Caveolin-1、GPR30和 Vimentin在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)及意義①

趙　樂(lè)　唐　萃　楊　磊　莫小梅　朱　平　劉智敏

(重慶醫(yī)科大學(xué)分子醫(yī)學(xué)與腫瘤研究中心，重慶400016)

[摘　要]　目的：探討Caveolin-1、GPR30和Vimentin在人甲狀腺乳頭狀癌(Papillary thyroid carcinoma,PTC)的表達(dá)及意義。方法：選取甲狀腺乳頭狀癌76例和正常的甲狀腺組織44例，采用免疫組織化學(xué)S-P法檢測(cè)Caveolin-1、GPR30和Vimentin 的表達(dá)，分析其與患者臨床病理指標(biāo)的關(guān)系，以及三者之間表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果：在PTC組織中，Caveolin-1、GPR30和Vimentin的陽(yáng)性表達(dá)率分別為9.21%(7/76)、80.26%(61/76)、76.32%(58/76)，其中Caveolin-1的陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于正常組織81.82%(36/44),而GPR30、Vimentin的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于正常組織0(0/44)、0(0/44)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。Caveolin-1、GPR30和Vimentin的表達(dá)與腫瘤的分期(P=0.005，P<0.001,P<0.001)以及頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P≤0.001)顯著相關(guān)。此外Caveolin-1與GPR30的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(rs=-0.528,P<0.001),Caveolin-1與Vimentin 的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(rs=-0.572,P<0.001),GPR30與Vimentin的表達(dá)呈正相關(guān)(rs=0.812,P<0.001)。Caveolin-1聯(lián)合GPR30 或Vimentin表達(dá)的條件下：Caveolin-1陰性表達(dá)伴隨GPR30或Vimentin陽(yáng)性表達(dá)與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移更具有相關(guān)性(P<0.05)；GPR30與Vimentin聯(lián)合陽(yáng)性表達(dá)較只有一種蛋白陽(yáng)性表達(dá)與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移更具有相關(guān)性(P=0.005);Caveolin-1陰性表達(dá)伴隨GPR30和Vimentin陽(yáng)性表達(dá)與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性最強(qiáng)(P<0.001)。結(jié)論：Caveolin-1、GPR30和Vimentin在PTC組織中的表達(dá)與腫瘤分期，以及頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，且三者的表達(dá)密切相關(guān)，Caveolin-1、GPR30和Vimentin 在PTC中的表達(dá)情況可作為檢測(cè)PTC頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的指標(biāo)。

[關(guān)鍵詞]　甲狀腺乳頭狀癌;Caveolin-1;GPR30;Vimentin

doi:10.3969/j.issn.1000-484X.2015.11.015

·臨床免疫學(xué)·

Caveolin-1、GPR30和 Vimentin在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)及意義①

趙樂(lè)唐萃楊磊莫小梅朱平劉智敏

(重慶醫(yī)科大學(xué)分子醫(yī)學(xué)與腫瘤研究中心，重慶400016)

[摘要]目的：探討Caveolin-1、GPR30和Vimentin在人甲狀腺乳頭狀癌(Papillary thyroid carcinoma,PTC)的表達(dá)及意義。方法：選取甲狀腺乳頭狀癌76例和正常的甲狀腺組織44例，采用免疫組織化學(xué)S-P法檢測(cè)Caveolin-1、GPR30和Vimentin 的表達(dá)，分析其與患者臨床病理指標(biāo)的關(guān)系，以及三者之間表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果：在PTC組織中，Caveolin-1、GPR30和Vimentin的陽(yáng)性表達(dá)率分別為9.21%(7/76)、80.26%(61/76)、76.32%(58/76)，其中Caveolin-1的陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于正常組織81.82%(36/44),而GPR30、Vimentin的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于正常組織0(0/44)、0(0/44)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。Caveolin-1、GPR30和Vimentin的表達(dá)與腫瘤的分期(P=0.005，P<0.001,P<0.001)以及頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P≤0.001)顯著相關(guān)。此外Caveolin-1與GPR30的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(rs=-0.528,P<0.001),Caveolin-1與Vimentin 的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(rs=-0.572,P<0.001),GPR30與Vimentin的表達(dá)呈正相關(guān)(rs=0.812,P<0.001)。Caveolin-1聯(lián)合GPR30 或Vimentin表達(dá)的條件下：Caveolin-1陰性表達(dá)伴隨GPR30或Vimentin陽(yáng)性表達(dá)與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移更具有相關(guān)性(P<0.05)；GPR30與Vimentin聯(lián)合陽(yáng)性表達(dá)較只有一種蛋白陽(yáng)性表達(dá)與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移更具有相關(guān)性(P=0.005);Caveolin-1陰性表達(dá)伴隨GPR30和Vimentin陽(yáng)性表達(dá)與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性最強(qiáng)(P<0.001)。結(jié)論：Caveolin-1、GPR30和Vimentin在PTC組織中的表達(dá)與腫瘤分期，以及頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，且三者的表達(dá)密切相關(guān)，Caveolin-1、GPR30和Vimentin 在PTC中的表達(dá)情況可作為檢測(cè)PTC頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的指標(biāo)。

[關(guān)鍵詞]甲狀腺乳頭狀癌;Caveolin-1;GPR30;Vimentin

doi:10.3969/j.issn.1000-484X.2015.11.015

中圖分類號(hào)①本文受國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81272937)資助。

作者簡(jiǎn)介：趙樂(lè)(1991年-)，女，主要從事甲狀腺乳頭狀癌轉(zhuǎn)移機(jī)制的研究，E-mail:969162838@qq.com。

通訊作者及指導(dǎo)教師：劉智敏(1962年-)，女，博士，教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事甲狀腺癌方面的研究，E-mail:liuzm9999@aliyun.com。

[Abstract]Objective:To investigate the expression of Caveolin-1,GPR30 and Vimentin at tumor tissues of human papillary thyroid carcinoma(PTC) patients and analyze their associations for the possible clinical implication.Methods: Immunohistochemistry was used to analyze the expression of Caveolin-1,GPR30 and Vimentin in 76 PTC and 44 normal samples.The correlations of Caveolin-1,GPR30 and Vimentin expression with one another,and with several clinicopathological indicators were statistically analyzed.Results: In PTCs,the positive expression rates of Caveolin-1,GPR30 and Vimentin were 9.21%(7/76),80.26%(61/76) and 76.32%(58/76),respectively.Caveolin-1,GPR30 and Vimentin expression had significant correlations with TNM stages(P=0.005,P<0.001,andP<0.001,respectively) and with cervical lymph node metastasis(P≤ 0.001 for all).Meanwhile,Caveolin-1 expression had a negative correlation with GPR30(rs=-0.528,P<0.001) and Vimentin(rs=-0.572,P<0.001).GPR30 and Vimentin expression were positively correlated(rs=0.812,P<0.001).Caveolin-1 under-expression was accompanied by GPR30 or Vimentin over-expression had stronger correlation with LNM(P=0.020 for Caveolin-1/GPR30 andP=0.001 Caveolin-1/Vimentin) than did each alone;concomitant high expression of GPR30 and Vimentin had stronger correlation with LNM(P=0.005 for GPR30/Vimentin)than did each alone.And lower expression of Caveolin-1 accompanied by higher expression of GPR30 and Vimentin was significantly associated with LNM as compared with cases not showing such expressing(P<0.001).Conclusion: These results demonstrated that the evaluation of Caveolin-1 ,GPR30 and Vimentin expression may be play an important role in the development and metastasis of PTC,and their biological function may relate with each other.

Expression and significance of Caveolin-1,GPR30 and Vimentin in papillary thyroid carcinoma

ZHAOLe,TANGCui,YANGLei,MOXiao-Mei,ZHUPing,LIUZhi-Min.MolecularMedicineandCancerResearchCenter,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China

[Key words]Papillary thyroid carcinoma;Caveolin-1;GPR30;Vimentin

甲狀腺癌是最常見(jiàn)的內(nèi)分泌系統(tǒng)惡性腫瘤，其發(fā)病率在近年來(lái)不斷遞增。甲狀腺癌最常見(jiàn)的類型為乳頭狀甲狀腺癌(Papillary thyroid carcinoma,PTC),約占全部甲狀腺癌的80%[1]。PTC其特點(diǎn)是分化程度較好，惡性程度較低。但仍有約50%的高分化PTC患者伴有頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，是影響其預(yù)后的主要不良因素。甲狀腺癌是一種激素依賴性疾病，雌激素通過(guò)與雌激素受體(ER)結(jié)合促進(jìn)甲狀腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。G蛋白偶聯(lián)受體30(G protein-coupled receptor 30,GPR30),是一種新型的雌激素受體，參與腫瘤細(xì)胞的遷移、增殖、黏附和侵襲等[2，3]。小窩蛋白(Caveolin-1)作為整合膜蛋白，參與細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化、惡性增殖和侵襲轉(zhuǎn)移等[4]。

有研究表明，GPR30可以通過(guò)ERK信號(hào)通路與Caveolin-1相互抑制從而在腫瘤細(xì)胞中發(fā)揮作用[5]。最新的研究資料表明，腫瘤組織發(fā)生上皮細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移(Epithelial mesenchymal transition,EMT)通過(guò)Caveolin-1依賴型信號(hào)通路[6]。在腫瘤組織中Caveolin-1的表達(dá)下調(diào)激活TGF-β1 信號(hào)傳導(dǎo)通路，使其下游的波形蛋白(Vimentin)表達(dá)上調(diào)，而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞EMT的發(fā)生。本研究采用免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)人甲狀腺乳頭狀癌組織中的Caveolin-1、GPR30和Vimentin的表達(dá)，探討其在人甲狀腺乳頭狀癌侵襲、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)特性的相關(guān)性，為PTC的早期發(fā)現(xiàn)及預(yù)后評(píng)估提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料收集重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院普外科2013年6月~2014年6月手術(shù)后經(jīng)病理診斷為PTC的組織標(biāo)本共76例，其中男性25例，女性51例，年齡19~77歲，平均年齡42歲。無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(頸清標(biāo)本病理證實(shí))32例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者44例。依據(jù)國(guó)際抗癌聯(lián)盟(UICC)TNM分期標(biāo)準(zhǔn)，其中Ⅰ期12例，Ⅱ期16例，Ⅲ期47例，Ⅳ期1例。腫瘤的平均直徑為2.1 cm(0.3~5.9 cm)?；颊咝g(shù)前均未接受過(guò)放射、化學(xué)治療。同期設(shè)44例正常的甲狀腺組織作為對(duì)照組。

1.2主要試劑兔抗人GPR30多克隆抗體購(gòu)自Abcam公司，兔抗人Caveolin-1多克隆抗體購(gòu)自Santa Crua 公司，小鼠抗人Vimentin 抗體購(gòu)自Cell Signalling 公司，兔抗人IgG多克隆抗體購(gòu)自Millipore公司。免疫組化SP法試劑盒和DAB試劑盒均購(gòu)自北京中杉金橋公司。

1.3免疫組織化學(xué)采用鏈霉親和素-過(guò)氧化物酶法(Sreptavidin-Perosidase,SP)測(cè)定Caveolin-1、GPR30及Vimentin。標(biāo)本均經(jīng)10%甲醛固定，石蠟包埋，4 μm連續(xù)切片。每例石蠟切片經(jīng)常規(guī)脫蠟，水化，抗原修復(fù)；3%過(guò)氧化氫室溫孵育30 min，阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性；山羊血清封閉30 min;滴加1∶200稀釋的兔抗人GPR30，1∶100稀釋的兔抗人Caveolin-1和1∶100稀釋的鼠抗人Vimentin，4℃孵育過(guò)夜；滴加生物素標(biāo)記的兔抗人IgG，37℃孵育30 min;辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液，37℃孵育15 min。DAB顯色，復(fù)染，脫水，透明，封片。用PBS替代一抗作陰性對(duì)照。

1.4結(jié)果判定400倍顯微鏡下每張切片選取5個(gè)高倍視野，陽(yáng)性細(xì)胞為胞漿，胞膜染色為黃色或棕褐色顆粒。免疫組化結(jié)果判定根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞百分率及顯色深淺。陽(yáng)性細(xì)胞的百分率：<5%為0、6%～25%為1、>25%～50%為2、>50%～75%為3、>75%為4。顯色深淺：不顯色或顯色不清為0、淺黃色為1、棕黃色為2、深褐色為3。采用Remmele半定量評(píng)分，陽(yáng)性細(xì)胞百分率和顯色深淺的乘積0～1分為(-)、2～4分為(+)、5～8分為(++)、>9分為(+++)。為便于統(tǒng)計(jì)，0或+為低表達(dá)組，++或+++為高表達(dá)的地方。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。采用χ2檢驗(yàn)和Spearman等級(jí)相關(guān)性分析，P<0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1Caveolin-1、GPR30和Vimentin在正常甲狀腺組織及PTC組織中的表達(dá)Caveolin-1、GPR30和Vimentin的表達(dá)主要定位于胞質(zhì)和胞膜(圖1)，其在44例正常的甲狀腺組織的陽(yáng)性率分別為81.2%、0、0,在76例PTC組織中的陽(yáng)性率分別為9.21%、80.26%、76.32%。經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)分析，由表1可知，Caveolin-1、GPR30和Vimentin在正常甲狀腺組織和甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。同時(shí)，Caveolin-1、GPR30、Vimentin的表達(dá)與TNM分期(P=0.005,P<0.001,P<0.001)、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有顯著相關(guān)性(P≤0.001)，與年齡、性別、腫瘤直徑無(wú)顯著相關(guān)性(P>0.05)。

圖1　Caveolin-1、GPR30和Vimentin的免疫組織化學(xué)染色Fig.1　Immunohistochemical staining for Caveolin-1,GPR30 and VimentinNote: Columns correspond to immunostaining for Caveolin-1,GPR30 and Vimentin,respectively.The first row exhibits strong staining of Caveolin-1,weak staining of GPR30 and Vimentin in nodular hyperplasia tissues with the indicated antibody(A-C);the succeeding rows show moderate staining(D-F) and strong staining(G-I)of Caveolin-1,GPR30 and Vimentin in PTCs.All the pictures are in high-power fields(×400).

圖2　Caveolin-1、GPR30 和Vimentin在甲狀腺乳頭狀癌中聯(lián)合表達(dá)與腫瘤頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系Fig.2　Association of concomitant Caveolin-1,GPR30 and Vimentin expression with LNM in PTCsNote: Columns correspond to immunostaining for Caveolin-1,GPR30 and Vimentin,respectively.The first row is the immunostaining of a representative of PTC without LNM showing only Caveolin-1(A)being high expression and low expression of GPR30(B)and Vimentin(C);the second row is the immunostaining of a representative of PTC with LNM showing low expression of Caveolin-1(D) and high expression of GPR30(E) and Vimentin(F).All the pictures are in high-power fields(×400).

表1　Caveolin-1、GPR30和Vimentin 在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)及其與臨床病理的特征Tab.1　Correlation of Caveolin-1,GPR30 and Vimentin protein expression with clinicopathological characteristics in PTCs

Note：P<0.05 is statistically significant.

2.2Caveolin-1、GPR30和Vimentin在人甲狀腺乳頭狀癌組織中表達(dá)的相關(guān)性經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)分析，在76例甲狀腺乳頭狀癌組織中Caveolin-1與GPR30蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(rs=-0.528,P<0.001)，Caveolin-1與Vimentin蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(rs=-0.572,P<0.001)，GPR30與Vimentin蛋白表達(dá)呈正相關(guān)(rs=0.812,P<0.001),見(jiàn)表2。通過(guò)對(duì)連續(xù)的同一病理組織免疫染色，結(jié)果顯示如圖2A~C顯示在PTC不伴隨頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病理組織中Caveolin-1為高表達(dá)，GPR30和Vimentin為低表達(dá)；圖2D~F顯示在PTC并伴隨有頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病理組織中Caveolin-1為低表達(dá)，GPR30和Vimentin為高表達(dá)。

2.3人甲狀腺乳頭狀癌組織中Caveolin-1、GPR30和Vimentin 聯(lián)合表達(dá)與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性由2.2結(jié)果顯示Caveolin-1與GPR30以及Caveolin-1與Vimentin的蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，GPR30與Vimentin的蛋白表達(dá)呈正相關(guān)。而2.1結(jié)果顯示，Caveolin-1、GPR30和Vimentin的表達(dá)與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有顯著相關(guān)性。我們進(jìn)一步分析Caveolin-1/GPR30、Caveolin-1/Vimentin和GPR30/Vimentin兩種分子表達(dá)與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性。結(jié)果如表3所示，Caveolin-1低表達(dá)伴隨GPR30高表達(dá)的頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率(68.3%)比僅有Caveolin-1低表達(dá)或僅有GPR30高表達(dá)的頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率(30.0%)高(P=0.020),結(jié)果同見(jiàn)于Caveolin-1/Vimentin的分子表達(dá)中(P=0.001)。而在GPR30/Vimentin分子表達(dá)中，兩種分子同時(shí)高表達(dá)的頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高于只有其中一種分子高表達(dá)的頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率(P=0.005)。此外統(tǒng)計(jì)分析表明Caveolin-1低表達(dá)伴隨GPR30和Vimentin高表達(dá)與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性最強(qiáng)(P<0.001)。

表2　Caveolin-1、GPR30和Vimentin 在PTC中表達(dá)的相關(guān)性Tab.2　Correlation of Caveolin-1,GPR30 and Vimentin protein expression with one another in PTCs

Note：P<0.05 is statistically significant.

表3　PTC中Caveolin-1、GPR30和Vimentin 聯(lián)合表達(dá)與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性Tab.3　Correlation of concomitant expression of GPR30,EGFR and CXCR1 with LNM

Note：1)stands for significant difference among the three groups;2)stands for significant difference between group(2)and group(3);3)stands for significant difference between groups with and without concomitant expression of all three molecules.P<0.05 is statistically significant.

3討論

大量臨床流行病學(xué)研究表明：甲狀腺癌的發(fā)病具有明顯的性別差異。有調(diào)查統(tǒng)計(jì)資料顯示，在PTC中，女性的發(fā)病率是男性的3倍，發(fā)病率在育齡期女性最高，且在女性絕經(jīng)期后發(fā)病率降低[1]，顯示甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展與雌激素密切相關(guān)。已有的體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)E2能夠促進(jìn)甲狀腺癌細(xì)胞的增殖、黏附、遷移和侵襲[7，8]。已有研究證明，雌激素通過(guò)與雌激素受體ERα結(jié)合發(fā)揮生物學(xué)作用。GPR30作為特異性的雌激素受體，當(dāng)腫瘤細(xì)胞內(nèi)的雌激素受體減少時(shí)會(huì)相應(yīng)的表達(dá)增高，從而降低子宮內(nèi)膜癌患者的生存率[9]。本課題組前期研究證實(shí)，雌激素通過(guò)GPR30可激活ERK1/2、PI3K-Akt通路，誘導(dǎo)甲狀腺未分化癌的增殖。封爽等[10]研究證實(shí)在乳腺上皮細(xì)胞中Caveolin-1基因沉默可以激活PI3K/AKT信號(hào)通路，從而促進(jìn)乳腺細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)乳腺組織癌變。研究表明在頭頸癌中Caveolin-1表達(dá)下調(diào)可以激活TGF-P1RI信號(hào)通路從而使其下游的分子Vimentin表達(dá)上調(diào)，最終促使腫瘤EMT發(fā)生。推測(cè)Cavelin-1、GPR30以及Vimentin三者在腫瘤組織中的表達(dá)可能存在相互作用，從而在腫瘤的發(fā)展及預(yù)后中發(fā)揮作用。已有研究表明，GPR30在子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌、甲狀腺癌組織中高表達(dá)[9,11,12];Caveolin-1在乳腺癌、頭頸癌細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)[13]；Vimentin在乳腺癌[14]、胰腺癌[15]、前列腺癌[16]等多種腫瘤中表達(dá)上調(diào)。提示Caveolin-1作為抑癌基因可以抑制腫瘤的發(fā)展，而GPR30和Vimentin作為促癌基因，其表達(dá)上調(diào)與腫瘤病人的不良預(yù)后相關(guān)[9-16]。本研究通過(guò)檢測(cè)76例甲狀腺乳頭狀癌組織中Caveolin-1、GPR30和Vimentin的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)Caveolin-1在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)明顯低于正常甲狀腺組織(P<0.05)，而GPR30和Vimentin的表達(dá)明顯高于正常甲狀腺組織(P<0.05)。在76例甲狀腺乳頭狀癌組織中，Caveolin-1、GPR30和Vimentin的表達(dá)與患者的年齡、性別及腫瘤大小無(wú)關(guān)，而與腫瘤分期、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(P<0.05)。Spearman等級(jí)相關(guān)分析提示：Caveolin-1與GPR30,Caveolin-1與Vimentin的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.528,P<0.001;r=-0.572,P<0.001);GPR30與Vimentin的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.812,P<0.001)。這表明在甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)展過(guò)程中Caveolin-1與GPR30、Vimentin可能具有拮抗作用，GPR30與Vimentin可能具有協(xié)同作用。

鑒于Caveolin-1、GPR30和Vimentin的表達(dá)與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，且三種蛋白兩兩間存在相關(guān)性。我們進(jìn)一步分析了Caveolin-1低表達(dá)GPR30高表達(dá)、Caveolin-1低表達(dá)Vimentin高表達(dá)及GPR30和Vimentin同時(shí)高表達(dá)是否與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有顯著相關(guān)性。結(jié)果顯示：Caveolin-1低表達(dá)GPR30高表達(dá)較只有Caveolin-1低表達(dá)或只有GPR30高表達(dá)與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有顯著相關(guān)性(P<0.05)，結(jié)果同見(jiàn)于Caveolin-1與Vimentin(P<0.05);而GPR30與Vimentin同時(shí)高表達(dá)較只有一種分子高表達(dá)與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有顯著相關(guān)性(P<0.05)。Caveolin-1低表達(dá)GPR30和Vimentin同時(shí)高表達(dá)與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性最顯著(P<0.001)。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)及相關(guān)文獻(xiàn)，我們認(rèn)為在PTC中Caveolin-1下調(diào)可激活PI3K/AKT、TGF-P1RI信號(hào)通路進(jìn)而上調(diào)GPR30及Vimentin的表達(dá)，從而增強(qiáng)腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移能力。但其相互作用的具體分子機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

綜上所述，可初步認(rèn)為Caveolin-1、GPR30和Vimentin在PTC中的表達(dá)情況可作為監(jiān)測(cè)其發(fā)展的指標(biāo)。聯(lián)合檢測(cè)三分子在PTC中的表達(dá)，可為早期診斷發(fā)現(xiàn)頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移提供生物學(xué)指標(biāo)。

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[收稿2015-01-10修回2015-04-02]

(編輯倪鵬)