核苷酸還原酶M1表達對老年晚期非小細胞肺癌化療療效的影響

江　波　何文杰　涂長玲　劉　坤

(昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院　云南省腫瘤醫(yī)院干療科，云南　昆明　650118)

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核苷酸還原酶M1表達對老年晚期非小細胞肺癌化療療效的影響

江波何文杰涂長玲劉坤

(昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院云南省腫瘤醫(yī)院干療科，云南昆明650118)

摘要〔〕目的探討核苷酸還原酶M1(RRM1)的表達對老年晚期非小細胞肺癌(NSCLC)化療療效的影響。方法分為治療組和對照組，每組40例。治療組通過免疫組織化學(xué)法檢測肺癌組織RRM1的表達，根據(jù)RRM1的表達選擇化療藥物，RRM1低表達選擇吉西他濱(1 000 mg/m2第1、8天，每21 d為1個周期)化療，RRM1高表達選擇紫杉醇(175 mg/m2第1天，每21 d為1個周期)化療；對照組只需根據(jù)醫(yī)生的意愿選擇吉西他濱或紫杉醇化療。結(jié)果治療組中不同性別、組織類型及分期患者的RRM1表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療組的療效及疾病控制率明顯優(yōu)于對照組(P<0.05)；兩組的治療方式與不良反應(yīng)均無明顯差異。結(jié)論根據(jù)RRM1的表達對老年晚期NSCLC患者進行選擇性用藥。

關(guān)鍵詞〔〕 核苷酸還原酶M1；非小細胞肺癌；化療

第一作者：江波(1973-)，女，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事肺癌的化療和靶向治療及其肺癌生物標志物的研究。

過去10年間，肺癌的發(fā)病率及死亡率在≥70歲的人群中明顯上升〔1〕。因此，老年肺癌的治療是腫瘤學(xué)界面臨的越來越普遍的問題。第三代化療藥物(吉西他濱、紫杉醇、多西他賽等)單藥化療是非選擇性老年晚期非小細胞肺癌(NSCLC)患者的基本治療，可延長生存期、改善生活質(zhì)量。但是目前老年晚期NSCLC的化療療效不容樂觀，單藥間比較療效相近，有效率約20%〔2〕。如何選擇性用藥以更好地提高不同化療藥物的療效是臨床醫(yī)師面臨的難題。本研究探討老年晚期NSCLC根據(jù)肺癌組織的核苷酸還原酶M1(RRM1)表達選擇化療藥物的可行性，從而為老年晚期NSCLC化療藥物的選擇提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1臨床資料選取2009年10月至2013年3月我科收治的老年晚期NSCLC患者80例，患者均未接受過抗腫瘤化療藥物治療。均經(jīng)病理組織學(xué)或細胞學(xué)檢查確診，無化療禁忌證，預(yù)計生存時間>3個月。分為兩組。治療組：40例，男32例，女8例，年齡70～76歲，中位年齡73.6歲，其中腺癌22例，鱗癌18例，ⅢB期12例，Ⅳ期28例。對照組：40例，男29例，女11例，年齡70～77歲，中位年齡74.2歲，其中腺癌24例，鱗癌16例，ⅢB期10例，Ⅳ期30例。化療前生活質(zhì)量(PS)評分0～2分，血常規(guī)、肝腎功、心電圖均正常。病理組織分型按WHO組織學(xué)分類(1998)標準，分期按1997年國際抗癌聯(lián)盟(UICC)制訂的標準。兩組一般資料具有可比性。

1.2RRM1檢測 治療組40例患者的肺癌組織標本均在化療前采用SP免疫組化法檢測RRM1蛋白表達,RRM1抗體工作濃度均為1∶100，以已知陽性標本為陽性對照,以PBS代替一抗作為陰性對照。標本經(jīng)4～5 μm厚石蠟切片，常規(guī)脫蠟、水化、微波修復(fù)抗原后，按SupervisionTM試劑盒說明書操作。每張切片加3%H2O2100 μl孵育10 min，棄去PBS液，再在切片上滴加一抗，室溫孵育4 h,PBS清洗3 min，重復(fù)3次；棄去PBS液，每張切片滴加生物素標記的二抗工作液，室溫孵育30 min DAB顯色，蘇木素復(fù)染，脫水，透明，中性樹膠封固，鏡檢。采用雙盲法閱片,Olympus光學(xué)顯微鏡高倍鏡下隨機選擇5個視野，每個視野計數(shù)100個細胞。胞質(zhì)中RRM1染色為棕黃色者評定為陽性細胞。樣本含<50%的陽性染色細胞為RRM1(-)即低表達，≥50%陽性染色細胞為RRM1(+)即高表達。

1.3治療方法(1)治療組：40例患者的肺癌組織標本均進行了RRM1的表達檢測，RRM1低表達者化療采用吉西他濱單藥化療，吉西他濱1 000 mg/m2第1、8天，每21 d為1個周期；RRM1高表達者化療采用紫杉醇單藥化療，紫杉醇175 mg/m2第1天，每21 d為1個周期；(2)對照組：40例患者均未進行肺癌組織標本RRM1的表達檢測，根據(jù)臨床醫(yī)師的意愿，選擇吉西他濱或紫杉醇進行單藥化療，藥物劑量、方法與治療組相同；兩組患者均治療2～6周期，疾病進展或患者不能耐受時停藥。

1.4療效及不良反應(yīng)評價標準參照RECIST實體瘤近期療效評價標準進行療效評價，分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)，疾病穩(wěn)定(SD)，疾病進展(PD)。客觀有效率(RR)為(CR+PR)/總數(shù)×100%，疾病控制率(DCR)為(CR+PR+SD)/總數(shù)×100%；不良反應(yīng)按照WHO分級標準評定。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗及Pearson分析。

2結(jié)果

2.1治療組RRM1的表達40例治療組的肺癌組織標本中RRM1高表達18例(見圖1)，表達率為45%。不同性別(男43.8%，女50%)，組織類型(腺癌41.7%，鱗癌50%)及分期(ⅢB期50%，Ⅳ期42.9%)患者的RRM1表達差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.795,P=0.427;χ2=0.846,P=0.405;χ2=0.389,P=0.733)。

圖1　RRM1免疫組織化學(xué)染色情況 (SP，×400)

2.2近期療效兩組中80例患者均可評價療效，無1例達完全緩解。治療組患者中，PR10例(25%)，NC7例(17.5%)，PD23例(57.5%)；對照組患者中，PR5例(15%)，NC5例(12.5%)，PD20例(72.5%)。治療組與對照組的客觀有效率分別為25%和15%，兩組差異顯著(χ2=8.146,P=0.008)；治療組與對照組疾病控制率分別為42.5%和27.5%，兩組差異顯著(χ2=9.348,P=0.005)。

2.3治療方式與不良反應(yīng)(1)治療組中，22人接受了吉西他濱化療，共完成化療79個周期，平均完成3.6個周期，化療不良反應(yīng)主要表現(xiàn)為骨髓抑制、胃腸道反應(yīng)等，Ⅲ級及以上的不良反應(yīng)發(fā)生率為13.6%；另有18人接受了紫杉醇化療，共完成化療68個周期，平均完成3.8個周期，化療不良反應(yīng)主要表現(xiàn)為骨髓抑制、胃腸道反應(yīng)等，Ⅲ級及以上的不良反應(yīng)發(fā)生率為5.6%；(2)對照組中，20人接受了吉西他濱化療，共完成化療78個周期，平均完成3.9個周期，化療不良反應(yīng)主要表現(xiàn)為骨髓抑制、胃腸道反應(yīng)等，Ⅲ級及以上的不良反應(yīng)發(fā)生率為10%；另有20人接受了紫杉醇化療，共完成化療80個周期，平均完成4個周期，化療不良反應(yīng)主要表現(xiàn)為骨髓抑制、胃腸道反應(yīng)等，無Ⅲ級及以上的不良反應(yīng)發(fā)生。

3討論

近年研究顯示多種分子標志物對化療療效有一定的預(yù)測作用〔3〕。RRM1是核苷酸還原酶影響吉西他濱療效的成分〔4〕，是近年來發(fā)現(xiàn)的一個可能有助于指導(dǎo)臨床是否選擇吉西他濱化療的分子標志物。有基礎(chǔ)及臨床研究顯示RRM1高表達與吉西他濱耐藥有關(guān)〔5〕。一項來自于75例NSCLC患者腫瘤活檢組織的RRM1的表達水平顯示：低水平RRM1表達的患者經(jīng)過吉西他濱/順鉑聯(lián)合化療后療效會更好；但這種預(yù)測價值在應(yīng)用長春瑞濱/順鉑和紫杉醇/順鉑方案化療的患者身上看不到〔6〕。Bepler等〔7〕進行的一項臨床研究，接受吉西他濱/卡鉑化療的局部晚期NSCLC患者中，RRM1表達與腫瘤縮小成負相關(guān)(r=-0.498,P=0.002),也就是說，瘤內(nèi)RRM1低表達患者化療療效好于高表達者。Jennifer等〔8〕在研究兩個對吉西他濱耐藥的NSCLC細胞株時發(fā)現(xiàn)RRM1呈陽性表達，認為其可以作為預(yù)測吉西他濱化療敏感程度的生物標志物。

本研究選擇老年人為研究對象，化療藥物選擇了第三代單藥化療去除了鉑類藥物間相互作用的影響，使研究因素較單一，因此能較好地反映RRM1的表達與吉西他濱療效間的關(guān)系。本研究說明老年晚期NSCLC患者RRM1低表達者能從吉西他濱的化療中獲益，初步提示根據(jù)RRM1的表達對老年晚期NSCLC患者進行選擇性用藥的合理性。

參考文獻4

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8Jennifer D,Davidson Y,Liandong M,etal.An increase in the expression of ribonucleotide reductase large subunit is associated with gemcitabine resistance in non-small-cell lung cancer cell lines〔J〕.Cancer Res,2004;64(76):3761-6.

〔2014-06-17修回〕

(編輯曹夢園)

通訊作者：何文杰(1979-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事肺癌的化療和靶向治療研究。

中圖分類號〔〕R734.2〔

文獻標識碼〕A〔

文章編號〕1005-9202(2015)21-6152-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2015.21.071