miRNA與多發(fā)性硬化的研究進展

楊挺嘉　殷旭華　丁楓

miRNA與多發(fā)性硬化的研究進展

楊挺嘉殷旭華丁楓

010059內(nèi)蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科〔楊挺嘉(現(xiàn)為內(nèi)蒙古醫(yī)科大學2013級在讀研究生)、殷旭華〕；010059內(nèi)蒙古醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院(丁楓)

摘要:micro RNA(miRNA)是一類長度約為19～25個核苷酸的非編碼單鏈RNA分子，通常在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控靶基因的降解或抑制翻譯。越來越多的證據(jù)表明，miRNA可通過靶向免疫系統(tǒng)中關鍵信號轉(zhuǎn)導分子的表達，從而在多個環(huán)節(jié)上參與調(diào)控機體的固有免疫反應和適應性免疫反應。多發(fā)性硬化(multiple sclerosis，MS)是一種累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的自身免疫性疾病，最近研究發(fā)現(xiàn)，多種miRNA在介導MS致病過程中起關鍵作用。本文就miRNA 在T細胞分化和發(fā)育以及在MS中的作用進行綜述。

關鍵詞:多發(fā)性硬化；微RNAs；T淋巴細胞

多發(fā)性硬化(multiple sclerosis，MS)是以中樞神經(jīng)系統(tǒng)白質(zhì)炎性脫髓鞘病變?yōu)橹饕攸c的自身免疫病，是青年人非創(chuàng)傷性神經(jīng)殘疾的首要原因。在致病性和分子遺傳水平，MS有5個主要的、相互作用的特征：(1)MS的嚴重性與進行性脫髓鞘的程度相關；(2)MS的特征包括軸索腫脹和巨噬細胞活化；(3)T細胞介導的炎性反應，觸發(fā)免疫細胞釋放促炎性細胞因子，如白細胞介素-1β(IL-1β)；(4)血-腦脊液屏障通透性改變；(5)促炎性的micro RNA(miRNA)和相關致病生物標志物增加[1-3]。MS的發(fā)病機制涉及復雜的遺傳、表觀遺傳、微生物和/或環(huán)境因素，最近研究發(fā)現(xiàn)，中樞神經(jīng)系統(tǒng)的miRNA有潛在的誘導作用[2]。本文就miRNA 在T細胞分化和發(fā)育以及在MS中的作用進行綜述。

1miRNA的功能

miRNA是一類由19～25個核苷酸組成的小的非編碼RNA，可以調(diào)節(jié)基因表達。估計約33%的人類基因由miRNA調(diào)節(jié)，一個miRNA可以潛在調(diào)節(jié)多個mRNA靶基因(平均200個)，一個基因也可以受多個miRNA調(diào)控，由此形成龐大的調(diào)控網(wǎng)絡。目前已確定的人miRNA超過1500個(http://www.mirbase.org)，它們與一些主要的疾病相關聯(lián)，如自身免疫性疾病和癌癥。miRNA在免疫細胞中高度表達[4]，并參與固有免疫應答和適應性免疫應答[5]。據(jù)報道，miRNA是維持免疫耐受的關鍵,在miRNA的合成過程中，Dicer酶和Drosha酶的缺失可以導致T細胞的異常和自身免疫性疾病[6]。在不同的免疫細胞亞群中，miRNA的轉(zhuǎn)錄不同，表明初始、效應和記憶性T細胞[7]以及調(diào)節(jié)性T細胞的功能[6]依賴于miRNA調(diào)控。重要的是，miRNA能夠通過細胞旁分泌形式表達，并在許多不同的生物體液(腦脊液、血清、尿液和唾液)中被檢測出來[8]。

2miRNA 調(diào)控T 細胞活化與MS 的發(fā)病機制

越來越多的研究表明，CD4+T 作為效應 T細胞的主要成分，其介導的自身免疫反應在MS發(fā)病過程中發(fā)揮關鍵作用。經(jīng)典免疫學將 CD4+T 細胞分為Th1 和 Th2 兩個亞群。Th1細胞主要分泌干擾素-γ(IFN-γ)等細胞因子，介導細胞免疫，具有清除細胞內(nèi)病原微生物、抗腫瘤等作用；Th2 細胞主要分泌 IL-4 等細胞因子介導體液免疫，參與清除細胞外病原微生物及變態(tài)反應。IFN-γ和IL-4相互拮抗，調(diào)控 Thl 和Th2細胞的分化。Th17 細胞是近年來發(fā)現(xiàn)的一種新型的CD4+T 細胞亞群，能夠特異性地產(chǎn)生IL-17。雖然已發(fā)現(xiàn)許多miRNA在MS中表達失調(diào)，但只有部分miRNA的功能被闡述，下面就目前已知的一些 miRNA 在T細胞的分化和發(fā)育以及在MS中的作用做相關闡述。

2.1miR-30a miR-30a基因位于人染色體 6q13。研究發(fā)現(xiàn)，在 MS和實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)動物模型(為研究MS的理想動物模型)急性發(fā)病期，miR-30a 表達水平下降，IL-17的表達水平升高，兩者呈負相關；而在EAE小鼠體內(nèi)過量表達 miR-30a時，EAE小鼠病情則緩解，表明miR-30a 可能調(diào)控Th17 分化過程中相關重要轉(zhuǎn)錄因子的表達。研究發(fā)現(xiàn)，細胞因子信號傳導抑制蛋白1(SOCS1)和干擾素調(diào)節(jié)因子4(IRF4)均參與調(diào)控Th17 細胞的分化[9-10]。SOCS1主要通過抑制JAK-STAT信號通路發(fā)揮作用[11]，缺失SOCS1的CD4+T 細胞主要分化為Th1，少數(shù)分化為Th17[9]。文獻報道，體外誘導Th17 分化過程中，IRF4 是IL-6和轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)介導Th17細胞分化通路中的必需成分[10]。體內(nèi)敲除IRF4的小鼠不易誘導形成 EAE。通過microRNA靶基因預測軟件發(fā)現(xiàn)，SOCS1和IRF4這兩個分子的 3′非編碼區(qū)堿基序列可以與 miR-30a 的序列通過堿基互補配對，阻斷或降低SOCS1和IRF4的表達，減少體內(nèi)炎性反應，對EAE發(fā)病起拮抗作用。增加內(nèi)源性miR-30a的表達可作為治療MS新的潛在方法。

2.2miRNA-146a miRNA-146a位于人染色體5q33.3，由22個核苷酸組成(5′-UGAGAACUGAAUUCCAUGGGUU-3′；59%A+U；NCBI基因ID：406938)，是一種迅速誘導的、促炎性反應的miRNA，在人中樞神經(jīng)系統(tǒng)中具有相對較短的半衰期(約1.5～2.0 h)[12]。研究發(fā)現(xiàn)腦內(nèi)皮細胞中的miR-146a通過抑制多個基因來抑制核轉(zhuǎn)錄因子kappa B(NF-κB)活化并負調(diào)節(jié)T細胞的黏附。NF-κB可驅(qū)動細胞黏附分子、趨化因子和促炎性細胞因子轉(zhuǎn)錄，在一些自身免疫疾病如MS中發(fā)揮核心作用[13]。NF-κB不僅啟動編碼蛋白質(zhì)的基因轉(zhuǎn)錄，也驅(qū)動pre-miRNA的表達，pre-miRNA可反饋調(diào)節(jié)NF-κB的活性[14]。miR-146a是一個NF-κB依賴性基因，并且通過抑制人單核細胞中腫瘤壞死因子受體相關因子6(TRAF6)和白細胞介素-1受體相關激酶1(IRAK1)的信號轉(zhuǎn)導下調(diào)NF-κB的活性[15]。在培養(yǎng)的腦、臍靜脈或視網(wǎng)膜的內(nèi)皮細胞中，抑制NF-κB的活性可降低腫瘤壞死因子-α(TNF-α)誘導滲透性和/或白細胞遷移[16]。在體內(nèi)，用試劑阻斷NF-κB的活性可減少MS的發(fā)病率和EAE的臨床評分[17]。研究表明，內(nèi)皮細胞的miR-146a抑制NF-κB活化可減少Jurkat T-細胞和初級T-細胞黏附到腦血管內(nèi)皮細胞，從而對MS及EAE疾病的發(fā)展產(chǎn)生影響[18]。增加內(nèi)源性的miRNA-146a可能作為治療MS新的潛在方法。

2.3miR-873 通過采用miRNA芯片和RT-PCR方法，在EAE模型小鼠和經(jīng)IL-17刺激3 h后的星形膠質(zhì)細胞中，有11種miRNA有不同程度的上調(diào)，其中以miR-873的上調(diào)最為顯著，它能明顯抑制A20(TNF-induced protein3, TNFAIP3)的表達并能降低野生型重組A20 3′-UTR熒光素酶的活性。用熒光素酶報告基因技術和Western blot檢測EAE模型小鼠和IL-17刺激3 h后的星形膠質(zhì)細胞發(fā)現(xiàn)，miR-873可直接靶向調(diào)節(jié)A20 mRNA，并顯著抑制A20蛋白表達[19]。

A20是一個具有雙重功能的泛素編輯蛋白，可負調(diào)節(jié)NF-κB驅(qū)動基因的表達，是炎性反應調(diào)控的中心，與一些嚴重的自身免疫病有關，包括MS[20]。A20缺陷小鼠過早死于自發(fā)多器官炎性反應和惡變。沉默A20基因可明顯加重EAE小鼠腦和脊髓組織病變。NF-κB驅(qū)動星形膠質(zhì)細胞活化可使EAE病程加重[21]。在IL-6和IL-17的刺激下，星形膠質(zhì)細胞中趨化因子表達增多，以募集T細胞到中樞神經(jīng)系統(tǒng)中[22]。在IL-17的刺激下鼠原代星形膠質(zhì)細胞中miR-873顯著上調(diào)，miR-873的過度表達可抑制A20蛋白的表達，促進NF-κB的磷酸化，導致體內(nèi)、外炎性反應因子和趨化因子如IL-6、TNF-α、巨噬細胞炎癥蛋白-2(MIP-2)、單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)和單核細胞趨化蛋白-5(MCP-5)增多[19]。更重要的是，在體內(nèi)抑制內(nèi)源性miR-873可明顯減輕炎性反應和脫髓鞘，改善EAE進程。miR-873能夠通過影響A20的表達和NF-κB的活化調(diào)控由IL-17刺激的星形膠質(zhì)細胞IL-6、TNF-α、MIP-2和MCP-1/5的表達，從而對MS及EAE疾病的發(fā)展產(chǎn)生影響[19]。

2.4miR-155 miR-155位于人染色體21q21.3，由23個核苷酸組成(5′-UUAAUGCUAA-UCGUGAUAGGGGU-3′；61%A+U；NCBI：AF402776)，是一個在NF-κB調(diào)控下轉(zhuǎn)錄誘導的miRNA[23]。在炎性細胞因子的刺激下，miR-155在淋巴細胞(包括B細胞和T細胞)中高度表達，并且最新的證據(jù)表明它在固有免疫應答和免疫適應性應答中有重要作用[24]。研究發(fā)現(xiàn)miRNA-155在相關免疫病理狀態(tài)中(包括MS、唐氏綜合征、類風濕性關節(jié)炎和系統(tǒng)性紅斑狼瘡)均上調(diào)，進而影響T淋巴細胞和血-腦脊液屏障的功能[25]。研究發(fā)現(xiàn)，隨EAE的進展，miR-155在脾、淋巴結(jié)和大腦中表達顯著增加，并且敲除miR-155的小鼠CNS炎性反應和EAE的發(fā)病程度顯著減輕[26]。miR-155的作用機制：(1)作用于CD47 3′-UTR，促使腦細胞CD47表達下調(diào)，觸發(fā)巨噬細胞介導的髓鞘吞噬作用[27]；(2)誘導Th1細胞亞群和Th17細胞的分化[1,24]。最近研究表明，抑制miR-155的表達可抑制Th1和Th17細胞的分化，導致EAE疾病嚴重程度降低[28]；抗miR-155治療可顯著抑制EAE病情進展[1,24]。因此，抑制miR-155的表達可能成為MS潛在的治療靶點。

2.5miR-132/212簇 miR-132和miR-212在脊椎動物中有著相似且高度保守的序列，位于人染色體17p13.3，在基因組中呈現(xiàn)串聯(lián)排列，稱為miR-132/212基因簇。最近研究表明，miR-132/212簇在Th17分化和EAE的發(fā)病中起重要作用。miR-132/212簇的表達取決于芳香烴受體(arylhydro-carbon receptor，AHR)。某些研究表明，AHR通過調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)和Th17細胞的平衡，在自身免疫性疾病如EAE中起關鍵作用[29]。研究發(fā)現(xiàn)，AHR活化誘導miR-132/212簇的產(chǎn)生，并且增加AHR介導的Th17細胞產(chǎn)生，miR-132/212群集和AHR形成一個正反饋環(huán)路[30]。miR-132/212群集在神經(jīng)元的高度表達受轉(zhuǎn)錄因子環(huán)磷腺苷效應元件結(jié)合蛋白(CREB)調(diào)控，cAMP激活AHR，導致AHR易位進入細胞核[31]。研究結(jié)果顯示CREB和AHR信號之間相互作用，誘導miR-132/212產(chǎn)生[30]。研究發(fā)現(xiàn)miR-132/212簇缺乏可降低Th1和Th17細胞的比例，抑制EAE的發(fā)展。研究表明內(nèi)源性的AHR激動劑可誘導miR-132/212簇在T細胞的表達，促進Th17細胞的分化可導致EAE疾病發(fā)展[30]。因此，作為AHR信號的下游調(diào)節(jié)信號，抑制miR-132/212簇可阻斷Th17細胞生成，可能成為潛在的MS治療靶點。

2.6其他 Lindberg等[32]比較了365例在復發(fā)緩解型多發(fā)性硬化(RRMS)患者及健康志愿者外周血CD4+、CD8+T細胞和B細胞中miRNA的表達，其中miR-17-5p、miR-193a和miR-497在MS患者中表達失調(diào)，特別是miR-17-5p在MS患者CD4+T細胞中表達上調(diào)。miR-17-5p屬于 miR-17-92簇，在自身免疫性疾病和淋巴增殖性疾病的小鼠發(fā)病中起重要作用。miR-193a可調(diào)控caspase級聯(lián)反應活化[33]，在MS患者CD4+T細胞中比例失調(diào)。此外， miR-497在CD4+T細胞和B細胞中表達上調(diào)，但在MS患者與對照組的CD8+T細胞中表達下調(diào)[34]。

Petrocca等[35]通過測試723名人的miRNA發(fā)現(xiàn)，miR-106、miR-25、miR-19a和miR-19b在MS患者及對照組的Treg細胞中顯著上調(diào)。這些miRNA通過沉默CDKN1A(p21)和BCL2L11(BIM)調(diào)節(jié)TGF-β信號傳導通路。推測維持自身免疫耐受和T淋巴細胞穩(wěn)態(tài)的TGF-β信號轉(zhuǎn)導通路破壞可能是miRNA促進MS發(fā)展的方式之一。Guerau-de-Arellano等[36]研究發(fā)現(xiàn)，miR-128和miR-27b的表達在初始CD4+T細胞中表達增加，而miR-340在MS患者的記憶性CD4+T細胞中表達增加。研究表明，失調(diào)的miRNA通過抑制原癌基因BMI-1和IL-4抑制Th2細胞途徑，其過度表達可在MS患者中促進Th1細胞免疫應答和自身免疫的發(fā)展。

3miRNA的治療潛力

目前，有關MS的治療研究取得新的進展，即以一種特定的miRNA為目標調(diào)控致病基因表達。如通過使用和轉(zhuǎn)入修飾的寡核苷酸類似物抑制特定的miRNA可能成為治療MS最有前景的方法之一。有研究結(jié)果顯示[37]，鎖核酸(locked nucleic acid，LNA)可能勝任這個目的，因為它是一個構(gòu)象鎖定的核苷酸類似物，且能夠耐受核酸酶活性。然而，研究者們面臨一個重要的問題是如何有效傳遞這些分子進入生物體，尤其在神經(jīng)障礙性疾病，遞送修飾的寡核苷酸穿過血-腦脊液屏障仍有相對難度。最近一些學者的研究方向已經(jīng)轉(zhuǎn)向利用小分子藥物影響 miRNA的生物合成或功能[38]。檢測生物體液(血漿、血清和血液)中異常的miRNA表達水平，可能是MS的新的生物標志物，它可能有助于疾病預后的評估和臨床亞型的鑒別，從而有助于治療決策或者療效監(jiān)測。miRNA作為MS新的治療目標有很大的研究價值和開發(fā)空間。

參考文獻：

[1]Kü?ükali Ci, Kürtüncü M, ?oban A, et al. Epigenetics of multiple sclerosis: an updated review[J]. Neuromolecular Med,2015,17(2):83-96.

[2]Ma X, Zhou J, Zhong Y, et al.Expression, regulation and function of microRNAs in multiple sclerosis[J]. Int J Med Sci,2014,11(8):810-818.

[3]Sturm D, Gurevitz SL, Turner A. Multiple sclerosis: a review of the disease and treatment options[J]. Consult Pharm，2014,29(7):469-479.

[4]Guerau-de-Arellano M, Alder H, Ozer HG,et al. miRNA profiling for biomarker discovery in multiple sclerosis: from microarray to deep sequencing[J]. J Neuroimmunol,2012,248(1-2):32-39.

[5]O’Connell RM,Rao DS,Chaudhuri AA,et al.Physiological and pathological roles for microRNAs in the immune system[J].Nat Rev Immunol,2010,10(2):111-122.

[6]Liston A, Lu LF, O’Carroll D, et al. Dicer-dependent microRNA pathway safeguards regulatory T cell function[J]. J Exp Med,2008,205(9):1993-2004.

[7]Wu H, Neilson JR, Kumar P, et al. miRNA profiling of naive, effector and memory CD8 T cells[J]. PLoS One,2007,2(10):e1020.

[8]Moreno-Moya JM, Vilella F, Simón C. MicroRNA: key gene expression regulators[J]. Fertil Steril, 2014,101(6):1516-1523.

[9]Jager LD, Dabelic R, Waiboci LW. et al. The kinase inhibitory region of SOCS-1 is sufficient to inhibit T-helper 17 and other immune functions in experimental allergic encephalomyelitis[J]. J Neuroimmunol,2011,232(1-2):108-118.

[10]Huber M, Brüstle A, Reinhard K, Et al. IRF4 is essential for IL-21-mediated induction, amplification,and stabilization of the Th17 phenotype[J].Proc Natl Acad Sci USA, 2008, 105(52):20846-20851.

[11]Liu X, Leung S, Wang C. et al. Crucial role of interleukin-7 in T helper type 17 survival and expansion in autoimmune disease[J]. Nat Med,2010,16(2):191-197.

[12]Sethi P, Lukiw WJ. Micro-RNA abundance and stability in human brain: specific alterations in Alzheimer’s disease temporal lobe neocortex[J]. Neurosci Lett, 2009,459(2):100-104.

[13]Yan J, Greer JM. NF-kappa B, a potential therapeutic target for the treatment of multiple sclerosis[J]. CNS Neurol Disord Drug Targets,2008,7(6):536-557.

[14]Boldin MP, Baltimore D. MicroRNAs, new effectors and regulators of NF-κB[J]. Immunol Rev,2012, 246(1):205-220.

[15]Taganov KD, Boldin MP, Chang KJ. et al. NF-kappaB-dependent induction of microRNA miR-146, an inhibitor targeted to signaling proteins of innate immune responses[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 2006,103(33):12481-12486.

[16]Gonzalez-Velasquez F, Reed JW, Fuseler JW. et al. Activation of brain endothelium by soluble aggregates of the amyloid-β protein involves nuclear factor-κB[J]. Curr Alzheimer Res,2011,8(1):81-94.

[17]Paris D, Beaulieu-Abdelahad D, Mullan M. et al. A melioration of experimental autoimmune encephalomyelitis by anatabine[J]. PLoS One,2013,8(1):e55392.

[18]Wu D, Cerutti C, Lopez-Ramirez MA. et al. Brain endothelial miR-146a negatively modulates T-cell adhesion through repressing multiple targets to inhibit NF-κB activation[J]. J Cereb Blood Flow Metab,2015,35(3):412-423.

[19]Liu X, He F, Pang R. et al.Interleukin-17 (IL-17)-induced microRNA 873 (miR-873) contributes to the pathogenesis of experimental autoimmune encephalomyelitis by targeting A20 ubiquitin-editing enzyme[J]. J Biol Chem,2014,289(42):28971-28986.

[20]Hymowitz SG, Wertz IE. A20: from ubiquitin editing to tumour suppression[J]. Nat Rev Cancer, 2010,10(5):332-341.

[21]Brambilla R, Persaud T, Hu X, et al. Transgenic inhibition of astroglial NF-kappa B improves functional outcome in experimental autoimmune encephalomyelitis by suppressing chronic central nervous system inflammation[J]. J Immunol,2009,182(5):2628-2640.

[22]Meares GP, Ma X, Qin H, et al. Regulation of CCL20 expression in astrocytes by IL-6 and IL-17[J]. Glia,2012,60(5):771-781.

[23]Lu HE, Yang YC, Chen SM, et al. Modeling neurogenesis impairment in Down syndrome with induced pluripotent stem cells from Trisomy 21 amniotic fluid cells[J]. Exp Cell Res,2013,319(4):498-505.

[24]Seddiki N, Brezar V, Ruffin N, et al. Role of miR-155 in the regulation of lymphocyte immune function and disease[J]. Immunology,2014,142(1):32-38.

[25]Kamphuis WW, Derada Troletti C, Reijerkerk A, et al. The blood-brain barrier in multiple sclerosis: microRNAs as key regulators[J]. CNS Neurol Disord Drug Targets,2015,14(2):157-167.

[26]Thamilarasan M, Koczan D, Hecker M, et al. MicroRNAs in multiple sclerosis and experimental autoimmune encephalomyelitis[J]. Autoimmun Rev, 2012,11(3):174-179.

[27]Junker A, Krumbholz M, Eisele S, et al.MicroRNA profiling of multiple sclerosis lesions identifies modulators of the regulatory protein CD47[J]. Brain,2009,132(Pt12):3342-3352.

[28]Zhang J, Cheng Y, Cui W, et al. MicroRNA-155 modulates Th1 and Th17 cell differentiation and is associated with multiple sclerosis and experimental autoimmune encephalomyelitis[J]. J Neuroimmunol, 2014,266(1-2):56-63.

[29]Quintana FJ, Basso AS, Iglesias AH, et al. Control of T(reg) and T(H)17 cell differentiation by the arylhydrocarbon receptor[J]. Nature,2008,453(7191):65-71.

[30]Nakahama T, Hanieh H, Nguyen NT, et al. Aryl hydrocarbon receptor-mediated induction of the microRNA-132/212 cluster promotes interleukin-17-producing T-helper cell differentiation[J]. Proc Natl Acad Sci USA,2013,110(29):11964-11969.

[31]Remenyi J, Hunter CJ, Cole C, et al. Regulation of the miR-212/132 locus by MSK1 and CREB in response to neurotrophins[J]. Biochem J,2010,428(2):281-291.

[32]Xiao C, Srinivasan L, Calado DP, et al. Lymphoproliferative disease and autoimmunity in mice with increased miR-17-92 expression in lymphocytes[J]. Nat Immunol,2008,9(4):405-414.

[33]Ovcharenko D, Kelnar K, Johnson C, et al. Genome-scale microRNA and small interfering RNA screens identify small RNA modulators of TRAIL-induced apoptosis pathway[J]. Cancer Res,2007,67(22):10782-10788.

[34]Lindberg RLP， Hoffmann F，Mehling M，et al. Altered expression of miR-17-5p in CD4+lymphocytes of relapsing-remitting multiple sclerosis patients[J]. Eur J Immunol,2010, 40：888-898.

[35]Petrocca F，Vecchione A，Croce CM. Emerging role of miR-106b-25/miR-17-92 clusters in the control of transforming growth factor beta signaling[J]. Cancer Res,2008, 68：8191-8194.

[36]Guerau-de-Arellano M, Smith KM, Godlewski J, et al. Micro-RNA dysregulation in multiple sclerosis favours pro-inflammatory T-cell-mediated autoimmunity[J]. Brain,2011,134(Pt 12):3578-3589.

[37]Im HI，Kenny PJ. MicroRNAs in neuronal function and dysfunction[J]. Trends Neurosci, 2012, 35:325-334.

[38]Li Y, He C, Jin P. Emergence of chemical biology approaches to the RNAi/miRNA pathway[J]. Chem Biol,2010,17(6):584-589.

(本文編輯：時秋寬)

doi：10.3969/j.issn.1006-2963.2016.01.016

通訊作者：殷旭華，Email：yinxuhua1116@163.com

中圖分類號：R744.5+1

文獻標識碼：A

文章編號：1006-2963 (2016)01-0062-05

(收稿日期：2015-06-16)