長鏈非編碼RNA H19在泌尿系腫瘤中的研究進(jìn)展

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長鏈非編碼RNA H19在泌尿系腫瘤中的研究進(jìn)展

田躍軍代宇郭琦王志平洪梅

(蘭州大學(xué)第二醫(yī)院泌尿外科研究所甘肅省泌尿系疾病研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室甘肅省泌尿系統(tǒng)疾病臨床醫(yī)學(xué)中心，甘肅蘭州730030)

〔關(guān)鍵詞〕H19；IGF2；泌尿系腫瘤；DNA甲基化

長鏈非編碼RNA可在轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后等多個(gè)水平參與基因的表達(dá)調(diào)控，從而參與細(xì)胞的生長、發(fā)育、代謝、凋亡等生理過程。H19作為長鏈非編碼RNA的一員，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切，其通過基因組印記、染色質(zhì)修飾等表觀遺傳學(xué)方式調(diào)控相關(guān)基因的表達(dá)，從而影響腫瘤的各種生物學(xué)活動(dòng)。而最近研究發(fā)現(xiàn)，H19在泌尿系腫瘤中也扮演著重要的角色。本文著重從基因表達(dá)的表觀遺傳調(diào)控方面探討H19與泌尿系腫瘤的關(guān)系，希望為其臨床應(yīng)用提供一個(gè)新的標(biāo)志物和藥物靶點(diǎn)。

1H19的結(jié)構(gòu)和功能

H19定位于小鼠7號(hào)染色體末端，人染色體11p15.5，長約為2.6 kb，共含5個(gè)外顯子和4個(gè)內(nèi)含子，與人胰島素樣生長因子2(IGF2)基因是一對在正常人胚胎組織中表現(xiàn)為印跡特征的基因，正常情況下H19為母源基因表達(dá)，IGF2為父源基因表達(dá)。印跡基因是指來源于父母雙方的等位基因，在DNA或組蛋白修飾的影響下，只有來源于一方親本的基因表達(dá)。H19和IGF2兩基因在基因組中定位非常接近，而且其表達(dá)調(diào)控也相互關(guān)聯(lián)，在多種腫瘤中存在H19/IGF2的印跡異常。

H19在進(jìn)化上呈高度的保守性，在胚胎組織中高表達(dá)，在成年組織中僅少量表達(dá)于心肌和骨骼肌，但在組織再生及腫瘤發(fā)生時(shí)被異常激活，主要定位于胞質(zhì)內(nèi)〔1,2〕。長鏈非編碼RNA(lncRNA)可通過染色體重塑、組蛋白修飾、調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)活性、生成miRNA等多種方式影響人類疾病的發(fā)生發(fā)展〔3〕。H19基因的第一個(gè)外顯子編碼一個(gè)微小RNA(miRNA)分子，即miR-675，H19可通過miR-675的加工調(diào)控來發(fā)揮作用〔4〕。

最近有文獻(xiàn)報(bào)道，內(nèi)源性表達(dá)的lncRNA還可充當(dāng)miRNA的分子海綿，通過吸附miRNA控制其活性〔5〕。在未分化的骨骼肌細(xì)胞中過表達(dá)miR-106a時(shí)，H19的表達(dá)水平也顯著增高，miR-106a可能通過與H19結(jié)合提高lncRNA的穩(wěn)定性；用siRNA干擾H19的表達(dá)后，5個(gè)miR-106a靶mRNA的表達(dá)水平均明顯降低了，過表達(dá)野生型H19能夠提高miR-106a靶報(bào)告基因的表達(dá)，而miR-106a的結(jié)合序列被突變的H19則完全喪失了這種活性。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明H19在miR-106a相關(guān)的miRNA家族中扮演著一個(gè)分子海綿的角色〔6〕。

Let-7家族miRNA在發(fā)育、代謝和腫瘤中都有重要作用，過表達(dá)Let-7能夠誘導(dǎo)早熟性的肌肉分化。Kallen等〔7〕報(bào)道，H19敲減后能誘導(dǎo)同樣的表型，交聯(lián)免疫共沉淀測序技術(shù)也支持H19作為一種分子海綿調(diào)節(jié)Let-7的豐度。Let-7還是一個(gè)潛在的抑癌基因，能夠抑制細(xì)胞增殖和運(yùn)動(dòng)相關(guān)癌基因的表達(dá)。Yan等〔8〕也報(bào)道，過表達(dá)H19促進(jìn)了卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系的運(yùn)動(dòng)和轉(zhuǎn)移，這是由于H19干擾了Let-7對其靶基因的調(diào)控作用；同時(shí)，二甲雙胍能夠降低腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和侵襲能力，其可能通過改變DNA甲基化狀態(tài)下調(diào)H19的表達(dá)。

2H19自身的表達(dá)調(diào)控

2.1DNA甲基化對H19的調(diào)控每個(gè)印記基因都有自己的調(diào)控區(qū)，稱為差異甲基化區(qū)域(DMR)或印記調(diào)控區(qū)(ICR)，印跡基因的表達(dá)受調(diào)控區(qū)DMR調(diào)控，甲基化發(fā)生在該區(qū)域。DNA的甲基化主要是DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(DNMT)發(fā)生催化，以S-腺苷甲硫氨酸(SAM)為供體發(fā)生反應(yīng)的過程。H19基因的DMR或ICR定位于H19基因上游-4到-2 kb處，H19/IGF基因位點(diǎn)的印記狀態(tài)主要取決于H19啟動(dòng)子上游2.4 kb的印記調(diào)控中心，該調(diào)控區(qū)富含CpG，DNA的甲基化修飾就發(fā)生在CpG位點(diǎn)〔9,10〕。在小鼠中，精子H19 DMR甲基化異常不僅可降低IGF2基因的表達(dá)，也可導(dǎo)致小鼠胚胎著床后的再吸收〔11〕。對于母源等位基因，H19印記調(diào)控區(qū)DMR的去甲基化狀態(tài)使其與多功能轉(zhuǎn)錄因子鋅指蛋白(CTCF)結(jié)合，形成絕緣子(insulator)，阻礙增強(qiáng)子(enhancer)對IGF2的轉(zhuǎn)錄激活作用〔12〕。

2.2轉(zhuǎn)錄因子對H19的調(diào)控c-Myc能結(jié)合H19調(diào)控區(qū)DMR附近的增強(qiáng)盒E-boxes，而E-boxes是一段高度保守、具有蛋白結(jié)合位點(diǎn)的DNA序列，結(jié)合之后能促進(jìn)組蛋白乙?；约凹せ頗19發(fā)生轉(zhuǎn)錄；且進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)證明c-Myc的過表達(dá)可上調(diào)H19，使IGF2下調(diào)，但不影響H19基因的印跡狀態(tài)〔13〕。在母源染色體上，轉(zhuǎn)錄因子CTCF可結(jié)合到H19調(diào)控區(qū)ICR上，通過黏連蛋白(cohesin)形成一個(gè)轉(zhuǎn)錄絕緣子〔14〕。這個(gè)轉(zhuǎn)錄絕緣子阻礙了增強(qiáng)子對IGF2的轉(zhuǎn)錄激活，使得母源H19等位基因獨(dú)立占據(jù)了增強(qiáng)子；而父源ICR的甲基化造成了H19啟動(dòng)子的高甲基化和H19的表達(dá)抑制。H19/IGF2調(diào)控區(qū)ICR的絕緣子活性具有細(xì)胞類型特異性，除了依賴不同細(xì)胞的特異性增強(qiáng)子，也取決于絕緣子蛋白CTCF的翻譯后修飾狀態(tài)〔15〕。更進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)一些轉(zhuǎn)錄因子E2F〔16〕、Slug〔17〕、p53和HIF-1α〔18〕，在調(diào)控H19轉(zhuǎn)錄水平也發(fā)揮著重要作用。

3H19與膀胱癌

在我國，膀胱癌發(fā)病率隨年齡的增長而增加，在60歲以上人群中超過腎腫瘤，居泌尿系惡性腫瘤發(fā)病的首位〔19〕。臨床上以手術(shù)治療為主，輔助放療、化療、膀胱灌注等手段的綜合治療，但其療效難以令人滿意。目前已有報(bào)道H19促進(jìn)膀胱癌的發(fā)生發(fā)展，并作為一種潛在的治療靶點(diǎn)參與膀胱癌的治療。

Byun等〔20〕篩檢了41例膀胱癌和它們的癌旁黏膜組織，通過對其mRNA的等位基因進(jìn)行評估，發(fā)現(xiàn)膀胱癌病例中22.2%存在IGF2的印跡丟失(LOI)，12.5%存在H19的LOI。通過使用等位基因焦磷酸測序法對IGF2和H19的調(diào)控區(qū)DMR進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)膀胱癌70%在H19和IGF2的調(diào)控區(qū)DMR發(fā)生異常的DNA甲基化。H19表達(dá)升高是膀胱癌復(fù)發(fā)的早期分子標(biāo)志，H19表達(dá)升高是由于正常情況下啟動(dòng)子被甲基化因而不表達(dá)的父源H19等位基因在腫瘤中出現(xiàn)了表達(dá)。進(jìn)一步研究膀胱癌中印記缺失和DNA甲基化之間的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)印記缺失與調(diào)控區(qū)DMR的DNA甲基化的改變無必然的聯(lián)系，同時(shí)DNA甲基化異常也可在不依靠基因組印記缺失的情況下獨(dú)立發(fā)生。由此認(rèn)為在膀胱癌中，H19和IGF2發(fā)生DNA甲基化異常是印跡缺失的一個(gè)必要環(huán)節(jié)，且先于LOI，DNA甲基化異常的發(fā)生雖然是印記缺失的一個(gè)必要環(huán)節(jié)，但不是印記缺失的充分條件。

Luo等〔21〕用RT-PCR分析發(fā)現(xiàn)在膀胱癌組織和細(xì)胞株中，H19的表達(dá)水平明顯高于癌旁組織和正常膀胱細(xì)胞株。當(dāng)沉默H19的表達(dá)時(shí)，ID2的表達(dá)水平降低，膀胱癌細(xì)胞株T24和253J的生長明顯受到抑制。經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)ID2和H19之間存在一種正相關(guān)，而且H19對ID2有一個(gè)正性的調(diào)控作用，由此認(rèn)為在膀胱癌細(xì)胞中過表達(dá)的H19激活了ID2，從而促進(jìn)了膀胱癌細(xì)胞的增殖能力。Luo等〔22〕從另一方面證明了H19與膀胱癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移機(jī)制的關(guān)系，在膀胱癌中H19與EZH2基因的增強(qiáng)子結(jié)合，隨后激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路，使E-cadherin的表達(dá)水平缺失，誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的發(fā)生，從而促進(jìn)了膀胱癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。既往研究證實(shí)Wnt信號(hào)通路與EMT關(guān)系密切，當(dāng)經(jīng)典的Wnt信號(hào)通路被激活時(shí)，誘導(dǎo)β-catenin向胞核內(nèi)轉(zhuǎn)移，進(jìn)而促使Slug表達(dá)升高，下調(diào)E-cadherin的表達(dá)水平，誘導(dǎo)EMT發(fā)生，最終促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移，證明H19在膀胱癌的發(fā)生發(fā)展中起到了一個(gè)促癌基因的作用〔23〕。

Amit等〔24,25〕發(fā)現(xiàn)IGF2和H19兩者特異性地表達(dá)在高度惡性的腫瘤細(xì)胞中，不表達(dá)于正常細(xì)胞，當(dāng)限制IGF2或者H19的表達(dá)時(shí)，腫瘤細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移能力受到顯著抑制。受IGF2-P4(IGF2第4啟動(dòng)子) 或者H19 啟動(dòng)子調(diào)控，表達(dá)白喉毒素A(DTA)的單啟動(dòng)子載體，稱作IGF2-P4-DTA或者H19-DTA。將IGF2-P4和 H19兩者啟動(dòng)子同時(shí)調(diào)控的DTA表達(dá)載體稱為雙啟動(dòng)子白喉毒素A載體(H19-DTA-IGF2-P4-DTA)。他們進(jìn)一步建立膀胱腫瘤動(dòng)物模型研究發(fā)現(xiàn)H19-DTA-IGF2-P4-DTA在抑制膀胱癌細(xì)胞生長方面明顯優(yōu)于單啟動(dòng)子白喉毒素A載體(IGF2-P4-DTA 和 H19-DTA)，將雙啟動(dòng)子白喉毒素A載體轉(zhuǎn)染入膀胱腫瘤細(xì)胞，其可在不影響正常膀胱組織細(xì)胞的前提下有效殺傷膀胱腫瘤細(xì)胞，提示H19有望在膀胱腫瘤的臨床治療方面有一個(gè)好的應(yīng)用前景。Gofrit等〔26〕在表淺性膀胱癌治療方案的Ⅱb期臨床實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DT A BC-819是H19啟動(dòng)子序列調(diào)控的DNA質(zhì)粒，不僅抑制了2/3病人的新的腫瘤生長，同時(shí)使剩下1/3癌灶遭到徹底破壞,BC-819的安全性和有效性在治療膀胱癌中取得了一個(gè)好的效果，其有望成為治療膀胱癌的新藥物。

4H19與腎癌

腎癌約占人類惡性腫瘤的3%，位居發(fā)達(dá)國家惡性腫瘤前10位，在我國腎癌的發(fā)病率呈逐年增高趨勢。腎癌作為一種多基因相關(guān)腫瘤，發(fā)病機(jī)制極其復(fù)雜〔27〕。腎癌主要包括腎細(xì)胞癌和腎母細(xì)胞瘤。目前國內(nèi)外有關(guān)H19與腎癌關(guān)系的研究成果提示，H19有望成為腎癌早期診斷的標(biāo)志物以及治療的分子靶標(biāo)。

Cardoso等〔28〕通過焦磷酸測序法和多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)(MS-MLPA)發(fā)現(xiàn)腎母細(xì)胞瘤(Wilms瘤)的32個(gè)樣本中有28個(gè)樣本H19調(diào)控區(qū)DMR發(fā)生高甲基化，在血液樣本中H19調(diào)控區(qū)DMR高甲基化狀態(tài)也是一致的，有5個(gè)腫瘤樣本存在彌漫性或局灶性的間變(anaplasia)，其中4個(gè)檢出了H19調(diào)控區(qū)DMR的高甲基化，H19對Wilms瘤的發(fā)展起著抑制作用。Scott等〔29〕研究發(fā)現(xiàn)在腎母細(xì)胞瘤中定位于染色體11p15區(qū)域的基因可出現(xiàn)69%表觀遺傳異常，其中包括37%H19表突變(epimutation)和32%父源性單親源二體(pUPD)，當(dāng) H19表突變發(fā)生時(shí)，腎母細(xì)胞瘤有一個(gè)更高的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，這也預(yù)示其在腎母細(xì)胞瘤中扮演抑癌基因的角色。

Charlton等〔30,31〕研究發(fā)現(xiàn)Wilms瘤中腎臟的發(fā)育相關(guān)基因出現(xiàn)了一個(gè)低甲基化狀態(tài)，同時(shí)其腎臟組織的抑癌基因(CASP8、H19、MIR195、RB1、TSPAN32)被過甲基化而表達(dá)沉默。Wilms瘤患者13個(gè)樣本中11個(gè)樣本的H19的調(diào)控區(qū)DMR發(fā)生甲基化升高，其正常腎組織(NKs)的甲基化水平明顯低于腎源性殘余(NRs)的甲基化水平，NRs的甲基化水平明顯低于Wilms瘤的甲基化水平。而且隨著腎母細(xì)胞瘤惡性程度越高，腎臟組織的DNA甲基化水平越高，由此認(rèn)為通過對其甲基化狀態(tài)進(jìn)行分析為研究腎源性殘余向腎母細(xì)胞瘤的轉(zhuǎn)變提供了一個(gè)新的證據(jù)。

Wang等〔32〕用qRT-PCR分析發(fā)現(xiàn)在腎細(xì)胞癌3種細(xì)胞株786-O、ACHN、Caki-2和癌組織中，H19的表達(dá)量明顯高于正常腎細(xì)胞株HK-2和正常癌旁組織。當(dāng)沉默H19的表達(dá)時(shí)，Wound healing分析實(shí)驗(yàn)證明，腎細(xì)胞癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力明顯受到抑制，Kaplan-Meier分析發(fā)現(xiàn)，在腎細(xì)胞癌患者中，高表達(dá)H19的患者預(yù)后不良，而且H19的高表達(dá)與更多的臨床分期和更短的生存期成正相關(guān)，由此認(rèn)為H19在腎細(xì)胞癌中起到了促癌基因的作用。

5H19與前列腺癌

前列腺癌在歐美國家較為多見，中國近年來其發(fā)病率逐年增加，嚴(yán)重威脅著老年男性的健康〔33〕。其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，有研究證明DNA甲基化等表觀遺傳學(xué)改變對前列腺癌的發(fā)生發(fā)展起著重要作用〔34〕。Dobosy等〔35〕給小鼠喂食膽堿和蛋氨酸缺乏(CMD)的飼料，造成小鼠甲基缺乏，將其前列腺組織與正常前列腺組織作對照，發(fā)現(xiàn)前者IGF2和H19的表達(dá)水平顯著高于后者。染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)顯示，在CMD前列腺組織中，H19和IGF2啟動(dòng)子的抑制性組蛋白修飾(H3K9二甲基化)下降，而IGF2和H19啟動(dòng)子的DNA甲基化無改變。他們認(rèn)為在CMD前列腺組織中，因?yàn)榻M蛋白修飾比DNA甲基化更容易發(fā)生改變，所以IGF2和H19的表達(dá)水平升高。

Paradowska等〔36〕發(fā)現(xiàn)在良性前列腺增生組織中H19 CpGs的甲基化大于80%；相反在惡性前列腺癌中，他們篩檢了30個(gè)樣本，發(fā)現(xiàn)其中的9個(gè)樣本的CpGs甲基化狀態(tài)只接近41%。通過對前列腺癌和良性前列腺增生組織作對比，證實(shí)H19的ICR或DMR調(diào)控區(qū)的甲基化狀態(tài)在統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著不同，前列腺癌出現(xiàn)明顯的甲基化缺失。染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)顯示在良性前列腺增生中IGF2/H19的調(diào)控區(qū)ICR發(fā)生了組蛋白H3K9二甲基化，而在前列腺癌中這種現(xiàn)象不發(fā)生。他們認(rèn)為在惡性前列腺癌和良性前列腺增生之間的IGF2/H19基因的多功能轉(zhuǎn)錄因子CTCF結(jié)合區(qū)域，其甲基化狀態(tài)顯著不同。通過對IGF2/H19的調(diào)控區(qū)ICR或DMR的DNA甲基化和組蛋白修飾狀態(tài)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)在前列腺癌中H19基因存在顯著甲基化缺失，將可能對前列腺癌的早期診斷和治療提供幫助。

Zhu等〔37〕分析發(fā)現(xiàn)H19和H19編碼的miR-675的表達(dá)量，在轉(zhuǎn)移性前列腺癌細(xì)胞株M12中的表達(dá)水平顯著低于非轉(zhuǎn)移性前列腺癌細(xì)胞株P(guān)69。伴隨H19的表達(dá)量在非轉(zhuǎn)移性前列腺癌細(xì)胞株P(guān)69和PC3中的上升，miR-675的表達(dá)量也得到提高，且癌細(xì)胞的遷移能力明顯受到抑制，說明H19與miR-675之間存在正相關(guān)?？墒窃谵D(zhuǎn)移性前列腺癌細(xì)胞株M12中，過表達(dá)H19并不能提高miR-675的表達(dá)水平，也無法抑制癌細(xì)胞的遷移能力，說明前列腺癌細(xì)胞株M12的轉(zhuǎn)移能力可能只與miR-675的表達(dá)水平相關(guān)。更進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)H19或miR-675在前列腺癌細(xì)胞株P(guān)69中對TGFBI有負(fù)性調(diào)控作用，而以往研究證實(shí)TGFBI作為一種細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)蛋白，可誘導(dǎo)EMT的發(fā)生，促進(jìn)多種腫瘤的轉(zhuǎn)移能力〔38〕。雙熒光素酶分析顯示miR-675可直接結(jié)合TGFB1的mRNA 3′UTR抑制其翻譯活性，TGFBI是miR-675的一個(gè)潛在靶基因。他們認(rèn)為在前列腺癌中，H19-miR-675直接降低了TGFBI的表達(dá)水平，進(jìn)而在前列腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移機(jī)制中起到了主要作用。

Ribarska等〔39〕研究發(fā)現(xiàn)前列腺癌中H19表達(dá)降低，H19調(diào)控區(qū)DMR在良性前列腺組織和惡性前列腺癌組織中均存在DNA低甲基化或DNA高甲基化現(xiàn)象；同時(shí)他們還發(fā)現(xiàn)ZAC1轉(zhuǎn)錄因子可誘導(dǎo)印記基因H19、CDKN1C、IGF2的表達(dá)水平，通過觀察印記基因與前列腺癌基因EZH2、ERG、HOXC6之間的關(guān)系，證明一些轉(zhuǎn)錄因子在基因印記網(wǎng)絡(luò)中扮演著重要角色；但他們認(rèn)為H19、IGF2等印記基因可獨(dú)立依靠DNA的甲基化而在前列腺癌中異常表達(dá)，也為前列腺癌的臨床研究提供了一個(gè)新的方法。

6小結(jié)

隨著人們生活水平的提高，近年來泌尿系腫瘤的發(fā)病率和死亡率在我國呈現(xiàn)連續(xù)增長的趨勢，嚴(yán)重威脅人們健康。其中泌尿系腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)是患者最重要的死亡原因，但目前臨床上缺乏有效的治療手段。所以，研究泌尿系腫瘤的發(fā)生發(fā)展機(jī)制，探索出一種新型有效的治療方法至關(guān)重要。目前對于H19的研究還處于起步階段，特別是在泌尿系統(tǒng)腫瘤中的報(bào)道還比較少，其影響泌尿系腫瘤的機(jī)制還有待進(jìn)一步探索。現(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)H19在膀胱癌、前列腺癌和腎細(xì)胞癌中主要作為一種癌基因，在腎母細(xì)胞瘤中起著抑癌基因作用，其異常表達(dá)與這幾種泌尿系腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移機(jī)制密切相關(guān)，這也為下一步臨床治療打下了基礎(chǔ)。能否有效糾正其在腫瘤中的異常表達(dá)，是泌尿系腫瘤中的潛在治療策略，H19作為一種新的藥物靶點(diǎn)，在膀胱癌治療中已經(jīng)取得了較好的效果，我們相信隨著研究的不斷深入，其必將為腎癌、前列腺癌等泌尿系腫瘤乃至多種腫瘤的臨床研究提供一個(gè)新的策略和思路。

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〔2015-07-08修回〕

(編輯曲莉)

〔中圖分類號(hào)〕R737.11

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)05-1234-04；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.05.099

通訊作者：洪梅(1973-)，女，博士，助理研究員，主要從事泌尿系腫瘤的基礎(chǔ)研究。

基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金(81302240)；蘭州大學(xué)中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)(lzujbky-2013-134，lzujbky-2014-165)；甘肅省科技計(jì)劃(145RJZA153)；甘肅省泌尿系疾病臨床醫(yī)學(xué)中心開放課題(mnlczxkf-23)

第一作者：田躍軍(1987-)，男，碩士在讀，主要從事泌尿系腫瘤的臨床與基礎(chǔ)研究。