紅景天苷對(duì)梗阻性黃疸大鼠的肝保護(hù)作用及機(jī)制探討

張立超，王晨宇，曹慧芳，李濤，馬利鋒，侯森林，康建省，劉懷軍( 河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院，石家莊050000;河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院)

紅景天苷對(duì)梗阻性黃疸大鼠的肝保護(hù)作用及機(jī)制探討

張立超1，王晨宇2，曹慧芳1，李濤1，馬利鋒1，侯森林1，康建省1，劉懷軍1
( 1河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院，石家莊050000;2河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院)

摘要:目的觀察紅景天苷對(duì)梗阻性黃疸大鼠的肝保護(hù)作用，并探討其機(jī)制。方法40只雌性SD大鼠隨機(jī)分為陰性對(duì)照組(陰性組)、陽(yáng)性對(duì)照組(陽(yáng)性組)、低濃度組和高濃度組，每組10只。陰性組行梗阻性黃疸假手術(shù)，其余三組均制備梗阻性黃疸模型;造模24 h后，陰性組和陽(yáng)性組均經(jīng)腹腔注射0.5 mL/100 g生理鹽水，低濃度組和高濃度組分別經(jīng)腹腔注射紅景天苷15、30 mg/100 g，1次/d，均干預(yù)14 d。分別于干預(yù)7、14 d時(shí)，采集腹主動(dòng)脈血檢測(cè)血清谷草轉(zhuǎn)氨酶( AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶( ALT)、直接膽紅素( DBIL)、總膽紅素( TBIL)、丙二醛( MDA)、超氧化物歧化酶( SOD)活性。結(jié)果干預(yù)7、14 d時(shí)各組AST、ALT、DBIL、TBIL、MDA水平均為陽(yáng)性組＞低濃度組＞高濃度組＞陰性組，P均＜0.05;干預(yù)7、14 d時(shí)各組SOD水平均為陽(yáng)性組＜低濃度組＜高濃度組＜陰性組，P均＜0.05。結(jié)論紅景天苷可通過降低氧化應(yīng)激反應(yīng)保護(hù)梗阻性黃疸大鼠的肝功能，且濃度越高作用越強(qiáng)。

關(guān)鍵詞:紅景天苷;梗阻性黃疸;肝功能;氧化應(yīng)激;超氧化物歧化酶;丙二醛

梗阻性黃疸常表現(xiàn)為高膽紅素，高膽紅素的細(xì)胞毒性較強(qiáng)，常導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷。丙二醛( MDA)、超氧化物歧化酶( SOD)是反應(yīng)氧化應(yīng)激的重要指標(biāo)。紅景天苷是紅景天經(jīng)現(xiàn)代化學(xué)分離提取后的主要成分。研究發(fā)現(xiàn)，其在抗腫瘤、增強(qiáng)免疫功能及保護(hù)心血管系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肝腎功能等方面均發(fā)揮重要作用［1］。2012年10月～2014年10月，我們觀察了紅景天苷對(duì)梗阻性黃疸大鼠的肝保護(hù)作用，并探討其機(jī)制。

1　材料與方法

1.1材料8～9周雌性SD大鼠40只(購(gòu)自河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)，體質(zhì)量250～300 g，均予標(biāo)準(zhǔn)飼料、飲水飼喂，維持正常晝夜節(jié)律，適應(yīng)性飼養(yǎng)5 d。AU-2700全自動(dòng)生化分析儀購(gòu)自日本奧林巴斯光學(xué)株式會(huì)社，紅景天苷購(gòu)自上海源葉生物。

1.2分組造模與干預(yù)處理40只大鼠禁食12 h、禁水4 h后隨機(jī)分為陰性對(duì)照組(陰性組)、陽(yáng)性對(duì)照組(陽(yáng)性組)、低濃度組和高濃度組，每組10只。陰性組行假手術(shù): 2%的苯巴比妥100 mg/kg腹腔麻醉大鼠，游離膽總管但不做結(jié)扎。其余三組均制備梗阻性黃疸模型［2］: 2%苯巴比妥100 mg/kg腹腔麻醉大鼠，游離并雙重結(jié)扎膽總管。大鼠清醒后予正常飲水和喂食。陰性組和陽(yáng)性組均經(jīng)腹腔注射生理鹽水0.5 mL/100 g，1次/d。低濃度組和高濃度組分別經(jīng)腹腔注射紅景天苷15、30 mg/100 g，1次/d。各組均干預(yù)14 d。

1.3肝功能與氧化應(yīng)激指標(biāo)觀察分別于干預(yù)7、14 d時(shí)采集各組大鼠腹主動(dòng)脈血1 mL，2 000 r/min離心15 min，取上清，保存?zhèn)溆谩２捎萌詣?dòng)生化分析儀檢測(cè)血清谷草轉(zhuǎn)氨酶( AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶( ALT)、直接膽紅素( DBIL)、總膽紅素( TBIL)水平，采用酶標(biāo)儀檢測(cè)過氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物丙二醛( MDA)、超氧化物歧化酶( SOD)活性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以珋x±s表示，差異顯著性檢驗(yàn)采用one-way ANOVA，并采用LSD、SNK、Duncan法處理組間均數(shù)多重比較;計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

干預(yù)7、14 d時(shí)各組AST、ALT、DBIL、TBIL、MDA水平均為陽(yáng)性組＞低濃度組＞高濃度組＞陰性組，P均＜0.05;干預(yù)7、14 d時(shí)各組SOD水平均為陽(yáng)性組＜低濃度組＜高濃度組＜陰性組，P均＜0.05。見表1。

3　討論

梗阻性黃疸是指因膽總管結(jié)石膽管狹窄或者膽管癌等良、惡性疾病導(dǎo)致的膽管系統(tǒng)阻塞［1～3］，膽汁排泄受阻而導(dǎo)致膽紅素反流入血，最終引起黃疸［4］。由梗阻性黃疸隨之引起的DBIL升高［5］，

表1　干預(yù)7、14 d各組AST、ALT、DBIL、TBIL、MDA、SOD水平比較(±s)

表1　干預(yù)7、14 d各組AST、ALT、DBIL、TBIL、MDA、SOD水平比較(±s)

注:與陰性組比較，*P＜0.05;與陽(yáng)性組比較，#P＜0.05;與低濃度組比較，ΔP＜0.05。

組別　n　ALT( U/L)　AST( U/L)　 DBIL(μmol/L)　 TBIL(μmol/L)　 MDA( nmol/mg)　 SOD( U/mg)陰性組10干預(yù)7 d　47.10±6.02　 107.03±12.02　 5.22±0.92　 7.08±0.75　1.30±0.02　 200.03±21.92干預(yù)14 d　38.35±8.13　 115.46±13.31　 6.91±1.04　 8.21±1.15　1.91±0.13　 199.03±22.01陽(yáng)性組　10干預(yù)7 d　141.23±17.90*　341.78±23.05*　200.13±15.03*　243.89±22.63*　6.41±1.02*　135.33±9.38*干預(yù)14 d　234.12±21.83*　553.18±43.47*　271.89±22.78*　350.18±39.29*　17.72±1.58*　103.30±9.23*低濃度組　10干預(yù)7 d　139.21±13.04* #　270.89±22.87* #172.39±19.93* #　202.51±19.61* #　5.44±0.33* #　140.18±13.54* #干預(yù)14 d　210.43±12.53* #　468.98±32.51* #230.76±21.34* #　310.56±29.21* #　12.21±0.92* #　118.98±11.27* #高濃度組　10干預(yù)7 d　110.89±9.86* #Δ　201.65±21.34* #Δ130.78±28.10* #Δ177.16±13.55* #Δ　4.15±0.32* #Δ　169.98±13.62* #Δ干預(yù)14 d　132.65±8.26* #Δ　358.43±23.01* #Δ189.88±18.54* #Δ252.15±41.23* #Δ　7.50±0.57* #Δ　139.14±18.65* #Δ

可導(dǎo)致肝功能障礙、胃腸黏膜屏障功能障礙［6］、解毒功能障礙和組織愈合能力減弱等［7］。

研究發(fā)現(xiàn)，DBIL可抑制細(xì)胞膜生物功能，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)核酸、核蛋白的合成下降，降低線粒體活化活力，使其能量代謝下降，最后對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用［8，9］。脂質(zhì)和蛋白質(zhì)氧化損傷，是高膽紅素血癥特別是DBIL介導(dǎo)機(jī)體損傷的重要機(jī)制之一［10］。

紅景天屬于景天科多年生草木或灌木植物，中醫(yī)認(rèn)為其可祛邪惡氣、補(bǔ)氣養(yǎng)心、活血清肺、收斂止血。紅景天苷為紅景天屬植物中廣泛存在的酚苷類化合物，有抗疲勞、抗衰老、抗炎鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)、清除自由基等多種藥理作用，已用于心血管病、全腦缺血再灌注損傷的治療中［11，12］。研究發(fā)現(xiàn)，紅景天苷可抑制H2O2對(duì)細(xì)胞的氧化損害，恢復(fù)線粒體的膜電位和膜通透性［13］。MDA是體內(nèi)氧化應(yīng)激反應(yīng)時(shí)脂質(zhì)過氧化的終末產(chǎn)物之一，常用于反映體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度，測(cè)定MDA含量可間接反映氧自由基對(duì)細(xì)胞的損傷程度［14］。而SOD是機(jī)體的抗氧化物質(zhì)，其活力的高低可間接反映機(jī)體清除氧自由基的能力［15］。MDA和SOD在本研究中共同作為氧化應(yīng)激指標(biāo)。而ALT和AST作為急性肝功能損傷的指標(biāo)，TBIL和DBIL作為梗阻性黃疸模型成功建立的指標(biāo)和肝功能損傷指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)，將大鼠膽總管結(jié)扎后出現(xiàn)了肝功能的損傷，并且出現(xiàn)了氧化應(yīng)激損傷，而給予紅景天苷后肝功能及氧化應(yīng)激損傷均明顯好轉(zhuǎn)，說明紅景天苷可通過抵抗氧化應(yīng)激損傷保護(hù)肝功能，其具體機(jī)制可能與其清除自由基、降低脂質(zhì)過氧化作用、降低酸性磷酸酶活性，促進(jìn)DNA合成，提高巨噬細(xì)胞吞噬功能等作用相關(guān)，但具體分子機(jī)制需進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn):

［1］Kawano H，Minagawa K，Wakahashi K，et al.Successful management of obstructive jaundice due to gallstones with eculizumab in a patient with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria［J］.Intern Med， 2012，51( 18) : 2613-2616.

［2］Peter G，Shaheer R，Narayanan P，et al.Hepatic artery aneurysm: a rare case of obstructive jaundice with severe hemobilia ［J］.Ann Gastroenterol，2014，27( 3) : 288-289.

［3］Xin KY，Yee LS，Yong TT，et al.Obstructive jaundice due to intraductal tumour thrombus in recurrent hepatocellular carcinoma: What is the optimal therapeutic approach［J］.Hepatogastroenterology，2014，61( 135) : 1863-1866.

［4］Wang L，Yu WF.Obstructive jaundice and perioperative management［J］.Acta Anaesthesiol Taiwan，2014，52( 1) : 22-29.

［5］Elton NW.The van den bergh reaction［J］.Am J Clin Pathol，1950，20( 10) : 901-914.

［6］Aydin S，Aytac E，Uzun H，et al.Effects of ganoderma lucidum on obstructive jaundice-induced oxidative stress［J］.Asian J Sur，2010，33( 4) : 173-180.

［7］Smirnova NG，Chefu SG，Kovalenko AL，et al.effect of hepatoprotector remaxol infusion on liver function in obstructive jaundice model in rats［J］.Eksp Klin Farmakol，2010，73( 9) : 24-27.

［8］Silina EV，Stupin VA，Gakhramanov TV，et al.oxidative stress in patients with mechanical jaundice of different origin and severity ［J］.Klin Med ( Mosk)，2011，89( 3) : 57-63.

［9］Zhao JM，Zhang L，Du QW，et al.analyse related factors of impact and prognosis of 73 cases of severe hepatitis［J］.Chi J Exp Clin Viro，2013，27( 5) : 366-369.

［10］Greene MW，Burrington CM，Lynch DT，et al.Lipid metabolism，oxidative stress and cell death are regulated by pkc delta in a dietary model of nonalcoholic steatohepatitis［J］.PLoS One，2014，9 ( 1) : 85848.

［11］郭娜，盛后財(cái)，金星，等.紅景天苷提取工藝研究進(jìn)展［J］.北方園藝，2015( 8) : 190-193.

［12］楊愛榮.紅景天苷對(duì)人惡性黑色素瘤細(xì)胞a375增殖和凋亡的影響［J］.山東醫(yī)藥，2014，54( 13) : 10-12.

［13］Xu MC，Gao XF，Ruan C，et al.Mir-103 regulates oxidative stress by targeting the bcl2/adenovirus e1b 19 kda interacting protein 3 in huvecs［J］.Oxid Med Cell Longev，2015，15( 48) : 9647.

［14］Start C.Some valuable lessons we＇ve learned from mda members ［J］.J Mich Dent Assoc，2011，93( 9) : 24.

［15］Yuan Y，Wu SJ，Liu X，et al.Antioxidant effect of salidroside and its protective effect against furan-induced hepatocyte damage in mice［J］.Food funct，2013，4( 5) : 763-769.

·臨床研究·

收稿日期:( 2015-01-27)

文章編號(hào):1002-266X( 2015) 30-0032-02

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

中圖分類號(hào):R735.8

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2015.30.012