高效液相色譜法測定注射用蘭索拉唑中蘭索拉唑的含量

許　萌，鹿夢溪，周春華*，徐德華，張雪寧，宋　娟(.河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院藥學部，河北 石家莊 050000；.華北理工大學基礎醫(yī)學院，河北 唐山 06000；.河北醫(yī)科大學藥學院藥物分析教研室，河北 石家莊 05007)

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·論著·

高效液相色譜法測定注射用蘭索拉唑中蘭索拉唑的含量

許萌1，鹿夢溪2，周春華1*，徐德華3，張雪寧1，宋娟1(1.河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院藥學部，河北 石家莊 050000；2.華北理工大學基礎醫(yī)學院，河北 唐山 063000；3.河北醫(yī)科大學藥學院藥物分析教研室，河北 石家莊 050017)

[摘要]目的采用高效液相色譜法建立測定蘭索拉唑及其制劑注射用蘭索拉唑含量的方法。方法色譜柱為Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm，5 μm) ；流動相為甲醇∶水(70∶30)；檢測波長為285 nm；流速 1.0 mL/min；柱溫25 ℃；進樣量 20 μL。結果注射用蘭索拉唑制劑中的輔料對蘭索拉唑的測定無干擾，蘭索拉唑在50~500 mg/L濃度范圍內與峰面積呈良好的線性關系，精密度[相對標準差(relative standard deviation,RSD)=0.14%] 良好；低、中、高3種濃度平均回收率分別為100.0%、98.3%、101.7%，RSD分別為0.5%、0.3%、0.4%。結論該方法簡便、準確、專屬性好，可用于蘭索拉唑及其制劑含量的測定。

[關鍵詞]蘭索拉唑；色譜法,高效液相；含量測定

doi:10.3969/j.issn.1007-3205.2016.01.016

蘭索拉唑是繼奧美拉唑之后的一種新質子泵抑制劑，能夠強有力地抑制胃酸分泌，且不受其他胃酸分泌的各種始動因素影響[1]，可廣泛用于治療與酸分泌有關的各種消化功能紊亂性疾病，是近年來臨床應用廣泛、療效顯著的藥物[2-3]。與奧美拉唑相比，蘭索拉唑有一個三氟乙氧取代基，其生物利用度較奧美拉唑提高了30%以上，而對幽門螺桿菌的抑菌活性比奧美拉唑提高了4倍[4-5]。蘭索拉唑有多種劑型及測定方法[6-9]，本研究采用高效液相色譜法測定蘭索拉唑及其制劑含量，以尋求簡便快速測定蘭索拉唑含量的方法，旨在為蘭索拉唑及其制劑的質量控制提供依據(jù)。

1資料與方法

1.1儀器高效液相色譜儀，Waters 515高效液相色譜儀；Waters 480紫外檢測器，操作平臺Empower Application；Diamonsil C18色譜柱(250 mm×4.6 mm，5.0 μm)；電子分析天平(CPA225D，德國 Sartorius)；浙江飛越FY-2C旋片式真空泵；超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司，型號KQ-300B)；pH計(上海雷磁儀器廠，型號Phs-3B)。

1.2藥品與試劑蘭索拉唑對照品 (中國藥品生物制品檢定所，批號：100709-200902，純度99.8%)；注射用蘭索拉唑(江蘇奧賽康，批號：F1411060、F1411061、F1411062；規(guī)格：30 mg)；甲醇為色譜純，其他試劑為分析純；水為高純水。

1.3色譜條件Diamonsil C18色譜柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流動相：甲醇 ∶水 (70 ∶30)；檢測波長285 nm；流速 1.0 mL /min；柱溫25 ℃；進樣量 20 μL。

2結果

2.1溶液的配制①供試品溶液的配制：按照說明書中的配制方法，將蘭索拉唑樣品進行溶解，并加入到100 mL生理鹽水注射液中，即得到供試品溶液。②蘭索拉唑對照品溶液的配制：精密稱取蘭索拉唑對照品25.06 mg，放至25 mL量瓶中，加入甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，配成1.00 g/L的蘭索拉唑儲備液。③空白輔料溶液的配制：按處方比例分別稱取除蘭索拉唑以外的其他成分(甘露醇，氫氧化鈉)置100 mL 棕色量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置25 mL棕色量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得空白輔料溶液。

2.2專屬性試驗分別取空白輔料溶液、蘭索拉唑對照品溶液及注射用蘭索拉唑流動相溶液各 20 μL，分別注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，結果見圖1。各色譜峰均分離良好，空白輔料對蘭索拉唑的測定無干擾。

圖1空白溶液(A)、對照品(B)及樣品(C)的色譜圖

Figure 1HPLC of blank sample solution (A),standard solution (B) and sample solution (C)

2.3線性試驗依次精密量取“2.1”項下蘭索拉唑對照品溶液5、4、3、2、1、0.5 mL，置10 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，配制成濃度分別為500、400、300、200、100、50 mg/L的一系列線性溶液，按照“1.3”項下色譜條件測定，以峰面積A為縱坐標，濃度C為橫坐標，進行線性回歸，得回歸方程A=4.51×104C+4.85×104(r2=0.999 3)。結果表明蘭索拉唑在50~500 mg/L濃度范圍內線性關系良好。

2.4回收率試驗精密稱取處方比例的80%、100%、120%蘭索拉唑對照品和輔料，置10 mL量瓶中，加入甲醇稀釋至刻度，搖勻，每個比例平行配制3份溶液，按照“1.3”項下色譜條件測定，以加入量和測得量計算平均回收率。結果低、中、高3種濃度的平均回收率分別為100.0%、98.3%、101.7%，精密度相對標準差(relative standard deviation,RSD)分別為0.5%、0.3%、0.4%。RSD符合要求，回收率實驗結果良好，見表1。

表1　回收率試驗結果

2.5精密度試驗配置濃度約為300 mg/L的蘭索拉唑對照品溶液，按照“1.3”項下色譜條件測定，連續(xù)進樣6次，記錄峰面積，計算峰面積的RSD為 0.2%(n=6)，說明該方法精密度良好。

2.6穩(wěn)定性試驗將配置好的供試品溶液放置0、1、2、3、4、5、6 h后，按照“1.3”項下色譜條件測定，記錄峰面積，計算RSD為1.5%，說明該供試品在室溫放置6 h過程中濃度基本不變，穩(wěn)定性良好。

2.7注射用蘭索拉唑樣品的含量測定取3個批號的注射用蘭索拉唑，按照“2.1”項下，分別用生理鹽水溶解稀釋成每1 mL含蘭索拉唑300 μg的樣品溶液，精密取上述溶液各20 μL，分別注入色譜儀，記錄色譜圖。另取蘭索拉唑對照品適量，同法測定，按外標法以峰面積計算含量。3個批號的樣品含量分別為標示量的100.1%、99.3%、99.5%。結果見表2。

表2　含量測定結果

3討論

3.1注射用蘭索拉唑消化性潰瘍病是一種常見病、多發(fā)病，發(fā)病率約占人口總數(shù)的10%。目前消化道潰瘍治療藥主要有質子泵抑制劑(蘭索拉唑等)、H2受體拮抗劑(雷尼替丁等)、胃黏膜保護劑(鉍劑)、抗酸劑(氫氧化鋁)等[10-12]。目前國內使用最廣泛的質子泵抑制劑有蘭索拉唑。

蘭索拉唑為苯并咪唑類衍生物，是堿性化合物，其水溶液不穩(wěn)定，在酸性條件下易分解，因此通常在注射用蘭索拉唑的處方中加入一定量的氫氧化鈉，以營造堿性環(huán)境來增加其溶解度[13]。臨床應用中常與氯化鈉溶液或葡萄糖溶液配伍使用，多數(shù)為中性或偏酸性，使用不當時會出現(xiàn)溶液變色和沉淀現(xiàn)象。注射用蘭索拉唑在復配過程中，其pH會發(fā)生改變，從而使溶解度發(fā)生改變，有較大的微粒產(chǎn)生，可能會使蘭索拉唑的含量減少，不能夠達到有效的血藥濃度，同時大微粒的產(chǎn)生，還會在輸液過程中可能堵塞小的毛細血管，給患者帶來嚴重的危害，甚至危及生命。國內已有報道患者在輸注蘭索拉唑等藥物時，發(fā)生栓塞性疾病，造成患者死亡，雖然沒有找到確鑿的依據(jù)，表明患者的死亡是由輸注拉索拉唑發(fā)生栓塞造成的，但是注射用蘭索拉唑在復配過程中產(chǎn)生微粒的事實還是不容忽視的。因此，臨床上使用注射用蘭索拉唑時必須配有1.2 μm的過濾器，以便去除輸液過程中可能產(chǎn)生的不溶性微粒，避免不溶性微粒對人體造成的嚴重危害。為保證注射用蘭索拉唑的產(chǎn)品質量及臨床用藥的安全有效性，本研究采用高效液相色譜法對注射用蘭索拉唑含量進行測定。

3.2色譜條件的選擇將蘭索拉唑對照品溶液在200~400 nm的波長范圍內經(jīng)紫外線掃描，結果最大吸收峰在285 nm處，而在此波長下輔料沒有吸收，不干擾測定。故選擇285 nm作為測定波長。

參照國家藥品標準中蘭索拉唑片和蘭索拉唑腸溶膠囊的分析檢驗方法，二者均采用甲醇-磷酸鹽的流動相，與此相比，本研究對注射用蘭索拉唑含量的測定方法進行了簡化。此方法下蘭索拉唑與其空白輔料峰能分離完全，峰形較好且保留時間適宜。試驗結果表明該方法簡便、快速、準確，適用于注射用蘭索拉唑藥品生產(chǎn)及實際應用中的含量測定。

3.3注射用蘭索拉唑的含量 注射用蘭索拉唑為注射劑，是蘭索拉唑的無菌凍干粉制劑。按平均裝量計算，制劑中含蘭索拉唑應為標示量的90.0%~110.0%。本研究中測得的3個批號的注射用蘭索拉唑中蘭索拉唑的含量分別為標示量的100.1%、99.3%、99.5%，均在標準所規(guī)定的范圍內，符合制劑標準規(guī)定。

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(本文編輯：許卓文)

Determination of related substances in lansoprazole for injection

by high performance liquid chromatography

XU Meng1,LU Meng-xi2,ZHOU Chun-hua1*，

XU De-hua3,ZHANG Xue-ning1,SONG Juan1

(1.Department of Pharmacy,the Second Hospital of Hebei Medical University,Shijiazhuang

050000,China;2.College of Basic Medical,North China University of Science and Technology,

Hebei,Tangshan 063000,China;3.Department of Pharmacy,Hebei Medical

University,Shijiazhuang 050017,China)

[Abstract]ObjectiveTo use high performance liquid chromatography for the determination of the content of lansoprazole and lansoprazole injection.MethodsThe determination was carried out on with a Dikma Diamonsil TM2C18(4.6 mm×250 mm, 5 μm) column.The mobile phase was methanol-water(70∶30). The determination wavelength was 285 nm.ResultsThe excipients did not interfere with the determination of lansoprazole.The developed method could be used for the determination of lansoprazole and its injection.The calibration curve of lansoprazole was in good linearity over the range of 50-500 mg/L.The precision of the method(relative standard deviation[RSD]=0.14%) was good.The average recovery of the low,medium,and high concentrations were 100.0%,98.3%,101.7% with RSD 0.5%,0.3%,0.4% respectively.ConclusionThe method is simple,accurate and specific.It can be used for the determination of lansoprazole.

[Key words]lansoprazole;chromatography，high performance liquid;content determination

[中圖分類號]R961

[文獻標志碼]A

[文章編號]1007-3205(2016)01-0057-04

*通訊作者：E-mail: Zhouchunhua80@126.com

[作者簡介]許萌(1989-)，女，河北保定人，河北醫(yī)科大學第二醫(yī)

[基金項目]河北省醫(yī)學科學研究重點課題(20150677；20150261)；

[收稿日期]2015-09-14；[修回日期]2015-10-20

河北省藥學會臨床藥學專項科研項目計劃(YX201501)

院藥劑師，理學碩士，從事藥物質量與控制研究。