改善睡眠類中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物檢測(cè)技術(shù)的研究進(jìn)展

徐文峰 金鵬飛北京醫(yī)院藥學(xué)部，北京 100730

改善睡眠類中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物檢測(cè)技術(shù)的研究進(jìn)展

徐文峰 金鵬飛▲
北京醫(yī)院藥學(xué)部，北京 100730

查閱國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)近年來(lái)改善睡眠類中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物的概況和檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行歸納和總結(jié)，為檢測(cè)中成藥和保健食品非法添加化學(xué)藥物提供技術(shù)參考。改善睡眠類中成藥和保健食品中非法添加的化學(xué)藥物主要有鎮(zhèn)靜催眠藥以及鎮(zhèn)痛藥等。涉及的檢測(cè)方法包括薄層色譜法、液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、離子遷移技術(shù)等。

中成藥；保健食品；非法添加；化學(xué)藥物；檢測(cè)技術(shù)

失眠是指無(wú)法入睡或無(wú)法保持睡眠狀態(tài)，導(dǎo)致睡眠不足。又稱入睡和維持睡眠障礙，為各種原因引起入睡困難、睡眠深度或頻度過(guò)短、早醒及睡眠時(shí)間不足或質(zhì)量差等。隨著現(xiàn)代生活節(jié)奏的加快、生活壓力的增加，越來(lái)越多的人面臨焦慮、失眠等癥狀，長(zhǎng)期受到失眠癥的困擾［1］。由于擔(dān)心長(zhǎng)時(shí)間服用鎮(zhèn)靜催眠類藥物不良反應(yīng)較大，很多失眠患者較青睞改善睡眠類中成藥和保健食品，故改善睡眠類中成藥及保健食品的市場(chǎng)需求也隨之日益增長(zhǎng)。出于利益驅(qū)動(dòng)，一些不法廠商在改善睡眠類中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物以增加產(chǎn)品功效。患者在不知情的情況下長(zhǎng)期大量服用此類中成藥和保健食品，可能造成嚴(yán)重的不良反應(yīng)，甚至危及生命［2］。因此，本文綜述了近年來(lái)改善睡眠類中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物的檢測(cè)方法，為相關(guān)監(jiān)管部門提供文獻(xiàn)支持，打擊中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物的行為，保護(hù)消費(fèi)者的合法權(quán)益和身體健康。

1 改善睡眠類中成藥及保健食品非法添加化學(xué)藥物概況

目前改善睡眠類中成藥及保健食品中非法添加化學(xué)藥物具有如下特點(diǎn)［3-4］：①添加化學(xué)成分來(lái)源多樣，劑量隨意，不同批次產(chǎn)品之間所添加藥物的含量相差巨大，為躲避檢查，有的批次不存在非法添加藥物，而有的批次存在非法添加藥物；②廠家在取得保健食品批準(zhǔn)文號(hào)后，再在上市產(chǎn)品中違法添加化學(xué)藥物；③減少添加藥物的劑量，增加添加藥物的種類；④利用制劑的特點(diǎn)，將違禁藥物添加到膠囊殼中以逃避檢測(cè)；⑤非法添加的藥物可能與保健食品所含化學(xué)成分存

在相互作用，添加的藥物也可能與消費(fèi)者正在使用的藥物之間存在相互作用，對(duì)消費(fèi)者身體健康具有潛在危害。

改善睡眠類中成藥及保健食品中最為常見的非法添加藥物為鎮(zhèn)靜催眠藥。由于多數(shù)失眠為身體不適及疼痛造成的，鎮(zhèn)痛藥也經(jīng)常被非法添加于改善睡眠類中成藥及保健食品中。目前，已經(jīng)從改善睡眠類中成藥及保健食品中篩查出的，或已經(jīng)建立篩查方法的潛在添加藥物有①鎮(zhèn)靜催眠藥，包括苯二氮類：氯氮、地西泮、硝西泮、氟西泮、氯甲西泮、氯硝西泮、氟硝西泮、奧沙西泮、勞拉西泮、普拉西泮、去甲西泮、替馬西泮、去烷基氟西泮、2-羥基氟西泮、去甲基氟硝西泮、7-氨基氟硝西泮、三唑侖、艾司唑侖、阿普唑侖、咪達(dá)唑侖、α-羥基咪達(dá)唑侖；巴比妥類：巴比妥、苯巴比妥、戊巴比妥、異戊巴比妥、司可巴比妥；其他類：佐匹克隆、唑吡坦、扎來(lái)普??；②其他精神類藥品，包括：氯美扎酮、文法拉辛、奮乃靜、苯妥英鈉、氯巴占、氯丙嗪、異丙嗪、多塞平、奧氮平、氯氮平、甲苯喹唑酮、甲丙氨酯、氟哌啶醇；③鎮(zhèn)痛藥，包括：青藤堿、羅通定、羥嗪、對(duì)乙酰氨基酚、阿司匹林、安乃近、非那西汀、安替比林、氨基比林、舒林酸、甲芬那酸、雙氯芬酸、氯唑沙宗、奧沙普秦、賽拉嗪、尼美舒利、貝諾酯、芬布芬、酮洛芬、布洛芬、洛索洛芬、吲哚美辛、保泰松、萘普生、吡羅昔康、氯諾昔康、美洛昔康、羅非昔布、塞來(lái)昔布；④其他類，包括：氯苯那敏、褪黑素。

2 減肥保健食品篩查檢測(cè)技術(shù)

保健食品本身化學(xué)成分極為復(fù)雜，再加上非法添加的化學(xué)藥物種類繁多，結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)各異，為了快速有效地檢測(cè)改善睡眠類中成藥及保健食品中非法添加的化學(xué)藥物，國(guó)內(nèi)外科研工作者進(jìn)行了大量的研究，已報(bào)道的檢測(cè)方法主要包括薄層色譜法（TLC）［5］、液相色譜法（LC）［6-7］、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（LCMS）［8-9］、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）［10］、離子遷移譜（IMS）［11］等?，F(xiàn)將近年來(lái)各類檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用實(shí)例綜述如下：

2.1 薄層色譜法

吳靜［12］建立了鎮(zhèn)靜安神類中成藥及保健食品中添加地西泮、苯巴比妥和艾司唑侖的薄層色譜快速檢測(cè)方法。分別精密稱取地西泮、苯巴比妥和艾司唑侖對(duì)照品各10 mg，加甲醇2 mL超聲使溶解作為對(duì)照品溶液。樣品取1次服用量加氯仿10 mL超聲使溶解，濾過(guò)，水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，點(diǎn)于硅膠GF254薄層板上，以正己烷-氯仿-甲醇（5∶3∶1）為展開劑，展開后置254 nm紫外燈下檢視。該色譜條件下3種化學(xué)藥物能得到較好的分離。

蘇?。?3］建立了快速檢測(cè)中成藥中非法添加氨基比林、阿司匹林、吲哚美辛、布洛芬、雙氯芬酸鈉的薄層色譜法。樣品經(jīng)甲醇提取后，采用硅膠GF254薄層板，以三氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸（25∶25∶0.2）為展開劑。該色譜條件下，能同時(shí)有效檢測(cè)上述5種非甾體抗炎藥。氨基比林、阿司匹林、吲哚美辛、布洛芬和雙氯芬酸鈉的檢測(cè)限分別為0.3、0.2、0.04、0.7、0.08 μg。作者按該實(shí)驗(yàn)方法篩查了近20余種中成藥，其中檢出非法添加這5種非甾體抗炎藥的中成藥2種。

2.2 液相色譜法

林芳等［14］建立了同時(shí)快速測(cè)定改善睡眠類保健食品中違法添加巴比妥、氯氮、地西泮等18種精神藥物的超高效液相檢測(cè)方法。樣品經(jīng)氯仿超聲提取，濃縮后甲醇轉(zhuǎn)溶處理。流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脫，流速為0.4 mL/min。該檢測(cè)方法中18種精神藥物在15 min內(nèi)可有效分離，在3～100 μg/mL的線性范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)均大于0.999，平均回收率在80.2%～107.2%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于7%，檢測(cè)限為0.6～2 ng。

韓東岐等［15］建立了同時(shí)檢測(cè)鎮(zhèn)靜安神類中成藥及保健食品中非法添加的苯妥英鈉、氯氮、勞拉西泮等9種安眠藥物的高效液相色譜法。流動(dòng)相為含0.1%三乙胺的0.05 mol/L磷酸二氫銨-甲醇溶液，梯度洗脫，流速為1.0 mL/min。作者在147批藥物（鎮(zhèn)靜安神類中成藥87批、保健食品60批）中檢出11批含有鹽酸多塞平，3批含有艾司唑侖，各有1批含有勞拉西泮、阿普唑侖和氯氮。

劉志輝等［16］建立了中成藥及保健品中非法添加對(duì)乙酰氨基酚、吡羅昔康、萘普生等9種解熱鎮(zhèn)痛類化學(xué)藥物的高效液相色譜測(cè)定方法。流動(dòng)相為1.8%冰醋酸溶液-乙腈（62∶38），流速為0.8 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為264 nm。該色譜條件下，9種解熱鎮(zhèn)痛類化學(xué)藥物得到良好的分離，在測(cè)定范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.99，檢測(cè)限為3.6～18.2 ng，定量限為12.0～60.0 ng，平均回收率為98%以上。

2.3 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)

蘆麗等［17］建立了高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜同時(shí)測(cè)定改善睡眠類保健食品中非法添加咪達(dá)唑侖、艾司唑侖、阿普唑侖、三唑侖、褪黑素等24種鎮(zhèn)靜催眠藥的快

速篩查方法。樣品經(jīng)甲醇超聲提取20 min，經(jīng)0.45 μm濾膜過(guò)濾后進(jìn)行分析檢測(cè)。流動(dòng)相A為0.05%（V/V）甲酸水溶液，流動(dòng)相B為甲醇-乙腈 （15∶25，V/V）溶液，等度洗脫；采用電噴霧離子（ESI）源及正、負(fù)離子切換模式，掃描三級(jí)質(zhì)譜，利用24種藥物的二、三級(jí)質(zhì)譜對(duì)樣品進(jìn)行定性篩查。24種鎮(zhèn)靜催眠藥品在一定線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.999，檢出限在4.0～446.6 μg/L之間，3個(gè)添加水平的回收率為88.6%～110.3%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.8%～9.8%之間。27批樣品經(jīng)篩查發(fā)現(xiàn)有18批樣品檢出褪黑素。

賈昌平等［18］建立了超高效液相色譜-質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定保健食品中異戊巴比妥、氯硝西泮、氯氮、地西泮、勞拉西泮等24種違禁精神藥品的檢測(cè)方法。樣品經(jīng)甲醇超聲振蕩提取，0.22 μm濾膜過(guò)濾后進(jìn)樣。流動(dòng)相為0.1%甲酸（A），0.1%甲酸-甲醇（B）梯度洗脫；采用電噴霧離子源，正、負(fù)離子模式，利用一、二級(jí)精密質(zhì)量數(shù)進(jìn)行定性，一級(jí)準(zhǔn)分子離子峰定量檢測(cè)。24種精神藥品在線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.990，檢測(cè)限在1.56～218.2 ng/mL之間，回收率為64.60%～99.33%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于7%。

黃越燕等［19］建立了基于超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜快速、準(zhǔn)確檢測(cè)中成藥及保健食品中非法添加對(duì)乙酰氨基酚、阿司匹林、美洛昔康、塞來(lái)昔布等17種抗炎鎮(zhèn)痛類化學(xué)藥物的方法。以0.1%甲酸甲醇溶液（A）-0.1%甲酸水溶液（B）為流動(dòng)相梯度洗脫。選擇ESI離子源、多反應(yīng)監(jiān)測(cè)，通過(guò)比較MRM通道中樣品與對(duì)照品的分子離子峰、二級(jí)碎片離子峰、色譜保留時(shí)間等信息確定添加的化學(xué)藥物，并根據(jù)外標(biāo)法以質(zhì)譜峰面積計(jì)算添加藥物的準(zhǔn)確量。該方法對(duì)上述化學(xué)藥物的檢測(cè)限均在0.3～0.5 ng/g，定量限均在0.9～15.0 ng/g，加樣回收率均在90.5%～113.8%。

2.4 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)

肖麗和等［20］建立了鎮(zhèn)靜安神類中成藥及保健食品中非法添加艾司唑侖的氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法。樣品經(jīng)甲醇提取，采用全掃描一級(jí)質(zhì)譜，并結(jié)合譜庫(kù)檢索進(jìn)行鑒別；采用二級(jí)選擇反應(yīng)檢測(cè)（MRM）方式進(jìn)行定量分析。全掃描一級(jí)質(zhì)譜檢測(cè)限為2 ng，艾司唑侖在1～100 μg/mL濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

朱小紅等［21］建立了基于氣相色譜-質(zhì)譜保健食品及中成藥中非法添加安替比林、氨基比林、尼美舒利等8種非甾體抗炎藥物的檢測(cè)方法。采用溶劑超聲或液-液萃取方式對(duì)樣品進(jìn)行富集，選擇EI離子源，溶劑延遲2.5 min，質(zhì)譜掃描40～350 amu，定性檢測(cè)選擇Scan模式，離子掃描模式進(jìn)行定量。在選定的色譜條件下，8種非甾體抗炎藥物在30 min內(nèi)得到較好的分離。樣品篩查結(jié)果發(fā)現(xiàn)2批樣品中分別添加了對(duì)乙酰氨基酚和雙氯芬酸鈉。

2.5 離子遷移技術(shù)

焦建東等［11］采用離子遷移譜技術(shù)，建立了改善睡眠類保健品中苯巴比妥、異戊巴比妥、司可巴比妥的非法添加快速檢測(cè)方法。該方法設(shè)定條件為負(fù)源，離子源電壓1.9 kV，漂移管電壓7.5 kV，進(jìn)樣溫度180℃，漂移管溫度180℃，欄電壓45 V，欄脈沖寬度120 μs，漂移管流速1.2 L/min，排氣泵0.8 L/min，運(yùn)行時(shí)間30 s，光譜范圍25 ms；樣品經(jīng)甲醇提取，直接進(jìn)樣。該方法可以實(shí)現(xiàn)單獨(dú)存在一種巴比妥類化合物時(shí)的檢測(cè)鑒定；多種化合物同時(shí)存在時(shí)，可以實(shí)現(xiàn)苯巴比妥與另2種物質(zhì)的分離鑒別，而對(duì)異戊巴比妥與司可巴比妥無(wú)法實(shí)現(xiàn)分離鑒定。

3 結(jié)語(yǔ)

薄層色譜法操作簡(jiǎn)單，無(wú)需復(fù)雜的儀器和設(shè)備，尤其對(duì)于基層藥品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)，可作為初篩中藥及保健食品中非法添加某些化學(xué)藥物的有效手段。但該方法靈敏度差，多個(gè)成分之間經(jīng)常會(huì)有干擾，易導(dǎo)致假陽(yáng)性的情況，一般需要運(yùn)用專屬性更高的方法予以進(jìn)一步確認(rèn)［22］。

液相色譜法是檢測(cè)中藥及保健食品中非法添加化學(xué)藥物使用最為廣泛的技術(shù)，該方法分離度高、專屬性較強(qiáng)、分析速度快，通過(guò)比較樣品色譜峰與對(duì)照品色譜峰的保留時(shí)間及紫外光譜圖，可以基本確證樣品是否含有與對(duì)照品一致的化學(xué)成分。但該方法對(duì)有些異構(gòu)體化合物來(lái)說(shuō)，鑒別仍較困難［23］。

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用及氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)以液相色譜或氣相色譜作為分離系統(tǒng)，質(zhì)譜作為檢測(cè)系統(tǒng)。兼具液相色譜、氣相色譜高效的分離能力與質(zhì)譜高專屬性、高靈敏度的特性。檢測(cè)時(shí)可以同時(shí)得到化合物的保留時(shí)間、分子量、離子碎片等信息，從而對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證。但由于儀器價(jià)格昂貴，操作相對(duì)復(fù)雜，不易在基層檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)推廣［24］。

離子遷移技術(shù)是以離子漂移時(shí)間的差別來(lái)進(jìn)行離子分離定性的一種技術(shù)，與傳統(tǒng)的質(zhì)譜、色譜法比較具有分析速度快、靈敏度高、無(wú)溶劑和氣體消耗等優(yōu)點(diǎn)［25］。

近年來(lái)，改善睡眠類中成藥及保健食品中非法添加化學(xué)藥物的現(xiàn)象已開始受到廣泛關(guān)注，與其相應(yīng)的檢測(cè)篩查技術(shù)和方法的研究和應(yīng)用也取得了一定的進(jìn)展。提高保健食品中非法添加化學(xué)藥物的檢測(cè)能力，建立和完善保健食品中非法添加化學(xué)藥物的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)和指南，可以更好地打擊保健品中非法添加化學(xué)藥物的行為，保護(hù)消費(fèi)者的合法權(quán)益和身體健康。在此基礎(chǔ)上，政府部門也需要加大監(jiān)管力度、完善法律法規(guī)、加大懲處力度，讓不法廠商無(wú)機(jī)可乘。

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Advances in determination technologies of illegal adulterated chemical substances in sleep improving traditional Chinese medicines and dietary supplements

XU Wenfeng JIN Pengfei▲
Department of Pharmacy，Beijing Hospital，Bejing 100730，China

Domestic and foreign literature about the profiles and the determination technologies of illegal adulterated chemical substances in sleep improving TCMs and dietary supplements were summarized in order to provide technical

for supervising sleep improving TCMs and dietary supplements.The adulterated chemical substances mainly contained sedative-hypnotic drugs and analgesics.The analytical methods involved thin layer chromatography analysis （TLC），liquid chromatography analysis（LC），liquid chromatography mass spectrography analysis（LC-MS），gas chromatography mass spectrography analysis（GC-MS），ion mobility chromatography analysis，and so on.

Traditional Chinese medicines；Dietary supplements；Illegally adulterated；Chemical substance；Determination technologies

R927.1

A

1673-7210（2016）06（a）-0027-04

2016-01-05本文編輯：趙魯楓）

北京醫(yī)院博士啟動(dòng)課題（BJ-2015-091）。

徐文峰（1986-），男，博士；研究方向：藥物分析。

金鵬飛（1978-），男，副主任藥師，主要從事藥物分析、醫(yī)院藥學(xué)研究。