HBV準(zhǔn)種與肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展關(guān)系的研究進(jìn)展

任靜靜綜述 鄧偉審校

作者單位：530021 南寧1廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院實(shí)驗(yàn)研究部；2廣西壯族自治區(qū)腫瘤防治研究所

綜述

HBV準(zhǔn)種與肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展關(guān)系的研究進(jìn)展

任靜靜1綜述 鄧偉2審校

作者單位：530021 南寧1廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院實(shí)驗(yàn)研究部；2廣西壯族自治區(qū)腫瘤防治研究所

乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）為一嗜肝細(xì)胞性DNA病毒，具有復(fù)制率高、突變率高的特點(diǎn)，在宿主體內(nèi)以準(zhǔn)種形式存在。HBV感染不僅可以引起隱匿性、急性和慢性病毒性肝炎，還與肝硬化和肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。關(guān)注HBV準(zhǔn)種的研究，有助于從整體和動態(tài)的角度認(rèn)識HBV基因突變的特點(diǎn)、規(guī)律及其生物學(xué)特性，進(jìn)而探究HBV準(zhǔn)種與HCC發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，為早期預(yù)防、早期診斷和合理治療提供新策略。本文就HBV準(zhǔn)種與HCC發(fā)生發(fā)展的關(guān)系作一綜述。

乙型肝炎病毒；準(zhǔn)種；肝細(xì)胞癌；腫瘤發(fā)生；基因變異

乙型肝炎病毒（hepa t i t i s B v i r u s，H BV）感染是導(dǎo)致慢性肝炎、肝硬化、肝細(xì)胞癌（hepa t o c e ll u l a r c a rc inoma，H CC）的重要原因。H CC嚴(yán)重威脅人類的生命健康，據(jù)全球癌癥最新數(shù)據(jù)（G l o b o c an 2012）估計，H CC已經(jīng)位居全球惡性腫瘤死亡第2位，是死亡率較高的惡性腫瘤之一。在2012年全球H CC死亡病例中，超過50%的死亡病例發(fā)生在中國［1］。感染H BV者比未感染H BV者發(fā)展為H CC的風(fēng)險高30倍，據(jù)估計全世界53%H CC患者與H BV感染有關(guān)［2］。因此，H BV相關(guān)H CC的防治仍然是我國一項(xiàng)重要的課題。H BV病毒學(xué)研究的進(jìn)展以及相關(guān)檢測技術(shù)的發(fā)明，使我們對H BV病毒的結(jié)構(gòu)、功能、生物學(xué)特性有了更深入地了解，尤其是在H BV準(zhǔn)種的概念提出來之后，研究人員對H BV的感染、復(fù)制過程和遺傳異質(zhì)性有了新的看法，認(rèn)為H BV準(zhǔn)種群之間核苷酸的差異會影響病毒感染后的疾病進(jìn)程和結(jié)果。本文就H BV準(zhǔn)種與H CC發(fā)生發(fā)展關(guān)系的研究進(jìn)展作一綜述。

1 HBV準(zhǔn)種的概念和特點(diǎn)

H BV是嗜肝逆轉(zhuǎn)錄D N A病毒，基因組結(jié)構(gòu)由一個共價閉合環(huán)狀雙鏈D N A組成（c o v a l en t cl o s e dc i rc u l a r D N A，ccc D N A），全長約3 200 b p。以ccc D N A為復(fù)制模板，在宿主R N A聚合酶作用下，轉(zhuǎn)錄成含有H BV D N A序列上全部遺傳信息的前基因組R N A（p r egenomi c R N A，pg R N A），pg R N A進(jìn)入肝細(xì)胞質(zhì)，在H BV自身的D N A逆轉(zhuǎn)錄酶作用下，合成負(fù)鏈D N A，再以負(fù)鏈D N A為模板合成正鏈D N A，形成子代的部分雙鏈環(huán)狀D N A。同時，以ccc D N A為模板轉(zhuǎn)錄成幾種不同長短的m R N A，在細(xì)胞質(zhì)中翻譯合成編碼蛋白，經(jīng)包膜蛋白包裹組裝成成熟的病毒顆粒向細(xì)胞外分泌，進(jìn)入新的復(fù)制周期。H BV復(fù)制過程中有逆轉(zhuǎn)錄過程，其逆轉(zhuǎn)錄酶缺乏D N A聚合酶的3′-5′校正功能，導(dǎo)致較高的錯配率，其逆轉(zhuǎn)錄錯配率大于10-5核苷酸替換/位點(diǎn)/年，這種復(fù)制錯誤率高于其他D N A病毒，與進(jìn)化相對較慢的R N A病毒相似。因此，大量的病毒變異產(chǎn)生了受自然選擇作用的高度異質(zhì)性種群。這種遺傳學(xué)上高度相關(guān)但序列不完全相同的變異株組成的混合體，即準(zhǔn)種（q ua s i s pe c ie s）。

H BV準(zhǔn)種這一概念最早于1993年提出，是指H BV全基因序列異質(zhì)性界定在2%～5%之間，不足以構(gòu)成新的基因型或血清型。準(zhǔn)種是H BV的自然存在方式，一直在演變，當(dāng)病毒生存的外界環(huán)境發(fā)生變化時，存在于宿主體內(nèi)的準(zhǔn)種優(yōu)勢變異株容易通過篩選，能更好地適應(yīng)新環(huán)境，符合經(jīng)典的達(dá)爾文進(jìn)化理論—適者生存。H BV準(zhǔn)種具有以下特點(diǎn)：⑴H BV準(zhǔn)種普遍存在于慢性乙型肝炎患者體內(nèi);⑵準(zhǔn)種可見于H BV全基因序列，有普遍性和個體化的雙重特點(diǎn)［3］，以H BV C區(qū)、S區(qū)、核心啟動子等免疫攻擊主要靶點(diǎn)尤為多見［4］；⑶H BV基因組易發(fā)生變異，并在長期進(jìn)化過程中不斷累積，形成了具有種族和地域差異的H BV準(zhǔn)種，其與乙型肝炎慢性化、H CC的發(fā)生、H BV免疫逃逸和耐藥等密切相關(guān)。因此，H BV病毒許多重要的特征不能用一個僅有的共有序列解釋，對于病毒種群里存在的微變異體需要更多了解。

2 HBV準(zhǔn)種演變的動力學(xué)因素

病毒變異是準(zhǔn)種產(chǎn)生的根本原因，是準(zhǔn)種不斷演變的使動因素，因而變異的復(fù)雜性決定了準(zhǔn)種的復(fù)雜性。目前發(fā)現(xiàn)H BV準(zhǔn)種動態(tài)變化的原因主要來自三個方面。首先是病毒自身的原因，包括R N A聚合酶缺乏校對功能、H BV復(fù)制活性高、突變率高、聚合物區(qū)域的錯誤、基因微小及O RF重疊等［5］。其次是宿主方面的原因，例如宿主的一些AP O BEC-3蛋白可以聯(lián)合H BV衣殼調(diào)節(jié)病毒高突變基因的產(chǎn)生［6］。此外還可能來自于化學(xué)損害，包括脫氨基、脫嘌呤、脫嘧啶作用，與氧自由基的反應(yīng)，直接或間接的電離輻射，光化學(xué)反應(yīng)等。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)病毒自身的變異、宿主的免疫壓力及抗病毒藥物的應(yīng)用是影響病毒準(zhǔn)種構(gòu)成的主要因素。H BV病毒自身的變異表現(xiàn)為核苷酸錯配［7］；宿主的免疫壓力影響主要表現(xiàn)為H BV的免疫逃逸；抗病毒藥物對H BV準(zhǔn)種的影響表現(xiàn)為慢性H BV感染者使用抗病毒藥物治療時，H BV準(zhǔn)種所處的環(huán)境較為復(fù)雜，優(yōu)勢株和劣勢株處于不斷演變和進(jìn)化中，通過對環(huán)境的適應(yīng)性變化而被篩選下來。

3 HBV準(zhǔn)種與HCC發(fā)生發(fā)展的關(guān)系

3.1 H BV準(zhǔn)種復(fù)雜性與肝臟疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系

H BV準(zhǔn)種是遺傳學(xué)上具有異質(zhì)性的變異體，這些同時存在的變異體可能有助于病毒的持續(xù)和致病。目前的研究表明H BV準(zhǔn)種的相互作用可能增強(qiáng)H BV復(fù)制，減弱宿主的免疫反應(yīng)，可潛在促進(jìn)肝病的急劇惡化和肝衰竭的發(fā)生［8］。研究者通過對乙肝患者組織標(biāo)本進(jìn)行H BV D N A分析發(fā)現(xiàn)，慢性乙肝患者病情越嚴(yán)重，H BV基因前C/C區(qū)準(zhǔn)種的發(fā)生率越高；通過采用單鏈構(gòu)象多態(tài)性（SS CP）和D N A序列分析法對慢性乙型肝炎不同疾病類型患者S區(qū)準(zhǔn)種檢測及準(zhǔn)種復(fù)雜性進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)隨病情加重，H BV準(zhǔn)種的復(fù)雜度會增加。M a t he t等［9］采用同樣方法分析發(fā)現(xiàn)肝硬化患者體內(nèi)的H BV準(zhǔn)種復(fù)雜度高于慢性乙型肝炎患者，同樣認(rèn)為隨病情加重，H BV準(zhǔn)種的復(fù)雜度增加。劉霖等［10］采用PCR-構(gòu)象敏感凝膠技

術(shù)，對慢性乙型肝炎患者H BV前C/C及BCP區(qū)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)慢性H BV急性發(fā)作時H BV準(zhǔn)種復(fù)雜度較低，而病情好轉(zhuǎn)時準(zhǔn)種復(fù)雜度較高。溫志立等［11］對H BV感染的慢性攜帶者和慢性乙型肝炎重度患者血清采用熔點(diǎn)曲線法分析，發(fā)現(xiàn)慢性乙型肝炎重度患者攜帶的H BV準(zhǔn)種數(shù)量多于慢性攜帶者，提示H BV準(zhǔn)種與乙型肝炎臨床表現(xiàn)存在一定關(guān)系。姚碧蓮等［12］通過對慢性H BV攜帶者、慢性乙型肝炎患者和慢性乙型肝炎肝硬化患者R T區(qū)進(jìn)行克隆和測序分析發(fā)現(xiàn)，H BV準(zhǔn)種復(fù)雜度肝硬化組＞慢性乙型肝炎組＞慢性攜帶者組，三組間有統(tǒng)計學(xué)差異，提示慢性H BV感染過程中免疫清除期比免疫耐受期具有更寬的H BV變異譜，隨著病程延長，H BV準(zhǔn)種越復(fù)雜。以上研究結(jié)果均提示，H BV準(zhǔn)種復(fù)雜程度與疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，復(fù)雜的H BV準(zhǔn)種可能導(dǎo)致病毒持續(xù)感染，進(jìn)一步誘發(fā)肝細(xì)胞損害。

3.2 H BV準(zhǔn)種突變位點(diǎn)分布與H CC的關(guān)系

3.2.1 X基因變異與H CC的關(guān)系 X基因負(fù)責(zé)編碼H BV X蛋白（H B x），它的功能目前還不完全清楚。有文獻(xiàn)表明H B x在H BV感染的持續(xù)和H CC的發(fā)展中起一定作用［13］。X基因區(qū)最常見的突變是發(fā)生在基本核心啟動子區(qū)（BCP）的核苷酸A1762T/G1764A雙突變，它可導(dǎo)致X蛋白羧基功能區(qū)2個密碼子（130、131）發(fā)生改變，氨基酸分別由賴氨酸變?yōu)榈鞍彼幔i氨酸變?yōu)楫惲涟彼幔↘130M和V131I）。有研究表明這些突變可以降低H B e A g的合成，增強(qiáng)H BV-D N A的復(fù)制水平，形成H B e A g陰性的慢性H BV感染，進(jìn)而可能發(fā)展為H CC。目前已報道與 H CC有關(guān)的突變有C1653T、T1753V、C1773T、G1386M、G1613A、A1727G、T1485、B1499、A1757/T1764/G1766和T1766/A1768［14～18］，他們單獨(dú)或聯(lián)合可作為H CC發(fā)生的預(yù)測指標(biāo)。近年來研究發(fā)現(xiàn)增強(qiáng)子Ⅱ/核心啟動子區(qū)域的 T1653、V1753和T1762/A1764突變、基因亞型C2/C e、H BV D N A水平≥4l og10拷貝/m L是H CC發(fā)生的獨(dú)立危險因素［19，20］。

3.2.2 PreC/C基因變異與H CC的關(guān)系 P r e C/C區(qū)基因主要編碼核心蛋白（H B c A g）和e蛋白（H B e A g）。C區(qū)突變并不是隨機(jī)分布，而是聚集在主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ限制區(qū)域，這些突變和H CC顯著相關(guān)。例如C區(qū)氨基酸變異 c P5H/L/T、c D32N/H、c C/E43K、cI9 7F/L、c L100I、c A131G/N/P、c S181H/P、c C/Q182K/s t op、c P50A/H/Y和c E83D，均與H CC發(fā)生有關(guān)［21］。P r e C區(qū)最常見的突變是1 896位核苷酸G突變?yōu)锳，也就是P r e C區(qū)第28位氨基酸發(fā)生G1896A突變，這一過程可產(chǎn)生一個終止密碼子（T AG），妨礙H B e A g的合成［22］。有研究［23］發(fā)現(xiàn)在H B e A g陰性患者體內(nèi)，單核苷酸替換G1896A與H CC進(jìn)展有關(guān)，而在H B e A g陽性患者體內(nèi)，單核苷酸替換G1899A與H CC進(jìn)展有關(guān)。Z hang等［22］通過對192名慢性乙型肝炎病毒患者的全基因進(jìn)行研究，證實(shí)G1896A突變是導(dǎo)致疾病發(fā)展的一個重要因素，G1776A突變會導(dǎo)致H B e A g陰性和高病毒載量，這種患者發(fā)展為肝硬化和H CC的概率更高。此外C1913A或C1914T、A2149C/T、A2188T/C、C2198A、C2444A/T突變已被報道與H CC密切相關(guān)［21］。

3.2.3 P基因變異與H CC的關(guān)系 P基因編碼病毒H BV D N A聚合酶/逆轉(zhuǎn)錄酶。P基因區(qū)最常見的突變是Y M DD突變。Y M DD突變主要由拉米夫定引起，常常是蛋氨酸（M）被異亮氨酸（I）或纈氨酸（V）取代，即Y M DD突變?yōu)閅 I DD或Y V DD而引起嚴(yán)重肝臟病變。H o s a k a等［24］研究發(fā)現(xiàn)，與拉米夫定有關(guān)的Y M DD突變是H CC的獨(dú)立危險因素。另有研究［25］已在肝硬化和H CC患者中檢測到自發(fā)型Y M DD突變，且H CC患者較肝硬化患者發(fā)生自發(fā)型Y M DD突變率更高。

3.2.4 PreS1/S2/S基因變異與H CC的關(guān)系 基因組S區(qū)被劃分為S、P r e S1和P r e S2三個區(qū)域，主要功能為編碼H BsA g。近年來在韓國男性H CC患者P r e S1區(qū)發(fā)現(xiàn)W4P/R突變的存在［26］。目前發(fā)現(xiàn)某些前S基因缺失株（P r e S1缺失、P r e S2缺失）的累積，可發(fā)生肝臟損害甚至H CC［27］。K ao等［28］研究發(fā)現(xiàn)H CC患者P r e S缺失發(fā)生率明顯高于慢性攜帶者，其主要聚集在C-末端P r e S1和N-末端P r e S2序列。此外，已證實(shí)T770C突變（基因庫編碼A Y206393）與H CC進(jìn)展明顯有關(guān)。

4 展望

對H BV準(zhǔn)種的深入研究使我們從患者體內(nèi)整個病毒群體水平上認(rèn)識H BV的生物學(xué)特性和意義，使研究者對H BV的認(rèn)識更加全面。通過研究“肝炎-肝癌”疾病各階段演變過程中H BV準(zhǔn)種的動態(tài)變化及致癌優(yōu)勢株的存在情況，有望為肝癌篩查中高危人群地確定提供新的思路。在抗H BV治療前用高靈敏的方法檢測個體病毒準(zhǔn)種的組成，尤其進(jìn)行耐藥病毒株的檢測，對臨床制定有效的個體化抗病毒治療方案有指導(dǎo)意義。對慢性乙型肝炎患者，可以通過檢測患者體內(nèi)病毒準(zhǔn)種的組成，與已檢測出的H CC高危突變株作對比，以便早期檢測出致癌優(yōu)勢株，進(jìn)行早期干預(yù)、早期治療，改善患者預(yù)后，提高生存質(zhì)量。

［1］ 鄭榮壽，左婷婷，曾紅梅，等.中國肝癌死亡狀況與生存分析［J］.中華腫瘤雜志，2015，37（9）：697-702.

［2］ L up b e r ge r J，H i ldt E.H epa t i t i s B v i r u s-in d u c e d on c ogene s i s［J］. W o rld J G a s tr oen t e r o l，2007，13（1）：74-81.

［3］ 張磊，張淑云.乙型肝炎病毒的基因變異及其臨床意義［J］.世界華人消化雜志，2012，20（18）：1644-1652.

［4］ 劉輝，歐啟水.乙型肝炎病毒準(zhǔn)種特點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)診斷［J］.醫(yī)學(xué)綜述，2012，18（10）：1539-1542.

［5］ R o dr igue z-F r ia s F，B u t i M，T a b e r ne r o D，e t a l.Q ua s i s pe c ie s s tr u ct u r e，c o r ne r s t one o f hepa t i t i s B v i r u s in f e ct ion：ma ss s e q uen c ing app r oa c h［J］.W o rld J G a s tr oen t e r o l，2013，19（41）：6995-7023.

［6］ Domingo E，G ome z J.Q ua s i s pe c ie s an d i t s impa ct on v i r a l hepa t i t i s［J］. V i r u s R e s，2007，127（2）：131-150.

［7］ Daha r i H，S hu d o E，R i b ei r o RM，e t a l.M o d e l ing c omp l e x d e c ay p r of i l e s o f hepa t i t i s B v i r u s d u r ing an t i v i r a l t he r apy［J］.H epa t o l ogy，2009，49（1）：32-38.

［8］ C ao L，W u C，S hi H，e t a l.C oe x i s t en c e o f hepa t i t i s B v i r u s q ua s i spe c ie s enhan c e s v i r a l r ep l i c a t ion an d t he a b i l i t y t o in d u c e ho s t an t ib o d y an d c e ll u l a r immune r e s pon s e s［J］.J V i r o l，2014，88（15）：8656-8666.

［9］ M a t he t VL，F(xiàn) e ld M，Es pino l a L，e t a l.H epa t i t i s B v i r u s S gene mut an t s in a pa t ien tw i t h c h r oni c a ct i v e hepa t i t i s w i t h c i rc u l a t ing A n t i-H Bs an t i b o d ie s［J］.J M e d V i r o l，2003，69（1）：18-26.

［10］劉霖，王宇明，蘭林，等.慢性乙型肝炎急性發(fā)作患者血清病毒準(zhǔn)種動力學(xué)研究［J］.中華肝臟病雜志，2006，14（1）：29-32.

［11］溫志立，譚德明，彭仕芳，等.熔點(diǎn)曲線法研究乙型肝炎病毒準(zhǔn)種和臨床表現(xiàn)的關(guān)系［J］.中華肝臟病雜志，2006，14（1）：19-22.

［12］姚碧蓮，劉峰，黃素園，等.乙型肝炎病毒感染不同狀態(tài)下血清病毒R T區(qū)準(zhǔn)種特點(diǎn)及其臨床意義［C］.新發(fā)和再發(fā)傳染病防治熱點(diǎn)研討會論文集.2011.

［13］Yu H，Z hu R，Z hu Y Z，e t a l.E ff e ct s o f mu t a t ion s in t he X geneo f hepa t it i s B v i r u s on t he v i r u s r ep l i c a t ion［J］.A ct a V i r o l，2012，56（2）：101-110.

［14］C hui S H，C hen J H，Sz e t o Y T，e t a l.P r e v a l en c e o f hepa t i t i s B genot ype an d v i r a l b a s i c c o r e p r omo t e r an d p r e c o r e mu t a t ion s among t eenage r s in M a c ao：r e l a t ion s hip w i t h hepa t o c e ll u l a r c a rc inoma d ev e l opmen t［J］.B r J B iome d S c i，2011，68（3）：143-146.

［15］C hoi C S，C ho E Y，P a rk R，e t a l.X genemu t a t ion s in hepa t i t i s B pat ien t s w i t h c i rr ho s i s，w i t h an d w i t hou t hepa t o c e ll u l a r c a rc inoma［J］.J M e d V i r o l，2009，81（10）：1721-1725.

［16］ K han A，A I B a lw i MA，T ana k a Y，e t a l.N o v e l poin t mu t a t ion s an d mu t a t iona l c omp l e x e s in t he enhan c e r II，c o r e p r omo t e r an d p r e c o r e r egion s o f hepa t i t i s B v i r u s geno t ype D1 a ss o c ia t e d w i t h hepa t o c e ll ul a r c a rc inoma in S au d i A r a b ia［J］.I n t J C an c e r，2013，133（12）：2864-2871.

［17］K i t a b B，Ess ai d E I F ey d i A，A f i f i R，e t a l.V a r ia b i l i t y in t he p r e c o r e an d c o r e p r omo t e r r egion s o f H BV s tr ain s in M o r o cc o：c ha r a ct e r i z at ion an d impa ct on l i v e r d i s ea s e p r og r e ss ion［J］.P L o S One，2012，7（8）：e42891.

［18］Q u L S，L iu TT，Jin F，e t a l.C om b ine d p r e-S d e l e t ion an d c o r e p r omo te r mu t a t ion s r e l a t e d t ohepa t o c e ll u l a r c a rc inoma：A ne s t e d c a s e-c on tr o l s t u d y in C hina［J］.H epa t o l R e s，2011，41（1）：54-63.

［19］T ana k a Y，M u k ai d e M，O r i t o E，e t a l.S pe c i f i c mu t a t ion s in enhan c e r II/c o r e p r omo t e r o f hepa t i t i s B v i r u s s u b geno t ype s C1/C2 in cr ea s e t he r i s k o f hepa t o c e ll u l a r c a rc inoma［J］.J H epa t o l，2006，45（5）：646-653.

［20］Yuen MF，T ana k a Y，S hin k ai N，e t a l.R i s k f o r hepa t o c e ll u l a r c a rc inoma w i t h r e s pe ct t o hepa t i t i s B v i r u s geno t ype s B/C，s pe c i f i c mu t at ion s o f enhan c e r II/c o r e p r omo t e r/p r e c o r e r egion s an d H BV D N A l e v e l s［J］.G u t，2008，57（1）：98-102.

［21］K im D W，L ee S A，H w ang E S，e t a l.N a t u r a ll y o cc u rr ing p r e c o r e/c o r e r egion mu t a t ion s o f hepa t i t i s B v i r u s geno t ype C r e l a t e d t o hepa t oc e ll u l a r c a rc inoma［J］.P L o S O ne，2012，7（10）：e47372.

［22］ Z hang D，M a S，Xin Z，e t a l.P r e v a l en t H BV poin t mu t a t ion s an d mu t a t ion c om b ina t ion s a t BCP/p r e C r egion an d t hei r a ss o c ia t ion w i t h l i v e r d i s ea s e p r og r e ss ion［J］.B m c I n f e ct iDi s，2010，10（38）：271-271.

［23］ Z heng JX，Z eng Z，Z heng YY，e t a l.R o l e o f hepa t i t i s B v i r u s b a s e c o r ean d p r e c o r e/c o r e p r omo t e r mu t a t ion s on hepa t o c e ll u l a r c a rc inoma in un tr ea t e d o ld e r geno t ype C C hine s e pa t ien t s［J］.J V i r a l H epa t，2011，18（10）：423-431.

［24］H o s a k a T，S u z u k i F，K o b aya s hi M，e t a l.De v e l opmen t o f H CC in pat ien t s r e c ei v ing a d e f o v i r d ipi v o x i l f o r l ami v u d ine-r e s i s t an t hepa t i t i s B v i r u s mu t an t s［J］.H epa t o l R e s，2010，40（2）：145-152.

［25］Yang J H，Z hang H，C hen X B，e t a l.R e l a t ion s hip b e tw een hepa t o c e ll u l a r c a rc inoma an d hepa t i t i s B v i r u s geno t ype w i t h s pon t aneou s Y M DD mu t a t ion s［J］.W o rld J G a s tr oen t e r o l，2013，19（24）：3861-3865.

［26］ L ee S A，K im K J，K im D W，e t a l.M a l e-s pe c i f i c W4P/R mu t a t ion in t he p r e-S1 r egion o f hepa t i t i s B v i r u s，in cr ea s ing t he r i s k o f p r og r e ss ion o f l i v e r d i s ea s e s in c h r oni c pa t ien t s［J］.J C l in M i cr o b io l，2013，51（12）：3928-3936.

［27］ L iao Y，H u X，C hen J，e t a l.P r e c o r e mu t a t ion o f hepa t i t i s B v i r u s may c on tr i b u t e t o hepa t o c e ll u l a r c a rc inoma r i s k：e v i d en c e fr om an up d a t e d me t a-ana l y s i s［J］.P L o S O ne，2012，7（6）：e38394-e38394.

［28］ K ao J H，L iu C J，Jo w GM，e t a l.F ine mapping o f hepa t i t i s B v i r u s p r e-S d e l e t ion an d i t s a ss o c ia t ion w i t h hepa t o c e ll u l a r c a rc inoma［J］. L i v e r I n t，2012，32（9）：1373-1381.

［2016-06-20收稿］［2016-07-12修回］［編輯 江德吉］

R735.7

A

1674-5671（2016）04-14

10.3969/j.issn.1674-5671.2016.04.13

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81260319）；廣西高?？茖W(xué)技術(shù)研究資助項(xiàng)目（KY2015ZD025）

鄧偉。E-mail：9608946@qq.com