山豆根中總黃酮的含量測(cè)定

鄒玉龍　張　穎　徐　丹　李海燕

牡丹江醫(yī)學(xué)院紅旗醫(yī)院，黑龍江　牡丹江　157011

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山豆根中總黃酮的含量測(cè)定

鄒玉龍張穎徐丹李海燕*

牡丹江醫(yī)學(xué)院紅旗醫(yī)院，黑龍江牡丹江157011

【摘要】目的:測(cè)定山豆根中總黃酮的含量。方法: 采用超聲波提取法提取山豆根中的總黃酮，并以A1( NO3)3、NaNO2、及NaOH為顯色劑，蘆丁為對(duì)照品，分光光度法測(cè)定其含量。結(jié)果：山豆根中總黃酮含量為5.7mg/g 。結(jié)論：該方法可用于測(cè)定山豆根中的總黃酮。

【關(guān)鍵詞】山豆根；總黃酮；超聲波提取

山豆根為豆科植物越南槐(VietnamesesophoraRoot)的干燥根及根莖。山豆根味極苦，微有豆腥氣，具有清熱解毒，消腫止痛的功效，常用于咽喉牙齦腫痛、肺熱咳嗽煩渴、熱解便秘等癥。山豆根含有黃酮類、有機(jī)酸、植物色素、脂肪、水分及灰分等成分[1]，而黃酮類化合物具有心血管系統(tǒng)維護(hù)、抗菌及抗病毒、抗腫瘤、抗氧化、抗炎、鎮(zhèn)痛、保肝等多種生物活性[2-4]。實(shí)驗(yàn)采用超聲波提取法提取山豆根中的總黃酮，以蘆丁為對(duì)照品，采用紫外可見分光光度法測(cè)定其總黃酮的含量。

1儀器與材料

1.1儀器RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)；AS3120B超聲波清洗儀(北京卓川電子科技有限公司)；722-型分光光度計(jì)(上海光譜儀器有限公司)；BSA223S分析天平(上海賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)。

1. 2材料乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉均為分析純；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)；山豆根為市售。

2方法與結(jié)果

2. 1樣品溶液的制備山豆根干燥后打粉過(guò)40目篩，精確稱取5.0000g于錐形瓶中，加入80ml 60%乙醇溶液，超聲提取60min，過(guò)濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，定容至250ml。

2.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制精確稱取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品10mg，用60%的乙醇溶液定容至100ml容量瓶中，冷藏放置于冰箱。

2.3測(cè)定波長(zhǎng)的選擇取標(biāo)準(zhǔn)溶液1ml ，置于25ml容量瓶中，加入0. 6ml5% NaNO2，搖勻，放置6 min后加入 1 ml 10 % A1(NO3)3，放置6 min，再加入10ml 4% NaOH溶液，混勻，用60%乙醇稀釋至刻度。同時(shí)作空白對(duì)照，15min后測(cè)定波長(zhǎng)420～700nm區(qū)段的吸光度，得知最大吸收在510 nm，因此選定波長(zhǎng)為510 nm 。

2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立分別取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml標(biāo)準(zhǔn)溶液于25ml容量瓶中，各加入0.6ml 5% NaNO2，搖勻，放置6min后加入1ml 10% A1(NO3)3，放置6min，再加入10ml 4 % NaOH溶液，混勻，用60%乙醇稀釋至刻度，靜置15min，以試劑空白為參比于510nm處測(cè)其吸光度，以吸光度A縱坐標(biāo)，蘆丁的濃度c為橫坐標(biāo)，得到回歸方程:A=11.83c+0.0169(r=0.9994)，表明樣品在4～20μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5精密度考察精密移取標(biāo)準(zhǔn)溶液5份1ml，按“2.4”測(cè)定其吸光度，RSD為0.82 %(n=5)，說(shuō)明精密度良好。

2. 6重現(xiàn)性考察精密移取樣品溶液5份1ml，按“2.4”測(cè)定其吸光度，RSD為1.19%(n=5)，說(shuō)明重現(xiàn)性良好。

2.7回收率實(shí)驗(yàn)移取已知總黃酮含量的樣品溶液1ml，加入標(biāo)準(zhǔn)溶液，按“2.4”測(cè)定吸光度，計(jì)算加樣回收率。結(jié)果平均回收率為101.26%，RSD為2.71%(n=5)。

2.8總黃酮含量測(cè)定準(zhǔn)確吸取樣品溶液1ml，共5份，測(cè)定樣品溶液中總黃酮的濃度為0.114 mg/ml，RSD為 0.15%(n=5)，并通過(guò)計(jì)算得出山豆根中總黃酮含量為5.7mg/g 。

3討論

天然產(chǎn)物有效成分含量較低，難于富集，分離難度大，不同的提取方法對(duì)不同藥物有效成分的提取率存在差異。黃酮的主要提取方法有：溶劑法(水提法、堿性稀醇和堿性水提、有機(jī)溶劑提取法)、超聲波提取法 、微波提取法、酶解法、超臨界流體萃取法、雙水相萃取分離法。實(shí)驗(yàn)采用超聲波法提取總黃酮，利用分光光度計(jì)測(cè)定了總黃酮的含量，該工藝簡(jiǎn)單無(wú)污染、成本較低，是一條理想的提取黃酮的途徑。

參考文獻(xiàn)

[1] 王君明，崔瑛.山豆根化學(xué)成分、藥理作用及毒性研究進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17(4)：229-232.

[2] 嚴(yán)振宇，張秋菊.黃酮類化合物提取分離方法簡(jiǎn)介[J].微量元素與健康研究，2012，29(3)：55-57.

[3] 沈廣志，郭強(qiáng)，何志鵬.分光光度法測(cè)定大棗中總黃酮含量[J].微量元素與健康研究，2011，28(4)：26-27.

[4] 李春華. 山豆根的研究進(jìn)展[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2012(19)：26.

The determination of Total flavonoids content of Sophora tonkinensis

ZOU YulongZHANG YingXU DanLI Haiyan

Hongqi Hospital of Mudanjiang medical University ，Mudanjiang 157011，China

Abstract:Objective determination of content of total flavonoids in sophorae tonkinensis.Methods Using ultrasonic extraction method to extract total flavonoids in sophorae tonkinensis， Spectrophotometry was used to determine the content of total flavonoids，A1(NO3)3，NaNO2， and NaOH as chromogenic agent and Rutin as constrast sample. Results the determination of flavonoids content in sophorae tonkinensis is 5.7 mg/g. Conclusion this method can be used to determine of total flavonoids in sophorae tonkinensis

Key words:Sophora tonkinensis ;total flavonoids; ultrasonic extraction

作者簡(jiǎn)介：鄒玉龍(1989-)，男，藥師，碩士，主要從事藥學(xué)研究。通信作者：李海燕(1986-)，女，藥師，碩士，主要從事藥學(xué)研究。

【中圖分類號(hào)】R284.1

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

【文章編號(hào)】1007-8517(2016)09-0013-01

(收稿日期：2016.03.16)