②肺部炎性滲出性病變，白細(xì)胞和中性粒細(xì)胞、降鈣素原升高、抗生素治療有效；③胸水為膿性，行細(xì)菌培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)致病菌，隨訪復(fù)查積液完全吸收[2]。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 標(biāo)本采集 取入院后未進(jìn)行藥物治療前患者第一次抽取的胸腔積液5ml置于肝素抗凝管內(nèi)，3500r/分離心10分鐘分離血清，取上清液置于4℃冰箱內(nèi)保存待檢；檢測(cè)試劑盒均由瑞士Roche公司提供，嚴(yán)格按試劑盒說明書，在Roche電化學(xué)發(fā)光儀E170型上檢驗(yàn)；且均在試劑盒高、低值質(zhì)控要求范圍內(nèi)。質(zhì)控品采用原裝進(jìn)口配套試劑，室內(nèi)、室間質(zhì)控均合格。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn) 四種標(biāo)志物的陽性參考值：CEA>4.7ng/ml，NSE>16.3ng/ml， CYFRA21-1>3.3ng/ml、CA125>35u/ml。聯(lián)合檢測(cè)時(shí)以四項(xiàng)中的任意2項(xiàng)以上超過參考值為陽性，否者為陰性。

1.3.3 指標(biāo)比較 比較兩組患者CEA、NSE 、CYFRA21-1及CA125四種腫瘤標(biāo)志物的含量以及單項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性。敏感性（%） = 真陽性/（ 真陽性+假陰性）×100%；特異性（%） = 真陰性/（真陰性+假陽性） ×100%；準(zhǔn)確性（%） = 真陽性+真陰性/（真陽性+真陰性+假陽性+假陰性） ×100%。惡性組中單項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)超過參考值或聯(lián)合檢測(cè)時(shí)以四項(xiàng)中的任意2項(xiàng)以上超過參考值即為真陽性，否則為假陰性。良性組中單項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)超過參考值或聯(lián)合檢測(cè)時(shí)以四項(xiàng)中的任意2項(xiàng)以上超過參考值即為為假陽性，否則為真陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示， 組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)；以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組胸腔積液腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)值對(duì)比 惡性組中4種腫瘤標(biāo)志物的濃度均明顯高于良性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 各單項(xiàng)及4項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)惡性胸腔積液的診斷價(jià)值比較 CEA+ NSE+ CYFRA21-1+CA125聯(lián)合檢測(cè)的敏感性及準(zhǔn)確性均高于單項(xiàng)檢測(cè)，特異性較NSE、CYFRA21-1兩個(gè)單項(xiàng)檢測(cè)有所下降，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但與CEA比較下降明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)果見表2。

3 討論

惡性腫瘤目前已成為我國(guó)疾病死亡的主要原因，大部分患者在早期可無明顯臨床癥狀，等到發(fā)現(xiàn)時(shí)大都出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。約30%～45%的轉(zhuǎn)移癌患者并發(fā)惡性胸水，由于惡性胸腔積液患者的平均生存期不到1年，因此盡早明確診斷非常重要[3]。脫落細(xì)胞學(xué)檢查和胸膜活檢是診斷惡性胸腔積液的金標(biāo)準(zhǔn)，但敏感性僅有35%～60%[4]。胸腔鏡活檢的確診率可達(dá)95%以上，但創(chuàng)傷較大，費(fèi)用昂貴，對(duì)患者自身情況有一定的要求，其在臨床上的應(yīng)用受到限制。胸水腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)因其快速、簡(jiǎn)便已逐漸廣泛應(yīng)用于臨床。

腫瘤標(biāo)志物是指在腫瘤發(fā)生和增殖過程中，特征性存在于惡性腫瘤細(xì)胞或由惡性腫瘤細(xì)胞異常產(chǎn)生的物質(zhì)或是宿主對(duì)腫瘤反應(yīng)而產(chǎn)生的物質(zhì)。這些物質(zhì)存在于腫瘤細(xì)胞和組織中，也可進(jìn)入血液或其他體液中，是反映腫瘤存在和生長(zhǎng)的一類物質(zhì)，包括酶、激素、特殊蛋白質(zhì)和癌基因蛋白等[5]。由于惡性腫瘤廣泛侵犯壁層或臟層胸膜，并在胸腔中合成、增殖并釋放相關(guān)的標(biāo)志物至胸膜腔內(nèi)，同時(shí)因其分子量普遍較大，很難進(jìn)入血循環(huán)系統(tǒng)中被肝、腎等臟器代謝、滅活，從而導(dǎo)致胸水中的相關(guān)腫瘤標(biāo)志物濃度明顯升高[6]。理想的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)符合以下條件：①敏感性和特異性高；②存在于體液特別是血液中，易于檢測(cè)；③其濃度和腫瘤轉(zhuǎn)移、惡性程度有關(guān)，能協(xié)助腫瘤分期和判斷預(yù)后；④其濃度和腫瘤大小相關(guān)，半衰期短，有效治療后濃度快速下降。

CEA是一種細(xì)胞粘附分子，屬細(xì)胞表面的糖蛋白家族，在腫瘤生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移中起重要作用，多種癌癥均可導(dǎo)致其升高，高水平的CEA>80mg/L，可看作腫瘤已有轉(zhuǎn)移的標(biāo)志。據(jù)報(bào)道：胸水中高水平CEA相對(duì)于血清CEA升高更具診斷價(jià)值[7]。本研究中，惡性胸腔積液組中CEA水平明顯高于良性積液組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。其敏感性為67.6%，特異性86.7%，準(zhǔn)確性為76.1%，其在肺腺癌所致惡性胸水中水平升高最顯著，與有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道一致[8]，對(duì)于肺腺癌所致惡性胸腔積液的診斷有重要臨床意義。NSE是糖酵解中的關(guān)鍵酶，它存在于神經(jīng)組織和神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)中，小細(xì)胞肺癌、嗜鉻細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤等患者血清中NSE活性都會(huì)明顯升高。本研究顯示，NSE水平在惡性胸腔積液組中明顯高于良性積液組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其敏感性最低為43.2%，特異性73.3%，準(zhǔn)確性為56.7%。 CYFRA21-1是細(xì)胞體間的中間絲，在正常及惡性的上皮細(xì)胞中起支架作用， 腫瘤細(xì)胞中最豐富的是CK18和CK19。CYFRA21-1是角蛋白CK19的一種，對(duì)于非小細(xì)胞肺癌特別是肺鱗癌有較高的診斷價(jià)值[2]。本研究結(jié)果顯示，CYFRA21-1水平在惡性胸腔積液組中明顯高于良性積液組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其敏感性為64.9%，特異性70.0%，準(zhǔn)確性為67.2%。CA125是一種大分子量的糖蛋白，在乳腺癌、卵巢癌、肺癌中均可升高。本研究結(jié)果顯示，CA125水平在惡性胸腔積液組中明顯高于良性積液組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其敏感性最高為78.4%，準(zhǔn)確性為59.7%。CA-125特異性較低為36.7%，假陽性的例數(shù)較多，因此CA125不適合作為惡性胸腔積液的首選單項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)，但可以作為一種聯(lián)合檢測(cè)指標(biāo)，有助于提高診斷的準(zhǔn)確性。

本研究中，各單項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物對(duì)腫瘤的診斷其敏感性及準(zhǔn)確性均較差，而四項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)診斷惡性胸腔積液的敏感性達(dá)到97.3%，明顯高于其單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。因此聯(lián)合多項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)可以極大的提高陽性診斷，而準(zhǔn)確性也相應(yīng)有所提高，對(duì)于良惡性胸腔積液的鑒別診斷具有重要的臨床價(jià)值[9]。

綜上所述，胸水CEA、NSE、CYFRA21-1和CA125單項(xiàng)檢測(cè)其敏感性和準(zhǔn)確性均較差。四項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)可提高惡性胸腔積液診斷的敏感性和準(zhǔn)確性，為臨床良惡性胸腔積液的鑒別提供了一種診斷方法，使患者能夠盡早得到正確合理的治療，延長(zhǎng)患者的生命。同時(shí)其由于創(chuàng)傷小，胸水可反復(fù)多次抽取、檢查費(fèi)用較低等優(yōu)點(diǎn)，容易被患者接受，值得臨床推廣應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

[1] Froudarakis ME.Pleural effusionin lung cancer： more questions than answers [J].Respiration，2012，83（5） ：367-376.

[2]李芳芳，路堯，張國(guó)俊.胸水CA125、CA199、CEA、NSE、CYFRA21-1、CA72-4對(duì)原發(fā)性肺癌的診斷價(jià)值[J].腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2014，27（ 1）：49-52.

[3]孫家興，于文成.惡性胸腔積液與結(jié)核性胸腔積液的診斷進(jìn)展[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2013，13（14）：2780-2782.

[4] Trape J，Molina R，Sant F，et al. Diagnostic accuracy of tumour markers in serous effusions： a validation study [J]. Tumour Biol，2012，33（5）：1661-1668.

[5] 王旭瑩.腫瘤標(biāo)志物的臨床檢測(cè)方法及應(yīng)用[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2007（7）：105-106.

[6] 吳秀偉，劉利煒，何遠(yuǎn)春，等.多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片系統(tǒng)在鑒別良惡性胸腹腔積液中的價(jià)值[J].安徽醫(yī)藥， 2009， 13（ 3）： 286-288.

[7]朱琳，王運(yùn)利.聯(lián)合檢測(cè)TB-Ab、ADA和CEA對(duì)結(jié)核性與惡性胸水的診斷價(jià)值[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2013，8（5）：89.

[8]Ando S，Kimura H， Iwai N，et al. Optimal combination of seven tumour markers in prediction of advanced stage at first examinationof patients with non-small cell lung cancer[J]. Anticancer Res，2010，21（ 4B） ： 3085-3092.

[9] Gosein MA，Narinesingh D，Narayansingh GV，et al.Peritoneal tuberculosis mimicking advanced ovarian carcinoma： an important differential diagnosis to consider[J].BMC Res Notes，2013，3（9） ： 88-94.

（收稿日期：2015.10.10）