13C-尿素呼氣試驗(yàn)檢測(cè)幽門螺桿菌的影響因素

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·綜述·

13C-尿素呼氣試驗(yàn)檢測(cè)幽門螺桿菌的影響因素

王艷嬌(綜述)，劉改芳*(審校)(河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院消化內(nèi)科，河北 石家莊 050051)

[關(guān)鍵詞]螺桿菌，幽門；(13)C-尿素呼氣試驗(yàn)；質(zhì)譜儀；紅外光譜儀

doi:10.3969/j.issn.1007-3205.2016.03.032

13C-尿素呼氣試驗(yàn)(13C-urea breath test，13C-UBT)是1987年Graham等[1]首次報(bào)道用于幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，H.pylori)感染的診斷方法。該方法于1996年9月通過美國食品藥物管理局的評(píng)審批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床。至今13C-UBT仍然被認(rèn)為是H.pylori感染診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。但有些因素可影響13C-UBT檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，使其出現(xiàn)假陰性或假陽性結(jié)果。現(xiàn)就13C-UBT檢測(cè)H.pylori的影響因素綜述如下。

1檢測(cè)儀器的影響

用于13C-UBT的檢測(cè)儀器主要有質(zhì)譜儀和紅外光譜儀2種。13C-呼氣質(zhì)譜儀由氣相色譜儀、離子比率質(zhì)譜儀、加樣器和計(jì)算機(jī)系統(tǒng)等組成，其工作原理為通過氣相色譜法，將CO2從呼出氣樣品中分離出來，得到純凈的CO2,然后將CO2注入離子比率質(zhì)譜儀中，離子比率質(zhì)譜儀包括離子源、質(zhì)量分析器和檢測(cè)器，根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量對(duì)CO2分子進(jìn)行分析，得到呼氣中13C的千分差值。

1.1質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀檢測(cè)H.pylori是目前最靈敏的方法，但儀器核心部件的性能對(duì)檢測(cè)結(jié)果有一定的影響，其核心部件包括離子源和質(zhì)量分析器兩部分，樣品在質(zhì)譜分析前首先要進(jìn)行離子化，離子源部件的性能決定了離子化效率，因而很大程度上決定了一臺(tái)質(zhì)譜儀的靈敏度。質(zhì)量分析器的準(zhǔn)確性受分析器的穩(wěn)定性和分辨率的影響，為確保檢測(cè)結(jié)果不受儀器部件穩(wěn)定性等的影響，對(duì)于核心部件每5年需由專業(yè)技術(shù)人員定期進(jìn)行更換[2]。13C-呼氣質(zhì)譜儀結(jié)構(gòu)復(fù)雜、價(jià)格昂貴、維護(hù)費(fèi)用高，使其在臨床的推廣應(yīng)用和普及受到一定的限制。相比之下，13C-紅外光譜儀因價(jià)格便宜、操作簡(jiǎn)單，是目前我國臨床應(yīng)用比較普及的檢測(cè)H.pylori的儀器。

1.213C-紅外光譜儀13C-紅外光譜儀由高選擇性的13CO2和12CO2探測(cè)器組成，檢測(cè)CO2在紅外線譜之間的特異性吸收，最終得到呼氣中13C的千分差值。國內(nèi)外一些對(duì)比研究表明13C-紅外光譜儀與13C-呼氣質(zhì)譜儀的檢測(cè)結(jié)果具有很好的相關(guān)性，用于13C-UBT檢測(cè)H.pylori是非?？煽康腫2]。13C-紅外光譜儀測(cè)定時(shí)需要將集氣袋的口打開連接至儀器端口，操作過程中可能會(huì)有一部分樣本漏出，從而降低測(cè)定值，因此應(yīng)用13C-紅外光譜儀進(jìn)行檢測(cè)時(shí)要盡量減少樣本漏出[3]。另外，13C-紅外光譜儀的性能不如質(zhì)譜儀穩(wěn)定，需要定期進(jìn)行校正，一般每周需要校正2次。總之，在應(yīng)用13C-呼氣質(zhì)譜儀檢測(cè)H.pylori時(shí)，對(duì)其核心部件需要定期進(jìn)行更換，以減少儀器本身對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成的誤差；在應(yīng)用13C-紅外光譜儀時(shí)需注意盡快將集氣袋插入端口，減少因氣體漏出導(dǎo)致的誤差，并應(yīng)按要求時(shí)間及時(shí)對(duì)儀器進(jìn)行校正。

2飲食的影響

研究表明，許多食物會(huì)對(duì)13C-UBT的檢測(cè)結(jié)果有一定的影響。綻永華等[4]對(duì)60例H.pylori陽性的十二指腸潰瘍患者隨機(jī)分為2組進(jìn)行根除H.pylori治療，治療組口服埃索美拉唑+阿莫西林+呋喃唑酮+大蒜素膠囊，對(duì)照組不含大蒜素膠囊，服藥7 d后2組繼續(xù)服用埃索美拉唑3周，停藥4周后復(fù)查UBT,治療組H.pylori根除率為92.9%，對(duì)照組為84.4%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，大蒜素是大蒜的主要有效成分，其分子中的巰基可抑制與H.pylori生長(zhǎng)繁殖有關(guān)的含巰基酶，進(jìn)而產(chǎn)生抗菌作用。富含乳酸桿菌的酸奶酪等食物的攝入可抑制H.pylori在胃內(nèi)的生長(zhǎng)[5]。Fujimura等[6]研究認(rèn)為乳酸桿菌可以抑制H.pylori的生長(zhǎng)。這與乳酸桿菌產(chǎn)生的細(xì)菌素、乳酸、過氧化氫等可以抑制H.pylori活性有關(guān)[7]。另外，Stoicov等[8]通過體外實(shí)驗(yàn)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)綠茶對(duì)H.pylori有抑菌作用，這可能是因?yàn)榫G茶的主要成分兒茶素對(duì)H.pylori尿素酶有抑制作用。因此，在13C-UBT檢測(cè)前患者需要隔夜空腹或禁食4 h以上，從而避免食物對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響；此外，還應(yīng)了解患者的飲食習(xí)慣，如果長(zhǎng)期或近期飲用綠茶、頻繁進(jìn)食大蒜或富含乳酸桿菌的食物，檢測(cè)結(jié)果可能會(huì)出現(xiàn)假陰性或較低的檢測(cè)值。

3藥物的影響

研究已證實(shí)近期內(nèi)使用抗生素、鉍制劑、質(zhì)子泵抑制劑、H2受體阻滯劑、部分中藥(如黃連、黃芩、大黃等)對(duì)H.pylori的檢測(cè)有明顯的影響，可造成假陰性的結(jié)果。吳炎等[9]對(duì)156例十二指腸球部潰瘍患者做了研究，發(fā)現(xiàn)近期內(nèi)未使用抗生素者UBT陽性率明顯高于使用抗生素者，在停藥1個(gè)月后對(duì)之前檢測(cè)為陰性的患者再次檢測(cè),陽性率為66．7%；不同種類的抗生素對(duì)UBT的影響是不同的，近期應(yīng)用克林霉素的患者，UBT均為H.pylori陽性，未顯示出影響；而近期應(yīng)用甲硝唑、阿莫西林等類藥物的患者，在停藥1個(gè)月后復(fù)查時(shí)，原H.pylori陰性者均轉(zhuǎn)為陽性；近期應(yīng)用左氧氟沙星的患者，在停藥1個(gè)月后復(fù)查時(shí)原來H.pylori陰性者45.5%轉(zhuǎn)為陽性，54.5%的患者仍為陰性。質(zhì)子泵抑制劑有強(qiáng)烈、持久的抑酸作用,應(yīng)用后會(huì)使胃內(nèi)酸度降低，H.pylori在生存環(huán)境不利時(shí)易于發(fā)生形態(tài)變異，常由S型縮卷成球形，處于靜止的自身保護(hù)狀態(tài)，可能導(dǎo)致對(duì)H.pylori的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性[10]。而鉍制劑抗H.pylori的機(jī)制主要有：鉍制劑可進(jìn)入H.pylori菌體內(nèi)并聚集，促使其發(fā)生不規(guī)則收縮，導(dǎo)致細(xì)胞膜破裂；另外，鉍制劑還可與H.pylori產(chǎn)生的毒素結(jié)合，使H.pylori無法在胃黏膜上皮定植[11]。H2受體阻滯劑本身對(duì)H.pylori沒有抑制作用，其對(duì)13C-UBT結(jié)果的影響可能與其抑制胃酸分泌，使胃內(nèi)pH升高有關(guān)。部分中藥對(duì)13C-UBT結(jié)果也有很大影響，游運(yùn)舸等[12]研究認(rèn)為用祛菌通幽湯(其內(nèi)含有炒大黃、黃連等)替代含鉍劑四聯(lián)方案中的抗生素對(duì)H.pylori有很好的根除效果，其具體機(jī)制尚不清楚。故在13C-UBT檢測(cè)前應(yīng)仔細(xì)詢問病情，了解之前是否使用過相關(guān)藥物，如有服藥史需告知患者停用相關(guān)藥物一定時(shí)間后再進(jìn)行檢測(cè)，如因某些原因不能停服者，可采用血清學(xué)方法檢測(cè)H.pylori抗體；對(duì)于H.pylori根除治療的患者應(yīng)囑其在停藥后4周以上復(fù)查，如復(fù)查仍為陽性者，應(yīng)在停藥后2～3個(gè)月待H.pylori恢復(fù)其典型形態(tài)、尿素酶活性恢復(fù)后再次行根除治療。

4疾病的影響

某些疾病狀態(tài)下進(jìn)行13C-UBT也會(huì)影響其檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，出現(xiàn)假陽性或假陰性。李舜等[13]對(duì)382例上消化道疾病患者同期UBT的結(jié)果以病理對(duì)照作為判定H.pylori感染的標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果顯示慢性萎縮性胃炎者UBT假陽性率達(dá)24.1%，原因可能是萎縮性胃炎者胃酸缺乏極易發(fā)生胃內(nèi)其他產(chǎn)尿素酶的細(xì)菌過度生長(zhǎng),可能導(dǎo)致13C-UBT假陽性。尹曙明等[14]對(duì)94例殘胃者和100例非殘胃者進(jìn)行13C-UBT檢測(cè)，結(jié)果顯示殘胃者術(shù)后H.pylori感染率明顯低于術(shù)前和非殘胃者(37.2%vs79.8%，77.0%)，畢Ⅱ式術(shù)后H.pylori感染率低于畢Ⅰ式術(shù)后(24.4%vs47.2%)，且隨著術(shù)后病程的延長(zhǎng)H.pylori感染率逐漸降低。胃部分切除的患者口服13C-尿素后13C-尿素在胃內(nèi)排空速度過快，更易進(jìn)入十二指腸或小腸，導(dǎo)致13C-UBT出現(xiàn)假陰性，對(duì)于殘胃者宜采用胃黏膜組織快速尿素酶試驗(yàn)或H.pylori糞便抗原等檢測(cè)方法檢測(cè)。徐林發(fā)等[15]對(duì)53例上消化道出血患者做了研究，結(jié)果顯示UBT檢測(cè)H.pylori陽性率明顯低于病理組織學(xué)方法(24.5%vs90.6%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，說明上消化道出血者用UBT檢測(cè)H.pylori會(huì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果。這可能是因?yàn)槌鲅笪竷?nèi)的血液及血凝塊一方面中和胃酸，使胃內(nèi)pH值升高，另一方面釋放大量的氧氣抑制H.pylori的生長(zhǎng)，使H.pylori尿素酶活性降低[9]。鄭忠法等[16]研究顯示慢性胃炎H.pylori的陽性率為71.7%，膽汁反流性胃炎的H.pylori陽性率為36%，2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說明膽汁反流對(duì)H.pylori有抑制作用，但膽汁反流性胃炎與H.pylori感染是可以并存的，這可能與膽汁反流的時(shí)間、頻率等有關(guān)。高瑞梅等[17]關(guān)于H.pylori的細(xì)菌培養(yǎng)試驗(yàn)顯示，膽汁濃度高于1∶192時(shí)H.pylori分離株無法生長(zhǎng)。膽汁反流可以破壞H.pylori生長(zhǎng)的微環(huán)境，膽汁酸對(duì)H.pylori的聚集、生長(zhǎng)有明顯抑制效果，膽汁反流可影響13C-UBT的檢測(cè)結(jié)果，造成假陰性。因此，在13C-UBT前需先了解患者的疾病狀態(tài)，對(duì)可影響檢測(cè)結(jié)果的疾病給予相應(yīng)的處理措施，或采用其他(如H.pylori抗體檢測(cè))檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)，以提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

5受檢者的配合及尿素劑型的影響

在檢測(cè)前需向患者詳細(xì)介紹13C-UBT的方法、簡(jiǎn)單原理及需要患者配合的注意事項(xiàng)，以消除患者的顧慮，從而得到其重視和配合。檢測(cè)開始前需囑患者清潔口腔，因?yàn)榭谇恢幸灿幸欢ǖ哪蛩孛富钚?，這會(huì)影響13C-UBT的檢測(cè)結(jié)果。零時(shí)呼氣后需叮囑患者保持安靜，避免劇烈活動(dòng)，因?yàn)樯眢w在安靜和運(yùn)動(dòng)狀態(tài)下CO2的產(chǎn)量有很大變化,呼氣中13CO2濃度會(huì)因內(nèi)源性CO2的產(chǎn)生而被不同程度的稀釋,使13CO2豐度明顯下降,造成檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)偏差。將13C-尿素制成膠囊口服可減少口腔尿素酶活性的影響,Peng等[18]比較了服用膠囊制劑及粉劑的UBT檢測(cè)H.pylori的敏感度、特異度及準(zhǔn)確性，結(jié)果顯示膠囊制劑的準(zhǔn)確性較高(98%、93%)。因此，為避免口腔中尿素酶活性對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，檢測(cè)前需告知患者清潔口腔或口服膠囊制劑；在檢測(cè)前應(yīng)與患者溝通，使其配合操作者進(jìn)行檢測(cè)，這對(duì)于檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性也是非常必要的。

6展望

H.pylori感染可導(dǎo)致消化性潰瘍、胃癌、尋常型銀屑病、阿爾茨海默病等許多疾病[19]，因此對(duì)H.pylori感染的診斷及根除是非常重要的。13C-UBT作為目前國際公認(rèn)的檢測(cè)及抗H.pylori藥物療效監(jiān)測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)，已經(jīng)在臨床上推廣應(yīng)用。但其檢測(cè)的準(zhǔn)確性也受許多因素的影響，除上述影響因素外，關(guān)于13C-UBT的13C-尿素劑量等目前尚無統(tǒng)一的規(guī)定，有報(bào)道提出了優(yōu)化方案[20]，但減小13C-尿素劑量是否會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性尚不明確。

[參考文獻(xiàn)]

[1]Graham DY,Klein PD,Evans DJ Jr,et al. Campylobacter pylori detected noninvasively by the13C-urea breath test[J]. Lancet,1987,1(8543):1174-1177.

[2]郝波,程文芳,張國新,等.13C-呼氣紅外光譜儀在診斷幽門螺桿菌感染中的應(yīng)用[J].江蘇醫(yī)藥,2014,40(5):535-537.

[3]王敏,王志玲，勾凌燕,等.13C-紅外光譜儀測(cè)定呼氣中13C千分差值的可信度研究[J].衛(wèi)生研究,2013,42(2):298-301.

[4]綻永華，彭娜娜.大蒜素、阿莫西林、埃索美拉唑、呋喃唑酮四聯(lián)療法治療Hp陽性十二指腸潰瘍效果觀察[J].山東醫(yī)藥,2013,53(10):63-64.

[5]王嵐,郁文靜，鄒靜，等.13C-尿素呼氣試驗(yàn)檢測(cè)幽門螺旋桿菌感染的護(hù)理[J].中華現(xiàn)代護(hù)理雜志,2013,19(14):1686-1687.

[6]Fujimura S,Watanabe A,Kimura K,et al. Probiotic mechanism of Lactobacillus gasseri OLL2716 strain against Helicobacter pylori[J]. J Clin Microbiol,2012,50(3):1134-1136.

[7]何晨熙,劉改芳,孔聰聰,等.益生菌聯(lián)合三聯(lián)療法根除幽門螺桿菌療效研究[J].臨床薈萃,2014,29(1):28-30.

[8]Stoicov C,Saffari R,Houghton J. Green tea inhibits Helicobacter growth in vivo and in vitro[J]. Int J Antimicrob Agents,2009,33(5):473-478.

[9]吳炎,高燕,趙婭敏,等.抗生素對(duì)十二指腸球部潰瘍出血者胃內(nèi)酸化14C-UBT的影響[J].中國臨床實(shí)用醫(yī)學(xué),2008,2(6):17-19.

[10]吳婧，劉改芳.幽門螺桿菌根除率的影響因素[J].中華消化雜志,2013,33(1):69-70.

[11]孔聰聰,劉改芳,吳婧,等.不同鉍劑四聯(lián)方案根除幽門螺桿菌240例的療效分析[J].中華消化雜志,2013,33(1):69-70.

[12]游運(yùn)舸,武建華,廖慧.祛菌通幽湯聯(lián)合質(zhì)子泵抑制劑和鉍劑治療幽門螺桿菌相關(guān)性胃病臨床研究[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2014,21(6):27-29.

[13]李舜,張家云,鄧詠梅.14C-尿素呼氣試驗(yàn)在不同胃黏膜病變中的診斷價(jià)值及影響因素分析[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2005,21(5):477-478.

[14]尹曙明,張贛生,項(xiàng)平,等.13C-尿素呼氣試驗(yàn)診斷殘胃幽門螺桿菌感染的應(yīng)用價(jià)值[J].中華消化雜志,2012,32(10):669-673.

[15]徐林發(fā),林軍,姜冠軍,等.上消化道出血對(duì)幽門螺桿菌尿素酶試驗(yàn)的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2005,9(6):1011.

[16]鄭忠法,舒正方,余文宇.膽汁反流性胃炎與幽門螺桿菌感染的相關(guān)性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2013,23(23):5709-5710.

[17]高瑞梅,許琳,孟欣穎,等.原發(fā)性膽汁反流性胃炎胃黏膜胃動(dòng)素、血管活性腸肽的表達(dá)[J].世界華人消化雜志,2010,18(7):722-725.

[18]Peng NJ,Lai KH,Lo GH,et al. Comparison of noninvasive diagnostic tests for Helicobacter pylori infection[J]. Med Princ Pract,2009,18(1):57-61.

[19]吳婧,劉改芳,趙麗偉,等.幽門螺桿菌毒素分型與胃十二指腸疾病的關(guān)系[J].臨床薈萃,2012,27(9):1709-1711.

[20]Pacheco SL,Ogata SK,Machado RS,et al. Diagnosis of Helicobacter pylori infection by means of reduced-dose13C-Urea breath test and early sampling of exhaled breath[J]. J Pediatr Gastroenterol Nutr,2013,57(5):607-611.

(本文編輯：許卓文)

[中圖分類號(hào)]R573

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A

[文章編號(hào)]1007-3205(2016)03-0358-03

*通訊作者

[作者簡(jiǎn)介]王艷嬌(1987-)，女，河北定興人，河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院醫(yī)學(xué)碩士研究生，從事消化內(nèi)科疾病診治研究。

[收稿日期]2014-12-19；[修回日期]2015-01-13