普伐他汀對高脂血癥小鼠抗疲勞功能的影響

劉海霞

普伐他汀對高脂血癥小鼠抗疲勞功能的影響

劉海霞

[摘要]目的建立高脂血癥小鼠模型，觀察普伐他汀對高脂血癥小鼠抗疲勞功能的影響。方法取90只昆明雄性清潔級小鼠，隨機分為正常對照組、高脂模型組和普伐他汀組，每組30只。后2組采用高脂飲食飼料喂養(yǎng)6周制備高脂血癥小鼠模型。造模成功后，普伐他汀組給予普伐他汀10 mg/(kg·d)，對小鼠連續(xù)灌胃6周；對照組、高脂模型組給予蒸餾水灌胃。使用ZB-200疲勞轉棒儀對小鼠進行疲勞實驗，分別記錄三組小鼠的落棒時間。結果高脂模型組落棒時間明顯短于正常對照組(P<0.01)，普伐他汀組落棒時間明顯短于正常對照組和高脂模型組(P<0.01)。結論普伐他汀在有效降血脂的同時，可導致小鼠疲倦和勞力性疲勞等不良反應。

[關鍵詞]普伐他??；高脂血癥；抗疲勞

[Abstract]ObjectiveTo establish the hyperlipidemia model mice,observe the effect of pravastatin on the anti-fatigue activity of hyperlipidemia mice.Methods90 male clean level Kunming mice were randomly divided into normal control group (n=30),high fat model group (n=30) and pravastatin group (n=30) respectively.High fat model group and pravastatin group were fed with high fat diet for 6 weeks to establish the hyperlipemia mice model.Then pravastatin group was given pravastatin 10 mg/(kg·d) by intragastric gavage for 6 weeks,control group and high fat model group were given distilled water,ZB-200 rotarod apparatus was used for mice fatigue tests,the rod fall time was recorded in each group respectively.ResultsThe rod drop time of high fat model group was less than that of normal control group (P<0.01),while the rod drop time pravastatin group was less than those of normal control group and high fat group (P<0.01).ConclusionPravastatin could cause the adverse reactions of tired and exertional fatigue in the treatment of hyperlipidemia mice.

收稿日期：2015-03-22

基金項目：湖北省咸寧市科技基金(WJ2015MB229)

通信作者*

DOI:10.14053/j.cnki.ppcr.201510004

Study on antifatigue effect of pravastatin on hyperlipemia miceLIU Hai-xia (Hubei College of Traditional Chinese Medicine,Jingzhou 434020,China)

Key words：Pravastatin;Hyperlipidemia;Fatigue resistance

0引言

普伐他汀屬于他汀類降脂藥物，通過競爭性抑制HMG-CoA還原酶而明顯降低血漿TC水平，加強由受體介導的LDL-c的分解代謝及血液中LDL-c的清除[1]，從而阻滯肝臟大量合成LDL，有效防止LDL-c的產生[2]。但長期使用普伐他汀對患者腦卒中、腫瘤發(fā)生率、總死亡事件的影響及其安全性仍存在爭議[3]。其不良反應主要表現(xiàn)在肌病、肝臟安全性、腎臟損害、癌癥風險、新發(fā)糖尿病風險等5個主要問題上[4]。加州大學圣迭戈分校的研究顯示，他汀類藥物的使用與疲倦和勞力性疲勞等不良反應存在顯著的相關性，女性比男性更常見[5]。隨著患者年齡的增加，因不良反應而中斷他汀類藥物治療的例數(shù)也隨之增加[6]。本研究旨在觀察普伐他汀對高脂血癥小鼠抗疲勞功能的影響，探討普伐他汀可能導致疲倦和勞力性疲勞的不良反應。

1材料與方法

1.1實驗動物與分組90只昆明雄性清潔級小鼠，16周齡，體重21~25 g，動物飼養(yǎng)環(huán)境：溫度20 ℃，相對濕度60 %，12 h周期性光照。實驗過程中對動物的處置符合2006年科技部發(fā)布的《關于善待實驗動物的指導性意見》[7]。實驗小鼠隨機分為正常對照組、高脂模型組和普伐他汀組，每組30只。

1.2儀器與材料

1.2.1主要實驗儀器成都泰盟公司自主研制開發(fā)的ZB-200疲勞轉棒儀；全自動生化儀(TOSHIBA公司)、精密電子天平(型號：T200，G&G)；4 ℃冰箱(BCD-2O5E/Y，海爾集團)；研磨器等。

1.2.2實驗試劑和藥品TC、TG、HDL-c、LDL-c試劑盒(溫州東甌津瑪生物技術有限公司)，普伐他汀鈉(美百樂鎮(zhèn)，第一三共制藥上海有限公司)。

1.2.3高脂飼料本試驗采用高脂飼料飼喂法，高脂飼料配方組成[8]：膽固醇l%，膽鹽0.1%，豬油10%，蛋黃粉5%，全脂奶粉5%，基礎飼料78.9%。基礎飼料各成分含量：水分≤10%，粗蛋白≥22%，粗脂肪≥4%，粗纖維≤5%，粗灰分≤8%，鈣1%~1.8%，磷0.6%~1.2%。普通飼料為標準嚙齒類動物飼料(脂肪占總熱量的12%，由湖北中醫(yī)藥高等?？茖W校動物中心提供)；高脂飼料低溫保存。

1.3實驗方法

1.3.1高脂血癥小鼠模型的建立16周齡昆明雄性清潔級小鼠90只，予以適應性喂養(yǎng)1周后，隨機分為3組，每組30只。正常對照組給予普通膳食12周。高脂模型組、普伐他汀組均給予高脂膳食6周制備高脂血癥小鼠模型。造模后高脂模型組給予普通膳食；普伐他汀組給予普伐他汀10 mg/(kg·d)灌胃，正常對照組和高脂模型組給予等量蒸餾水灌胃，共6周。

1.3.2血脂測定分別于第1周、第6周、第12周的第1天斷尾取血，用全自動生化儀測定TC、TG、HDL-c、LDL-c的含量。

1.3.3抗疲勞試驗使用ZB-200疲勞轉棒儀分別于第1周、第6周、第12周的第1天對小鼠進行轉棒訓練2次，使小鼠在5 min內基本能夠隨轉棒而做相應的運動，避免在轉棒上失去平衡而掉落。正式實驗前再進行一次訓練，隨后將小鼠放在轉棒式疲勞儀的轉棒上,以30 r/min的速度迫使小鼠在棒上運動[9]。觀察記錄各組小鼠的落棒時間。

2結果

2.1長期高脂飼料喂養(yǎng)對小鼠體重的影響見表1。由表1可見，長期高脂膳食組(高脂模型組、普伐他汀組)小鼠體重明顯高于普通膳食組(正常對照組)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，見表1。

2.2血脂水平的變化實驗6周后，高脂模型組TC、TG、LDL-c水平均顯著高于正常對照組，HDL-c水平低于正常對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。實驗12周后，普伐他汀組TC、TG、LDL-c水平均低于高脂模型組，HDL-c水平高于高脂模型組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，見表2。

表1　實驗動物體重的變化(g)

注：*與正常對照組比較，P<0.01

表2　血脂水平的變化(mmol/L)

注：#與高脂模型組比較，P<0.01

2.3落棒檢測和計時疲勞實驗使用ZB-200疲勞轉棒儀分別于第1周、第6周、第12周的第1天進行落棒檢測和計時疲勞實驗，轉速：30 r/min。結果見表3。

表3　三組小鼠落棒時間比較

結果顯示，高脂模型組落棒時間短于正常對照組，普伐他汀組落棒時間短于正常對照組及高脂模型組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。

3討論

普伐他汀作為臨床上廣泛使用的他汀類降血脂藥，對高脂血癥患者TC、TG、HDL-c的總有效率分別為90.9%、94.4%、85.7%[10]。近年研究發(fā)現(xiàn)，本品對心血管具有良好的保護作用[11]，能明顯降低血脂異常患者心血管事件發(fā)生率及病死率[12]，抑制心肌梗死時室性心律失常的發(fā)生[13]，防治自身免疫性疾病[14]，臨床推廣應用價值較高。他汀類藥物的總體安全性良好，藥物相關的不良事件發(fā)生率較低，但不能忽視他汀類藥物潛在的不良反應[15]，如肌肉毒性、對肝酶的影響及疲倦和勞力性疲勞等。普伐他汀肌病的發(fā)生率介于氟伐他汀(5.1%)和辛伐他汀(18.2%)之間[16]。服用中等劑量的辛伐他汀和普伐他汀可能導致疲倦和勞力性疲勞，或為他汀類藥物的另一類不良反應。

本研究結果顯示，高脂模型組小鼠體重明顯高于正常對照組，高脂膳食小鼠體重增加的部分原因是脂肪組織在動物體內的積聚[17]。有研究表明，高脂飲食誘導的肥胖小鼠脂肪組織受體相互作用蛋白140 mRNA表達增加，可能是誘發(fā)小鼠肥胖及高血脂的重要因素之一[18]。使用ZB-200疲勞轉棒儀對小鼠的抗疲勞試驗結果提示，高脂模型組落棒時間明顯短于正常對照組，普伐他汀組落棒時間明顯短于高脂模型組，說明普伐他汀在有效降低血脂的同時，可導致小鼠疲倦和勞力性疲勞等不良反應。產生疲勞的原因很多，而其最直接和最客觀的表現(xiàn)是運動耐力的下降[19]。期待通過進一步大量臨床試驗研究，對他汀類藥物可能導致疲倦和勞力性疲勞的不良反應做到早期發(fā)現(xiàn)并處理，避免出現(xiàn)嚴重的不良反應。因此，對高脂血癥患者應當著重考慮他汀類藥物對體能和生活質量的影響，在患者了解藥物不良反應的前提下合理應用，制定相應的治療策略，嚴密監(jiān)測不良反應，保證安全用藥[20]，為臨床高脂血癥患者的治療提供更合理的方案。

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作者單位：咸寧市中心醫(yī)院消化內科，咸寧 437100