鹽酸頭孢噻呋注射液對(duì)奶牛的安全性研究

馮言言, 鄭莉, 林紅, 孟芳, 孔梅*, 吳連勇*, 曹興元

(1.齊魯動(dòng)物保健品有限公司，濟(jì)南 250100；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，北京 100193)

鹽酸頭孢噻呋注射液對(duì)奶牛的安全性研究

馮言言1, 鄭莉1, 林紅1, 孟芳1, 孔梅1*, 吳連勇1*, 曹興元2

(1.齊魯動(dòng)物保健品有限公司，濟(jì)南 250100；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，北京 100193)

試驗(yàn)旨在研究鹽酸頭孢噻呋注射液對(duì)奶牛的安全性。試驗(yàn)選擇20頭健康泌乳奶牛，隨機(jī)分成4組，即1×(2.2 mg/kg bw)、3×(6.6 mg/kg bw)、5×(11.0 mg/kg bw)推薦劑量組和0.9%生理鹽水對(duì)照組，觀察用藥后奶牛的直腸溫度、精神狀態(tài)以及乳房局部癥狀等臨床癥狀，并進(jìn)行血液生理和血清生化指標(biāo)的測(cè)定。結(jié)果顯示，鹽酸頭孢噻呋注射液1×、3×、5×推薦劑量組所有試驗(yàn)動(dòng)物用藥后均無(wú)明顯的不良反應(yīng)，血液生理和血清生化指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)，表明鹽酸頭孢噻呋注射液在臨床上用于靶動(dòng)物奶牛是安全的。

鹽酸頭孢噻呋注射液；奶牛；安全性

頭孢噻呋為動(dòng)物專(zhuān)用頭孢菌素類(lèi)抗生素，抗菌譜廣，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌均有很好的殺菌作用[1]。奶牛產(chǎn)后子宮炎是由大腸桿菌、化膿隱秘桿菌、壞死梭桿菌和黑色素普雷沃氏菌(之前稱(chēng)為擬桿菌)等細(xì)菌感染引起的奶牛全身性疾病，是奶牛產(chǎn)后最常見(jiàn)的疾病之一，常見(jiàn)于新產(chǎn)牛、高產(chǎn)牛，與奶牛胎衣不下、難產(chǎn)、雙胎或死胎等密切相關(guān)[2]。頭孢噻呋對(duì)引起奶牛產(chǎn)后子宮炎的主要病原菌如金黃色葡萄球菌、鏈球菌、大腸桿菌和化膿隱秘桿菌具有良好的殺菌作用，能夠有效治療奶牛產(chǎn)后子宮炎[3]。國(guó)外已批準(zhǔn)頭孢噻呋的鹽酸鹽及晶體游離酸注射液在臨床上治療奶牛產(chǎn)后子宮炎[4-10]。目前，國(guó)內(nèi)無(wú)鹽酸頭孢噻呋注射液對(duì)奶牛的靶動(dòng)物安全性報(bào)道，為更好地將鹽酸頭孢噻呋注射液推廣應(yīng)用到治療奶牛產(chǎn)后子宮炎的臨床病癥中，本研究進(jìn)行了鹽酸頭孢噻呋注射液對(duì)靶動(dòng)物奶牛的安全性研究，以期為臨床上合理使用該藥物提供依據(jù)。

1 材料

1.1 受試藥物 鹽酸頭孢噻呋注射液，規(guī)格100 mL：5 g；批號(hào)：1401001，由齊魯動(dòng)物保健品有限公司提供；推薦用藥方法：皮下注射或肌內(nèi)注射，一次量，每1 kg體重，奶牛2.2 mg(以頭孢噻呋計(jì))，每日1次，連用5 d。

1.2 儀器與器材 全自動(dòng)生化分析儀：型號(hào)7150，日本日立公司；生物顯微鏡：型號(hào)XSZ-580A，上海中恒公司；血細(xì)胞分析儀：型號(hào)KX-21，日本SYSMEX公司；動(dòng)物用紅外線測(cè)溫儀：型號(hào)HRQ-S9，鄭州豪潤(rùn)奇電子科技有限公司。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物 從北京市房山區(qū)奶牛場(chǎng)的125頭荷斯坦奶牛(胎次：1～3胎)中選擇泌乳期的奶牛20頭，每頭奶牛單欄內(nèi)飼養(yǎng)，通過(guò)耳標(biāo)識(shí)別。入選牛在試驗(yàn)前適應(yīng)新環(huán)境1周。

2 方法

2.1 動(dòng)物分組與給藥劑量 20頭奶牛隨機(jī)分到鹽酸頭孢噻呋注射液1×推薦劑量組(2.2 mg/kg bw)、3×推薦劑量組(6.6 mg/kg bw)、5×推薦劑量組(11.0 mg/kg bw)和一個(gè)空白對(duì)照組(0.9%生理鹽水)，每組5頭，頸部皮下注射給藥,每日給藥1次，連續(xù)給藥7 d。2.2 臨床癥狀觀察 整個(gè)試驗(yàn)期間，測(cè)量試驗(yàn)?zāi)膛Ｖ蹦c溫度、呼吸頻次和脈搏，并觀察試驗(yàn)?zāi)膛５木駹顟B(tài)、行為表現(xiàn)和乳房局部癥狀，分別在給藥后0、3、7、14 d對(duì)各組試驗(yàn)?zāi)膛５木駹顟B(tài)、行為表現(xiàn)和乳房局部癥狀按評(píng)分依據(jù)進(jìn)行評(píng)分。奶牛直腸溫度、呼吸頻次和脈搏正常參考值范圍見(jiàn)表1，奶牛精神狀態(tài)、行為表現(xiàn)和乳房局部癥狀評(píng)分見(jiàn)表2。

表1 奶牛直腸溫度、呼吸頻次和脈搏正常參考值范圍

表2 奶牛精神狀態(tài)、行為表現(xiàn)和乳房局部癥狀評(píng)分

2.3 血液生理指標(biāo)測(cè)定 在給藥后0、3、7 d對(duì)各組奶牛頸靜脈采血10～15 mL，進(jìn)行血液生理指標(biāo)測(cè)定。檢測(cè)參數(shù)包括血紅蛋白(HGB)、紅細(xì)胞數(shù)(RBC)、平均紅細(xì)胞體積(MCV)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量(MCH)、白細(xì)胞(WBC)、血小板計(jì)數(shù)(PLT)和淋巴細(xì)胞(LYM#)等。2.4 血清生化指標(biāo)測(cè)定 在給藥后0、3、7 d對(duì)各組奶牛頸靜脈采血10～15 mL，進(jìn)行血清生化指標(biāo)測(cè)定。檢測(cè)參數(shù)包括丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、血尿素氮(BUN)、膽固醇(CHOL)、總膽紅素(TBIL)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、直接膽紅素(DBIL)、堿性磷酸酶(ALKP)、肌酐(CREA)、膽堿酯酶(CHE )和葡萄糖(GLU)等。

2.5 安全性判定及數(shù)據(jù)處理 觀察記錄鹽酸頭孢噻呋注射液各劑量組和空白對(duì)照組試驗(yàn)?zāi)膛Ｓ盟幥昂蟮呐R床癥狀，記錄各試驗(yàn)組奶牛的血液生理指標(biāo)和血清生化指標(biāo)數(shù)值，使用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算各指標(biāo)的平均值與標(biāo)準(zhǔn)差，考察所測(cè)數(shù)值是否在奶牛正常參考值范圍內(nèi)，綜合評(píng)價(jià)泌乳期奶牛使用不同劑量鹽酸頭孢噻呋注射液的安全性。

3 結(jié)果與分析

3.1 臨床癥狀觀察 試驗(yàn)期間試驗(yàn)動(dòng)物均未出現(xiàn)意外死亡。試驗(yàn)期間奶牛的直腸溫度、呼吸頻次和脈搏均在正常范圍內(nèi)。給藥后0、3、7、14 d記錄各組試驗(yàn)動(dòng)物的精神狀態(tài)、行為表現(xiàn)以及乳房局部癥狀，結(jié)果顯示，鹽酸頭孢噻呋注射液各劑量組和對(duì)照組奶牛的精神狀態(tài)、行為表現(xiàn)以及乳房局部癥狀評(píng)分均為0，各試驗(yàn)組奶牛精神狀態(tài)較好，行為、采食正常，乳房局部無(wú)紅、腫、熱、痛現(xiàn)象，表明鹽酸頭孢噻呋注射液對(duì)奶牛的臨床癥狀無(wú)影響。

3.2 血液生理指標(biāo)測(cè)定 血液生理指標(biāo)是評(píng)判藥物對(duì)靶動(dòng)物有無(wú)危害性的重要依據(jù)之一，其中血紅蛋白(HGB)、紅細(xì)胞數(shù)(RBC)等用來(lái)評(píng)判動(dòng)物是否貧血，白細(xì)胞(WBC)主要反映機(jī)體的免疫和防御功能，血小板計(jì)數(shù)(PLT)主要作為藥物性過(guò)敏反應(yīng)疾病的輔助診斷指標(biāo)。試驗(yàn)結(jié)果顯示，鹽酸頭孢噻呋注射液各試驗(yàn)組以及空白對(duì)照組奶牛血液學(xué)指標(biāo)如HGB、RBC、WBC、PLT等均在奶牛正常生理指標(biāo)范圍內(nèi)(表3～表6)，未出現(xiàn)異常生理指標(biāo)，因此認(rèn)為，鹽酸頭孢噻呋注射液在臨床使用中安全，不會(huì)對(duì)奶牛產(chǎn)生治療外的影響。

表3 空白對(duì)照組給藥后0、3、7 d血液學(xué)指標(biāo)值

表4 1×劑量組給藥后0、3、7 d血液學(xué)指標(biāo)值

表5 3×劑量組給藥后0、3、7 d血液學(xué)指標(biāo)值

表6 5×劑量組給藥后0、3、7 d血液學(xué)指標(biāo)值

3.3 血清生化指標(biāo)測(cè)定 血清生化指標(biāo)是判斷動(dòng)物機(jī)體的生理成分、代謝狀況以及主要器官的功能狀態(tài)是否正常的重要手段。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALKP)等是衡量肝功能最常用的指標(biāo)。血尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)是衡量腎功能是否正常的重要指標(biāo)，總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)可反映肝臟中蛋白質(zhì)代謝情況。試驗(yàn)結(jié)果顯示，鹽酸頭孢噻呋注射液各試驗(yàn)組與空白對(duì)照組血清生化指標(biāo)如ALT、AST、BUN、TP等均在正常范圍內(nèi)(表7～表10)，這表明鹽酸頭孢噻呋注射液對(duì)奶牛的肝、腎等器官功能無(wú)影響，臨床上可安全用于治療奶牛相關(guān)疾病。

表7 空白對(duì)照組奶牛在給藥后0、3、7 d血清生化指標(biāo)值±s)

表8 1×劑量組奶牛在給藥后0、3、7 d血清生化指標(biāo)值

表9 3×劑量組奶牛在給藥后0、3、7 d血清生化指標(biāo)值

表10 5×劑量組奶牛在給藥后0、3、7 d血清生化指標(biāo)值

4 討論與小結(jié)

鹽酸頭孢噻呋注射液的安全性研究可為該制劑在臨床上的使用提供科學(xué)依據(jù)。美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)報(bào)道了碩騰動(dòng)物保健品有限公司開(kāi)發(fā)的原研品鹽酸頭孢噻呋注射液在靶動(dòng)物牛上使用的安全性[12-13]。同本研究所考察的安全性項(xiàng)目一致，主要觀察試驗(yàn)動(dòng)物的臨床癥狀、血液學(xué)和血清生化等指標(biāo)。研究人員對(duì)試驗(yàn)牛皮下或肌內(nèi)注射鹽酸頭孢噻呋注射液后，臨床觀察中未發(fā)現(xiàn)與毒性或疾病相關(guān)的臨床癥狀，血液學(xué)檢查結(jié)果顯示所有的血液學(xué)參數(shù)均在正常的生理范圍內(nèi)，血清生化結(jié)果顯示，僅部分高劑量組(11.0 mg/kg bw)動(dòng)物的肌酸磷酸激酶升高，可能與注射給藥導(dǎo)致的注射部位肌肉損傷有關(guān)，其他指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)。本研究中，鹽酸頭孢噻呋注射液對(duì)試驗(yàn)?zāi)膛５呐R床癥狀、乳房局部癥狀以及血液生理和血清生化指標(biāo)均無(wú)影響，同F(xiàn)DA報(bào)道的基本一致，這說(shuō)明國(guó)內(nèi)仿制藥鹽酸頭孢噻呋注射液安全性高，無(wú)副作用。

目前，國(guó)內(nèi)未見(jiàn)有報(bào)道鹽酸頭孢噻呋注射液在奶牛上使用的安全性研究，僅有鹽酸頭孢噻呋注射液在豬上使用的安全性資料。郭桂芳等[14]研究了肌內(nèi)注射鹽酸頭孢噻呋注射液對(duì)豬的安全性，對(duì)試驗(yàn)豬連續(xù)2次肌內(nèi)注射給藥，進(jìn)行臨床癥狀、血液生理生化指標(biāo)對(duì)比分析，與給藥前相比，所有試驗(yàn)動(dòng)物給藥后采食和行動(dòng)正常，呼吸和排泄也未見(jiàn)異常，注射部位未見(jiàn)腫塊等現(xiàn)象，臨床表現(xiàn)均正常。同郭桂芳等的研究?jī)?nèi)容相似，本研究考察了鹽酸頭孢噻呋注射液對(duì)靶動(dòng)物牛的安全性，試驗(yàn)內(nèi)容也包括臨床觀察、血液學(xué)指標(biāo)和血清生化指標(biāo)測(cè)定。兩個(gè)研究中，鹽酸頭孢噻呋注射液對(duì)靶動(dòng)物豬和牛的臨床癥狀、血液學(xué)和血清生化指標(biāo)均正常，可見(jiàn)，鹽酸頭孢噻呋注射液在靶動(dòng)物豬、牛中使用安全性較高，臨床上可用來(lái)治療豬、牛的相關(guān)疾病。

本研究中，1×、 3×和5×推薦劑量組奶牛分別給予2.2 mg/kg bw、6.6 mg/kg bw和11.0 mg/kg bw劑量的鹽酸頭孢噻呋注射液，每日1次，連用7 d，所有試驗(yàn)組奶牛的臨床癥狀、乳房局部癥狀、血液生理指標(biāo)和血清生化指標(biāo)均未受到影響，可見(jiàn)鹽酸頭孢噻呋注射液臨床應(yīng)用于奶牛是安全的，不影響奶牛的正常生理功能，不會(huì)對(duì)奶牛產(chǎn)生治療外的影響。

[1] 陳杖榴. 獸醫(yī)藥理學(xué)第三版[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2009.

[2] Sheldon I M, Lewis G S, LeBlanc S,etal. Defining postpartum uterine in cattle[J].Theriogenology,2006,65:1516-1530.

[3] Malinowski E, Lassa H, Markiewicz H,etal. Sensitivity to antibiotics ofArcanobacteriumpyogenesandEscherichiacolifrom the uteri of cows with metritis/endometritis[J].The Veterinary Journal,2011,187:234-238.

[4] Smith B I, Donovan A, Risco C,etal. Comparison of various antibiotic treatments for cows diagnosed with toxic puerperal metritis[J].J Dairy Sci, 1998,81:1555-1562.

[5] Chenault J R, McAllister J F, Chester S T,etal. Efficacy of ceftiofur hydrochloride sterile suspension administered parenterally for the treatment of acute postpartum metritis in dairy cows[J].Javma,2004,224(10):1634-1639.

[6] Risco C A, Hernandez J. Comparison of ceftiofur hydrochloride and estradiol cypionate for metritis prevention and reproductive performance in dairy cows affected with retained fetal membranes[J].Theriogenology, 2003, 60:47-58.

[7] Dubuc J, Duffield T F, Leslie K E,etal. Randomized clinical trial of antibiotic and prostaglandin treatment for uterine health and reproductive performance in dairy cows[J].J Dairy Sci, 2011,94:1325-1338.

[8] Mclaughlin C L, Stanisiewski E, Lucas M J,etal. Evaluation of two doses of Ceftiofur Crystalline free acid sterile suspension for treatment of metritis in lactating dairy cows[J].J Dairy Sci,2012,95:4363-4371.

[9] Mclaughlin C L, Stanisiewski E, Risco C A,etal. Evaluation of ceftiofur crystalline free acid sterile suspension for control of metritis in high-risk lactating dairy cows[J]. Theriogenology, 2013, 79:725-734.

[10]Emily J R. Evidence for the use of ceftiofur for treatment of metritis in dairy cattle[J].Vet Clin North Am Food Anim Pract,2015,31(1):139-49.

[11]http://www.fda.gov/downloads/AnimalVeterinary/Products/ApprovedAnimalDrugProducts/FOIADrugSummaries/UCM478009.pdf.

[12]http://www.fda.gov/downloads/AnimalVeterinary/Products/ApprovedAnimalDrugProducts/FOIADrugSummaries/ucm059122.pdf.

[13]郭桂芳，梁先明，楊大偉，等. 肌肉注射鹽酸頭孢噻呋混懸注射液對(duì)豬安全性試驗(yàn)[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2010, 46(11): 66-69.

(編輯：侯向輝)

Study on Safety of Ceftiofur Hydrochloride Sterile Suspension in Dairy Cows

FENG Yan-yan1, ZHENG Li1, LIN Hong1, MENG Fang1, KONG Mei1*, WU Lian-yong1*,CAO Xing-yuan2

(1.QiluAnimalHealthProductsCoLtd,Jinan250100，China; 2.CollegeofVeterinaryMedicine,ChineseAgriculturalUniversity,Beijing100193，China)

The aim of the experiment was to evaluate the safety of ceftiofur hydrochloride sterile suspension on dairy cows. Twenty healthy dairy cows were selected in this experiment and divided into 4 groups randomly. Each group was given 0.9% saline, recommended dosage (2.2 mg/kg bw), 3 times of recommended dosage(6.6 mg/kg bw) and 5 times of recommended dosage(11.0 mg/kg bw). During the experiment, rectal temperature, mental attitude, local reaction of the udder, hematology and serum chemistries of the dairy cows were undertaken. The results showed that there was no significant adverse effect on the dairy cows in the three ceftiofur hydrochloride sterile suspension dosage groups. Both the hematology parameters and serum chemistries parameters were within normal limits. In conclusion, ceftiofur hydrochloride sterile suspension was safe to dairy cows.

ceftiofur hydrochloride sterile suspension; dairy cows; safety

馮言言，獸醫(yī)師，從事新獸藥開(kāi)發(fā)研究。

2016-08-15

A

1002-1280 (2016) 12-0034-06

S859.796