• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于cox1基因的貽貝科遺傳差異及系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系

    2015-12-23 18:24:07朱明孟學(xué)平趙軍楊官品
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年10期

    朱明 孟學(xué)平 趙軍 楊官品

    摘要:基于線粒體DNA的細(xì)胞色素C氧化酶亞基1基因(cox1),分析貽貝科8個(gè)屬中13個(gè)物種的種間、種內(nèi)遺傳差異及系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系,結(jié)果表明,屬間遺傳距離為0.245~0.630,平均為0.487;同物種的母系和父系cox1遺傳距離為0.21~0.24;新西蘭綠唇貽貝與資料中的綠唇貽貝和Perna perna聚為1支,支持率為100%,后與翡翠貽貝聚為1支;13個(gè)物種中,除Trichomya hirsuta與貽貝屬種類聚為1支外,其余各屬均聚為單系支,貽貽屬M(fèi)ytilus、股貽貝屬Perna、肌蛤?qū)費(fèi)usculista 3個(gè)屬遺傳關(guān)系近。

    關(guān)鍵詞:貽貝科;cox1基因;綠唇貽貝;遺傳差異;系統(tǒng)發(fā)育

    中圖分類號(hào): S917 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號(hào):1002-1302(2015)10-0023-05

    貽貝科屬于軟體動(dòng)物門瓣鰓綱貽貝目(Mytiloida),現(xiàn)有33個(gè)屬約250個(gè)種[1]。新西蘭綠唇貽貝Perna canaliculus(Gmelin,1791)、翡翠貽貝Perna viridis(Linnaeus,1785)隸屬于貽貝科股貽貝屬(Perna),紫貽貝Mytilus galloprovincialis (Lamarck,1819)屬于貽貝屬(Mytilus),翡翠貽貝和紫貽貝是我國(guó)主要養(yǎng)殖的2種貝類[2]。翡翠貽貝自然分布于西太平洋及印度洋熱帶和亞熱帶海域,我國(guó)主要分布在東海南部及南海;紫貽貝在世界上分布范圍非常廣,在我國(guó)被認(rèn)為是1個(gè)外來種,目前南北沿海均有分布[3];新西蘭綠唇貽貝是股貽貝屬中新西蘭特有的1個(gè)物種,是新西蘭的重要海產(chǎn)種質(zhì)[4-5],其脂溶性提取物有顯著的抗炎作用,對(duì)慢性關(guān)節(jié)炎具有很好的療效,在生活中得到廣泛應(yīng)用[6],新西蘭年養(yǎng)殖產(chǎn)值為1.90億美元[7]。有關(guān)貽貝科物種群體遺傳差異研究有許多報(bào)道[8-11],如位正鵬等基于cox1基因研究了股貽貝屬3種貽貝的系統(tǒng)關(guān)系[12],劉君等研究了cox1基因在貽貝科鑒定中的應(yīng)用[13],葉瑩瑩等基于16S rRNA基因研究了厚殼貽貝4個(gè)群體的遺傳結(jié)構(gòu)[14]。有關(guān)綠唇貽貝幼蟲附著變態(tài)的研究也有較多報(bào)道[7,15-16],但綠唇貽貝的分子系統(tǒng)學(xué)研究未見報(bào)道。本試驗(yàn)通過擴(kuò)增新西蘭綠唇貽貝、翡翠貽貝和紫貽貝的cox1片段,研究其序列結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、序列差異水平,并結(jié)合GenBank檢索到的貽貝科cox1序列,分析其系統(tǒng)演化關(guān)系,為生物入侵監(jiān)測(cè)及貽貝科國(guó)際種質(zhì)資源交流管理提供理論依據(jù)和技術(shù)手段,也為貽貝科類群的系統(tǒng)演化關(guān)系提供資料,對(duì)我國(guó)貽貝的養(yǎng)殖及綠唇貽貝的引種具有重要意義。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)樣本

    綠唇貽貝6個(gè)個(gè)體,采于新西蘭奧克蘭;翡翠貽貝18個(gè)個(gè)體,采于福建廈門;紫貽貝15個(gè)個(gè)體,采于江蘇連云港。取閉殼肌備用。

    1.2 DNA提取、PCR擴(kuò)增及測(cè)序

    采用CTAB法裂解組織,酚-氯仿抽提、乙醇沉定法獲得總DNA。綠唇貽貝和翡翠貽貝cox1片段長(zhǎng)為750 bp,擴(kuò)增所用引物為ACOIF:5′-CGDATTCARCTWTCTCAYCCHGG-3′和ACOIR:5′-AMMGTAAAYATRTGRTGMGCCC-3′;紫貽貝cox1片段為889 bp,擴(kuò)增所用引物為Med-cox1-F:5′-TGGGGTCTGAGGAGGTTTGT-3′和Med-cox1-R:5′-CCCTGTAGGGACTGCGATTA-3′。PCR擴(kuò)增程序:94 ℃變性1 min,54 ℃退火1 min,35個(gè)循環(huán);72 ℃延伸 1 min。反應(yīng)體系為25 μL,Taq酶1~2 U。經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè),將有效擴(kuò)增PCR產(chǎn)物送生工生物工程(上海)股份有限公司用ABI-PRISM 3730測(cè)序儀雙向測(cè)序。

    1.3 序列比對(duì)分析

    測(cè)序獲得的原始DNA序列用DNAStar軟件包中的SeaMan軟件組裝,結(jié)合測(cè)序峰圖進(jìn)行人工校對(duì),獲得可靠的DNA序列;用ClustalX軟件對(duì)DNA序列進(jìn)行排序,將5′、3′端取齊,轉(zhuǎn)換成 .meg文件;用DnaSP 5.0軟件檢測(cè)單倍型,用Mega 4軟件分析序列特征,計(jì)算遺傳距離,構(gòu)建NJ (K2-P法)系統(tǒng)進(jìn)化樹,進(jìn)行遺傳差異分析;GenBank中檢索貽貝科cox1序列資料,與本試驗(yàn)序列資料一起分析貽貝科屬間、種間遺傳差異及系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 3種貽貝的cox1序列差異分析

    由表1可見,經(jīng)測(cè)序拼接和人工校對(duì),從新西蘭綠唇貽貝、翡翠貽貝和紫貽貝3種貝類cox1片段中共獲得39條序列,其中綠唇貽貝6條,翡翠貽貝18條,紫貽貝15條,校對(duì)后cox1的PCR產(chǎn)物可信長(zhǎng)度紫貽貝為850 bp、綠唇貽貝和翡翠貽為730 bp左右;5′、3′端取齊進(jìn)行核苷酸差異分析,共檢測(cè)到20種單倍型,其中綠唇貽貝6個(gè)個(gè)體有5種單倍型,翡翠貽貝18個(gè)個(gè)體有6種單倍型,紫貽貝15個(gè)個(gè)體有9種單倍型,3種貝類種間無共享單倍型。綠唇貽貝、翡翠貽貝和紫貽貝cox1單倍型G+C含量明顯低于A+T含量,平均分別為0.362、0.340、0.373。由圖1可見,3種貽貝20種單倍型進(jìn)行序列比對(duì),共有665個(gè)比對(duì)位點(diǎn),其中變異位點(diǎn)由248個(gè),占37.3% (圖1中僅列出180個(gè)變異位點(diǎn));綠唇貽貝與翡翠貽貝cox1變異位點(diǎn)有195個(gè),占變異位點(diǎn)的29.3%,紫貽貝與綠唇貽貝和翡翠貽貝之間核苷酸變異位點(diǎn)分別為212和197個(gè),分別占變異位點(diǎn)的31.9%、29.6%;綠唇貽貝、翡翠貽貝、紫貽貝3種貽貝種內(nèi)個(gè)體間的核苷酸變異位點(diǎn)分別占變異位點(diǎn)的1.7%、1.5%、3.3%,與紫貽貝相比,綠唇貽貝與翡翠貽貝間核苷酸差異較小,共享變異位點(diǎn)相對(duì)較多,但cox1片段不同部位共享變異位點(diǎn)多少有不同。圖1中下方左側(cè)方框10個(gè)堿基中有7個(gè)共享變異位點(diǎn),右側(cè)方框中只有2個(gè)共享變異位點(diǎn),有8個(gè)非共享變異位點(diǎn)分布在連續(xù)的25個(gè)堿基序列中,此區(qū)域可用于設(shè)計(jì)區(qū)分2種貽貝的PCR特異引物。

    2.2 3種貽貝的遺傳距離

    基于cox1核苷酸序列的遺傳距離顯示,綠唇貽貝(LYB)、翡翠貽貝(FCYB)和紫貽貝(ZYB)的種內(nèi)遺傳距離分別為0.007、0.005和0.014,種間遺傳距離為0.242(LYB-FCYB)、0.355(ZYB-FCYB)、0.393(ZYB-LYB);綠唇貽貝與翡翠貽貝同屬股貽貝屬,其差異屬于屬內(nèi)種間差異,因此兩兩遺傳距離相對(duì)小,而綠唇貽貝、翡翠貽貝與紫貽貝遺傳距離相對(duì)較大。

    2.3 貽貝科貝類cox1核苷酸差異分析

    從GenBank檢索到貽貝科13個(gè)物種403條cox1片段序列(表2)用于分析種內(nèi)遺傳距離,結(jié)果表明,加里弗尼亞貽貝(Mytilus californianus) 440 bp的cox1片段核苷酸序列92個(gè)個(gè)體為M型、87個(gè)個(gè)體為F型,種內(nèi)個(gè)體間遺傳距離平均分別為0.004、0.010,M型與F型間的遺傳距離為0.244;Geukensia demissa 57個(gè)序列間遺傳距離0.000~0.026,平均為0.013;Limnoperna pulex 38個(gè)序列間遺傳距離為0.000~0.053,平均為0.026;Mytilus edulis 26個(gè)序列間遺傳距離,M型為0.009,F(xiàn)型為0.012,M型和F型之間的遺傳距離為0.244;翡翠貽貝cox1(409 bp)片段20個(gè)序列的遺傳距離為0.000~0.012,平均為0.005;基于33個(gè) cox1片段(454 bp)的紫貽貝,其平均遺傳距離為0.035,根據(jù)序列特征可將其序列分為3組即Mga1、Mga2和Mga3,其組內(nèi)遺傳距離分別為0.007、0.008、0.035,Mga1和Mga2間的遺傳距離為0.019,Mga3和Mga1、Mga2間的遺傳距離分別是0.062、0.063,Mga3存在明顯的遺傳分化,Mga1和Mga2間無分化;基于cox1片段(500 bp)Perna perna 20個(gè)序列的遺傳距離為0.000~0.007,平均為0.004;油黑殼菜蛤(Mytilus trossulus) 12個(gè)cox1片段核苷酸序列差異較大,遺傳距離為0.000~0.228,平均為0.162,可分成4組,即Mtr1~Mtr4(圖2),4個(gè)組的組內(nèi)遺傳距離依次為0.018、0.005、0.014、0,Mtr1與Mtr2間的遺傳距離為0.159,其余組間遺傳距離為0.212~0.228,雖為同一個(gè)種,但差異達(dá)到種間差異水平,聚類時(shí)也明顯分為4支,這可能是由于Mtr3在資料中標(biāo)為M型,Mtr3與Mtr1、Mtr2間的分歧是由M、F型線粒體基因組DNA間的差異造成;樣本DQ198225未標(biāo)明是F型或M型,與其余11個(gè)序列的遺傳距離為0.221~0.227,平均為0.220;綠唇貽貝cox1片段(467 bp)共14條,種內(nèi)遺傳距離為0.000~0.015,平均為0.007。

    2.4 貽貝科系統(tǒng)演化關(guān)系分析

    將從GenBank檢索到的貽貝科403條序列與本試驗(yàn)39條序列一起進(jìn)行貽貝科系統(tǒng)發(fā)育分析,因不同學(xué)者所用cox1片段序列在cox1全長(zhǎng)中的位置和長(zhǎng)短不同,經(jīng)兩頭取齊,共獲得長(zhǎng)度為378 bp的單倍型38種,涵蓋13個(gè)物種,根據(jù)單倍型構(gòu)建NJ樹。由圖3可見,13個(gè)物種隸屬于8個(gè)屬,除毛貽貝屬(Trichomya hirsute)與貽貝屬種類交叉聚為1支外,其余各屬均聚為單系支。本試驗(yàn)新西蘭綠唇貽貝與資料中的綠唇貽貝(DQ917607,AF286188)聚為1支,另一來源的綠唇貽貝(DQ343592)與Perna perna(DQ343595)聚為1支,支持率為100%,這2支合聚為1支,支持率為51%;本試驗(yàn)的翡翠貽貝與資料中的翡翠貽貝(NC018362)聚為1支,支持率為100%;紫貽貝與加里福尼亞貽貝、毛貽貝聚為1支,貽貝屬與毛貽貝遺傳關(guān)系較近;連云港紫貽貝與資料中的紫貽貝(Mytilus galloprovincialis)[FJ890849(F型)、DQ399833(M型)、NC006886(Mytilus spp.)]和Mytilus edulis(NC006161)聚為單系支,支持率100%,而紫貽貝Mytilus galloprovincialis (FJ890850)M型線粒體cox1與Mytilus edulis(AY823623)線粒體DNA聚為1支。由表3可見,8個(gè)屬間的遺傳距離為0.254~0.630,平均為0.486;貽貝屬與Modiolula屬間遺傳距離最大,貽貝屬與毛貽貝屬間遺傳距離最小。

    3 結(jié)論與討論

    3.1 綠唇貽貝的分類地位

    貽貝科股貽貝屬目前認(rèn)定的物種有3種,即新西蘭綠唇貽貝、翡翠貽貝和P. perna (Linnaeus,1758),通過外部形態(tài)很難辯認(rèn)這3種貽貝[5]。P. perna原產(chǎn)于亞洲西部和南部及南美洲大西洋沿岸,近年來已經(jīng)入侵墨西哥灣沿海水域;翡翠貽貝自然產(chǎn)于亞洲沿海水域,從波斯灣到中國(guó)南方海域,現(xiàn)太平洋島國(guó)和墨西哥灣、美國(guó)南部的太平洋沿海水域均有發(fā)現(xiàn);

    綠唇貽貝僅產(chǎn)于新西蘭沿海水域。試驗(yàn)綠唇貽貝樣本(LYB)來源于新西蘭的奧克蘭海域,與股貽貝種類聚為1支,但沒有與資料中的綠唇貽貝(DQ343592)直接聚在一起,綠唇貽貝(DQ343592)與Perna perna (DQ343595)先聚為1支,而后與LYB聚在一起,這說明LYB與資料中提及的綠唇貽貝(DQ343592)親緣關(guān)系相對(duì)遠(yuǎn),資料中提及的綠唇貽貝樣本同樣采自新西蘭,但具體采集地尚不清。基于cox1的遺傳距離顯示,Perna perna (DQ343595)與資料中綠唇貽貝(DQ343592)的遺傳距離為0.003,而資料中的綠唇貽貝與LYB的遺傳距離為0.167~0.180,接近Perna perna (DQ343595)和LYB間的距離,試驗(yàn)綠唇貽貝與資料中提及的綠唇貽貝間遺傳差異大,達(dá)到種間差異水平。試驗(yàn)測(cè)定綠唇貽貝的cox1片段序列與大部分綠唇貽貝序列相似性很高,與綠唇貽貝(DQ343592)差異大,因此,綠唇貽貝(DQ343592)的分類地位有待進(jìn)一步考證。Blair等認(rèn)為,單獨(dú)通過形態(tài)特征,很難辯認(rèn)股貽貝屬的3種貽貝[5],而cox1序列分析有助于股貽貝屬種類的識(shí)別。

    黑丝袜美女国产一区| 国产精品成人在线| 成人三级做爰电影| 岛国在线观看网站| 国产在线观看jvid| 人成视频在线观看免费观看| 大片电影免费在线观看免费| 国产成+人综合+亚洲专区| 激情视频va一区二区三区| 日韩成人在线观看一区二区三区| 久久人妻熟女aⅴ| 国产成人av教育| 国产精品 欧美亚洲| 怎么达到女性高潮| 国产免费视频播放在线视频| 757午夜福利合集在线观看| 老熟女久久久| 大陆偷拍与自拍| 99精品久久久久人妻精品| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 色老头精品视频在线观看| 欧美+亚洲+日韩+国产| 天堂动漫精品| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| av国产精品久久久久影院| 黄色视频在线播放观看不卡| 国产淫语在线视频| 国产福利在线免费观看视频| 国产精品1区2区在线观看. | 免费黄频网站在线观看国产| 免费高清在线观看日韩| 色婷婷av一区二区三区视频| 又黄又粗又硬又大视频| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 女警被强在线播放| 欧美乱码精品一区二区三区| 免费黄频网站在线观看国产| 久久久久久久精品吃奶| 成人18禁在线播放| 日韩中文字幕欧美一区二区| 日本黄色日本黄色录像| 久久九九热精品免费| 成人影院久久| 欧美日韩黄片免| 免费在线观看完整版高清| 亚洲av日韩在线播放| 最新在线观看一区二区三区| 成人永久免费在线观看视频 | 国产男女内射视频| 手机成人av网站| 日韩精品免费视频一区二区三区| 亚洲av第一区精品v没综合| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 丝袜喷水一区| 男女边摸边吃奶| 国产成人啪精品午夜网站| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 日韩三级视频一区二区三区| 精品国产乱码久久久久久小说| 亚洲色图综合在线观看| 国产深夜福利视频在线观看| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 精品久久久久久电影网| av天堂久久9| 视频区图区小说| 黄色片一级片一级黄色片| 久久久国产成人免费| a级毛片在线看网站| 成人手机av| 免费看十八禁软件| 免费看十八禁软件| 日韩大码丰满熟妇| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 亚洲av第一区精品v没综合| 美女主播在线视频| 精品久久蜜臀av无| 日本av手机在线免费观看| 亚洲欧美一区二区三区久久| 9热在线视频观看99| 亚洲欧美一区二区三区久久| 欧美大码av| 免费观看a级毛片全部| 亚洲国产欧美一区二区综合| 亚洲av国产av综合av卡| 69av精品久久久久久 | 大香蕉久久成人网| 精品国产乱码久久久久久小说| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产av国产精品国产| 搡老熟女国产l中国老女人| 女同久久另类99精品国产91| 色婷婷久久久亚洲欧美| 看免费av毛片| 人人澡人人妻人| 黄色毛片三级朝国网站| netflix在线观看网站| 中文字幕av电影在线播放| 亚洲精品国产色婷婷电影| 丝袜美足系列| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲第一av免费看| 久久精品人人爽人人爽视色| 大型av网站在线播放| 久久99一区二区三区| 女人久久www免费人成看片| 深夜精品福利| 国产成人精品在线电影| 51午夜福利影视在线观看| 国产成人精品无人区| 麻豆av在线久日| 日本vs欧美在线观看视频| 9色porny在线观看| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 国产日韩欧美视频二区| 亚洲成人免费av在线播放| 日本精品一区二区三区蜜桃| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 欧美日韩福利视频一区二区| 成人18禁在线播放| 99国产精品一区二区三区| 午夜精品国产一区二区电影| 亚洲精品一二三| 免费观看人在逋| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | tocl精华| 国产精品偷伦视频观看了| 两性夫妻黄色片| 香蕉国产在线看| av又黄又爽大尺度在线免费看| 在线天堂中文资源库| 一个人免费在线观看的高清视频| 91国产中文字幕| 色综合欧美亚洲国产小说| 国产1区2区3区精品| 中文亚洲av片在线观看爽 | 99re在线观看精品视频| 一个人免费在线观看的高清视频| 男人操女人黄网站| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 不卡av一区二区三区| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 国产精品一区二区免费欧美| 高潮久久久久久久久久久不卡| 一级毛片女人18水好多| 丝袜美足系列| 亚洲五月色婷婷综合| 国产成人欧美| 国产精品久久久人人做人人爽| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 99香蕉大伊视频| 青青草视频在线视频观看| av免费在线观看网站| 亚洲欧美色中文字幕在线| 一区福利在线观看| 蜜桃在线观看..| a级片在线免费高清观看视频| 久热这里只有精品99| 一区福利在线观看| 日本精品一区二区三区蜜桃| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲免费av在线视频| 真人做人爱边吃奶动态| 欧美日韩黄片免| 欧美激情 高清一区二区三区| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 久久精品91无色码中文字幕| 满18在线观看网站| 69av精品久久久久久 | 日本黄色视频三级网站网址 | 香蕉久久夜色| 国产日韩欧美视频二区| 两个人免费观看高清视频| 亚洲av日韩在线播放| 成人国语在线视频| 咕卡用的链子| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 成人免费观看视频高清| 69av精品久久久久久 | 久久青草综合色| 亚洲成人手机| 999久久久精品免费观看国产| 在线永久观看黄色视频| 考比视频在线观看| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 亚洲一区二区三区欧美精品| 老司机福利观看| 高清欧美精品videossex| 午夜免费成人在线视频| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产极品粉嫩免费观看在线| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产精品98久久久久久宅男小说| 国产一区二区三区视频了| 久久久久久人人人人人| 精品国产一区二区三区四区第35| 亚洲精品美女久久av网站| 18禁美女被吸乳视频| 99riav亚洲国产免费| 国产精品久久电影中文字幕 | 欧美中文综合在线视频| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 日韩视频在线欧美| 国产成人精品久久二区二区91| 99久久精品国产亚洲精品| 欧美大码av| 精品少妇内射三级| 中文字幕精品免费在线观看视频| 五月天丁香电影| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产一区二区激情短视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 国产精品亚洲av一区麻豆| 美女福利国产在线| 亚洲全国av大片| 久久久国产精品麻豆| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 国产成人免费无遮挡视频| 丝瓜视频免费看黄片| 在线永久观看黄色视频| 91精品三级在线观看| 大香蕉久久网| 久久性视频一级片| 两个人看的免费小视频| 水蜜桃什么品种好| 少妇精品久久久久久久| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 一区福利在线观看| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 免费av中文字幕在线| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 久久九九热精品免费| 黑丝袜美女国产一区| 国产欧美日韩精品亚洲av| 91精品三级在线观看| 国产在线一区二区三区精| 在线天堂中文资源库| 国产午夜精品久久久久久| 黄色视频,在线免费观看| 国产成人精品无人区| 18在线观看网站| 国产成人免费观看mmmm| 搡老乐熟女国产| 又黄又粗又硬又大视频| 国产深夜福利视频在线观看| 国产精品.久久久| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 怎么达到女性高潮| 精品人妻1区二区| 久久99一区二区三区| 久久热在线av| 又紧又爽又黄一区二区| 午夜福利视频在线观看免费| 91成年电影在线观看| 免费在线观看黄色视频的| xxxhd国产人妻xxx| 一区二区三区激情视频| 少妇精品久久久久久久| 亚洲视频免费观看视频| 叶爱在线成人免费视频播放| 欧美日韩福利视频一区二区| 欧美成人免费av一区二区三区 | 满18在线观看网站| 国产一区二区在线观看av| 亚洲avbb在线观看| 欧美久久黑人一区二区| 五月天丁香电影| 精品人妻1区二区| 99国产精品免费福利视频| 男女之事视频高清在线观看| 大香蕉久久成人网| 十分钟在线观看高清视频www| 国产在线精品亚洲第一网站| 欧美人与性动交α欧美软件| 欧美av亚洲av综合av国产av| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 久久性视频一级片| av一本久久久久| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 涩涩av久久男人的天堂| 一级片免费观看大全| 精品一区二区三区av网在线观看 | 国产av一区二区精品久久| 欧美日本中文国产一区发布| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产黄色免费在线视频| 在线av久久热| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲 国产 在线| 日本五十路高清| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| av线在线观看网站| 国产一区二区三区综合在线观看| 亚洲av欧美aⅴ国产| 国产麻豆69| 脱女人内裤的视频| 黄色成人免费大全| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 亚洲五月婷婷丁香| 久久国产精品人妻蜜桃| 丰满饥渴人妻一区二区三| 久久中文看片网| 欧美在线一区亚洲| aaaaa片日本免费| 国精品久久久久久国模美| 免费在线观看影片大全网站| 久久天堂一区二区三区四区| 久久精品国产亚洲av高清一级| e午夜精品久久久久久久| 精品国产国语对白av| videos熟女内射| 亚洲九九香蕉| 国产单亲对白刺激| 亚洲av片天天在线观看| 久久国产精品影院| a级片在线免费高清观看视频| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 人成视频在线观看免费观看| 操出白浆在线播放| 久久 成人 亚洲| 国产精品久久久av美女十八| 亚洲七黄色美女视频| 在线观看一区二区三区激情| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 免费不卡黄色视频| av电影中文网址| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产男女超爽视频在线观看| 人人妻人人澡人人看| 精品高清国产在线一区| 男女午夜视频在线观看| 午夜福利在线免费观看网站| 99精品久久久久人妻精品| 大片免费播放器 马上看| 精品亚洲成a人片在线观看| 久久中文字幕人妻熟女| 99热网站在线观看| 成人永久免费在线观看视频 | 老鸭窝网址在线观看| 久久久国产一区二区| 97人妻天天添夜夜摸| 欧美激情 高清一区二区三区| 日韩人妻精品一区2区三区| 国产亚洲欧美精品永久| 欧美精品亚洲一区二区| 久久中文看片网| 桃红色精品国产亚洲av| 中文字幕最新亚洲高清| 少妇粗大呻吟视频| 国产男女超爽视频在线观看| 国产单亲对白刺激| 热99国产精品久久久久久7| avwww免费| 嫁个100分男人电影在线观看| 看免费av毛片| 99久久人妻综合| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 亚洲全国av大片| 91精品三级在线观看| 久久久国产成人免费| 男男h啪啪无遮挡| 男女午夜视频在线观看| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 无人区码免费观看不卡 | 免费在线观看完整版高清| 视频在线观看一区二区三区| 亚洲国产欧美在线一区| 国产视频一区二区在线看| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 亚洲伊人久久精品综合| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 久久毛片免费看一区二区三区| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 午夜免费鲁丝| 精品人妻1区二区| 男女下面插进去视频免费观看| 久久午夜综合久久蜜桃| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 黄色丝袜av网址大全| 在线观看66精品国产| 欧美黄色片欧美黄色片| 免费观看a级毛片全部| 丝袜美足系列| 男女无遮挡免费网站观看| 男人操女人黄网站| 一本久久精品| 久久亚洲精品不卡| 免费人妻精品一区二区三区视频| 亚洲色图综合在线观看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 免费人妻精品一区二区三区视频| 脱女人内裤的视频| 精品人妻1区二区| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲精品成人av观看孕妇| 一二三四社区在线视频社区8| 午夜精品久久久久久毛片777| 亚洲av成人一区二区三| 国产日韩欧美在线精品| 亚洲av国产av综合av卡| 欧美精品av麻豆av| 国产日韩欧美视频二区| 亚洲熟妇熟女久久| 亚洲综合色网址| 9热在线视频观看99| 国产伦理片在线播放av一区| 人成视频在线观看免费观看| 亚洲成国产人片在线观看| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 亚洲,欧美精品.| 极品人妻少妇av视频| 国产精品久久久久久精品电影小说| 久久中文看片网| 精品国产乱码久久久久久小说| 老司机深夜福利视频在线观看| 宅男免费午夜| 免费不卡黄色视频| 麻豆乱淫一区二区| 日韩欧美免费精品| 成人影院久久| 91字幕亚洲| 日本a在线网址| 精品第一国产精品| 男女午夜视频在线观看| 国产黄频视频在线观看| 9191精品国产免费久久| 国产精品久久久av美女十八| 十八禁人妻一区二区| 精品少妇内射三级| 国产真人三级小视频在线观看| 免费看十八禁软件| 色综合婷婷激情| 另类亚洲欧美激情| 国产区一区二久久| 欧美乱妇无乱码| 777米奇影视久久| 纯流量卡能插随身wifi吗| 久久久久久久久久久久大奶| 精品国内亚洲2022精品成人 | 我的亚洲天堂| 极品少妇高潮喷水抽搐| 天天操日日干夜夜撸| 国产成人av激情在线播放| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产精品久久久久成人av| 欧美日本中文国产一区发布| 一级片'在线观看视频| 自线自在国产av| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 欧美在线黄色| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 免费日韩欧美在线观看| 十八禁网站免费在线| 一级片'在线观看视频| 嫩草影视91久久| 国产精品偷伦视频观看了| www日本在线高清视频| 女性生殖器流出的白浆| 精品第一国产精品| 亚洲成人免费av在线播放| 大香蕉久久成人网| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | www日本在线高清视频| 99精品欧美一区二区三区四区| 精品一区二区三区四区五区乱码| 午夜两性在线视频| 99国产精品一区二区蜜桃av | 在线观看免费高清a一片| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产男女超爽视频在线观看| 久久ye,这里只有精品| 午夜免费成人在线视频| 在线观看免费日韩欧美大片| www日本在线高清视频| 久久国产精品大桥未久av| 国产99久久九九免费精品| 国产不卡av网站在线观看| 成人国产av品久久久| 欧美黑人精品巨大| 性少妇av在线| 日韩免费av在线播放| 青草久久国产| 黄色视频在线播放观看不卡| 久久国产精品大桥未久av| av天堂久久9| 美女午夜性视频免费| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 成年人午夜在线观看视频| 99精品欧美一区二区三区四区| 精品午夜福利视频在线观看一区 | 国产欧美日韩精品亚洲av| 91大片在线观看| 日韩精品免费视频一区二区三区| 少妇的丰满在线观看| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 69av精品久久久久久 | 女人久久www免费人成看片| 9色porny在线观看| 国产精品久久久人人做人人爽| 日本wwww免费看| 亚洲精品国产区一区二| 夜夜爽天天搞| 色老头精品视频在线观看| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 亚洲精品久久午夜乱码| 国产xxxxx性猛交| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 美女视频免费永久观看网站| 日韩大码丰满熟妇| a级毛片黄视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 一区二区三区国产精品乱码| 高清视频免费观看一区二区| 久久人妻av系列| 国产91精品成人一区二区三区 | 日韩制服丝袜自拍偷拍| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 丝袜人妻中文字幕| 黄色视频在线播放观看不卡| 免费观看av网站的网址| 黄色毛片三级朝国网站| 亚洲男人天堂网一区| 一级毛片电影观看| 一区福利在线观看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 成年人黄色毛片网站| 一级黄色大片毛片| 久久亚洲真实| 水蜜桃什么品种好| 母亲3免费完整高清在线观看| 久久久久网色| 国产成人精品无人区| 免费日韩欧美在线观看| 日本a在线网址| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 免费观看人在逋| 亚洲午夜理论影院| 国产亚洲欧美在线一区二区| 脱女人内裤的视频| av有码第一页| 脱女人内裤的视频| 天堂动漫精品| 黑人欧美特级aaaaaa片| 18禁国产床啪视频网站| 多毛熟女@视频| 一区二区日韩欧美中文字幕| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 亚洲精华国产精华精| 女性被躁到高潮视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲av片天天在线观看| 午夜福利在线免费观看网站| 99九九在线精品视频| 国产精品一区二区在线观看99| 一级毛片精品| 视频区欧美日本亚洲| 午夜福利视频精品| 亚洲人成77777在线视频| 久久精品国产综合久久久| 99国产综合亚洲精品| 午夜91福利影院| 国产精品.久久久| 精品高清国产在线一区| 国产成人精品在线电影| 久久精品国产综合久久久| 91av网站免费观看| 一本大道久久a久久精品| 亚洲性夜色夜夜综合| 91九色精品人成在线观看| 免费高清在线观看日韩| 中文字幕高清在线视频| 亚洲九九香蕉| 欧美性长视频在线观看| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 欧美激情高清一区二区三区| 我要看黄色一级片免费的| 狠狠狠狠99中文字幕| 精品福利观看| 亚洲av欧美aⅴ国产| 一级黄色大片毛片| 亚洲人成电影观看| 老司机靠b影院| 人人妻人人澡人人看| 日韩免费av在线播放| 国产精品亚洲av一区麻豆| av欧美777| 亚洲情色 制服丝袜| 一个人免费看片子| 午夜福利一区二区在线看| 中文字幕最新亚洲高清| 精品久久久久久久毛片微露脸| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 美女主播在线视频| 免费少妇av软件| 国产精品 欧美亚洲| 国产精品久久久人人做人人爽| 国产人伦9x9x在线观看| 日韩欧美三级三区| 精品国内亚洲2022精品成人 | 美女国产高潮福利片在线看| 久久久久久久精品吃奶| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6|