復合天然植物添加劑對黃羽肉雞生長性能、免疫功能及臟器組織形態(tài)結構的影響

田 浪，何彥俠，侯月娥，郭吉余，錢雪橋＊，王林川

（1.廣東海大集團股份有限公司畜牧水產研究中心，廣州511400；2.華南農業(yè)大學獸醫(yī)學院，廣州510642）

復合天然植物添加劑對黃羽肉雞生長性能、免疫功能及臟器組織形態(tài)結構的影響

田 浪1，2，何彥俠1，侯月娥1，郭吉余1，錢雪橋1＊，王林川2＊

（1.廣東海大集團股份有限公司畜牧水產研究中心，廣州511400；2.華南農業(yè)大學獸醫(yī)學院，廣州510642）

為研究復合天然植物添加劑對黃羽肉雞生長性能、免疫功能及臟器組織形態(tài)結構的影響，試驗選用400羽黃羽肉雞混合雛，隨機分為4組，對照組飼喂基礎日糧，試驗A、B、C組分別在基礎日糧中添加低（3g／kg）、中（5g／kg）、高（8g／kg）劑量的天然植物添加劑，每組10個重復，每個重復10羽，試驗期50d。結果表明，試驗C組效果最佳，試驗全期平均日增重較對照組提高5.53%（P＜0.05），料重比較對照組降低6.11%（P＜0.05），成活率比對照組提高2.16%（P＜0.05）；與對照組相比，各添加劑組均在一定程度促進免疫器官發(fā)育，試驗C組各免疫器官指數均顯著提高（P＜0.05），同時各試驗組均能提高NDV疫苗抗體水平及其整齊度；各試驗組顯著增加了十二指腸絨毛長度和V／N值（P＜0.05），并且促進肝臟、腎臟組織健康發(fā)育。本試驗添加天然植物添加劑可顯著提高黃羽肉雞生長性能，增強機體免疫功能，促進腸道、肝臟和腎臟的發(fā)育，提高機體健康水平，其添加量以5g／kg為宜。

天然植物添加劑；黃羽肉雞；生長性能；免疫功能；臟器組織

中國黃羽肉雞遺傳多樣性豐富，黃羽肉雞養(yǎng)殖是很多地區(qū)農村經濟的主導產業(yè)。由于養(yǎng)殖過程中面臨環(huán)境應激、飼料霉菌、管理不善、疫苗應激、病原體污染等多因素的協同不良影響，肉雞常處于亞健康、疫病多發(fā)和生產性能差的狀態(tài)。研發(fā)具有增強機體抵抗力、免疫力和抗應激損傷等保健、防病功效的植物源性飼料添加劑，用于替代或減少黃羽肉雞養(yǎng)殖業(yè)中抗生素的使用，實現低抗或無抗養(yǎng)殖，是黃羽肉雞養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的必然趨勢，具有重要的經濟和社會意義。

天然植物兼有營養(yǎng)和藥用兩種屬性，具有安全、有效、毒副作用小等抗生素無法比擬的優(yōu)勢，已有大量研究報道，通過配伍制備的植物添加劑或中草藥具有增強機體免疫力，促進動物生長發(fā)育，提高飼料利用率和改善胴體品質等功能［1－3］。中國天然植物資源豐富，農業(yè)部2013年起施行的1773號公告《飼料原料目錄》明確規(guī)定了可用于養(yǎng)殖業(yè)的飼用天然植物多達115種，該目錄中很多天然植物原料具有抗病、促生長的保健功效。姜賀等［4］采用該目錄中的黃芪、刺五加，再配合松針粉制備復合添加劑，發(fā)現該復合添加劑可提高林下雞的平均體重和血液中總蛋白含量，改善肉質理化特性，以及降低膽固醇等。效梅等［5］采用山藥、山萸肉、茯苓、薄荷、澤瀉、黃芪和補骨脂等7種飼用天然植物原料，再配合生地、丹皮等其他5種中藥制備成中草藥添加劑，當添加8g／kg時能明顯促進熱應激三黃雞肝臟、腎臟和胃的生長發(fā)育，且在一定程度上減緩熱應激對肺臟和肝臟的損傷。馬中軍等［6］采用魚腥草、麥芽、山楂、白術等4種飼用天然植物原料配合多維制備成中草藥添加劑，以泰妙菌素＋硫酸黏菌素為對照，結果表明中草藥組的雞在14日齡后平均體重、日增重均顯著高于對照組，料重比顯著低于對照組，死亡率比對照組低9.2%。本試驗在前人研究的基礎上，精選《飼料原料目錄》中8種天然飼用植物（金銀花、藿香、黃芪、山楂、桑葉、葛根、魚腥草、蒼術）和4種天然藥用植物（連翹、板藍根、黃芩、黃連）制成復合植物飼料添加劑，研究其對黃羽肉雞生產性能、免疫功能及臟器組織形態(tài)結構的影響，為具有保健功效的天然植物飼料添加劑在黃羽肉雞生產中的科學應用提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 天然植物材料

8種《飼料原料目錄》中的天然飼用植物（金銀花、藿香、黃芪、山楂、桑葉、葛根、魚腥草、蒼術）及4種天然藥用植物（連翹、板藍根、黃芩、黃連）均購自玉林中藥港，所有植物品種經單獨烘干（60～65℃）6h，超微粉碎，過120目篩，然后按一定比例均勻混合。

1.2 試驗設計

挑選400羽健康、體重均勻的10日齡黃羽肉仔雞，隨機分在1個對照組和3個試驗組（A、B、C）中，每組10個重復，每個重復10羽。對照組肉雞飼喂基礎日糧，試驗組肉雞在基礎日糧中分別添加3、5和8g／kg（A、B和C組）復合天然植物添加劑，試驗期50d，其中試驗第1～20天為試驗Ⅰ期（肉雞10～30日齡），試驗第21～50天為試驗Ⅱ期（肉雞31～60日齡）。基礎日糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗在廣東海大集團試驗基地進行，試驗Ⅰ期在層疊式育雛籠內完成，試驗Ⅱ期轉入育成舍三層重疊式育成籠進行。所有試驗肉雞的飼養(yǎng)環(huán)境一致，飼喂、免疫、衛(wèi)生消毒等程序按照標準養(yǎng)殖制度，每天觀察雞群健康狀況，及時淘汰病弱雞。

填料使用就地挖取的一般黏性土，土料應過篩，篩孔不宜大于20mm，不含有凍土塊、膨脹土和雜土，有機質含量小于5%，保持土料的最有含水率。

1.4 測定指標

1.4.1 生長性能統(tǒng)計 分別于試驗期第20、50天08∶00晨飼前空腹稱重，計算各組采食量、日增重、料重比和成活率等指標。

1.4.2 免疫器官指數測定及臟器組織形態(tài)結構觀察 試驗期第32天時，每個重復隨機選取1只中等大小的公雞屠宰，放血致死后迅速剖開腹腔，剝取脾臟、胸腺、法氏囊并稱重，計算各器官指數，器官指數＝器官重（g）／雞活體重（kg）。同時取十二指腸中段約2cm腸段、肝臟、腎臟等組織，用HE染色法制作組織切片，對比觀察十二指腸絨毛形態(tài)，計算絨毛高度、隱窩深度及絨毛高度／隱窩深度值（V／C），觀察肝臟、腎臟組織結構變化情況。

1.4.3 血清抗體測定 分別于新城疫Ⅰ系苗免疫后第14、21天，每個重復隨機選取3只雞采集血液，待血清析出后，在低溫離心機中以3 000r／min離心10min，吸取血清，測定血清中新城疫抗體效價。

表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平（%）Table 1 Compositions and nutrient levels of basal diets

1.5 數據統(tǒng)計分析

試驗數據采用統(tǒng)計軟件SPSS 16.0進行單因素方差分析（One－Way ANOVA），采用Duncan’s法進行多重比較，以P＜0.05為差異顯著判斷標準，試驗結果以平均值±標準差表示。

2 結果與分析

2.1 復合天然植物添加劑對黃羽肉雞不同階段生長性能的影響

2.2 復合天然植物添加劑對黃羽肉雞免疫功能的影響

各組黃羽肉雞免疫器官指數見表3。由表3可知，添加復合天然植物添加劑后，42日齡時各劑量試驗組肉仔雞的脾臟指數、胸腺指數、法氏囊指數均大于對照組，其中試驗A組的3個指數均與對照組差異不顯著（P＞0.05），試驗B組的脾臟指數、法氏囊指數與對照組差異顯著（P＜0.05），試驗C組脾臟指數、胸腺指數和法氏囊指數均與對照組差異顯著（P＜0.05）。3個指數在試驗A、B、C組之間均差異不顯著（P＞0.05）。

血清中新城疫Ⅰ系疫苗抗體水平見表4。由表4可知，疫苗免疫后14d，各組抗體水平基本達到免疫保護水平，各試驗組抗體水平均高于對照組，其中B、C組顯著高于對照組（P＜0.05），同時各試驗組抗體水平離散度顯著低于對照組（P＜0.05）；疫苗免疫后21d，各組抗體水平均達到較好保護水平，各試驗組抗體水平均顯著高于對照組（P＜0.05），但各組間差異不顯著（P＞0.05），各試驗組離散度同樣顯著低于對照組（P＜0.05）。

表3 復合天然植物添加劑對黃羽肉雞免疫器官的影響Table 3 Effects of plant feed additives on immune organ of Yellow－feathered broilers

表4 復合天然植物添加劑對黃羽肉雞新城疫血清抗體的影響Table 4 Effects of plant feed additives on serum antibody of NDV－Ⅰvaccine of Yellow－feathered broilers

2.3 復合天然植物添加劑對黃羽肉雞臟器組織形態(tài)結構的影響

由表5可知，與對照組相比，各試驗組十二指腸絨毛長度均顯著增加（P＜0.05），隨著復合天然植物添加量增加，腸絨毛長度也隨之增加，但相鄰劑量兩組間差異不顯著（P＞0.05）。所有日糧處理組間十二指腸隱窩深度較為接近，差異不顯著（P＞0.05）。3個復合天然植物試驗組的V／N值均顯著優(yōu)于對照組（P＜0.05），但3組間差異不顯著（P＞0.05）。

十二指腸顯微組織形態(tài)結構見圖1。由圖1可知，對照組十二指腸絨毛較短、較細，且黏膜上皮細胞有壞死、脫落現象發(fā)生，而添加復合天然植物添加劑的各試驗組肉雞腸絨毛較對照組變粗、變長，上皮細胞更完整，尤其試驗B、C組腸絨毛清晰有光澤，上皮細胞脫落現象少。

肝臟組織顯微結構見圖2。由圖2可知，對照組肝細胞發(fā)育良好，輪廓清晰，結構完整，肝血竇明顯，肝小葉中央靜脈擴張，靜脈及組織內發(fā)生部分血細胞浸入現象。各試驗組均表現正常形態(tài)，肝小葉中央靜脈擴張，但血細胞浸入不明顯或未見血細胞。試驗B、C組可見肝血竇內皮枯否氏細胞數量較對照組增多，核染色較深，體積增大，呈多邊形，同時見肝血竇增大，肝細胞索分界明顯。

腎臟組織顯微結構見圖3。由圖3可知，腎臟組織細胞結構總體比較清晰，近曲小管、遠曲小管、腎小體等組織結構都較完整，但對照組可見少數血細胞和單核細胞浸入，以及部分腎小球增大及腎小管上皮細胞肥大，各試驗組均無此現象發(fā)生，腎小管上皮細胞結構正常。

表5 復合天然植物添加劑對黃羽肉雞十二指腸絨毛長度及隱窩深度的影響（μm）Table 5 Effects of plant feed additives on duodenal villi length and crypt depth of Yellow－feathered broilers

圖1 復合天然植物添加劑對黃羽肉雞十二指腸黏膜組織形態(tài)結構的影響（40×）Fig.1 Effects of plant feed additives on duodenal morphology of Yellow－feathered broilers（40×）

圖2 復合天然植物添加劑對黃羽肉雞肝臟組織形態(tài)結構的影響（400×）Fig.2 Effects of plant feed additives on liver tissue morphology of Yellow－feathered broilers（400×）

圖3 復合天然植物添加劑對黃羽肉雞腎臟組織形態(tài)結構的影響（400×）Fig.3 Effects of plant feed additives on kidney tissue morphology of Yellow－feathered broilers（400×）

3 討 論

3.1 復合天然植物添加劑對肉雞生長性能的影響

大量試驗證明，很多天然植物或其組合物既含有豐富的營養(yǎng)成分，可作為飼料原料使用，又具有增強免疫、維持生態(tài)環(huán)境、驅蟲保健和抗菌消炎等藥理作用［7］。尤其在肉雞養(yǎng)殖業(yè)中，藥用性植物組成的中草藥飼料添加劑具有提高成活率和生長速度，增強抗病能力，增加產蛋率和產肉率，改善蛋品和肉質，以及抗病防病的功效［8－9］。

廖玉英等［10］選用黃芪、黨參、當歸、枸杞子、刺五加、山楂和甘草7種補益類藥用植物作為中草藥飼料添加劑飼喂銀香雛雞，結果發(fā)現6周齡試驗組雞體重和增重與抗生素組相比差異不顯著，但顯著高于空白對照組，表明中草藥添加劑與抗生素具有同樣的促生長作用。王長康等［11］以黃芪、黃芩、茯苓、白術為主制成復方中藥添加劑，在優(yōu)質雞日糧中分別添加2、4mg／kg，結果發(fā)現兩組試驗雞全程料重比與對照組相比分別降低11.32%、12.45%，差異均極顯著。本試驗添加劑組方是由金銀花、藿香、黃芪、山楂、桑葉等12種天然植物組成的，以低、中、高劑量飼喂黃羽肉仔雞，結果表明各天然植物添加劑試驗組的耗料量、平均日增重、料重比均與對照組差異顯著，同時各試驗組平均日采食量、平均日增重隨植物添加劑添加量的增加有增加趨勢，而料重比則相反，但中、高劑量組間差異不顯著。本試驗這些結果與上述研究報道一致，表明本試驗的復合天然植物添加劑具有提高肉雞生長性能的顯著效果。組方中金銀花、板藍根、連翹中含有綠原酸、木犀草素、靛藍、靛玉紅、連翹苷等藥理活性成分，具有抗菌、消炎、解毒等功效，配合藿香中的揮發(fā)油，可起到抗菌、促生長的效果，此外，山楂具有理氣消食、助脾健胃的功效，能夠提高消化道中消化酶的活性，進一步提高飼料中營養(yǎng)物質的消化吸收率。綜合復合天然植物添加劑對生長性能的改善及產品成本的考慮，實際生產中建議以5g／kg添加量為宜。

3.2 復合天然植物添加劑對動物免疫器官及功能的影響

Rivas等［12］1988年提出用禽類胸腺、法氏囊、脾臟的重量評價雛雞的免疫狀態(tài)，其絕對質量和相對質量能反映部分機體細胞免疫和體液免疫機能。藥用植物或提取物能夠促進淋巴細胞轉化，增強巨噬細胞的吞噬功能，提高細胞免疫及體液免疫水平，增強機體免疫和抗病能力。Shan等［13］研究發(fā)現，刺五加提取物可以加強T細胞和B細胞的活力和免疫調節(jié)活性，并促進單核細胞產生細胞因子。Guo等［14］報道了中草藥多糖提取物對雞的免疫提高與修復的作用機理：刺激脾臟、胸腺、法氏囊等免疫器官的生長發(fā)育；增強細胞免疫和體液免疫；誘導細胞因子分泌；促進T細胞、NK細胞補體的形成。雷曉軍等［15］用黃芪、當歸、黨參、炒山楂、炒麥芽、神曲、甘草、馬齒莧、貫眾等按一定比例組成復方中草藥飼料添加劑，在日糧中添加0.5%、1%、2%飼喂肉仔雞，發(fā)現復方中草藥制劑能夠顯著提高生長性能及免疫器官指數，日糧中添加1%復方中草藥制劑效果最好。

本試驗研究發(fā)現，各試驗組的脾臟指數、胸腺指數、法氏囊指數均高于對照組，其中試驗B、C組與對照組差異顯著，而試驗A組與對照組差異不顯著，說明復合天然植物添加劑總體上能夠促進免疫器官的發(fā)育，進而提高肉雞的免疫應答能力。為此，本試驗進一步驗證測試了NDV疫苗血清抗體水平，免疫后14d各試驗組抗體水平均高于對照組，且B、C組均與對照組差異顯著，在免疫后21d各試驗組均達到了較高抗體水平，且顯著高于對照組，同時各試驗組兩次測定抗體水平的離散度均顯著低于對照組，表明復合天然植物添加劑能夠有效提高疫苗抗體水平及抗體的群體整齊度，將為雞群提供更可靠的免疫保護力。

3.3 復合天然植物添加劑對臟器組織形態(tài)結構的影響

腸道是機體重要的消化系統(tǒng)，同時也是重要的免疫系統(tǒng)和保護屏障系統(tǒng)，肝臟是機體內最大的代謝和解毒器官，具有分泌膽汁、貯存養(yǎng)分、免疫防御、造血、再生、解毒、代謝等一系列重要功能，腎臟是泌尿系統(tǒng)的重要器官，同時具有調節(jié)內分泌、酸堿平衡和血壓等功能。因此，腸道、肝臟和腎臟的健康狀況直接決定了雞體的健康水平，但關于天然植物或中草藥對雞腸道、肝臟、腎臟等組織結構影響的研究報道很少。王玨等［16］在閩中麻雞基礎日糧中分別添加2、3、4g／kg中藥富硒酵母，結果發(fā)現試驗組肝臟的平均質量和器官指數大多高于對照組，肝細胞線粒體增多、增大，小腸絨毛和腸腺長于對照組，說明中藥富硒酵母能促進雞肝臟和小腸的發(fā)育。張偉等［17］將420只14日齡青腳麻雞隨機均分7組，分別飲用高（2.0g／L）、中（1.0g／L）、低（0.5g／L）濃度黨參和淫羊藿提取物，對照組飲用自來水，結果發(fā)現2.0g／L黨參、淫羊藿提取物對青腳麻雞肝臟組織結構有明顯促進作用，表現為肝細胞索分界更明顯，肝血竇增大。

本研究發(fā)現復合天然植物添加劑試驗組黃羽肉雞的十二指腸絨毛長度、V／N均較對照組顯著提高，表明復合天然植物能促進腸道健康發(fā)育，顯著增大腸黏膜表面積，進而促進腸道對營養(yǎng)物質的消化和吸收，可以解釋復合天然植物提高生長速度、降低料重比等改善生長性能的作用；另一方面由于腸道含有豐富的腺體及淋巴結，同樣是機體重要的免疫器官，本試驗的復合天然植物添加劑在促進腸道發(fā)育的同時也相應增強了機體免疫功能，試驗中NDV疫苗血清抗體水平可證明這一點。試驗中復合天然植物添加劑試驗組較對照組的肝細胞發(fā)育更好，肝血竇變大，肝血竇內皮枯否氏細胞數量增加，說明復合天然植物促進了肝臟的造血和儲血能力，從而增強了機體的代謝和免疫功能。此外，各試驗組腎臟組織細胞結構較對照組更清晰，基本無血細胞和炎性細胞浸入，說明復合天然植物添加劑可促進腎臟的發(fā)育，提高腎臟代謝功能，有效緩解養(yǎng)殖過程中應激對腎臟的損傷，進而增強機體健康水平。

4 小 結

本試驗結果發(fā)現復合天然植物添加劑可以顯著提高黃羽肉雞生長性能，增強機體免疫功能，促進腸道、肝臟和腎臟等重要組織器官的發(fā)育，綜合考慮其應用效果及成本，復合天然植物添加劑以5g／kg添加量最適合黃羽肉雞的養(yǎng)殖生產。但是，不同天然植物復合物對黃羽肉雞抗應激、抗氧化功能、免疫增強作用以及對腸道不同微生物區(qū)系影響的相關分子作用機制還需要進一步研究。

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（責任編輯 盧慶萍）

Effects of Compounded Plant Feed Additives on the Growth Performance，Immune Function and Morphology of Internal Organs and Tissues in Yellow－feathered Broilers

TIAN Lang1，2，HE Yan－xia1，HOU Yue－e1，GUO Ji－yu1，QIAN Xue－qiao1＊，WANG Lin－chuan2＊
（1.AnimalHusbandryandFisheriesResearchCenter，GuangdongHaidGroupCo.，Ltd.，Guangzhou511400，China；2.CollegeofVeterinaryMedicine，SouthChinaAgriculturalUniversity，Guangzhou510642，China）

The present study was aimed to study the effects of plant additives on growth performance，immune function and morphology of internal organs and tissues in Yellow－feathered broilers.400Yellow－feathered broilers at 10－day－old were divided into 4groups.The broilers in control group were fed with basal diets，while in experimental group A，B and C were fed with basal diets added 3，5and 8g／kg plant additives，respectively.Each group had 10replicates（10birds per replicates），and the experiment lasted for 50d.The results showed that group C got the best experimental results of all groups：ADG increased by 5.53%（P＜0.05），F／G was decreased by 6.11%（P＜0.05），the survival rate was increased by 2.16%（P＜0.05），and immune organ index，duodenal villous length and serum antibody titer were significantly increased（P＜0.05）compared with the control group.All the experimental groups supplemented with the plant additives could enhance development of the duodenum，liver and kidney，and NDV antibody titer.In conclusion，adding the plant additives in the diet could improve the growth performance，immune function and development of internal organs in Yellow－feathered broilers，and the recommendedamount was 5g／kg.

plant feed additives；Yellow－feathered broilers；growth performance；immune function；internal organs and tissues

S816.7

A

1671－7236（2016）12－3206－08

10.16431／j.cnki.1671－7236.2016.12.018

2016－05－13

廣州市博士后科研啟動項目（230.30）

田 浪（1981－），男，四川自貢人，博士，研究方向：畜禽疫病防控，E－mail：tianlang＠haid.com.cn

＊通信作者：錢雪橋（1967－），男，江蘇泰州人，副教授，研究方向：水產營養(yǎng)及新型飼料添加劑，E－mail：qxq＠haid.com.cn王林川（1965－），男，江西南康人，教授，研究方向：預防獸醫(yī)禽病學，E－mail：lcwang＠scau.edu.cn