CYP2C19基因多態(tài)性與急性冠脈綜合征危險(xiǎn)分層的相關(guān)研究

劉麗霞，薛劍，張孝忠，陳建魁，張軍軍

· 論著 ·

CYP2C19基因多態(tài)性與急性冠脈綜合征危險(xiǎn)分層的相關(guān)研究

劉麗霞1，薛劍1，張孝忠1，陳建魁2，張軍軍3

目的探討CYP2C19基因多態(tài)性與急性冠脈綜合征（ACS）危險(xiǎn)分層的關(guān)系。方法選取2015年1月～2015年9月于軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院附屬醫(yī)院收治的ACS患者158例，男性66例，女性92例。入院后測定CYP2C19基因型，依據(jù)結(jié)果分組，快代謝組77例，中間代謝組61例，慢代謝組20例。采用GRACE評分對患者進(jìn)行危險(xiǎn)分層，并依據(jù)結(jié)果分為低危組（0～108分，n=89）、中危組（109～140分，n=40）、高危組（＞140分，n=29）。分析CYP2C19基因型與ACS高危的關(guān)系。結(jié)果高危組的腦鈉肽水平顯著高于低危組與中危組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。高危組慢代謝型比例較低危組和中危組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。GRACE評分快代謝組為（104±32）分，中間代謝組（112 ±31）分，慢代謝組（138±56）分。慢代謝組GRACE評分明顯高于中間代謝組和快代謝組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，CYP2C19慢代謝型改變（OR=13.336，95%CI：3.195～55.661，P＜0.001）是ACS患者高危的危險(xiǎn)因素，同時腦鈉肽升高（OR=2.147，95%CI：1.457～5.539，P=0.026）也是ACS患者高危的危險(xiǎn)因素。結(jié)論CYP2C19慢代謝型為急性冠脈綜合癥患者GRACE評分高危的危險(xiǎn)因素，明確基因型對于評估患者風(fēng)險(xiǎn)有重要意義。

冠脈綜合征；腦鈉肽；心肌梗死

急性冠脈綜合征（ACS）的發(fā)病率逐年升高，已成為威脅人類生命健康的嚴(yán)重問題，其治療的關(guān)鍵在于早期危險(xiǎn)分層[1]。但是，目前并沒有一種血清標(biāo)志物能夠獨(dú)立對ACS進(jìn)行有效分層。近年來，導(dǎo)致疾病的遺傳因素成為研究的熱點(diǎn)，許多代謝路徑中的關(guān)鍵酶在其中發(fā)揮重要作用，細(xì)胞色素P450（CYP450）中的CYP2C19是其中之一。

CYP2C19基因是細(xì)胞色素P450家族中最重要的藥物代謝酶編碼基因之一。研究表明CYP2C19*2和CYP2C19*3的單核苷酸多態(tài)性會增加心血管事件的發(fā)生率[2]。因此，本研究分析了CYP2C19基因多態(tài)性與ACS患者之間的關(guān)聯(lián)，以GRACE為分組標(biāo)準(zhǔn)，測定不同危險(xiǎn)分層的ACS患者CYP2C19基因多態(tài)性。

1 資料與方法

1.1 研究對象選取2015年1月～9月于軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院附屬醫(yī)院收治的ACS患者158例，其中男性66例，女性92例。納入標(biāo)準(zhǔn)：明確診斷為不穩(wěn)定型心絞痛、急性ST段抬高型心肌梗死、急性非ST段抬高型心肌梗死。排除對阿司匹林或氯吡格雷過敏或不耐受、半年內(nèi)有卒中或內(nèi)臟出血性疾病病史、嚴(yán)重肝臟疾病、凝血功能異常、瓣膜病、心肌病、先天性心臟病、感染性心內(nèi)膜炎、晚期腎功能不全、腫瘤及慢性心力衰竭患者。

1.2 基因型檢測脫氧核糖核酸（DNA）提取試劑盒提取各組外周靜脈血中DNA，并用實(shí)時熒光PCR法檢測基因型。取500μl EDTA抗凝靜脈血，提取基因組DNA?；蚪MDNA濃度在20～200 ng/μl，DNA的OD260/OD280在1.7～2.0之間。按照試劑盒說明書的反應(yīng)條件配置反應(yīng)體系，在PCR儀上進(jìn)行擴(kuò)增，聚合酶鏈反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性5 min，95℃變性30 s，58℃退火30 s，72℃延伸45 s，共38個循環(huán)，最后72℃延伸8 min。取PCR產(chǎn)物，3%瓊脂糖凝膠電泳，凝膠成像儀成像，檢測并明確基因類型。

CYP2C19基因型分析：檢測CYP2C19*1、*2、*3等位基因，*1/*1基因型為快代謝型，*1/*2或*1/*3基因型為中間代謝型，*2/*2、*3/*3或*2/*3基因型為慢代謝型。

1.3 ACS的危險(xiǎn)分層危險(xiǎn)分層采用The GRACE 2.0 ACS Risk Calculator評分系統(tǒng)[3]。入院即刻依據(jù)臨床資料進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估，包括：年齡、心率、收縮壓、心功能分級（Killip分級）、腎功能、ST段的改變、肌鈣蛋白的升高、心臟驟停。根據(jù)GRACE評分，分為3組：低危組（0～108分，n=89）、中危組（109～140分，n=40）、高危組（＞140分，n=29）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（s）表示，兩組間均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)（構(gòu)成比）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。采用多因素Logistic回歸分析ACS高危的影響因素。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同危險(xiǎn)分層的ACS患者臨床資料比較三組患者的年齡、男性比例、合并ACS危險(xiǎn)因素比例、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、左室射血分?jǐn)?shù)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。高危組的腦鈉肽（BNP）水平顯著高于低危組與中危組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。高危組慢代謝型比例較低危組和中危組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）（表1）。

2.2 不同CYP2C19基因型患者GRACE評分比較依據(jù)基因型鑒定結(jié)果分組，快代謝組77例，中間代謝組61例，慢代謝組20例。GRACE評分快代謝組為（104±32）分，中間代謝組（112±31）分，慢代謝組（138±56）分。慢代謝組GRACE評分明顯高于中間代謝組和快代謝組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）（圖1）。

2.3 ACS高危的影響因素分析多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，CYP2C19慢代謝型改變（OR=13.336，95%CI：3.195～55.661，P＜0.001）是ACS患者高危的危險(xiǎn)因素，同時BNP升高（OR=2.147，95%CI：1.457～5.539，P=0.026）也是ACS患者高危的危險(xiǎn)因素。年齡、性別、糖尿病、高血脂、高血壓等均與ACS患者高危分層無關(guān)（表2）。

3 討論

A C S包括急性S T段抬高型心肌梗死（STEMI）、急性非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI）和不穩(wěn)定型心絞痛（UA）[1,2]。ACS發(fā)病急，起病重，早期危險(xiǎn)分層對于判斷ACS預(yù)后及指導(dǎo)臨床醫(yī)師治療有重要的價值。無論是STEMI還是NSTEMI患者，危險(xiǎn)程度的評估貫穿于整個ACS診治過程[4]。

表1 不同危險(xiǎn)分層的ACS患者臨床基線資料比較

表2 多因素Logistic回歸分析ACS高危的影響因素

細(xì)胞色素P4502C19是重要的藥物代謝酶。CYP 2C19酶的活性不僅有種族差異，個體差異也很明顯。CYP2C19基因位于染色體10q24，包括9個外顯子，編碼490個氨基酸。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)CYP2C19*1～CYP2C19*25等25個類型，其中有23個等位基因編碼蛋白質(zhì)。編碼正常酶的基因是CYP2C19*1，常見的突變類型包括CYP2C19*2、CYP2C19*3和CYP2C19*17。中國人群中CYP2C19突變類型幾乎均為CYP2C19*2和CYP2C19*3[5]。CYP2C19*2是由于第5個外顯子第681位堿基G突變?yōu)锳，CYP2C19*3是第4個外顯子第636位堿基由G突變?yōu)锳，終產(chǎn)物是無活性的蛋白質(zhì)，從而使CYP2C19酶喪失催化活性，因此，這兩個基因型均是低功能代謝型。

本研究結(jié)果表明，CYP2C19基因多態(tài)性與ACS患者危險(xiǎn)分層有關(guān)，CYP2C19慢代謝型的患者GRACE評分高危的風(fēng)險(xiǎn)是快代謝型患者的13.3倍。既往研究表明CYP2C19*2和CYP2C19*3是冠心病患者發(fā)生不良心血管事件的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[6]。Trenk D等[7]觀察了797例接受PCI治療的患者，隨訪至少12個月，CYP2C19慢代謝型的患者出現(xiàn)不良心血管事件的危險(xiǎn)性顯著升高。另外一項(xiàng)關(guān)于ACS研究表明[8]，冠狀動脈介入術(shù)后30天內(nèi)支架血栓的發(fā)生率CYP2C19*2突變基因攜帶者是CYP2C19*1的3倍。

CYP2C19基因多態(tài)性不僅是ACS發(fā)病的重要危險(xiǎn)因素，同時也與ACS發(fā)病后危險(xiǎn)分層有關(guān)。Akasaka等[8]的研究結(jié)果表明CYP2C19*1和CYP2C19*2基因型體外ADP誘導(dǎo)的血小板聚集反應(yīng)有很大不同，CYP2C19*2突變型更易導(dǎo)致血小板聚集。而血小板活化聚集在ACS發(fā)病中起重要作用。

綜上所述，本研究初步證實(shí)了CYP2C19慢代謝型為ACS患者GRACE評分高危的危險(xiǎn)因素，其可以有效反映ACS患者的高危風(fēng)險(xiǎn)。盡早明確CYP2C19基因型對于ACS患者病情監(jiān)測、療效評估、預(yù)后評估有重要價值。

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本文編輯：姚雪莉

Correlation between CYP2C19 polymorphism and risk stratification of acute coronary syndrome

LIU Lixia*, XUE Jian, ZHANG Xiao-zhong, CHEN Jian-kui, ZHANG Jun-jun.*Department of Cardiology, Affiliated Hospital of Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, China.

ZHANG Xiao-zhong, E-mail: zxz947136@126.com; CHEN Jian-kui, E-mail: Chenjk307@163.com

ObjectiveTo discuss the relationship between CYP2C19 polymorphism and risk stratification of acute coronary syndrome (ACS).MethodsACS patients (n=158, male 66 and female 92) were chosen from the Affiliated Hospital of Academy of Military Medical Sciences from Jan. 2015 to Sept. 2015. All patients were divided into fast-metabolism group (n=77), medium-metabolism group (n=61) and slow-metabolism group (n=20) according to the detective results of CYP2C19 genotypes. The patients were given risk stratification by using GRACE scoring and divided into low-risk group (0-108, n=89), mid-risk group (109-140, n=40) and high-risk group (＞140, n=29). The relationship between CYP2C19 genotypes and high-risk factors of ACS was analyzed.ResultsThe level of brain natriuretic peptide (BNP) was significantly higher in high-risk group than that in low-risk group and mid-risk group (all P＜0.05). The percentage of slow-metabolism cases increased significantly in high-risk group compared with low-risk group and mid-risk group (all P＜0.05). GRACE scores were (104±32) in fast-metabolism group, (112±31) in medium-metabolism group and (138±56) in slow-metabolism group, which were significantly higher in slow-metabolism group then those in medium-metabolism group and fast-metabolism group (all P＜0.05). The results of multiple Logistic regression analysis showed that the change of CYP2C19 slow-metabolism genotype (OR=13.336, 95%CI: 3.195～55.661, P＜0.001) and higher BNP level (OR=2.147, 95%CI: 1.457-5.539, P=0.026) were high-risk factors in ACS patients.ConclusionCYP2C19 slow-metabolism genotype is a high-risk factor in ACS patients, and it is very important for reviewing ACS risk to definite genotypes.

Acute coronary syndrome; Brain natriuretic peptide; Myocardial infarction

R541.4

A

1674-4055(2016)12-1474-03

1100071 北京,軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院附屬醫(yī)院心內(nèi)科;2100071 北京,軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;3100043 北京,北京市石景山區(qū)中醫(yī)醫(yī)院心內(nèi)科

張孝忠,E-mail:zxz947136@126.com；

共同通訊作者：陳建魁,E-mail:Chenjk307@163.com

10.3969/j.issn.1674-4055.2016.12.17