毛皮動物抗體檢測采樣技術(shù)及注意事項

□張慶明（齊魯動物保健品有限公司）

毛皮動物抗體檢測采樣技術(shù)及注意事項

□張慶明（齊魯動物保健品有限公司）

毛皮動物養(yǎng)殖過程中為了預(yù)防烈性傳染病需要定期對動物進行疫苗接種，免疫的疫苗主要包括犬瘟熱活疫苗、病毒性腸炎滅活疫苗、狐貍腦炎活疫苗等。疫苗免疫完成后，為了評價免疫效果，考察群體健康狀態(tài)，可以對免疫后的動物進行血樣采集以監(jiān)測疫苗免疫后的抗體水平。但是考慮到成本及時間等問題，并不能對全群進行血樣檢測，需要進行科學(xué)合理的采樣。本文就抗體監(jiān)測采樣技術(shù)相關(guān)問題進行總結(jié)，為養(yǎng)殖戶科學(xué)養(yǎng)殖提供參考。

1 關(guān)于采樣動物

在隨機采樣的前提下，應(yīng)該采集臨床表現(xiàn)健康的毛皮動物，不采體況較差、處于亞健康狀態(tài)或者是發(fā)病的毛皮動物。如動物表現(xiàn)精神萎糜、食欲不振、感冒、發(fā)燒、咳喘、腹瀉，或者已知患有血蟲病、阿留申病等隱性感染疾病，不建議采集。

2 關(guān)于采樣數(shù)量

血樣樣品采集過少，不能代表整個養(yǎng)殖場的抗體水平。樣品采集數(shù)量過多，既不經(jīng)濟、又耗費時間?？紤]到目前毛皮動物養(yǎng)殖情況及抗體結(jié)果的可信度，采樣數(shù)量如表1。

表1 毛皮獸存欄量與采樣數(shù)對應(yīng)關(guān)系

3 關(guān)于采集時間

正常情況下，犬瘟熱和狐貍腦炎疫苗免疫動物后7天開始產(chǎn)生保護性抗體，14天抗體值可以達到保護水平。病毒性腸炎疫苗為滅活疫苗，疫苗免疫后14天開始產(chǎn)生保護性抗體，所以為了有效評價抗體水平，一般在疫苗免疫后1個月左右對動物進行血樣采集。夏季在免疫完6個月之后（疫苗保護期為6個月），冬季在免疫疫苗之前可以再采集一次血樣檢測一次抗體，制定合理的冬季免疫時間。在毛皮獸整個生長期，如果懷疑毛皮獸感染犬瘟熱、病毒性腸炎或者狐貍腦炎，可以對養(yǎng)殖場發(fā)病獸及健康獸同時進行血樣采集，監(jiān)測抗體。

4 關(guān)于采血方法

毛皮動物不易保定，采血時水貂可以采取懷抱式保定，即水貂腹部朝上，保定者一手按住水貂腹部，一手扣住水貂頸部，抱于胸前。狐貍、貉子可以用皮套套住頸部倒提保定。采血時要用酒精棉對采血部位進行消毒，防止細菌污染血樣、感染動物，同時酒精可刺激血管膨脹。采血時最好用一次性靜脈輸液針（頭皮針）連接注射器，用頭皮針插入血管（水貂采趾背側(cè)總動脈血管，狐貍貉子采小隱靜脈腳底支血管）采集血樣。

5 關(guān)于采集血樣量

犬瘟熱抗體、狐貍腦炎抗體檢測采用中和試驗法，最少需要血清的量為50微升。病毒性腸炎抗體檢測采用血凝抑制試驗，最少需要血清的量為50微升，所以三種疫苗抗體都檢測最少需要150微升血清，毛皮動物采血量至少1毫升才能保證分離出足夠量的血清用于檢測。

6 關(guān)于血樣處理

血樣采集后可以在室溫放置

表2 抗體數(shù)值統(tǒng)計分析表

1個小時左右后轉(zhuǎn)移到4℃冰箱中過夜，次日離心機以8000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，取上層血清。

7 關(guān)于抗體結(jié)果評價

以2015年某地區(qū)兩個養(yǎng)殖場犬瘟熱抗體監(jiān)測結(jié)果為例，進行說明。

犬瘟熱和狐貍腦炎抗體合格值為50，病毒性腸炎抗體合格值為25。表中變異系數(shù)表示抗體值的離散程度，其計算公司為：變異系數(shù)=（標準偏差 SD/平均值 Mean）× 100%。變異系數(shù)越大表示抗體值離散程度越大，當(dāng)變異系數(shù)大于15%時，則要考慮毛皮動物群體是否存在健康隱患，影響抗體整齊度。表2中所示，一場的抗體值無論是從合格率、平均值還是變異系數(shù)上都要優(yōu)于二場。

8 注意事項

采集樣品要標記清楚，編號有規(guī)律，排列有順序；樣品要放在裝有冰袋的保溫箱內(nèi)及時送檢；采集的樣品要有詳細的說明，包括日齡、免疫疫苗種類、免疫時間等；冬天采集血樣時要注意防凍；采血后的動物可以在其飼料或者飲水中添加葡萄糖粉和維生素C，緩解應(yīng)激反應(yīng)。