某豬場4種豬病毒性疫病抗體水平檢測及分析

韋冠東，湯德元，曾智勇，王洪光，李 達(dá)

（貴州大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽 550025）

某豬場4種豬病毒性疫病抗體水平檢測及分析

韋冠東，湯德元*，曾智勇，王洪光，李 達(dá)

（貴州大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽 550025）

為了解貴州省某規(guī)?；i場4種豬常見病毒性疫病的抗體水平及感染情況，實(shí)驗(yàn)采用ELISA抗體檢測法，對該豬場送檢的370份血清進(jìn)行了CSFV、PRRSV、PCV2和PRV 4種抗體水平檢測。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：該豬場種豬CSFV、PRRSV、PCV2和PRV 抗體陽性率分別為100%、94.74%、100%、5.26%，保育豬CSFV、PRRSV、PCV2和PRV 抗體陽性率分別為94.44%、83.33%、16.7%、5.56%；其中種豬CSF、PRRS、PCV2、PR已接種疫苗；保育豬CSF、PRRS、PR已接種疫苗，未接種PCV2疫苗，上述數(shù)據(jù)說明該豬場種豬CSF、PCV2、PRRS、PR免疫效果較好；保育豬CSF、PRRS、PR免疫效果較好，PCV2有野毒感染現(xiàn)象。該豬場種豬應(yīng)在保育豬階段做好PCV2的預(yù)防接種工作，同時(shí)做好豬場的疫病凈化措施。

豬場；病毒性疫??；ELISA；檢測

近年來，貴州省養(yǎng)豬業(yè)的規(guī)?；?、集約化進(jìn)程發(fā)展迅速，豬場豬的流動和引種工作較過去更加頻繁，而規(guī)?；i場母豬發(fā)生繁殖障礙性疾病的現(xiàn)象日益突出，給養(yǎng)豬業(yè)帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。據(jù)相關(guān)報(bào)道，豬繁殖障礙性疾病嚴(yán)重影響?zhàn)B豬業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益，在規(guī)?；i場中的發(fā)病率達(dá)15%～35%，已成為豬場中最重要的疾病之一[1]。豬繁殖障礙性疾病主要由營養(yǎng)、管理等非傳染因素和病毒、細(xì)菌、寄生蟲等傳染因素獨(dú)立或相互作用而引起。其中病毒性疫病因素，如豬瘟病毒(CSFV)、豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)、豬圓環(huán)病毒II型(PCV2)、豬偽狂犬病毒(PRV)等是引起母豬繁殖障礙性疾病的主要原因[2-3]。本試驗(yàn)對貴州省某規(guī)?；i場送檢的370份血清樣本，應(yīng)用間接ELISA方法對上述4種病毒性疫病進(jìn)行了抗體檢測：結(jié)果表明該豬場種豬CSF、PCV2、PRRS和PR免疫效果較好；保育豬CSF、PRRS、PR免疫效果較好，PCV2有野毒感染現(xiàn)象。上述數(shù)據(jù)說明該豬場保育豬應(yīng)做好PCV2的預(yù)防接種工作，同時(shí)做好豬場的疫病凈化措施。

表1 豬群4種疫病抗體水平的檢測

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣品

2015年3月貴州省某規(guī)?；i場送檢的370份血清樣本，其中種豬190份，保育豬180份。

1.1.2 主要試劑

豬瘟病毒ELISA診斷試劑盒(批號：150202)、豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA診斷試劑盒(批號：140302)、豬圓環(huán)病毒II型ELISA診斷試劑盒(批號：140302)、豬偽狂犬病毒gE蛋白ELISA診斷試劑盒(批號：150101)，均購自武漢科前動物制品有限責(zé)任公司。

表2 種豬4種疫病抗體水平的檢測

表3 保育豬4種疫病抗體水平的檢測

1.2 檢測方法

離心分離血清前將血液樣本放置于37 ℃恒溫箱中作用1～1.5 h后，轉(zhuǎn)移至4 ℃冰箱過夜，在室溫下3 000 r/ min離心5 min，收集血清于EP管中，標(biāo)記后按照4種豬病毒病ELISA試劑盒操作步驟進(jìn)行抗體水平檢測并進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 ELISA檢測抗體水平總結(jié)果

CSF、 PRRS、 PCV2和PR 4種病毒性疫病抗體水平檢測結(jié)果見表1。

從表1中可以看出，CSFV、PRSSV、PCV2和PRV的抗體陽性率分別為97.30%（360/370）、89.19（330/370）、59.73%（221/370）、5.41%（20/370）。由于該豬場種豬和保育豬都接種了CSF、PRSS疫苗，因此該豬場這2種疫病的抗體合格率達(dá)到了《2014年國家動物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃》存欄豬抗體合格率≥70%的要求，且免疫效果均較為理想；由于該規(guī)?；i場給種豬、保育豬接種gE基因缺失的PRV疫苗，經(jīng)豬偽狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗體檢測試劑盒檢測，陽性率為5.41%。該數(shù)據(jù)說明野毒感染率為5.41%，免疫效果較理想；該豬場保育豬未接種PCV2，致使PCV2的抗體陽性率為59.73%，表明該豬場很可能受到PCV2的野毒感染。

2.2 種豬群4種抗體水平檢測結(jié)果

CSF、PRSS、PCV2和PR 4種病毒性疫病在種豬群的檢測的抗體水平結(jié)果見表2。

由于該豬場種豬免疫接種CSF、PRSS、PCV2和PRVgE基因缺失疫苗，對豬場送檢的免疫豬群血清抗體ELISA檢測結(jié)果顯示，種豬CSFV、PRSSV、PCV2的抗體陽性率為100%（190/190）、94.74%（180/190）、100%（190/190），免疫情況較理想，均達(dá)到了農(nóng)業(yè)部《2014年國家動物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃》抗體合格率≥70%的規(guī)定。種豬接種免疫PRVgE基因缺失疫苗，豬偽狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗體檢測試劑盒檢測PRV的陽性率為5.26%（10/190），免疫效果較理想。

2.3 保育豬群4種抗體水平檢測結(jié)果

CSF、PRSSV、PCV2和PR 4種病毒性疫病在保育豬群檢測的抗體水平結(jié)果見表3。

由于該豬場保育豬免疫接種過CSF、PRSS、PRVgE基 因 缺 失 疫苗，對豬場送檢的免疫豬群血清抗體ELISA檢測結(jié)果顯示，保育豬CSF和PRSSV的抗體陽性率分別為94.44%（170/180）、83.3%（150/180），免疫情況較理想，均達(dá)到了農(nóng)業(yè)部《2014年國家動物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃》抗體合格率≥70%的規(guī)定。保育豬接種免疫PRVgE基因缺失疫苗，豬偽狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗體檢測試劑盒檢測PRV的陽性率為5.56%（10/180），免疫效果較理想。該豬場保育豬由于未接種免疫PCV2疫苗，抗體水平檢測PCV2的陽性率為16.7%（30/180），可能為PCV2的野毒感染，應(yīng)引起重視。

3 結(jié)論與討論

檢測結(jié)果表明，該豬場種豬CSF、PRSS、PCV2和PRV的防控因接種了疫苗，其抗體陽性率均達(dá)到國家免疫要求，免疫效果較理想；但豬偽狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗體檢測試劑盒檢測結(jié)果表明有5.26%的種豬有野毒感染，建議該豬場淘汰有野毒感染的種豬，做好PR的凈化工作。該豬場保育豬疫苗接種了CSF、PRSS和PR疫苗，其抗體陽性率均達(dá)到國家免疫要求，免疫效果較理想；但豬偽狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗體檢測試劑盒檢測結(jié)果表明有5.56%的保育豬有野毒感染，建議該豬場淘汰有野毒感染的保育豬，做好PR的凈化工作；未接種PCV2疫苗的保育豬抗體陽性檢測率為16.7%，存在野毒感染，建議該豬場做好PCV2的防控工作，同時(shí)采取措施對豬群進(jìn)行凈化。

國內(nèi)規(guī)?；i場PCV2感染的血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，國內(nèi)豬場中普遍存在PCV2野毒感染。本次檢測結(jié)果表明，該豬場中也存在PCV2野毒感染。PCV2主要干擾和破壞機(jī)體抗體的產(chǎn)生和維持，從而破壞豬的免疫系統(tǒng)，致使豬群抵抗力下降，易繼發(fā)或并發(fā)其他疾病。目前認(rèn)為接種疫苗是防制PCV2野毒感染的最好方法。大量的試驗(yàn)己證實(shí)，接種免疫PCV2疫苗的豬群發(fā)病率和死亡率明顯降低，且飼料轉(zhuǎn)化率、胴體品質(zhì)等明顯優(yōu)于未接種PCV2疫苗的豬群。

鑒于該豬場的設(shè)施及環(huán)境，筆者建議該豬場應(yīng)制定免疫前抗體水平的檢測和免疫后抗體水平的監(jiān)測，從而可通過病原檢測或抗體監(jiān)測淘汰亞臨床感染或隱形感染豬群，以期凈化豬場的相關(guān)疫病。由于血清學(xué)檢測不能準(zhǔn)確說明機(jī)體病原的感染現(xiàn)狀，對于該豬場的疫病情況應(yīng)結(jié)合流行病學(xué)、臨診癥狀、病原學(xué)及PCR等檢測技術(shù)，以期提高檢測的準(zhǔn)確性，為豬場疫病的防控提供重要依據(jù)。此外，還應(yīng)注重加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，做好消毒，滅鼠等工作和建立完善的免疫程序，從而為有效控制和逐步凈化豬繁殖障礙性疫病提供有力的保障。

[1] 李永志.影響豬繁殖障礙的因素及防治措施[J].中國畜禽種業(yè)，2009(11)：58-59.

[2] 蔣春燕，何海健，葉秀娟，等.集約化豬場主要疾病及防控對策[J].動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2012，33(8)：101-104.

[3] 劉建，湯德元，羅險(xiǎn)峰，等.規(guī)?；i場主要病毒性疫病的診斷技術(shù)研究進(jìn)展[J].中國動物保健，2012，14 (1)：18-24.

2015-04-30）

韋冠東（1990-），男，碩士研究生，主要從事動物傳染病病原分子生物學(xué)的科研學(xué)習(xí)。

*通訊作者：湯德元（1964-），男，教授，博士，碩士生導(dǎo)師，主要從事動物傳染病病原分子生物學(xué)和中西獸醫(yī)結(jié)合的教學(xué)科研工作。E-mail: tdyuan@163.com