不同方法檢測尿液中紅細(xì)胞結(jié)果分析

何朝樹

（汾陽市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，山西032200）

不同方法檢測尿液中紅細(xì)胞結(jié)果分析

何朝樹

（汾陽市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，山西032200）

目的探討3種方法檢測尿液紅細(xì)胞的作用和價值。方法收集該院2014年3～4月住院及門診400例患者的晨尿標(biāo)本400份于一次性尿管中，并在2 h內(nèi)進(jìn)行干化學(xué)分析儀及顯微鏡檢測、UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀。結(jié)果以尿沉渣顯微鏡檢測結(jié)果為診斷標(biāo)準(zhǔn)，尿干化學(xué)法假陽性24例（6%），假陰性8例（2%）；UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析假陽性1例（0.3%）；假陰性14例（3.5%）。UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀對尿液標(biāo)本中紅細(xì)胞的檢測結(jié)果與干化學(xué)分析儀比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論3種方法對尿中紅細(xì)胞的檢測結(jié)果存在差異，流式細(xì)胞分析法和干化學(xué)法易出現(xiàn)假陰性和假陽性，建議3種方法聯(lián)合應(yīng)用，以提高尿中紅細(xì)胞的陽性檢出率。

紅細(xì)胞；尿分析/儀器和設(shè)備；顯微鏡檢查；流式細(xì)胞術(shù)；化學(xué)，分析；對比研究

尿液常規(guī)分析是臨床上常見的實驗室檢查項目之一。尿液中紅細(xì)胞的準(zhǔn)確分析，可以對泌尿生殖、消化等系統(tǒng)的疾病提供診斷和鑒別診斷依據(jù)。目前臨床上對尿液常規(guī)分析主要采取干化學(xué)分析法、流式細(xì)胞分析術(shù)及尿沉渣顯微鏡檢查。干化學(xué)分析法標(biāo)本用量少，操作簡便，項目較多，檢測速度快，而且重復(fù)性好，適用于大批量標(biāo)本的健康體檢，但其結(jié)果容易受藥物、外源性物質(zhì)和人為因素的干擾，可出現(xiàn)假陽性或假陰性。UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀采用流式細(xì)胞技術(shù)，核酸染色，具有快速、誤差小、精密度高的特點，而且可以對尿液中有形成分進(jìn)行檢測分析。尿沉渣顯微鏡檢可以真實展現(xiàn)細(xì)胞等有形成分的形態(tài)，直觀、可靠，是尿中紅細(xì)胞檢查的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但逐一鏡檢，檢測速度遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能適應(yīng)臨床上日益增多的尿液標(biāo)本的要求，況且沒有統(tǒng)一質(zhì)控物，難以實現(xiàn)室內(nèi)質(zhì)控。根據(jù)上述3種尿液分析常用方法各自的優(yōu)缺點，本研究對400份尿液標(biāo)本進(jìn)行尿液干化學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)及顯微鏡聯(lián)合檢測，并對其檢測結(jié)果進(jìn)行分析和比較。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集本院2014年3～4月住院及門診400例患者的晨尿標(biāo)本（清晨起床后未進(jìn)食早餐和做運動之前排泄的尿液標(biāo)本），采集標(biāo)本前應(yīng)清潔生殖器，并留取中段尿于一次性無菌尿管中，接收標(biāo)本時應(yīng)嚴(yán)格核對患者姓名、性別、化驗單與標(biāo)本容器標(biāo)號是否一致。400例患者中男297例，女103例；年齡16～79歲；內(nèi)科306例，外科、婦產(chǎn)科各47例。所有標(biāo)本均要求在2 h內(nèi)完成尿液干化學(xué)、UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析和尿沉渣顯微鏡檢查，避免細(xì)菌繁殖、細(xì)胞溶解等諸多因素對檢測結(jié)果造成影響。

1.2 儀器與試劑干化學(xué)分析使用山西亞森FA-100及其配套試紙條；尿液流式細(xì)胞分析儀為日本Sysme的UF-1000i，試劑為配套試劑；顯微鏡使用日本奧林巴斯雙目顯微鏡，離心機使用長沙平凡儀器儀表公司生產(chǎn)的TD-5I型水平式離心機。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法

1.2.1.1 尿干化學(xué)分析儀每天開機后先用質(zhì)控品進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，確定質(zhì)控通過后，取試紙條浸入盛有患者尿液標(biāo)本的一次性尿管中數(shù)秒，然后取出放置于儀器試帶槽，然后按儀器操作步驟進(jìn)行檢測，同時記錄結(jié)果。

1.2.1.2 UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀每天開機后，先分別使用高低2種質(zhì)控物對儀器進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，在確保質(zhì)控通過后，按照儀器操作步驟，開始對尿液標(biāo)本上機檢測，并上傳數(shù)據(jù)，記錄保存。

1.2.1.3 尿沉渣顯微鏡檢查取混勻尿液標(biāo)本10 mL于刻度離心管中以1 500 r/min離心5 min，棄去上清液，留取沉淀物0.2 mL，滴于潔凈的載玻片上鏡檢，先以低倍鏡（100×）觀察，再以高倍鏡（400×）觀察，分別以10個高倍視野下的紅細(xì)胞取平均值，并記錄結(jié)果。

1.2.2 判定標(biāo)準(zhǔn)以尿沉渣顯微鏡檢查結(jié)果為待檢尿液中紅細(xì)胞個數(shù)的“金標(biāo)準(zhǔn)”：以每個高倍視野下紅細(xì)胞超過3個為陽性，對UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀和干化學(xué)分析法的檢測結(jié)果作評價。UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀的紅細(xì)胞正常參考范圍為每微升0～25個，干化學(xué)分析法以試紙條出現(xiàn)陽性反應(yīng)為陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用SPSS15.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3種方法檢測尿中紅細(xì)胞結(jié)果比較400例患者尿液標(biāo)本中紅細(xì)胞檢測結(jié)果有7種情況，尿干化學(xué)法假陽性24例（6%），假陰性8例（2%）；UF-1000i尿流式細(xì)胞分析假陽性1例（0.3%）；假陰性14例（3.5%）。見表1。

表1 3種方法檢測尿中紅細(xì)胞結(jié)果比較

2.2 干化學(xué)分析法和UF-1000i檢測結(jié)果比較干化學(xué)分析法和UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀2種方法檢測尿液中紅細(xì)胞結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=17.8，P＜0.05）。見表2。

表2 干化學(xué)分析和UF-1000i檢測結(jié)果比較（n）

3 討論

本研究中表1結(jié)果顯示，出現(xiàn)檢測情況1和7時，干化學(xué)分析和UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀都為陰性結(jié)果261例，尿沉渣鏡檢也是陰性260例，3種方法檢查都為陰性的符合率為99.6%。故可以建議當(dāng)尿干化學(xué)分析儀和UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀聯(lián)合檢測尿中紅細(xì)胞都出現(xiàn)陰性結(jié)果時，可不用顯微鏡鏡檢進(jìn)一步檢查尿沉渣中的紅細(xì)胞，而直接出示報告[1]。將2種方法聯(lián)合應(yīng)用，綜合分析可提高尿液中紅細(xì)胞檢測的準(zhǔn)確度，可適用于大批量的健康體檢標(biāo)本檢測。

本研究中表1結(jié)果還顯示，出現(xiàn)檢測情況3時，有24例尿液標(biāo)本UF-1000i尿液流式細(xì)胞儀和尿沉渣鏡檢均為陰性，而尿液干化學(xué)分析法則為陽性，假陽性率為6%。干化學(xué)分析法檢測尿液中紅細(xì)胞的原理是根據(jù)血紅蛋白的亞鐵血紅素具有過氧化物酶活性，可以催化分解過氧化物，使鄰聯(lián)甲苯胺氧化而呈色。其顏色深淺與血紅蛋白水平有關(guān)[2]。多數(shù)情況下可以反映尿液中紅細(xì)胞的有無，但不能分析其形態(tài)。一般造成干化學(xué)分析法出現(xiàn)假陽性的因素有：（1）某些腎臟疾??；（2）低比重尿；（3）低pH值尿；（4）放置時間過長引起尿中紅細(xì)胞破壞，釋放出血紅蛋白而出現(xiàn)假陽性[3]。表1出現(xiàn)情況4可見，8例患者尿標(biāo)本紅細(xì)胞檢測UF-1000i流式細(xì)胞分析儀和沉渣鏡檢均為陽性，而干化學(xué)分析法則為假陰性，占2%。引起假陰性的結(jié)果可能是尿液中含有維生素C等還原性物質(zhì)干擾所致[4]。

本研究中表1結(jié)果還顯示，出現(xiàn)檢測情況5時，有1例患者尿液標(biāo)本其干化學(xué)法與尿沉渣鏡檢均為陰性，而UF-1000i尿流式細(xì)胞分析儀顯示為陽性。UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀用紅色半導(dǎo)體激光束照射經(jīng)過核酸熒光染色后的尿液標(biāo)本在鞘液分析池中形成鞘液樣本，并通過各粒子產(chǎn)生的前向散射光、側(cè)向散射光以及側(cè)向熒光信號轉(zhuǎn)換成的光電信號進(jìn)行分析和識別，并通過計算得到相應(yīng)細(xì)胞的大小、長度、體積等，同時得到有形成分的直方圖和散點圖[5]，而尿液中出現(xiàn)草酸鈣結(jié)晶、酵母菌時，由于其大小和紅細(xì)胞接近，可以干擾紅細(xì)胞計數(shù)，造成假陽性結(jié)果[6]。表1出現(xiàn)情況6可見，有14例尿液標(biāo)本干化學(xué)分析儀和沉渣鏡檢紅細(xì)胞均為陽性，而UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀則顯示為陰性，占到總數(shù)的3.5%，UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀只能檢出其中的有形成分，當(dāng)檢測前患者服用過能產(chǎn)生熒光染料類似作用的藥物時，或者標(biāo)本留取時間過長，有形成分被破壞，均可導(dǎo)致假陰性結(jié)果的出現(xiàn)[7]。

本研究結(jié)果顯示，干化學(xué)分析儀和UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀檢測尿液中紅細(xì)胞時均可出現(xiàn)假陰性和假陽性結(jié)果[5]，而且2種方法檢測結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，顯微鏡檢測紅細(xì)胞具有直觀、可靠、簡便、特異度高的特點，但操作繁瑣，精密度差，影響因素也較多。干化學(xué)分析法和UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀聯(lián)合使用可以提高工作效率，并且避免了單一方法帶來的假陽性和假陰性，降低了人為誤差，當(dāng)二者出現(xiàn)結(jié)果不相符時，必須結(jié)合臨床并以尿沉渣鏡檢為準(zhǔn)，以提高尿常規(guī)分析中紅細(xì)胞檢測的準(zhǔn)確度[8]。

[1]趙進(jìn)良，周立芳，湯俊明，等.5種尿液隱血分析方法的比較[J].臨床檢驗雜志，2007，25（1）：54-55.

[2]孫士欣，陳建魁，于農(nóng)，等.尿沉渣人工顯微鏡鏡檢紅細(xì)胞、白細(xì)胞與尿液干化學(xué)分析儀的結(jié)果比較分析[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（14）：1729-1730.

[3]鄭宇瓊，焦曉陽.流式尿沉渣全自動分析儀、尿干化學(xué)分析儀及顯微鏡檢的臨床應(yīng)用意義探討[J].江西醫(yī)學(xué)檢驗，2001，19（1）：5-6.

[4]張湘琦，蘭愛純，唐和林，等.臨床尿常規(guī)檢驗的影響因素探討[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7（16）：1757-1758.

[5]吳桂玲，王麗.尿液干化學(xué)分析儀臨床應(yīng)用影響因素及方法學(xué)評價[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7（19）：2171-2172.

[6]胡曉舟.崔艷梅.王小林，等.三種方法在尿液有形成分分析中的對比觀察[J].檢驗醫(yī)學(xué)，2011，26（2）：100-104.

[7]羅春麗，劉體全.臨床檢驗基礎(chǔ)[M].2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：162-178.

[8]叢玉隆.尿液有形成分檢查及鏡檢篩選標(biāo)準(zhǔn)的制定[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2011，34（6）：481-483.

10.3969/j.issn.1009-5519.2015.05.035

:B

:1009-5519（2015）05-0728-02

2014-07-14

2014-10-06）

何朝樹（1971-），男，山西汾陽人，主管檢驗師，主要從事醫(yī)學(xué)檢驗工作；E-mail：316696320@qq.com。