自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞肝移植治療代償期肝硬化療效觀察

焦煜全　李雪麗　呂杰　焦文舉

讀者 作者 編者

?

自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞肝移植治療代償期肝硬化療效觀察

焦煜全李雪麗呂杰焦文舉

【摘要】目的 探討代償期肝硬化新的治療方法。方法 將530例患者隨機(jī)分為研究組（350例）和對照組（180例）。兩組患者均使用促細(xì)胞生長素、復(fù)方甘草酸苷、還原型谷胱甘肽、血漿人血白蛋白，以促進(jìn)肝細(xì)胞再生、抗肝纖維化，同時(shí)采用支持療法進(jìn)行治療。研究組在此基礎(chǔ)上，征求本人同意后，將我院細(xì)胞室制備的肝素抗凝骨髓血100 ml中自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞通過股動脈-肝動脈微創(chuàng)介入的方法移植肝內(nèi)。治療前，治療4周、12周、24周、48周分別檢查（ALT）、（AST）、（TBIL）、（DBIL）、（IBIL）、（ALB）、（GLB）、（ALP）、（GGT）等，同步做肝、脾超聲與CT檢查對比其臨床療效。結(jié)果 治療4周時(shí)，研究組血生化指標(biāo)檢查復(fù)常率100%，對照組為41．67%，兩組統(tǒng)計(jì)量值，χ2＝58．33，P＜0．01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療后12周復(fù)查，研究組復(fù)常率100%，對照組71．67%，χ2＝28．93，P＜0．01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。24、48周時(shí)，兩組復(fù)常率均為100%。B超與CT檢查，48周時(shí)，研究組肝臟光點(diǎn)密集、增強(qiáng)減輕，小結(jié)節(jié)消失，脾縮小0．5 cm者33例，占9．43%，對照組為0，χ2＝13．64，P＜0．01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 自體骨髓間質(zhì)充質(zhì)干細(xì)胞肝移植對快速抑制肝臟的炎癥反應(yīng)，恢復(fù)肝功能，抗肝纖維化效果顯著，而且能使肝硬化逆轉(zhuǎn)。

【關(guān)鍵詞】肝纖維化；代償期肝硬化；骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；股動脈-肝動脈介入；自體肝移植

肝硬化是各種慢性肝病發(fā)展的晚期階段。臨床上通常采取的常規(guī)保肝及中草藥抗肝纖維化治療，均能有一定療效，但不能徹底阻止病情的進(jìn)展，更不能使肝硬化逆轉(zhuǎn)[1-2]。為探討更加理想、有效的治療方法，我院采取自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞肝移植治療代償期肝硬化獲得了較好的臨床療效，具體報(bào)道如下。

1　對象與方法

1.1研究對象

選取2011年～2014年530例患者隨機(jī)分為研究組350例，對照組180例,研究組男性178例，女性172例，平均年齡（40.24±5.84）歲；對照組男性89例，女性91例，平均年齡（41.36±6.28）歲。

1.2研究方法

1.2.1常規(guī)方法 研究組與對照組均同樣接受促肝細(xì)胞生長素、復(fù)方甘草酸苷、還原型谷胱甘肽、氨基酸、血漿、人血白蛋白促進(jìn)肝細(xì)胞再生、抗肝纖維化和支持療法治療。

1.2.2自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞肝移植治療 研究組在常規(guī)治療同時(shí)，在征求患者本人同意后，將我院細(xì)胞室制備的肝素抗凝骨髓血100 ml中自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞通過股動脈—肝動脈微創(chuàng)介入的方法移植入肝內(nèi)。

1.3實(shí)驗(yàn)室檢查

兩組患者治療前均檢查血清ALT、AST、TBiL、DBiL、IBiL、ALB、GLB、ALP、GGT、BUN、Cr、PT、PTA。每組患者連續(xù)治療4周及后12周、24周、48周再分別檢查以上逐項(xiàng)，以比較臨床療效。1.4超聲與CT檢查

兩組患者于治療前皆做肝、脾超聲與CT聯(lián)合檢查。超聲所見：肝被膜不光滑，表面凹凸不平，肝實(shí)質(zhì)回聲光點(diǎn)密集增強(qiáng)，呈顆粒狀或結(jié)節(jié)狀，門靜脈增寬，脾增大；CT檢查肝右葉縮小，肝裂增寬，尾頁增大，脾增大。兩組病例皆為超聲和CT同時(shí)診斷為肝硬化者。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所得數(shù)據(jù)使用STATA8.0軟件進(jìn)行處理分析，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1血清生化檢查

兩組患者的血清生化檢查均恢復(fù)正常，復(fù)常率100%，治療后動態(tài)觀察：2周、24周和48周時(shí)復(fù)查，復(fù)常率均提到100%，ALT、AST下降（90.3±5.6 mmol/L vs 42.5±0.8 mmol/L，t=3.016，P=0.009 3；100.4±11.7 mmol/L vs 52.9±2.1 mmol/L，t=2.753，P=0.017 3），ALB升高（29.1±2.2 g/L vs 40.8±0.8 g/L，t=2.354，P=0.039），TBiL升高（6.1±1.5 μmol/L vs 18.6±0.6 μmol/L，t=1.842，P=0.028），P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2超聲與CT檢查

肝、脾超聲與CT檢查與血生化檢查同步進(jìn)行。48周時(shí)，研究組33例肝臟光點(diǎn)密集，增強(qiáng)減輕，小結(jié)節(jié)消失，脾縮小0.5 cm，占9.43%，對照組為0%，χ2＝13.64，P＜0.01，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3　討論

肝硬化的治療是個(gè)非常棘手的臨床課題。肝細(xì)胞長期的進(jìn)行性破壞，導(dǎo)致纖維組織大量增生和再生結(jié)節(jié)及假小葉形成，以往一直被醫(yī)學(xué)專家認(rèn)為是不可逆的病理改變。然而，近年來的研究已取得突破性的進(jìn)展，如王寶思應(yīng)用中藥復(fù)方制劑，焦文舉應(yīng)用復(fù)方蟲草注射液治療肝纖維化，都取得了一定的治療效果[3-6]。有效控制肝纖維化對于阻止慢性肝病惡性病變具有重要意義。但其只是肝硬化治療的一個(gè)組成部分，還必須與保肝、促進(jìn)肝細(xì)胞再生、調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫狀態(tài)，抑制引起肝臟損傷的炎性因子等同步進(jìn)行。

我院采取自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞肝移植治療代償期肝硬化，旨在探討更先進(jìn)，更有效的新途徑、新方法、促使肝硬化逆轉(zhuǎn)。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞指存在于骨髓中的間充質(zhì)干細(xì)胞。這些細(xì)胞通常處于靜息狀態(tài)，其數(shù)量約占骨髓細(xì)胞的1/10 000～1/100 000。BMSC有很強(qiáng)的趨化性和再生性，可趨化到周圍間質(zhì)組織，并作為功能活化細(xì)胞參與組織修復(fù)再生等過程[7-8]。臨床上通過股動脈-肝動脈微創(chuàng)介入的方法將BMSC移植到中、重度肝纖維化、肝硬化及肝衰竭患者肝臟之中，即可發(fā)揮抑制免疫反應(yīng)、抗炎、促進(jìn)肝細(xì)胞生長及抗肝纖維化等作用。間充質(zhì)干細(xì)胞，正常表達(dá)MHCI類分子，不表達(dá)或低表達(dá)MHCII類分子，也不表達(dá)共刺激受體，缺少T細(xì)胞活化所需要的共刺激信號系統(tǒng)，導(dǎo)致T細(xì)胞克隆耐受，抑制TH和CTL的活化和增殖，MSC可阻止成熟的單核細(xì)胞分化成DC，并抑制成熟DC的活化，通過激活CD4＋、CD 25細(xì)胞，從而使DC成熟延遲，多方面抑制DC、NK細(xì)胞功能，還可抑制B淋巴細(xì)胞。通過微創(chuàng)介入方法移植到肝臟的BMSC可游走到損傷的肝組織，減少淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等炎性細(xì)胞的浸潤與活化，抑制1L-1、1L-2等促炎因子生成，增加1L-10等抗炎因子，抑制損傷區(qū)域的炎癥反應(yīng)，還可抑制肝臟的星狀細(xì)胞分泌細(xì)胞外基質(zhì)，故有抗肝纖維化作用。

本次研究中兩組病例在治療4周復(fù)查血清ALT、TBiL等結(jié)果顯示，研究組復(fù)常率100%，對照組復(fù)常率41.67%，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞肝移植對抑制肝臟的炎癥反應(yīng)，恢復(fù)肝功能有顯著作用。12周、24周復(fù)查研究組各項(xiàng)指標(biāo)均正常，對照組也正常。48周時(shí)檢查發(fā)現(xiàn)了同樣結(jié)果。研究組肝臟炎癥反應(yīng)消失的快，肝功能恢復(fù)迅速，長時(shí)間穩(wěn)定，提示被移植的BMSC已演化為肝細(xì)胞，給肝臟補(bǔ)充了新的細(xì)胞所致。超聲和CT動態(tài)檢查結(jié)果患者肝臟小結(jié)節(jié)消失，脾縮小，說明自體BMSC肝移植可使部分患者肝硬化逆轉(zhuǎn)。因經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)重研究組僅做1次BMSC肝移植治療，如能反復(fù)多做幾次，有望提升肝硬化的逆轉(zhuǎn)率。這也是今后工作應(yīng)該加強(qiáng)之處。

參考文獻(xiàn)

[1] 聶青和． 肝纖維化的逆轉(zhuǎn)策略及研究現(xiàn)狀[J]． 世界華人消化雜志，2005，20（10）：11．

[2] 姚?。?分子乙型肝炎病毒相關(guān)病學(xué)[M]． 北京：中國醫(yī)藥科技出版社，1998：213-214．

[3] 蔡小波，陸倫根． 谷胱甘肽過氧化物酶與肝臟疾病[J]． 世界華人消化雜志，2009（32）：

[4] 黃艷，黃成，李?。?肝纖維化病程中Kupffer細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子對肝星狀細(xì)胞活化增殖、凋亡的調(diào)控[J]． 中國藥理學(xué)通報(bào)，2010，22（1）：733-734．

[5] 蔡小波，陸倫根． 谷胱甘肽過氧化物酶與肝臟疾病[J]． 世界華人消化雜志，2009，24（32）：215-216．

[6] 展玉濤，任繼萍． 肝臟干細(xì)胞[J]． 世界華人消化雜志，2003（11）：575．

[7] 焦文舉，曲乃方，遲鳳志，等． 復(fù)方蟲草注射液治療靜止型肝炎肝硬化30例臨床觀察[J]． 中華綜合醫(yī)學(xué)雜志，2001，2（10）：884-885．

[8] 張明． 用于篩選和評價(jià)抑制I型膠原a1鏈基因表達(dá)的抗纖維化藥物雙報(bào)告基因系統(tǒng)的構(gòu)建及其有效性鑒定[J]．中華肝臟病雜志，2014，22（10）：747-751．

讀者 作者 編者

Observation Curative Effect of Autologous Mesenchymal Stem Cells Liver Transplantation in Treatment of Compensatory Phase Liver Cirrhosis

JIAO Yuquan LI Xueli LV Jie JIAO Wenju, Heilongjiang Dongbei Gandan Hospital, Harbin 150001, China

[Abstract]Objective To investigate the new treatment for the cirrhosis of the liver cirrhosis. Methods Selected 530 cases with compensated cirrhosis were randomly divided into the study group (350 cases) and the control group (180 cases). Two groups of patients were underwent the same promote cell growth, compound glycyrrhizin, reduced glutathione and amino acids, plasma albumin, to promote hepatocyte cytothesis and anti- hepatic fibrosis, at the same time added supporting treatment. the study group on this basis, seek the consent, prepared by our hospital cell compartment of heparin anticoagulated bone marrow blood 100 ml of autologous bone marrow mesenchymal stem cells in the femoral artery to hepatic artery interventional and minimally invasive method for liver transplantation. Before treatment, 4 weeks of treatment and after 12 weeks, 24 weeks and 48 weeks were examined serum alanine (ALT), (AST), (ALB),(GLB), (ALP) ,(GGT), synchronous liver, spleen ultrasound and CT scan contrast the clinical curative effect. Results After 4 weeks of treatment, the study group, serum biochemical indicators were examined for complex often rate 100%, the control group for 41.67%, the values of the two groups of statistics, χ2=58.33, P ＜ 0.01, the difference had statistical significance. After 12 weeks of treatment, the study group was 100%, control group 71.67%, χ2=28.93, P＜0.01, the difference was statistically significant. 24, 48 weeks, the two groups were 100%. B ultrasonography and CT, 48 weeks, patients in the study group, liver spot intensive, enhance significantly reduced, small nodules disappeared, spleen shrunken 0.5 cm in 33 cases, accounting for 9.43% and 0% in the control group. χ2=13.64, P ＜ 0.01, the differences have statistical significance. Conclusion The liver transplantation of autologous bone marrow mesenchymal stem cells can inhibit the inflammation of the liver, restore the liver function, and the effect of anti hepatic fibrosis is remarkable, and it can reverse the liver cirrhosis.

[Key words]Hepatic fibrosis, Compensatory cirrhosis, Bone marrow mesenchymal stem cells, Femoral artery arterial involvement, Autologous liver transplantation

doi：10．3969/j．issn．1674-9308．2016．04．080

【文章編號】1674-9308（2016）04-0105-02

【中圖分類號】R657．3+1

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

作者單位：150001哈爾濱，黑龍江東北肝膽醫(yī)院